糖类脂肪蛋白质的鉴定精选课件.ppt

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1、关于糖类脂肪蛋白质的鉴定第一页，本课件共有19页（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定1.1.实验原理实验原理 当质量浓度为当质量浓度为0.1g/mL0.1g/mL的氢氧化钠溶液与的氢氧化钠溶液与质量浓度为质量浓度为0.05g/mL0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡蓝色的即生成淡蓝色的Cu(OH)Cu(OH)2 2悬浊液。悬浊液。Cu(OH)Cu(OH)2 2与葡与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红色的够生成砖红色的CuCu2 2O O沉淀。因此，利用该反应，沉淀。因此，利

2、用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。可证明样液中含可溶性还原糖。RRCHOCHO+2Cu(OH)+2Cu(OH)2 2RRCOOHCOOH+CuCu2 2O O+2H+2H2 2O O第二页，本课件共有19页2.2.实验材料实验材料 做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖的含做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖的含量、生物组织有无色素是影响实验结果及其观量、生物组织有无色素是影响实验结果及其观察的最重要因素。察的最重要因素。因此要选用可溶性因此要选用可溶性还原糖含量高还原糖含量高、白色或近于白色白色或近于白色的植物组织，其中以的植物组织，其中以苹果、苹果、梨梨最好，也可用白萝卜替代。最好，也可用白萝卜

3、替代。第三页，本课件共有19页3.3.试剂配制试剂配制 甲液（甲液（0.1g/mL0.1g/mL的氢氧化钠溶液）的氢氧化钠溶液）斐林试剂斐林试剂 乙液（乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）的硫酸铜溶液）甲液乙液等量混合，现用现配，甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后才切不可分开滴加，或者久置后才用。用。第四页，本课件共有19页4.4.实验步骤实验步骤（1 1）制备组织样液（教师制备）制备组织样液（教师制备）（2 2）鉴定样液）鉴定样液先在试管中加入2mL组织样液第五页，本课件共有19页再加入2mL刚配制的斐林试剂水浴煮沸2分钟注意观察整个注意观察整个实验过程中，实验过程中，溶

4、液颜色的变溶液颜色的变化！化！第六页，本课件共有19页还原糖检测实验的实验结果第七页，本课件共有19页（二）生物组织中脂肪的鉴定（二）生物组织中脂肪的鉴定1.1.实验原理实验原理 苏丹苏丹是可以对脂肪染色的试剂，因是可以对脂肪染色的试剂，因此，当含有大量油滴的植物细胞用苏丹此，当含有大量油滴的植物细胞用苏丹染色后，在显微镜下可以看到细胞内橘黄色染色后，在显微镜下可以看到细胞内橘黄色的颗粒。的颗粒。第八页，本课件共有19页2.2.实验材料实验材料 做脂肪的鉴定实验时，所用材料一要脂肪含量高，做脂肪的鉴定实验时，所用材料一要脂肪含量高，二要有一定大小才能做徒手切片，花生种子符合该二要有一定大小才能

5、做徒手切片，花生种子符合该实验的要求。实验的要求。将花生种子经过将花生种子经过3-43-4小时的浸泡使其变软，小时的浸泡使其变软，有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否则切片时易碎裂，切不成薄片。则切片时易碎裂，切不成薄片。3.3.试剂配制试剂配制 苏丹苏丹溶液：将溶液：将0.1g0.1g苏丹苏丹干粉溶于干粉溶于100mL100mL体积分数为体积分数为95%95%的酒精溶液中，待全部溶解后即的酒精溶液中，待全部溶解后即成。成。第九页，本课件共有19页4.4.实验步骤实验步骤（1 1）切片制作）切片制作去掉花生种皮去掉花生种皮用左手的三个手指夹住花生的一

6、片用左手的三个手指夹住花生的一片子叶，使花生子叶高于手指之上（子叶，使花生子叶高于手指之上（为什为什么？么？）。右手持刀片，将子叶削去一层，）。右手持刀片，将子叶削去一层，形成平面。形成平面。刀口向内，与花生断面平行，以均匀的动作，自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意要整个臂注意要整个臂部用力，而不要腕部用力。部用力，而不要腕部用力。）如此连续动作，切下一些薄片。第十页，本课件共有19页（2 2）染色）染色 用毛笔将最用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央滴苏丹滴苏丹溶液溶液2-32-3滴于花生子叶薄片上滴于花生子叶薄片上2-1min2-1min后

7、，后，吸去染液吸去染液滴滴50%50%的酒精洗去浮色的酒精洗去浮色吸去多余酒精吸去多余酒精再再滴滴1-21-2滴蒸馏水滴蒸馏水盖上盖玻片，制成临时装片。盖上盖玻片，制成临时装片。（3 3）镜检鉴定）镜检鉴定 在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的最在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的最薄处（薄处（最好只有最好只有最好只有最好只有1-21-2层细胞层细胞），移至视野的中），移至视野的中心心换用高倍镜观察，调焦至最清晰。可发现换用高倍镜观察，调焦至最清晰。可发现细胞内细胞内橘黄色橘黄色的圆形小颗粒，这就是脂肪滴的圆形小颗粒，这就是脂肪滴（油滴）。（油滴）。若发现观察物外围也有许多橘黄若发现观察物外围也有

8、许多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来色小颗粒，则是脂肪跑了出来。第十一页，本课件共有19页脂肪检测实验的实验结果脂肪检测实验的实验结果第十二页，本课件共有19页若用物理方法如何鉴定脂肪的存在若用物理方法如何鉴定脂肪的存在?烘烤种子后烘烤种子后,把子叶放在白纸上用手指挤把子叶放在白纸上用手指挤压压,白纸上会出现透明的油迹白纸上会出现透明的油迹,说明子叶含说明子叶含有脂肪。有脂肪。第十三页，本课件共有19页（三）生物组织中蛋白质的鉴定（三）生物组织中蛋白质的鉴定1 1 实验原理实验原理 在碱性溶液（在碱性溶液（NaOHNaOH）中，双缩脲）中，双缩脲（H H2 2NOC-NH-CONHNOC-NH-

9、CONH2 2）能与）能与Cu Cu 2+2+作用，形成作用，形成紫色的络合物，这个反应叫做双缩脲反紫色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。缩脲试剂发生颜色反应。第十四页，本课件共有19页3.3.试剂配制试剂配制 A A液（液（0.1g/mL0.1g/mL的氢氧化钠溶液）的氢氧化钠溶液）双缩脲试剂双缩脲试剂 B B液（液（0.01g/mL0.01g/mL的硫酸铜溶液）的硫酸铜溶液）2.2.实验材料实验材料 做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋

10、白质含做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质含量较高的大豆量较高的大豆(可用豆浆替代）或鸡蛋清。可用豆浆替代）或鸡蛋清。第十五页，本课件共有19页4.4.实验步骤：实验步骤：（1 1）制备生物组织样液（教师制备）制备生物组织样液（教师制备）（2 2）鉴定）鉴定先加2mL组织样液再加2mL双缩脲试剂A液加3-4滴双缩脲试剂B液第十六页，本课件共有19页蛋白质检测实验的实验结果蛋白质检测实验的实验结果第十七页，本课件共有19页注意：在鉴定蛋白质时要分别滴加两种试注意：在鉴定蛋白质时要分别滴加两种试剂，并且硫酸铜只能加剂，并且硫酸铜只能加3434滴，不能过量如滴，不能过量如过量，过量，CuSOCuSO4 4在碱性溶液中生成大量蓝色在碱性溶液中生成大量蓝色CuCu（OHOH）2 2沉淀，遮盖了紫色。沉淀，遮盖了紫色。鉴定蛋清组织中存在蛋白质时，要充分稀释。鉴定蛋清组织中存在蛋白质时，要充分稀释。如如稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后，会粘固在试稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后，会粘固在试管内壁上，使反应不易彻底，并且试管中也不易冲管内壁上，使反应不易彻底，并且试管中也不易冲洗干净。洗干净。第十八页，本课件共有19页感谢大家观看第十九页，本课件共有19页