生物制药终极版.docx

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1、名词解释1.药剂:是研究药物制剂的基本理论、处方设计、制备工艺、质量控制和合理使用等内容的综合性应用技术科学。2.药物剂型：是适合于疾病的诊断、治疗或预防的需要而制备的不同给药形式。3.首过效应：是指药物被吸 收后未到达全身循环之前即被代谢的现象。可分为三种：肝首过效应。肠道首过效应。肺首过效应。4.透皮治疗系统：TTS 又称透皮治疗贮库制剂）是经皮肤给药发挥全身治疗作用的一类控释膜制剂。5.毒理学：它是研究外源性物质对生物机体的有害作用的一门科学。6.急性毒性实验： 机体一次或24h内多次接触外源化学物后在短期内（最长14天）所产生的毒性效应，包括一般行为和外观改变、大体形态变化以及死亡效应

2、。7.长期毒性实验：（重复给药毒性试验）是药物非临床安全性评价的核心内容，是药物从药学研究进入临床试验的重要环节。8.免疫原性：指抗原能刺激特定的免疫细胞，使免疫细胞活化、增殖、分化，最终产生免疫效应物质抗体和致敏淋巴细胞的特性。9.药物依赖性：是由药物与机体相互作用造成的一种精神状态，有时也包括身体状态，表现出一种强迫性地要连续或定期用该药的行为和其它反应，10.临床试验：指任何在人体（病人或健康志愿者）进行药品的系统性研究，以证实或揭示试验用药品的作用、不良反应及/或试验用药品的吸收、分布、代谢和排泄，目的是确定试验用药品的疗效与安全性。11.试验方案：叙述试验的背景、理论基础和目的，以及

3、试验设计、方法和组织，包括统计学考虑、试验执行和完成的条件。12.药品不良反应：在按规定剂量正常应用药品的过程中产生的有害而非所期望的、与药品应用有因果关系的反应。13.不良事件：病人或临床试验受试者接受一种药品后出现的不良医学事件，但并不一定与治疗有因果关系。14.严重不良事件：临床试验过程中发生的需住院治疗、延长住院时间、伤残、影响工作能力、危及生命或死亡、导致先天畸形等事件。15.盲法：对于受试者所实施的处理因素（如选用药物），研究者（包括资料分析者）或/和受试者并不知道。16.I期临床试验：系初步的临床药理学及人体安全性评价试验，为新药人体试验的起始期，又称为早期人体试验。17.II期

4、临床试验：为治疗作用初步评价阶段。其目的是初步评价药物对目标适应症患者的治疗作用和安全性，也包括为III期临床试验研究设计和给药剂量方案的确定提供依据。18.药典： 是一个国家记载药品标准、规格的法典，一般由国家卫生行政部门主持编纂、颁布实施，国际性药典则由公认的国际组织或有关国家协商编订。19.药品标准：是药品现代化生产和质量管理的重要组成部分，是药品生产、供应、使用和监督管理部门共同遵循的法定依据。20.空气净化：去除空气中的污染物质，使空气洁净的行为。21.局部空气净化：仅使室内工作区域特定局部空间的空气含悬浮粒子浓度达到规定的空气洁净度级别，这种方式称局部空气净化。多选：1.新药研究、

5、开发的四大技术平台 ：组合化学、高通量筛选、合理药物设计和新释药系统（DDS）2.专利的四个标准：1、新颖性2、创造性（非显而易见性）3、实用性 4、实践性3.制剂的个基本要求：安全、有效、质量可控 制剂的个要素：制剂技术、药用辅料、制剂设备4.药剂学界习惯把剂型划分为：传统剂型（第一 代）、常规剂型（第二代）、缓控释剂型（第三代）、靶向剂型（第四代）、时间脉冲释药剂型（第五代）。第三至第六代剂型是药物新剂型的主要内容，也可统称为控制给药系统。其中可分为速度性控释、方向性控释、时间性控释和随症调控式个体化给药系统。5.蛋白质的不稳定性：1、由共价键引起的不稳定性：（1）蛋白质的水解：酸、碱、酶

6、（2）蛋白质的氧化：甲硫基酸、半胱氨酸（3）外消旋作用：D-型，L-型（4）二硫键的断裂及其交换 2、由非共价键引起的不稳定性：聚集、沉淀、表面吸附、变性6.脂质体的特点：1、靶向性和淋巴定向性：肝、脾网状内皮系统的被动靶向性。2、缓释作用：缓慢释放，延缓肾排泄和代谢，从而延长作用时间。3、降低药物毒性：如两性霉素B脂质体可降低心脏毒性。4、提高稳定性：如胰岛素脂质体、疫苗等可提高主药的稳定性。7.可将现有的TTS归纳为四类: 膜控释型、骨架控释型、微小贮库溶解控释型、粘合剂中分散型。 TTS制剂基本由下列几部分组成：外层覆盖膜；药物贮库，其中药物以固态较多；控制释药速度的微孔膜；受压后即能粘

7、附于皮肤的粘附层，对药物通透性影响极小；包装用保护膜，患者用前撕去。8.用动物实验评价新药的要点： （一）动物选择是否得当，直接关系着实验的成功和质量高低 （二）动物分组是否随机随机分组是动物实验设计和临床观察的一个重要原则。 （三）观测指标是否客观 (四)对照组设立是否妥当 （五）报告资料是否完善9.实验动物的选择和要求：主要原则: 急性毒性反应与人近似；易于饲养、操作方便；繁殖力较强，数量较大；价格较低，易于获得实验动物的年龄和体重：同一次试验同一批实验动物体重变异范围不应超过平均体重的20%；大鼠：180-240g、小鼠：18-25g、家兔：2-2.5kg10.理想的动物应具有以下特点：

8、对受试物的生物转化与人体相近；对受试物敏感；已有大量历史对照数据。11.新药审批办法规定先进行下列试验：微生物回复突变试验Ames试验。哺乳动物培养细胞染色体畸变试验。体内微核试验（作用于生殖系统的药物进行显性致死试验等）12.临床研究的主要环节 :施加因素、受试对象、试验效应 临床试验设计基本原则: 对照、随机、盲法、重复13.随机化的方法:简单随机化、区组随机化、分层随机化14.GMP的机构人员原则：人员是建立并保持良好的质量体系，实施GMP的第一要素。1）、足够的具有实践经验的合格人员（具有相应资力、经过培训）2）、明确职务分工及自身职责（职务授权、订立书面岗位职责）3）、所有人员都应理

9、解GMP的原则（GMP教育、培训）15.洁净室设计原则：远离或隔断污染源；控制污染源扩散或定向扩散；正确利用室内外压差；进出风量平衡。进入洁净室（区）的人员不能化妆和佩带饰物，不应裸手操作，当不可避免时，手部应及时消毒。16.洁净工作服的质地应光滑，不产生静电，不脱落纤维和颗粒性物质。无菌工作服必须包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留脱落物。17.对贮罐的要求：采用不锈钢制作，内壁电抛光并作钝化处理；贮水罐上安装0.2m疏水性的通气过滤器（呼吸器），并可以加热消毒或有夹套；能经受至少121高温蒸汽的消毒；排水阀采用不锈钢隔膜阀；若充以氮气，须装0.2m的疏水性过滤器过滤。18.选择原核表达体系的

10、条件： 1、蛋白质无糖基化或糖基化不影响其生物活性2、结构相对简单，无复杂的高级结构3、含有较少的二硫键19.融合的目的： 转录和翻译起始从正常的大肠杆菌序列开始，故通常可以产生高水平的融合蛋白；融合蛋白往往比天然的外源蛋白更加稳定；有助于蛋白质的分离和纯化。20.融合蛋白的裂解：1、化学裂解法：特异识别特定的氨基酸残基或一组氨基酸残基。但化学裂解法裂解位点的特异性低，有时可能对目标蛋白产生不必要修饰。2、酶解法：反应条件温和，具有高度的特异性。常用的酶有Xa因子、凝血酶、肠激酶、凝乳酶、胶原酶等。但酶解法成本高 ，反应时间长，更重要的是蛋白酶本身不可避免地混入目标蛋白中，造成新的污染，提高纯

11、化的复杂性。21.酵母表达系统的局限性：1、糖基化的模式与天然糖蛋白存在差异 2、表达水平较低 常见宿主有：酿酒酵母、裂殖酵母、克鲁维酵母、巴氏毕赤酵母等。22.对纯化步骤的评价相关方法的建立a、目的蛋白含量测定酶活性测定、生物活性测定、放射免疫、酶联免疫、免疫电泳、荧光。b、总蛋白含量测定紫外吸收法、Lowry法、Bradford染料结合法（考马斯亮兰G-250）等。c、样品复杂度检测HPLC（离子交换、凝胶过滤、反相）、SDS-PAGE、等电聚焦、毛细管电泳（CE）23.目前常用的凝胶包括3个主要类型：1.Poly dextran （交联葡聚糖凝胶）；2.Polyacrylamide （聚

12、丙烯酰胺凝胶）3.Agarose（琼脂糖凝胶）24.保护剂的使用：甘露醇、山梨醇、蔗糖、葡萄糖、右旋糖酐可用作保护剂；能在蛋白质除去水化层后，作为水的替代物结合在蛋白质上 ，减少其变性。25.蛋白质纯度的检测：1、SDS-PAGE；2、毛细管电泳；3、高压液相层析（HPLC）；4、质谱（MS）26.蛋白质结构的检测：1、氨基酸组成分析；2、肽谱；3、末端分析；4、高级结构分析填空：1.1473年威尼斯城邦共和国颁布了世界上第一部专利法2.1985年4月1日，中华人民共和国第一部专利法颁布实施3.GMP的历史 20世纪最大的药物灾难“反应停”事件后引起公众的不安和对药品监督的关心厂房应有防止昆虫

13、和其它动物进入的有效设施。厂房直通外界的门、窗设有防止昆虫、动物进入的有效设施洁净室（区）的墙壁与地面的交界处应成弧形或采取其他措施，以减少灰尘积聚和便于清洁。4.洁净室（区）应根据生产要求提供足够的照明。主要工作室的照度应达到300勒克斯；对照度有特殊要求的生产部位应设置局部照明。厂房应有应急照明设施。5.洁净室（区）的温度和相对湿度应与药品生产工艺要求相适应。无特殊要求时，温度应控制在18-26，相对湿度应控制在45%-65%。6.洁净室（区）的水池、地漏不得对药品产生污染，100级洁净室（区）内不得设置地漏。7.与药品直接接触的干燥用空气、压缩空气和惰性气体应经净化处理，符合生产要求。8

14、.实验动物房应与其它区域严格分开，实验动物应符合国家有关规定。9.GMP的设备原则： 1）、精度适应生产要求（差错风险最低）。 2）、便于进行有效清洁和维护（避免污染）。 3）、不对产品产生污染。10.无菌药品生产中过滤器材不得吸附药液组份和释放异物，禁止使用含有石棉的过滤器材。11.与设备连接的主要固定管道应标明管内物料名称、流向。12.储罐的通气口应安装不脱落纤维的疏水性除菌滤器，储存应采用80以上保温、65以上保温循环或4以下保温循环。13.储罐和输送管道所用材料应无毒、耐腐蚀，管道的设计和安装应避死角、盲管，应规定储罐和管道清洗、灭菌周期。14.用于生产和检验的仪器、仪表、量具、衡器等

15、，其适用范围和精密度应符合生产和检验要求，应有明显的合格标志，应定期校验。15.生产设备应有明显的状态标志。16.生产、检验设备应有使用、维修、保养记录，并由专人管理17.药品生产环境空气洁净度要求： 1、最终灭菌药品：100-10万级2、非最终灭菌药品：10万级-30万级 3、生物制品生产环境空气洁净度要求:100-10万级4、洁净工作服：10万级以上区域的洁净工作服 应在洁净室（区）内洗涤、干燥、整理，必要时应按要求灭菌。 18.药品生产人员应有健康档案。直接接触药品的生产人员每年至少体检一次。传染病、皮肤病患者和体表有伤口者不得从事直接接触药品的生产。19.射用水可通过蒸馏法、反渗透法、

16、超过滤器法等获得注射用水用纯化水经蒸馏而得是世界公认的首选方法。20.表达蛋白的部位：1、分泌表达；2、外周质及膜上表达 ；3、胞内表达。 表达蛋白的形式：1、融合表达2、非融合表达21.CHO（中国仓鼠卵巢）是目前重组糖蛋白生产的首选体系22.哺乳动物细胞表达系统载体：1、病毒性载体系统；2、质粒性载体系统23.常用液相色谱纯化方法：1、凝胶过滤；2、离子交换色谱；、亲和色谱；、反相色谱24.凝胶最好采用真空或低温保存；长时间不用的凝胶可用干燥保存法25.等电点小于5.0的酸性蛋白质，推荐使用阴离子交换，对于等电点大于7.0的碱性蛋白质，推荐使用阳离子交换。26.离子交换树脂使用前，先以蒸馏

17、水除去其内之杂质 ，并以NaOH和HCl处理树脂，使其上的官能基完全露出。27.只有在160的温度下加热2到4个小时，或用强碱、强酸或强氧化剂加温煮沸30分钟才能破坏内毒素的生物活性。28.内毒素的检测常用家兔热原法和鲎试验法。中国药典收录的细菌内毒素检查法包括2种方法：凝胶法和光度法,使用鲎试剂来定性或定量检测内毒素。29.洁净室（区）的温度和相对湿度应与药品生产工艺要求相适应。无特殊要求时，温度应控制在18-26,相对湿度应控制在45%-65%简答：1.生物技术药物的特点：1、较高的分子量 2、对酶促灭活的敏感性 3、聚集的可能性2.口腔递送系统存在的困难（生物利用度很低）（1）由于胃酸的

18、存在而被灭活。（2）由于消化性蛋白酶的存在而被灭活。（3）分子较大及其亲水性，很难完整穿过肠黏膜。（4）口服吸收药物的首过效应。3.毒理学研究方法：（1）体内实验：以实验动物为模型，最终目的是通过外源物质对实验动物的毒性反应，向人(原型)外推，以期评估外源物质对人的危害及危险性。（2）体外实验：筛选和预测急性毒性和机制研究；（3）人体实验和流行病学调查：进一步深化和证实在动物实验中所得到的资料。 毒理学研究以动物实验为中心，动物实验的设计、实施、结果观察和评价是毒理学研究的基础。4.急性毒性实验（acute toxicity）：机体一次或24h内多次接触外源化学物后在短期内（最长14天）所产生

19、的毒性效应，包括一般行为和外观改变、大体形态变化以及死亡效应。急性毒性试验的目的： 1）求出致死剂量及其他急性毒性参数2） 观察中毒表现、毒作用强度和死亡情况，初步评价毒物的毒效应特征 3） 为其他毒理试验提供接触剂量和选择观察指标的依据4） 为毒理学机制研究提供线索5） 体重变化原因：影响食欲或消化系统的功能；影响食物的吸收和利用；影响水的摄取；肾功能急性损伤5.长期毒性试验（重复给药毒性试验）是药物非临床安全性评价的核心内容，是药物从药学研究进入临床试验的重要环节。 具体包括以下五个方面：预测受试物可能引起的临床不良反应，包括不良反应的性质、程度、剂量反应关系和时间反应关系、可逆性等；判断

20、受试物反复给药的毒性靶器官或靶组织；推测临床试验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围；提示临床试验中需重点监测的指标；为临床试验中的解毒或解救措施提供参考。通常以大鼠和Beagle犬或猴作为长期毒性试验的实验动物。长期毒性试验的目的：是通过重复给药的动物试验表征受试物的毒性作用，预测其可能对人体产生的不良反应，降低临床试验受试者和药品上市后使用人群的用药风险6.II期临床试验的目的：1、确定试验样品是否安全有效2、与对照组比较有多大治疗价值3、通过试验确定适应症4、找出最佳的治疗方案包括治疗剂量、给药途径与方法、每日给药次数等5、对本品有何不良反应及危险性做出评价并提供防治方法 7.SOP的作用

21、：1. 将企业积累下来的技术经验,记录在标准文件中,以免因技术人员的流动而使技术流失;2. 使操作人员经过短期培训,快速掌握较为先进合理的操作技术;3. 根据作业标准,易于追查不良品产生之原因;4. 树立良好的生产形象，取得客户信赖与满意。5. 是贯彻ISO精神核心(说，写，做一致)之具体体现，实现生产管理规范化、生产流程条理化、标准化、形象化、简单化。6.是企业最基本最有效的管理工具和技术数据。8.原核表达系统的优势：、遗传背景清楚 、表达效率高 、发酵成本低，过程简便原核表达系统的局限性：1、翻译后加工修饰体系不完善2、异源蛋白质容易在细胞内积聚 3、脂多糖及内毒素9.昆虫细胞表达系统的局

22、限性1、宿主细胞生长慢、 培养基昂贵。 2、含有免疫宿主蛋白、 杆状病毒感染会导致宿主死亡、因此每一轮蛋白合成均需重新感染。3、昆虫细胞内的糖基化方式与脊椎动物细胞内的糖基化方式有一定的差异，其糖蛋白的糖链结构多为简单的不分支结构。 10.转基因植物表达体系优势：1、培养费用低2、收获设备或方法费用不贵，并且成熟3、易于放大4、表达蛋白稳定，可保存较长时间5.没有人类病原体缺点：1、表达不稳定或水平较低。2、基因沉默现象。3、糖基化模式问题。4、植物生长存在季节性和地域性。11.样品稳定性试验： a、测定样品在pH 2-9的稳定性；b、测定样品在0-4 mol/L NaCl及0-2 mol/L 硫酸铵中的稳定性；c、测定样品在0-50%乙醇、甲醇中的稳定性；d、测定样品在4-40的稳定性；e、室温下静置过夜，测定对蛋白水解酶的稳定性12.样品预处理：a、去除样品中颗粒物（0.45-0.22微米膜过滤或者10000 g离心15分钟）b、去除样品中脂类（ 10000 g离心15分钟或有机溶剂抽提）c、去除样品中核酸（加入核酸酶消化或者使核酸沉淀）d、抑制样品中蛋白水解酶（加入蛋白酶抑制剂）