性病实验室诊断标准及应用课件.ppt

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1、性传播疾病实验室诊断标准及应用性传播疾病实验室诊断标准及应用常见性传播疾病的实验室诊断常见性传播疾病的实验室诊断“金标准金标准”淋病淋病 淋球菌培养淋球菌培养 梅毒梅毒 暗视野检查暗视野检查+TPPA(+TPPA(FTA-ABS,WBFTA-ABS,WB)沙眼衣原体沙眼衣原体 衣原体培养衣原体培养+核酸扩增技术核酸扩增技术 支原体感染支原体感染 支原体培养支原体培养 生殖器疱疹生殖器疱疹 病毒培养病毒培养+核酸扩增技术核酸扩增技术 尖锐湿疣尖锐湿疣 核酸杂交和核酸扩增技术核酸杂交和核酸扩增技术 HIV/HIV/艾滋病艾滋病 蛋白印迹试验蛋白印迹试验+HIV+HIV抗原检测抗原检测 滴虫性阴道炎

2、滴虫性阴道炎 湿片法湿片法+毛滴虫培养毛滴虫培养 细菌性阴道病细菌性阴道病 G G染色查线索细胞染色查线索细胞 软下疳软下疳 细菌培养细菌培养+核酸扩增技术核酸扩增技术 性病性淋巴肉芽肿性病性淋巴肉芽肿 衣原体培养衣原体培养+核酸扩增技术核酸扩增技术 一一、梅梅毒毒的的诊诊断断标标准准 1、暗视野检查/镀银染色法 2、非梅毒螺旋体抗原血清试验 3、梅毒螺旋体抗原血清试验（一）实验室诊断方法的临床意义暗视野显微镜法直接镜检图像（1000）1、暗视野检查临床意义当标本阳性时，可确诊梅毒。适宜于早期梅毒(一、二期)，特别是早期一期梅毒、早期先天梅毒。暗视野显微镜检查法被WHO确定为性病实验室的必备方

3、法当标本阴性时，不能排除梅毒诊断不适用于来至口腔的标本暗视野显微镜检查法是能够立即在获得性或先天性梅毒的早期进行直接诊断的唯一标准2、RPR类临床意义RPR等试验一般认为是梅毒初筛试验?阳性者，均需作确证试验。VDRL用于神经梅毒诊断。有些疾病可导致生物学假阳性。复发或再感染可阳转或滴度升高。为疗效观察、判愈方法。早期梅毒治疗后血清滴度应下降4倍认为治疗有效。3、TPPA（TPHA）临床意义1、为梅毒确证试验，其敏感性：一期梅毒76（6990）二期梅毒为100潜伏梅毒为97（97100）晚期梅毒为94其特异性：1002、治疗后可终生阳性，不能作为疗效指标。3、IgM抗体可作为梅毒早期诊断或胎传

4、梅毒诊断。4、可有1生物学假阳性存在，如，SLE。两类血清学方法临床意义的比较RPR类：RPR等试验可用于大标本量的筛查？RPR定量可排除生物学假阳性？RPR是疗效判定的指标RPR是疗后随访的指标RPR用于判定是否血清复发TPPA类：是金标准TPPA等试验是确诊指标在HIV感染者中，血清学试验可发生难于解释的现象，若怀疑梅毒感染应作HIV检查（二）实验室诊断方法临床应用1、适用对象2、方法学的灵敏度3、不同病期方法学选择4、血清学结果解释5、RPR滴度与治疗效果6、疗后血清学随访7、生物学假阳性8、胎传梅毒实验室诊断标准9、神经梅毒实验室诊标准1、适用对象皮肤、性病门诊输血前检查手术前检查入院

5、检查产前检查检验检疫2、方法学的灵敏度病原学检查：PCR镀银染色暗视野血清学方法：FTA-ABSTPPARPR抗体：IgMIgG3、不同病期方法学选择 一期一期 二期二期 三期三期暗视野、镀银染色、PCR、IgMFTA-ABS、TPPA、ELISA、CLIA、RT、WB、RPR、暗视野、镀银染色、PCR等FTA-ABS、TPPA、ELISA、CLIA、RT、WB、RPR、VDRL、病理等4、血清学结果解释请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。TPPA为什么做滴度？经常有人提问夫、妻、子结果不一致情况？5、RPR滴度与治疗效果1、治疗

6、成功：早期梅毒患者在治疗后6个月内症状消失，且RPR滴度有至少4倍的下降。晚期梅毒或隐性梅毒患者在治疗后1224个月内RPR滴度有至少4倍的下降。2、治疗失败：治疗后症状持续或重新出现；治疗后RPR滴度反而上升了4倍或以上；RPR滴度较高（1:32或以上）但在六个月内没有达到4倍的下降。抗梅毒治疗失败的病人应考虑合并HIV感染及神经梅毒的可能性。3、血清固定：经正规治疗后，梅毒患者RPR一般都会转为阴性，但有13%的病人即使经足量抗梅治疗，RPR滴度仍持续呈低滴度阳性，这种现象称为血清固定，其原因尚不明了。血清固定患者的滴度重又上升则提示再次感染梅毒。6、疗后血清学随访方法:RPR时间：第1年

7、，每3个月检查1次第2年，每6个月检查1次第3年，最后1个月检查7、生物学假阳性常见原因大家忘掉只有梅毒才能达到1:8？RPR在妊娠患者中，有28%的假阳性发生XX梅毒事件（华西都市报）2012年8月，李冬梅（化名）怀孕。2012年12月26日，初检胎检筛查疑患梅毒。2013年1月4日(另一家机构），夫妻再检均呈阴性。2013年5月14日，待产，第2天产检结果被告之有梅毒。2013年5月16日，剖腹产。2013年5月21日（另一家机构），李冬梅RPR（-）TPPA（+），双女与母一致。2013年9月，前往重庆，RPR（-）TPPA（+）。8、胎传梅毒实验室诊断标准1.暗视野检查阳性。2.非梅毒

8、螺旋体抗原血清试验持续阳性。3.非梅毒螺旋体抗原血清抗体滴度是母亲的4倍以上。4.患儿19SIgM阳性。5.随访18个月观察。9、神经梅毒的实验室诊断1.1.梅毒血清学试验（梅毒血清学试验（RPRRPR、TPPATPPA）阳性。）阳性。2.2.脑脊液异常（脑脊液异常（WBCWBC计数计数 10*1010*10/L/L 蛋白量蛋白量500mg/L500mg/L）3.3.脑脊液脑脊液VDRLVDRL试验阳性（试验阳性（可可FTA-ABSFTA-ABS阳性阳性）。）。6n梅毒血清学检测梅毒血清学检测-策略一策略一非梅毒螺旋体抗原血清试验（非梅毒螺旋体抗原血清试验（非梅毒螺旋体抗原血清试验（非梅毒螺旋

9、体抗原血清试验（RPRRPRRPRRPR)阳性阴性报告：RPR阴性梅毒螺旋梅毒螺旋体抗原血体抗原血清试验清试验（TPPA)TPPA)RPR定量试验报告：RPR阴性滴度TPPA阳性阳性阴性报告：RPR阳性TPPA阴性？前带、早期第2次收费？1：8习惯？孕产妇梅毒检测及服务流程孕产妇梅毒检测及服务流程接受初次产前保健的孕产妇采用RPR或TRUST等筛查采用TPPA等证实阳性阴性诊断梅毒感染阳性排除梅毒感染阴性继续常规产前保健2个疗程治疗，RPR定量检测和随放？方法、前带、早期？真阳？真能排除？真梅毒梅毒血清学检测梅毒血清学检测-策略二策略二梅毒螺旋体血清试验（梅毒螺旋体血清试验（ELISA)ELI

10、SA)阳性阴性报告：ELISAELISA阴性推荐推荐TPPATPPA复检复检RPR定性、定量试验报告：ELISAELISA阳性RPR阳性及滴度阳性阴性报告：ELISAELISA阳性,TPPA阴性,RPR阴性报告：ELISAELISA阳性RPR阴性阳性阴性报告：ELISAELISA阳性,TPPA阳性,RPR阴性？敏感性第2次收费？收费不？以谁为准我室推荐的梅毒血清学试验我室推荐的梅毒血清学试验-策略三策略三 梅毒螺旋体抗原血清试验（梅毒螺旋体抗原血清试验（TPPA等）等）TPPA-TPPA+阴性报告RPR-RPR+现症梅毒抗梅治疗疗后观察既往感染随访或抗梅治疗第2次收费？我室推荐的梅毒血清学试验

11、我室推荐的梅毒血清学试验-策略四策略四 梅毒螺旋体抗原血清试验（梅毒螺旋体抗原血清试验（TPPA等）等）RPR滴度滴度（1:32直到出现阴性）TPPA-RPR-阴性报告TPPA-RPR+生物学假阳性TPPA+RPR-既往感染或随访TPPA+RPR+现症病人抗梅治疗疗效随访面对当前梅毒血清学检测存在的问题，即将有策略五面对当前梅毒血清学检测存在的问题，即将有策略五梅毒孕产妇所生儿童随访与先天梅毒感染状态监测流程梅毒孕产妇所生儿童随访与先天梅毒感染状态监测流程梅毒产妇所生新生儿不能开展暗视野、IgM采静脉血、RPR定量能开展暗视野、IgM阴性诊断先天梅毒感染阳性滴度母亲4倍，无论有无症状滴度母亲4

12、倍，有症状滴度母亲4倍，无症状治疗、随访18月TPPA阳性预治疗每3个月RPR定量，观察症状阳性阴性RPR滴度不下降或上升，结合症状6月后RPR未阴，滴度低水平连续2次阴性每3个月TPPA18月TPPA+连续2次阴性排除先天梅毒感染阴性无此线？n欧盟梅毒指南（2008年版）初筛试验：选用EIA、TPPA/TPHA如果怀疑早期梅毒最好用TP特异性IgM检测，如果阴性，12周后重复检测RPR/VDRL不推荐作为初筛试验，但可作为有症状早期梅毒的快速检测方法，需要同时检测滴度。确证试验初筛阳性，应用另外一种TP特异性试验确证EIA用TPPA/TPHA确证TPPA/TPHA用EIA确证然后再做滴度如果

13、初筛和确证结果不一致，则做重组抗原免疫印迹试验初筛和确证试验阳性，而RPR/TRUST阴性，推荐做IgM检测。阳性结果需要对第二份血样进行重复检测以确证。判断梅毒活动性成功治疗后，滴度32罕见。IgM检测，可以说明疾病的活动性，但是晚期梅毒IgM可能为阴性。如果治疗前RPR/TRUST为阴性，IgM检测有助于判断病情。血清学试验选择筛选试验:1.EIA；2.TPPA;3.TPPA/TPHA加VDRL/RPR。疑似早期梅毒：EIA-IgM初筛阳性，另一实验证实TPPA,EIA,RPR/VDRLEIA+:confirmwithTPPAorTPHA。2个试验不一致:免疫印迹。VDRL/RPR滴度1:

14、16、IgM阳性为梅毒活动的标志之一。治疗当天滴度为判断疗效的最佳依据。梅毒早期VDRL/RPR滴度可能较低。二、淋病的实验室诊断标准淋病诊断标准实验室方法 1、显微镜检查 涂片、革兰染色 对男性病人有诊断价值（敏感性9095%，特异性98100%）对女性病人敏感性5070%2、培养 敏感性：80100%特异性：100%3、核酸检测：荧光PCR、NGCT核酸TMA双检、NGCTUu三检等 敏感性：100%，死菌活菌、尿液分泌物均可 特异性：100%有诊断意义的报告报告方式，要包含4个因素对男性单纯性NG感染，敏感性可达95对女性NG感染，敏感性只有50不能作为诊断指标不能作为判愈指标显微镜检查

15、临床意义淋菌培养临床意义是临床诊断的金标准，是WHO推荐的淋病筛查的唯一方法是判愈的指标可以对疑似（或非生殖器部位标本）NG的菌株作进一步的鉴定可进行NG耐药监测，PPNG、TRNG、QRNG科研三、生殖道沙眼衣原体感染的诊断标准沙眼衣原体诊断标准实验室检查方法1、培养法：McCoy细胞特异性高：100%敏感性低价昂、费时、费力设备2、抗原检测、直接免疫荧光试验（DFA）：用种特异的沙眼衣原体主要外膜蛋白单克隆抗体用荧光素标记染色。需荧光显微镜，检查者要有经验，区别非特异性荧光。、酶免疫吸附试验（ELISA）：敏感性7197，特异性9799%，可成批检测。、快速免疫层析法：明窗试验等。明窗试验

16、（clearviewchlamydia）临床意义此法诊断女性宫颈沙眼衣原体感染的敏感性为87，特异性为98.8简便、快速，医生和病人都容易接受不是金标准注意事项标本的量一定要够、拭子要大一点、转动一圈、停留时间要长一点男性若分泌物少，可用首段尿液沉淀注意Na离子或其它原因造成的假阳性3、核酸扩增试验（NAAT）聚合酶链反应与连接酶链反应(PCR，LCR)、荧光定量PCR、NGCT核酸TMA双检、NGCTUu三检等。优点：1、敏感性：9097%，特异性99100%2、可以用尿液作检查，非侵袭性方法 3、筛查，无症状病人 缺点：1、价格昂贵需要贵重仪器、设备 2、人员需要培训200份标本同时用3种

17、方法检测Ct结果 明窗试验 IDEIA PCE FQ-PCR 阳性 47 62 66 阴性 153 138 134 合计 200 200 200四、生殖器疱疹实验室诊断标准生殖器疱疹诊断标准实验室检查方法1、病毒抗原检测：单克隆抗体免疫荧光试验（IFA）或酶免疫吸附试验（ELISA）来检测抗原。2、培养：看特征性细胞病变，特异性100%，但敏感性不高。需设备条件、技术。3、核酸检测:荧光PCR、双检、三联检4、抗体检测：IgM其它方法介绍复合PCR请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。HSV快速检查方法HSV-IDEIA（酶免疫放大

18、）与金标准相比，其敏感性达93.6%,特异性达97.8可同时检测HSV-1和HSV-2型文献报道，HSV-1致GH的比例在上升DAKO专利技术可成批，可单人份做2小时出结果可目测，可上机M-PCR与IDEIA检测HSV比较 HSV-IDEIAHSV-IDEIAM-PCRM-PCRIDEIAIDEIA（）（）IDEIAIDEIA（）TotalTotal1665171166517101311310131131Total166136302Total166136302五、尖锐湿疣实验室诊断标准人类乳头瘤病毒诊断标准实验室检查方法过去行业标准中无实验室检测方法只有组织病理学检查要求典型病理表现：角化过度伴角化不全，棘层肥厚，钉突延长，特征性空泡化细胞（核大小不一、深染固缩、核周胞浆空泡化），真皮水肿，血管扩张和炎性细胞浸润。核酸检测：HPV6、11，HPV16、18.？有漏检人类乳头瘤病毒实验室检查六、其它STD行业标准软下疳细菌性阴道病滴虫病均无标准支原体感染LGV（生殖道沙眼衣原体感染一样）细菌性阴道病实验室检查毛滴虫实验室检查67Thank You!