高三一轮复习选修1-专题2-微生物的培养与应用ppt课件.ppt
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1、严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。第第2课时课时微生物的实验室培养微生物的实验室培养土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。1、培养基的种类、营养要求及、培养基的种类、营养要求及配制原则配制原则2、无菌技术的内容及方法、无菌技术的内容及方法3、分离纯化微生物的研究思路、分离纯化微生物的研究思路、方法方法严格执行突发事件上报制度、校外活动
2、报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。一、培养基的营养构成一、培养基的营养构成1、微生物需要的五大类营养物质:、微生物需要的五大类营养物质:碳源、氮源、生长因子、无机盐和水碳源、氮源、生长因子、无机盐和水 另外还需要满足微生物生长对另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质(如特殊营养物质(如:生长因子)以及氧生长因子)以及氧气的要求。气的要求。严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。培养乳酸菌培养乳酸菌添加维生素添加维生素培养霉菌培养霉菌PH调至酸性调至酸性培养细菌培养细菌PH调
3、至中性或微碱性调至中性或微碱性培养厌氧微生物培养厌氧微生物无氧环境无氧环境【特殊要求】【特殊要求】严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。定义定义作用作用主要来源主要来源碳碳源源能提供能提供碳元素碳元素的物质的物质构成生物体构成生物体的物质,异的物质,异养生物的养生物的能能源源物质物质无机物:无机物:CO2、NaHCO3有机物:糖类、脂有机物:糖类、脂肪酸、石油、花生肪酸、石油、花生粉饼等粉饼等 异养异养微生物的碳源是微生物的碳源是有机物有机物,最常,最常利用的是利用的是糖类糖类;自养自养微生物利用微生物利用CO2或碳酸盐
4、或碳酸盐作为作为碳源(以无机碳源作为主要碳源)。碳源(以无机碳源作为主要碳源)。严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。定义定义作用作用主要来源主要来源氮氮源源能提供能提供氮元素氮元素的物质的物质合成蛋白质、合成蛋白质、核酸以及含核酸以及含氮代谢产物氮代谢产物无机物:无机物:N2、NH3、氨盐、硝酸盐、氨盐、硝酸盐有机物:尿素、牛肉有机物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等膏、蛋白胨等 能把能把氮气氮气作为氮源的只限于固氮菌、某作为氮源的只限于固氮菌、某些放线菌和藻类等。些放线菌和藻类等。霉菌仅以无机氮素化合物为氮源;部分霉菌仅以无机
5、氮素化合物为氮源;部分细菌不用有机氮化合物作为氮源就不能生长。细菌不用有机氮化合物作为氮源就不能生长。严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。生长生长因子因子生长不可缺生长不可缺少的微量有少的微量有机物机物酶和核酸的酶和核酸的成分成分维生素、氨基维生素、氨基酸、碱基等酸、碱基等(1)微生物最常利用的碳源是糖类微生物最常利用的碳源是糖类(特别是葡萄特别是葡萄糖糖),常利用的氮源是氨盐、硝酸盐。,常利用的氮源是氨盐、硝酸盐。(2)在微生物所需要的化合物中需要量最大的在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源。是碳源。(3)微生
6、物之所以需要补充生长因子,是由于微生物之所以需要补充生长因子,是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。【特别提醒【特别提醒】严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。结果结果常用的方法常用的方法消毒消毒仅杀死物体表面或仅杀死物体表面或内部一部分对人体内部一部分对人体有害的微生物有害的微生物(不包不包括芽孢和孢子括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或消毒法、紫外线或化学药物消毒法化学药物消毒法灭菌灭菌杀死物体内外所有杀死物体内外所有的微生物,包括芽的微生
7、物,包括芽孢和孢子孢和孢子灼烧灭菌、干热灭灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌菌、高压蒸汽灭菌二、消毒和灭菌二、消毒和灭菌严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。培养基培养基培养皿培养皿空空 气气接种环接种环双双 手手牛牛 奶奶巴氏消毒巴氏消毒化学消毒化学消毒紫外线消毒紫外线消毒高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌灼烧灭菌灼烧灭菌干热灭菌干热灭菌常用的消毒方法和灭菌方法常用的消毒方法和灭菌方法严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。无菌技术主要操作要求无菌技术主要操作
8、要求:实验前应对操作空间、操作人员实验前应对操作空间、操作人员消毒,对所有器具和培养基灭菌。消毒,对所有器具和培养基灭菌。实验进行时需在酒精灯火焰周围实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作,另外要避免已灭菌处理无菌区操作,另外要避免已灭菌处理材料再次污染。材料再次污染。严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。三、微生物实验室培养三、微生物实验室培养1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤:、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤:计算计算称量称量溶化溶化灭菌灭菌倒平板倒平板2、微生物接种最常用的方法中的是:、微生物接种最常用的方法中的是
9、:平板划线法平板划线法和和稀释涂布平板法稀释涂布平板法严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。如果未接种的培养基在恒温箱中保温如果未接种的培养基在恒温箱中保温12天后无菌落生长,说明培养基的天后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。制备是成功的,否则需要重新制备。培养基的制作是否合格?培养基的制作是否合格?严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。平板划线法:平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表通过接种环在琼脂固体培养基表面面连续划
10、线连续划线的操作,将聚集的菌种逐的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。这就是菌落。严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。平板划线的操作方法平板划线的操作方法严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。为什么在操作的第一步以及每为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧
11、接种环?次划线之前都要灼烧接种环?第一步:避免接种环上可能存在的微生物污第一步:避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;染培养物;每次划线前:每次划线前:杀死上次划线结束后杀死上次划线结束后接种环上接种环上残留的菌种,使下一次划线时接种环上的菌残留的菌种,使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。渐减少,以便得到菌落。严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。在划线操作
12、结束时,仍然需要在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?灼烧接种环吗?为什么?划线结束后灼烧接种环,能及时杀划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。污染环境和感染操作者。严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。稀释涂布平板法:稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度将菌液进行一系列的梯度稀释稀释,然后将不同稀释度的菌液分别然后将不同稀释度的菌液分别涂布涂布到到琼脂固体培养基的表面,进行培养。琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,
13、聚集在一在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的而能在培养基表面形成单个的菌落菌落。严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。1、根据培养基的用途可分为、根据培养基的用途可分为:四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 培养基中加入某种化学物质,将培养基中加入某种化学物质,将允允许特定种类许特定种类的微
14、生物生长,同时的微生物生长,同时抑制抑制或阻止其他或阻止其他种类微生物生长。种类微生物生长。选择培养基选择培养基严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。Q3:培养酵母菌和霉菌,可在培养基培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入中加入_以纤维素作为唯一碳源的选择培养以纤维素作为唯一碳源的选择培养基,可以分离分解纤维素的微生物。基,可以分离分解纤维素的微生物。Q1:分离利用石蜡油的微生物,用分离利用石蜡油的微生物,用_的培养基的培养基Q2:分离产生蛋白酶的微生物,用分离产生蛋白酶的微生物,用_的培养基的培养基Q4:分离固氮微生物用分
15、离固氮微生物用_的培养基。的培养基。以石蜡油作为唯一碳源以石蜡油作为唯一碳源以蛋白质作为唯一氮源以蛋白质作为唯一氮源青霉素青霉素缺氮缺氮严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。鉴别培养基鉴别培养基 如:可用如:可用伊红伊红美蓝美蓝培养基鉴别培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽光泽)在培养基中加入某种指示剂或化在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物。学药品鉴别不同种类的微生物。严格执行突发事件上报制度、校外活动
16、报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。2、统计菌落数目的方法、统计菌落数目的方法(1)显微镜直接计数法显微镜直接计数法原理:利用特定细菌计数板或血细胞原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计一定容积的样品计数板,在显微镜下计一定容积的样品中微生物数量。中微生物数量。方法:用计数板计数。方法:用计数板计数。缺点:不能区分死菌与活菌。缺点:不能区分死菌与活菌。四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。(2)
17、间接计数法间接计数法(活菌计数法活菌计数法)原理:当样品的稀释度足够高时,原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的平板上的菌落数,就能推测出样品中菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌大约含有多少活菌。严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。为了保证结果准确,一般选择菌落数为了保证结果准确,一般选择菌落数在在30300的平板进行计数。的平板进行计数。计算公式:计算公式:每克样品中的菌株数每克样品中
18、的菌株数C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数V代表涂布平板时所用的稀释液的体积代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)M代表稀释倍数代表稀释倍数严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。土壤取样土壤取样 样品稀释样品稀释 取样取样涂布涂布 微生物培养微生物培养 观察并记观察并记录结果录结果 细菌计数细菌计数3、细菌分离与计数的实验流程、细菌分离与计数的实验流程严格执行突发事件上报制度、校外活动报批制度等相关规章制度。做到及时发现、制止、汇报并处理各类违纪行为或突发事件。在细菌分解尿素
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