第八章磺胺类和喹诺酮类药物的分析PPT讲稿.ppt

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1、第八章第八章 磺胺类和喹诺酮类药物的磺胺类和喹诺酮类药物的分析分析第1页，共44页，编辑于2022年，星期三第一节第一节 磺胺类药物的分析磺胺类药物的分析对氨基苯磺酰胺衍生物对氨基苯磺酰胺衍生物N1取代物：取代物：母体结构中磺酰氨母体结构中磺酰氨基上的一个氢原子被其它基团取代基上的一个氢原子被其它基团取代后的衍生物。后的衍生物。N4取代物：取代物：母体结构中对位氨母体结构中对位氨基上的一个氢原子被其他基团取代基上的一个氢原子被其他基团取代后的衍生物。后的衍生物。N1、N4取代物：取代物：母体结构中母体结构中N1和和N 4上各有一个氢原子被取代的衍生上各有一个氢原子被取代的衍生物。物。第2页，共

2、44页，编辑于2022年，星期三一、常用药物的化学结构及理化性质一、常用药物的化学结构及理化性质常用药物化学结构常用药物化学结构第3页，共44页，编辑于2022年，星期三 两性化合物：两性化合物：ArNH2显弱碱性；磺酰胺显弱碱性；磺酰胺基基N1上的上的H较活泼，即具有一定的酸性。较活泼，即具有一定的酸性。因此可溶于酸性或碱性溶液中。因此可溶于酸性或碱性溶液中。与金属离子生成沉淀：与金属离子生成沉淀：铜盐沉淀的颜色随铜盐沉淀的颜色随N1取代基的不同而异，有的还有颜色变化过取代基的不同而异，有的还有颜色变化过程，常用于磺胺类药物的鉴别。程，常用于磺胺类药物的鉴别。可发生重氮化可发生重氮化-偶合反

3、应：偶合反应：产生有色沉淀产生有色沉淀性性 质质第4页，共44页，编辑于2022年，星期三与芳醛在酸性溶液中缩合：与芳醛在酸性溶液中缩合：生成有色生成有色的希夫碱。的希夫碱。N1上的芳杂环取代基具有碱性，可与上的芳杂环取代基具有碱性，可与有机碱沉淀剂反应：有机碱沉淀剂反应：生成沉淀。生成沉淀。乙酰化反应：乙酰化反应：芳伯氨基经醋酐酰化后芳伯氨基经醋酐酰化后（即乙酰化），在显微镜下观察，都具有（即乙酰化），在显微镜下观察，都具有特殊的结晶形状，可做鉴别反应。特殊的结晶形状，可做鉴别反应。性性 质质第5页，共44页，编辑于2022年，星期三二、磺胺类药物的鉴别二、磺胺类药物的鉴别1 1化学鉴别法化

4、学鉴别法（1）铜盐反应）铜盐反应可初步区别结构类似的磺胺药可初步区别结构类似的磺胺药第6页，共44页，编辑于2022年，星期三表表8-1 8-1 磺胺类药物与铜盐的反应磺胺类药物与铜盐的反应药物名称药物名称加入硫酸铜试液后的现象加入硫酸铜试液后的现象磺胺甲噁唑磺胺甲噁唑磺胺异噁唑磺胺异噁唑磺胺嘧啶磺胺嘧啶磺胺多辛磺胺多辛生成草绿色沉淀生成草绿色沉淀呈淡棕色，放置析出暗绿色絮状沉淀呈淡棕色，放置析出暗绿色絮状沉淀生成黄绿色沉淀，放置后变为紫色生成黄绿色沉淀，放置后变为紫色生成黄绿色沉淀，放置后变淡蓝色生成黄绿色沉淀，放置后变淡蓝色第7页，共44页，编辑于2022年，星期三（2）重氮化）重氮化-偶

5、合反应偶合反应第8页，共44页，编辑于2022年，星期三（3）芳伯氨基与芳醛的缩合反应）芳伯氨基与芳醛的缩合反应芳醛：芳醛：对二甲氨基苯甲醛、香草醛、水杨醛等对二甲氨基苯甲醛、香草醛、水杨醛等如：与对二甲氨基苯甲醛在酸性溶液中生成黄如：与对二甲氨基苯甲醛在酸性溶液中生成黄色希夫氏碱。色希夫氏碱。第9页，共44页，编辑于2022年，星期三N1取代基取代基为为含氮含氮杂环杂环，有一定碱性，可以和有，有一定碱性，可以和有机碱沉淀机碱沉淀剂剂生成沉淀。生成沉淀。（4）N1取代基的反应取代基的反应第10页，共44页，编辑于2022年，星期三2红外光谱识别法红外光谱识别法 红外法具有指纹性，在一定波长下，

6、磺胺类药物各具有红外法具有指纹性，在一定波长下，磺胺类药物各具有其独特的吸收光谱图，可鉴别本类药物的特征官能团。其独特的吸收光谱图，可鉴别本类药物的特征官能团。图图8-1 磺胺嘧啶的红外吸收光谱磺胺嘧啶的红外吸收光谱第11页，共44页，编辑于2022年，星期三三、磺胺嘧啶的检查三、磺胺嘧啶的检查1溶液澄清度与颜色的检查溶液澄清度与颜色的检查方法：方法：比色法比色法要求：要求：澄清无色；如显色，与黄色澄清无色；如显色，与黄色3 3号标号标准比色液比较，不得更深。准比色液比较，不得更深。有色的氧化产物有色的氧化产物偶氮苯化合物偶氮苯化合物第12页，共44页，编辑于2022年，星期三2有关物质的检查

7、有关物质的检查目的：控制药物的纯度。目的：控制药物的纯度。方法：薄层色谱法，主成分自身对照法方法：薄层色谱法，主成分自身对照法杂质的限度：杂质的限度：0.5。3干燥失重干燥失重 105干燥至恒重，减失重量干燥至恒重，减失重量0.5。第13页，共44页，编辑于2022年，星期三4酸度酸度取本品取本品2.0g，加水，加水100mL，置水浴中振摇，置水浴中振摇加热加热10分钟，立即放冷，滤过；分取滤液分钟，立即放冷，滤过；分取滤液25mL，加酚酞指示液加酚酞指示液2 滴与氢氧化钠滴定滴与氢氧化钠滴定(0.1mol/L)0.20mL，应显粉红色。，应显粉红色。5炽灼残渣：炽灼残渣：不得过不得过0.1。

8、6重金属：重金属：不得过百万分之十。不得过百万分之十。第14页，共44页，编辑于2022年，星期三四、含量测定四、含量测定1亚硝酸钠滴定法亚硝酸钠滴定法 测定原理：测定原理：利用磺胺类药物的利用磺胺类药物的N1取代物分子中含取代物分子中含有芳伯氨基，在有芳伯氨基，在05低温状态下、盐酸介质中可与亚低温状态下、盐酸介质中可与亚硝酸盐发生重氮化反应，测定磺胺类药物的含量。硝酸盐发生重氮化反应，测定磺胺类药物的含量。第15页，共44页，编辑于2022年，星期三 取供取供试试品品约约0.5 g，精密称定，置，精密称定，置烧烧杯中，加杯中，加水水40 mL与与盐盐酸溶液酸溶液(1+2)15 mL，然后置

9、于，然后置于电电磁磁搅搅拌拌器上，器上，搅搅拌使溶解，再加拌使溶解，再加溴化溴化钾钾2g，插入，插入铂铂-铂电铂电极极后，将滴定管的后，将滴定管的尖端插入液面下尖端插入液面下约约2/3处处，用，用亚亚硝酸硝酸钠钠液滴定液液滴定液迅速滴定迅速滴定，随滴随，随滴随搅搅拌。至近拌。至近终终点点时时，将，将滴定管的尖端提出液面，用少量的水淋洗，将洗液并人滴定管的尖端提出液面，用少量的水淋洗，将洗液并人溶液中，溶液中，继续继续缓缓缓缓滴定滴定，直到，直到电电流流计计指指针针突然偏突然偏转转，并不再回复，即并不再回复，即为为滴定滴定终终点点（永停法）（永停法）。每。每1mL的的亚亚硝酸硝酸钠钠滴定液滴定液

10、(0.1mol/L)相当于相当于25.03 mg的的C10H10N4O2S。磺磺胺胺嘧嘧啶啶含含量量测测定定第16页，共44页，编辑于2022年，星期三（1）加入适量）加入适量KBr（2）酸的种类及用量）酸的种类及用量 芳胺芳胺 盐酸盐酸1 2.56mol（3）室温条件下滴定）室温条件下滴定（4）滴定速度）滴定速度（5）指示终点的方法）指示终点的方法 药典采用永停法药典采用永停法 计算公式：计算公式：主要条件：主要条件：第17页，共44页，编辑于2022年，星期三2非水溶液滴定法非水溶液滴定法含磺酰亚氨基含磺酰亚氨基SO2NHR，其，其N上的上的H具有一定具有一定酸性（酸性（R吸电子效应越强，

11、吸电子效应越强，N上的上的H越易失去，酸性越越易失去，酸性越强），故可用非水酸碱滴定法测定。强），故可用非水酸碱滴定法测定。取供试品约取供试品约0.5g，精密称定，加，精密称定，加二甲基二甲基甲酰胺甲酰胺40mL溶解后，加溶解后，加偶氮紫指示液偶氮紫指示液3滴，滴，用用甲醇钠滴定液甲醇钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液滴定，至溶液恰显蓝色，并将滴定的结果用空白试验恰显蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每校正。每1mL甲醇钠滴定液甲醇钠滴定液(0.1mol/L)相相当于当于26.73mg的的C11H13N3O3S。磺胺异噁唑磺胺异噁唑第18页，共44页，编辑于2022年，星期三（1）测定

12、结果准确，终点明显。测定结果准确，终点明显。（2）甲醇钠滴定溶液应临用前标定。）甲醇钠滴定溶液应临用前标定。（3）滴定最好在隔绝空气中二氧化）滴定最好在隔绝空气中二氧化碳的情况下进行。碳的情况下进行。计算公式：计算公式：讨讨 论：论：第19页，共44页，编辑于2022年，星期三3紫外分光光度法紫外分光光度法仅有单一组分或虽有多种组分，但组分间互不干仅有单一组分或虽有多种组分，但组分间互不干扰的制剂：扰的制剂：直接采用紫外分光光度法，在待测组分的最大直接采用紫外分光光度法，在待测组分的最大吸收波长处测定吸收度，以对照品比较法或吸收系吸收波长处测定吸收度，以对照品比较法或吸收系数法计算数法计算磺胺

13、嘧啶片的溶出度测定磺胺嘧啶片的溶出度测定有多种组分且各组分吸收光谱互相重叠：有多种组分且各组分吸收光谱互相重叠：采用计算分光光度法采用计算分光光度法 复方磺胺甲噁唑片的含量测定复方磺胺甲噁唑片的含量测定(2000(2000版）版）第20页，共44页，编辑于2022年，星期三磺胺嘧啶片的溶出度测定磺胺嘧啶片的溶出度测定 取供试品照溶出度测定浆法，以盐酸溶液取供试品照溶出度测定浆法，以盐酸溶液(91000)1000mL为溶剂，为溶剂，转速为转速为100r/min，依法操作，经，依法操作，经60min，取溶液，取溶液5 mL滤过，精密量滤过，精密量取续滤液取续滤液1 mL，置，置50 mL量瓶中，加

14、量瓶中，加0.01 mol/L氢氧化钠溶液稀释至氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，在刻度，摇匀，在254 nm的波长处测定吸收度，按磺胺嘧啶的波长处测定吸收度，按磺胺嘧啶（C10Hl0N4O2S）的吸收系数（）的吸收系数（）为）为866计算出每片的溶出量，限度计算出每片的溶出量，限度为标示量的为标示量的70，应符合规定。，应符合规定。计算公式如下：计算公式如下：检查方法：检查方法：第21页，共44页，编辑于2022年，星期三复方磺胺甲噁唑片含量测定复方磺胺甲噁唑片含量测定处方组成：磺胺甲噁唑 400mg甲氧苄啶测定 80mg辅料 适量测定方法：测定方法：双波长分光光度法双波长分光光度法第22页，共

15、44页，编辑于2022年，星期三双双波波长长分分光光光光度度法法(双双波波长长等等吸吸收收法法)当光谱重叠时，在其光谱中选择两波长，在选定的波长处，干扰组分有相同的吸收；被测组分与干扰组分的吸收有足够大的差别。则两波长处吸光度的差值与被测组份的浓度成正比。第23页，共44页，编辑于2022年，星期三因为所以可见，在双波长分光光度法中吸光度的差值与干扰组份B无关。为测定波长,为参比波长A为待测组分,B为干扰组分第24页，共44页，编辑于2022年，星期三磺胺甲噁唑测定：因为磺胺甲噁唑在257nm的波长处有最大吸收,甲氧苄啶在此波长处吸收较小，并在304nm波长附近有一等吸收点，故选择257nm为

16、测定波长（2），在304nm波长附近选择等吸收波长为参比波长（1）。甲氧苄啶测定：由甲氧苄啶紫外吸收图谱可知，在239nm波长处甲氧苄啶有较大吸收，而此波长是磺胺甲噁唑的最小吸收，且在295nm波长附近有一等吸收点，故选择239nm作为甲氧苄啶的测定波长，在295nm波长附近选择等吸收波长作为参比波长。波波长长选选择择第25页，共44页，编辑于2022年，星期三精密称取在105干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50mg与甲氧苄啶对照品10mg，分别置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺甲噁

17、唑50mg与甲氧苄啶10mg），置100ml 量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟使磺胺甲噁唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品母液。对照品溶液对照品溶液配制配制供试品母液供试品母液配制配制第26页，共44页，编辑于2022年，星期三稀释液的配制稀释液的配制：精密量取供试品母液与对照品溶液(1)、(2)各1ml，分别置50ml量瓶中，各加0.4氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，即得。参比波长和测定波长的确定参比波长和测定波长的确定：取对照品溶液(2)的稀释液，以257nm 为测定波长(2)，在304nm 波长附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为参比波长(1)，要求2

18、 1 0。样液的测定样液的测定：再在2与1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值()计算，即得。磺磺胺胺甲甲噁噁唑唑测测定定第27页，共44页，编辑于2022年，星期三稀释液的配制稀释液的配制：精密量取上述供试品母液与对照品溶液(1)、(2)各2.5ml,分别置50ml 量瓶中，各加盐酸氯化钾溶液取0.1mol/L盐酸溶液75ml与氯化钾6.9g，加水至1000ml，摇匀稀释至刻度，摇匀，即得。参比波长和测定波长的确定参比波长和测定波长的确定：照分光光度法取对照品溶液(1)的稀释液，以239.0nm 为测定波长(2)，在295nm 波长附近(每

19、间隔0.2nm)选择等吸收点波长为参比波长(1)，要求2-1 0，样液的测定样液的测定：再在2 与1 波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(2)的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值()，计算，即得。甲甲氧氧苄苄啶啶测测定定第28页，共44页，编辑于2022年，星期三计算公式计算公式式中，式中，A AX X为供试品溶液稀释液的吸光度差值；为供试品溶液稀释液的吸光度差值；A AR R为对照品溶液稀释液的吸光度差值；为对照品溶液稀释液的吸光度差值；m mR R为为SMZSMZ对照品的称量（对照品的称量（mgmg）m m为样品的称量（为样品的称量（g g）；）；为平均片重（为平均片重（g/g

20、/片）。片）。第29页，共44页，编辑于2022年，星期三第二节第二节 氟喹诺酮类药物的分析氟喹诺酮类药物的分析 喹诺酮类药物是一类化学合成抗菌药，由喹诺酮类药物是一类化学合成抗菌药，由于具有抗菌谱广、抗菌作用强、使用安全及易于具有抗菌谱广、抗菌作用强、使用安全及易于制造等优点，发展迅速。于制造等优点，发展迅速。基本母核结构：基本母核结构：6-6-氟氟-4-4-喹诺酮喹诺酮-3-3-羧酸羧酸第30页，共44页，编辑于2022年，星期三一、几种常用药物的化学结构及理化性质一、几种常用药物的化学结构及理化性质 环环丙沙星丙沙星 氧氟沙星氧氟沙星常用药物结构常用药物结构诺氟沙星诺氟沙星培氟杀星培氟杀

21、星第31页，共44页，编辑于2022年，星期三理理 化化 性性 质质 显酸碱两性显酸碱两性 氟喹诺酮类药物结构分子中都含氟喹诺酮类药物结构分子中都含有羧基及碱性氮原子有羧基及碱性氮原子 溶解性溶解性 易溶于碱和酸，在水和乙醇中极微易溶于碱和酸，在水和乙醇中极微溶解。溶解。紫外区有特征吸收紫外区有特征吸收 具有共轭系统具有共轭系统第32页，共44页，编辑于2022年，星期三二、诺氟沙星的分析二、诺氟沙星的分析诺氟沙星：临床常用消炎药诺氟沙星：临床常用消炎药化学名：化学名：1-乙基乙基-6-氟氟-4-氧代氧代-l,4-二氢二氢-7-(1-哌嗪哌嗪基基)-3-喹啉羧酸喹啉羧酸结构：结构：性质：性质：

22、结构中有羧基显酸性，有哌嗪基结构中有羧基显酸性，有哌嗪基显碱性，是两性化合物。显碱性，是两性化合物。第33页，共44页，编辑于2022年，星期三1鉴别试验鉴别试验（1）N1为叔氨基为叔氨基 （2）F6显有机氟化物的性质显有机氟化物的性质 （3）紫外吸收特征：紫外吸收特征：5 g/mL本品的本品的0.4NaOH溶液，溶液，max273nm（4）采用红外光谱、薄层色谱、）采用红外光谱、薄层色谱、HPLC鉴别鉴别第34页，共44页，编辑于2022年，星期三2检查试验检查试验（1）溶液的澄清度：）溶液的澄清度：目的目的：控制碱不溶性杂质的限量：控制碱不溶性杂质的限量检查方法检查方法：比浊法：比浊法指标

23、要求指标要求：5份均应澄清；如显浑浊，与份均应澄清；如显浑浊，与2号浊度标准液比较，均不得更浓。号浊度标准液比较，均不得更浓。（2）氟：）氟：限度限度：含氟量：含氟量 5.4（理论（理论5.95）偏低原因偏低原因：原料制备、副反应：原料制备、副反应第35页，共44页，编辑于2022年，星期三（3）有关物质：）有关物质：HPLC法法 限度限度：杂质：杂质A0.2%。其他单个杂质。其他单个杂质0.5%。其他各杂质的和其他各杂质的和1.0%。（4）干燥失重：本品易吸收水分。）干燥失重：本品易吸收水分。限度限度：105，减失重量不得过，减失重量不得过1.0%（5）炽灼残渣）炽灼残渣 铂坩埚铂坩埚 限度

24、限度：遗留残渣不得过：遗留残渣不得过0.1%。（6）重金属）重金属 限度限度：15ppm。第36页，共44页，编辑于2022年，星期三3含量测定含量测定 原理原理：利用分子中有哌嗪基团显碱性。利用分子中有哌嗪基团显碱性。测定方法测定方法：取本品约取本品约0.25g，精密称定，加，精密称定，加冰醋酸冰醋酸20mL溶解后，加橙黄溶解后，加橙黄指示剂，用指示剂，用高氯酸标准滴定溶液高氯酸标准滴定溶液(0.1mol/L)滴定至溶液滴定至溶液显紫红色，并将滴定结果用空白校正。显紫红色，并将滴定结果用空白校正。注意事项注意事项：严格控制醋酐用量严格控制醋酐用量 诺氟沙星分子中哌嗪基为仲胺，容易发诺氟沙星分

25、子中哌嗪基为仲胺，容易发生乙酰化反应。生乙酰化反应。非非水水碱碱量量法法第37页，共44页，编辑于2022年，星期三色谱条件色谱条件：色谱柱：色谱柱：C18柱柱流动相：流动相：0.025mol/L磷酸溶液（用磷酸溶液（用三乙胺调节三乙胺调节pH值至值至3.00.1）-乙腈乙腈（8713）检测波长：检测波长：278nm系统适用性系统适用性：诺氟沙星峰与与环丙诺氟沙星峰与与环丙沙星峰和依诺沙星峰的分离度均应不小沙星峰和依诺沙星峰的分离度均应不小于于2.0定量方法定量方法：外标法外标法 高高效效液液相相色色谱谱法法第38页，共44页，编辑于2022年，星期三三、环丙沙星的分析三、环丙沙星的分析 化学

26、名化学名：1-1-环丙基环丙基-6-6-氟氟-l,4-l,4-二氢二氢-4-4-氧氧-7-(1-7-(1-哌嗪基哌嗪基)-3-)-3-喹啉羧基喹啉羧基结构结构：与诺氟沙星的结构区别是与诺氟沙星的结构区别是N N1 1上的取代基不同上的取代基不同 第39页，共44页，编辑于2022年，星期三1鉴别试验鉴别试验红外光谱法红外光谱法：与对照的图谱一致。与对照的图谱一致。TLC法法：供试品所显主斑点的颜色位置与对供试品所显主斑点的颜色位置与对照品的主斑点相同。照品的主斑点相同。水溶液显氟化物的鉴别反应水溶液显氟化物的鉴别反应。HPLC法法：供试品溶液主峰的保留时间应与供试品溶液主峰的保留时间应与对照品

27、溶液主峰的保留时间一致。对照品溶液主峰的保留时间一致。第40页，共44页，编辑于2022年，星期三2检查试验检查试验（1）结晶性）结晶性：应符合规定。应符合规定。（2）水分）水分：卡尔卡尔-费休法费休法 含水量应在含水量应在4.76.7。（3）有关物质）有关物质：高效液相色谱法：高效液相色谱法 杂质杂质A0.3%，杂质，杂质B,C,D,E均均0.2%，其他单个杂质，其他单个杂质0.2%，各杂质，各杂质的和的和0.5%。第41页，共44页，编辑于2022年，星期三（4）溶液的澄清度与颜色）溶液的澄清度与颜色：比色法比色法 应澄清无色；如显色，与黄色或黄绿色应澄清无色；如显色，与黄色或黄绿色4号标

28、准比色液比较，不得更深。号标准比色液比较，不得更深。（5）干燥失重：）干燥失重：五氧化二磷干燥法五氧化二磷干燥法 120减压干燥减压干燥6hr，减失重量，减失重量1.0%（6）)炽灼残渣：炽灼残渣：铂坩埚铂坩埚 遗留残渣不得过遗留残渣不得过0.1%。（7）重金属：）重金属：含重金属含重金属20ppm。第42页，共44页，编辑于2022年，星期三色谱条件色谱条件：色谱柱：色谱柱：C18柱柱流动相：流动相：0.025mol/L磷酸溶液（用磷酸溶液（用三乙胺调节三乙胺调节pH值至值至3.00.1）-乙腈乙腈（8713）检测波长：检测波长：278nm系统适用性系统适用性：环丙沙星峰与氧氟沙环丙沙星峰与

29、氧氟沙星峰和杂质星峰和杂质I峰的分离度均应符合要峰的分离度均应符合要求。求。定量方法定量方法：外标法外标法 高高效效液液相相色色谱谱法法3含量测定含量测定第43页，共44页，编辑于2022年，星期三（2）间接原子吸收法：）间接原子吸收法：根据环丙沙星在弱酸性介质中与雷氏盐根据环丙沙星在弱酸性介质中与雷氏盐定量生成缔合物，用原子吸收法测定沉淀中定量生成缔合物，用原子吸收法测定沉淀中的的Cr含量，间接测定环丙沙星含量。含量，间接测定环丙沙星含量。（3）紫外分光光度法：）紫外分光光度法：环丙沙星在稀盐酸中有紫外吸收的特点，环丙沙星在稀盐酸中有紫外吸收的特点，用紫外分光光度法测定含量。用紫外分光光度法测定含量。第44页，共44页，编辑于2022年，星期三