红细胞血型血清学检测技术规范精选课件.ppt

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1、关于红细胞血型血清学检测技术规范第一页，本课件共有23页主要内容主要内容 中国输血技术操作规程中国输血技术操作规程(血站部分血站部分)1997年版年版 中国输血技术操作规程中国输血技术操作规程(血站部分血站部分)(征求意件稿征求意件稿)AABB Technical Manual 14th ed AABB Standard 21st ed第二页，本课件共有23页对标本的一般要求对标本的一般要求 实验室所检测标本须有清晰的惟一性标识；实验室所检测标本须有清晰的惟一性标识；标本须和血液、血液成分制品来自于同一献血者；标本须和血液、血液成分制品来自于同一献血者；所检测的标本可为抗凝的或不抗凝的标本所检

2、测的标本可为抗凝的或不抗凝的标本,抗凝抗凝 剂推荐使用乙二胺四乙酸剂推荐使用乙二胺四乙酸(EDTA)；遵守试剂遵守试剂/仪器使用说明书中所限定的标本制备和仪器使用说明书中所限定的标本制备和 保存步骤；当说明书内容不能涵盖相关要求时保存步骤；当说明书内容不能涵盖相关要求时,可可 用经确认的标本制备和保存步骤；用经确认的标本制备和保存步骤；肉眼判定标本是否存在影响检测结果的因素肉眼判定标本是否存在影响检测结果的因素,如溶如溶 血、脂血等。血、脂血等。第三页，本课件共有23页仪器设备的要求仪器设备的要求仪器设备在安装后，需校准方可使用，校准仪器设备在安装后，需校准方可使用，校准 周期至少一年一次，仪

3、器设备需有维护程序。周期至少一年一次，仪器设备需有维护程序。所有的校准、维护须有记录。所有的校准、维护须有记录。仪器设备所使用的软件和实验室的信息系统仪器设备所使用的软件和实验室的信息系统 须经过确认。须经过确认。第四页，本课件共有23页记录的要求记录的要求所有检测标本具有可追溯性。所有检测标本具有可追溯性。核对当前核对当前ABO/RhD定型结果与既往的血型记录定型结果与既往的血型记录是否一致，结果不一致必须查找原因。是否一致，结果不一致必须查找原因。第五页，本课件共有23页 ABO血型鉴定血型鉴定 Rh血型鉴定血型鉴定 红细胞血型抗体鉴定红细胞血型抗体鉴定 交叉配血试验交叉配血试验 HDN血

4、型血清学检查血型血清学检查检测项目检测项目第六页，本课件共有23页原理原理:根据红细胞上和血清根据红细胞上和血清(或血浆或血浆)中有或无中有或无A抗原或抗原或/和和B抗原及其抗体抗原及其抗体,将血型分为将血型分为A、B、AB及及O型。型。ABOABO血型鉴定血型鉴定第七页，本课件共有23页方法方法:红细胞凝集试验红细胞凝集试验 正定型正定型 用已知抗用已知抗-A或抗或抗-B定型试剂来测定红细定型试剂来测定红细 胞上有无相应的胞上有无相应的A抗原或抗原或/和和B抗原抗原 反定型反定型 用已知用已知A1型细胞和型细胞和B型细胞来测定血清中型细胞来测定血清中 有无相应的抗有无相应的抗-A或或/和抗和

5、抗-B 正反定型结果不一致或有疑问，需进一步行正反定型结果不一致或有疑问，需进一步行ABO血型确认试血型确认试验。验。ABOABO血型鉴定血型鉴定第八页，本课件共有23页ABOABO亚型鉴定亚型鉴定A1和和A2亚型鉴定亚型鉴定原理原理:抗抗-A血清中含有抗血清中含有抗-A和抗和抗-A1两种抗体，抗两种抗体，抗-A可可以凝集以凝集A型和型和AB型红细胞，而抗型红细胞，而抗-A1只能与部分只能与部分A型型和和AB型红细胞反应，据此凡与抗型红细胞反应，据此凡与抗-A1强反应者被定为强反应者被定为A1或或A1B型，不与抗型，不与抗-A1反应，而与抗反应，而与抗-A强反应者被强反应者被定为定为A2或或A

6、2B型型。第九页，本课件共有23页鉴定其他弱鉴定其他弱A或弱或弱B亚型亚型I.红细胞与抗红细胞与抗-A、抗、抗-A1、抗、抗-B及抗及抗-AB的凝集程度的凝集程度II.红细胞上的红细胞上的H物质活性的强弱物质活性的强弱III.血清中是否存在抗血清中是否存在抗-A1和不规则抗和不规则抗-BIV.分泌型人唾液中分泌型人唾液中A、B、H物质物质方法方法:凝集反应、吸收放散、血凝抑制试验凝集反应、吸收放散、血凝抑制试验(唾液试验唾液试验)新生儿红细胞新生儿红细胞ABO血型抗原较弱，不宜作亚型鉴定。血型抗原较弱，不宜作亚型鉴定。ABOABO亚型鉴定亚型鉴定第十页，本课件共有23页RhRh血型鉴定血型鉴定

7、原理原理:Rh血型系统最常见的抗原主要有血型系统最常见的抗原主要有C,c,D,E,e 5种。种。可分别用抗可分别用抗C、抗、抗c、抗、抗D、抗、抗E、抗、抗e这这5种种Rh 定型试剂通过血凝试验来检查红细胞上是否存定型试剂通过血凝试验来检查红细胞上是否存 在相应抗原。在临床输血中，一般只做在相应抗原。在临床输血中，一般只做D抗原抗原 的鉴定。的鉴定。凡被检红细胞和抗凡被检红细胞和抗D试剂凝集者为试剂凝集者为 RhD阳性，不凝集者为阳性，不凝集者为RhD阴性。阴性。第十一页，本课件共有23页方法方法:根据所选试剂的恃性，根据所选试剂的恃性，Rh血型的鉴定方法可采血型的鉴定方法可采用试管直接盐水凝

8、集法，用试管直接盐水凝集法，酶技术酶技术、抗人球蛋白技、抗人球蛋白技术、聚凝胺、微柱凝胶等。术、聚凝胺、微柱凝胶等。RhRh血型鉴定血型鉴定第十二页，本课件共有23页 RhD阴性确认试验阴性确认试验 D变异型变异型 弱弱D 不完全不完全D D抗原位点数减少抗原位点数减少 抗原结构产生变异抗原结构产生变异 与常规使用的抗与常规使用的抗D定型试剂不凝集或弱凝集定型试剂不凝集或弱凝集 采用含采用含IgG抗抗D抗体的抗体的 采用抗不同采用抗不同D表位的抗表位的抗D 试剂进行抗球蛋白试验试剂进行抗球蛋白试验 抗体测定不同抗体测定不同D表位表位 当确定红细胞上无当确定红细胞上无D蛋白表达时，蛋白表达时，才

9、能最终判定被检标本为才能最终判定被检标本为RhD阴性阴性RhDRhD血型鉴定血型鉴定第十三页，本课件共有23页要求要求:红细胞在直接凝集试验中被红细胞在直接凝集试验中被IgM抗抗-D凝集的和凝集的和在在RhD阴性确认试验中被任何一种抗阴性确认试验中被任何一种抗-D凝集的都凝集的都应标记为应标记为RhD阳性阳性。在直接凝集试验和在。在直接凝集试验和在RhD阴阴性确认试验中与任何一种抗性确认试验中与任何一种抗-D都不凝集的血液需都不凝集的血液需标记为标记为RhD阴性阴性。红细胞与红细胞与IgM抗抗-D定型试剂在直定型试剂在直接凝集试验中不接凝集试验中不/弱凝集的标本，需进一步进行弱凝集的标本，需进

10、一步进行RhD阴性确认试验。阴性确认试验。RhDRhD血型鉴定血型鉴定第十四页，本课件共有23页原理原理:用已知抗原表型的试剂红细胞组，通过直接凝集用已知抗原表型的试剂红细胞组，通过直接凝集试验和间接抗球蛋白试验，筛选标本中可能存在的血试验和间接抗球蛋白试验，筛选标本中可能存在的血型同种免疫性抗体。避免含有临床意义的血型同种抗型同种免疫性抗体。避免含有临床意义的血型同种抗体随血液、血液成分制品一同输入。体随血液、血液成分制品一同输入。红细胞血型抗体鉴定红细胞血型抗体鉴定第十五页，本课件共有23页红细胞血型抗体鉴定红细胞血型抗体鉴定方法方法:盐水悬浮细胞凝集试验盐水悬浮细胞凝集试验 间接抗球蛋白

11、试验间接抗球蛋白试验及各种改良的及各种改良的IAT 免疫荧光技术、放射免疫技术免疫荧光技术、放射免疫技术 酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验(ELISA)固相红细胞粘附试验以及凝胶试验固相红细胞粘附试验以及凝胶试验AABB:有输血史或有输血史或/和妊娠史的献血者需要进行红细胞血和妊娠史的献血者需要进行红细胞血型抗体鉴定型抗体鉴定(具临床意义的抗体具临床意义的抗体)第十六页，本课件共有23页试剂试剂:用于筛选的试剂红细用于筛选的试剂红细胞必须来自至少两名无胞必须来自至少两名无关关O型供者，要求一种细型供者，要求一种细胞为胞为R1R1，另一种为，另一种为R2R2表型，且表达下列抗表型，且表达下列抗原

12、原:M,N,S,s,Mur,Dia,k,Fya,Fyb,Jka,Jkb,Lea。并。并尽可能多的包含尽可能多的包含Duffy,Kidd血型系统中主要抗血型系统中主要抗原的纯合子以及低频率原的纯合子以及低频率抗原。抗原。红细胞血型抗体鉴定红细胞血型抗体鉴定第十七页，本课件共有23页要求要求:必须对筛选检测出的抗体进行鉴定，评估其临必须对筛选检测出的抗体进行鉴定，评估其临床意义。不进行抗体鉴定的实验室需将抗体筛选床意义。不进行抗体鉴定的实验室需将抗体筛选阳性标本送至具有资质的参比实验室进行最后鉴阳性标本送至具有资质的参比实验室进行最后鉴定或确证。定或确证。红细胞血型抗体鉴定红细胞血型抗体鉴定第十八

13、页，本课件共有23页交叉配血试验交叉配血试验原理原理:交叉配血试验指检查受血者与供血者的抗原抗体交叉配血试验指检查受血者与供血者的抗原抗体成分是否相容，以及是否含有不规则抗体等成分是否相容，以及是否含有不规则抗体等,以保证输以保证输血安全。血安全。第十九页，本课件共有23页方法方法:交叉配血分交叉配血分“主侧主侧”交叉试验，即患者血清与献血交叉试验，即患者血清与献血者红细胞的相容性试验；者红细胞的相容性试验；“次侧次侧”交叉试验即献血者交叉试验即献血者血清与患者红细胞的相容性试验。血清与患者红细胞的相容性试验。患者与献血者的配血血样，每次输血后，患者与献血者的配血血样，每次输血后，4保存保存3

14、7天。天。交叉配血试验交叉配血试验第二十页，本课件共有23页新生儿溶血病血型血清学检查新生儿溶血病血型血清学检查原理原理:新生儿溶血病新生儿溶血病(HDN)是由母婴血型不合引起是由母婴血型不合引起,胎儿和新生儿红细胞被来自母体的胎儿和新生儿红细胞被来自母体的 IgG抗体致敏抗体致敏,并在并在其自身网状内皮系统受到免疫性破坏。其自身网状内皮系统受到免疫性破坏。第二十一页，本课件共有23页方法方法:婴儿及其父母婴儿及其父母ABO/RH血型鉴定血型鉴定 婴儿及母亲血清中血型抗体鉴定婴儿及母亲血清中血型抗体鉴定 (盐水介质法、酶法、抗球蛋白法等盐水介质法、酶法、抗球蛋白法等)婴儿红细胞上婴儿红细胞上 血型抗体鉴定血型抗体鉴定 (抗球蛋白法、放散试验抗球蛋白法、放散试验)新生儿溶血病血型血清学检查新生儿溶血病血型血清学检查第二十二页，本课件共有23页12/11/2022感谢大家观看第二十三页，本课件共有23页