实验六植物抗氧化酶活性的测定精品文稿.ppt
《实验六植物抗氧化酶活性的测定精品文稿.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《实验六植物抗氧化酶活性的测定精品文稿.ppt(14页珍藏版)》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、实验六植物抗氧化酶活性的测定第1页,本讲稿共14页POD、SOD、CAT(AOX)(PPO)第2页,本讲稿共14页抗氧化抗氧化酶与植物抗逆性关系与植物抗逆性关系第3页,本讲稿共14页Journal of Experimental Botany,2009,60(2):377390H2O2H2O2第4页,本讲稿共14页李忠光,2009.10第5页,本讲稿共14页POD一、实验原理一、实验原理Peroxidase,POD第6页,本讲稿共14页(ROS,H2O2)第7页,本讲稿共14页PPOPolyphennol oxidase,PPO第8页,本讲稿共14页抗氧化抗氧化酶动力学曲力学曲线第9页,本讲稿
2、共14页植物抗氧化酶提取和测定参考文献第10页,本讲稿共14页二、二、实验方法方法1、提取:分、提取:分别取取0.5 g实验材料材料加入少加入少许石英砂和石英砂和3 ml提取液(提取液(50mmol/L PBS,pH5.8,内含内含0.mmol/LEDTA,1%PVP)充分研磨充分研磨转入离心管中入离心管中用用2 ml提取液提取液洗研洗研钵 5000 rpm离心离心10 min 上清液定容至上清液定容至5 ml 用用于于测定定POD和和PPO酶活性或分装后活性或分装后转至至-20或或-80保存。保存。第11页,本讲稿共14页2、POD测测定定:取取POD反反应应混合液(混合液(10mmol/L
3、愈愈创创木酚,木酚,5 mmol/L H2O2,用用PBSPBS溶解)溶解)2.90 ml2.90 ml,25 水浴水浴5 min,加入加入酶酶液液100 m ml(空白(空白调调零用提取液取代),立即零用提取液取代),立即记时记时,摇摇匀,匀,读读出反出反应应30 s和和3 min时时的的A A470470。用。用计计算算PODPOD活性。活性。3、PPO测测定:取定:取PPO反反应应混合液(混合液(20 mmol/L邻邻苯二酚,用苯二酚,用PBS溶解)溶解)2.8 ml,25 水浴水浴5 min,加入,加入酶酶液液0.2 ml(空(空白白调调零用零用提取液提取液取代),立即取代),立即记时记时,摇摇匀,匀,读读出反出反应应 30 s和和2 min时时的的A410。以以每分每分钟钟A A值变值变化化0.010.01所需要的所需要的酶酶液的液的量量为为一个活力一个活力单单位(位(U U),则则:第12页,本讲稿共14页POD activities=(mmol.g-1FWmin-1)PPO activities=(U.g-1FW)4、计算、计算第13页,本讲稿共14页5、思考题、思考题5.1 简述植物POD和PPO的生理意义。5.2在论述呼吸代谢多途径及其生理意义。第14页,本讲稿共14页
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 实验 植物 氧化酶 活性 测定 精品 文稿
限制150内