实验十一水中细菌总数的测定精.ppt

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1、实验十一水中细菌总数的测定第1页，本讲稿共10页一、实验目的一、实验目的n1.学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。n2.了解水源水的平板菌落计数的原理。第2页，本讲稿共10页二、实验原理二、实验原理n本实验应用平板计数技术测定水中细菌本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多，它们对总数。由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，以一定的培养

2、基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中细菌总数仅是一种近似计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨值。目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。琼脂培养基。第3页，本讲稿共10页三、试剂与器材三、试剂与器材n1.试剂：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，灭菌水。n2.器材：灭菌三角瓶，灭菌的带玻璃塞瓶，灭菌培养皿，灭菌吸管，灭菌试管等。第4页，本讲稿共10页四、实验内容四、实验内容1.水样的采取n自来水：自来水龙头灼烧3分钟，放开水龙头流5分钟后接取水样。n桶装水:待水流一段时间后接取水样。n湖水:取距水面10-15厘米出水样。第5页，本讲稿共10页2 细菌总数测定（1）自来水

3、和桶装水n取1毫升注入无菌培养皿中做两皿；n倒入15毫升45的左右的牛肉膏蛋白胨培养基后混合均匀；n另取一空白培养皿做成空白对照；n培养基凝固后倒置于37的恒温培养箱中培养24-48小时后计数。第6页，本讲稿共10页（2）湖水或池水n稀释水样:4.5毫升无菌水+0.5毫升水样做梯度稀释至10-3；n取最后三个稀释度的水样1毫升注入2个无菌培养皿，然后倒入15毫升45的牛肉膏蛋白胨培养基混合均匀；n37恒温培养24-48小时后计数。第7页，本讲稿共10页3 菌落计数方法n菌苔不计数；n首先选取菌落数在30-300之间稀释度计数，平均菌落数乘于稀释倍数即可；n若有两个稀释度的平均菌落数均在30-300之间，按两者比值决定：如小于2，取两者平均数；如大于2，取其中菌落较小者；第8页，本讲稿共10页n如都大于300，取稀释度较高的平均菌落乘于稀释倍数；n如都小于30，取稀释度最小的平均菌落乘于稀释倍数；n如都不在30-300之间，取最接近300或30的平均菌落乘于稀释倍数。第9页，本讲稿共10页五 实验报告n1 结果 P183n2 思考题 P184（3）第10页，本讲稿共10页