《火棉胶切》PPT课件.ppt

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1、火棉胶切片（celloidin sections method)火棉胶（collodion)又称硝化纤维，由浓硝酸和浓硫酸作用于脱脂棉而成。特点：火棉胶易溶于乙醚和酒精混合液，易燃烧。制片过程不经过加温包埋，故减少了组织收缩和过度硬化。适用于大快或较坚硬的组织，常用于眼球、内耳、肌腱、脱钙骨、软骨成骨、膜内成骨和神经组织的许多特殊染色方法。缺点：制片时间长，切片厚，操作复杂。一、火棉胶的配制1.火棉胶有固体和液体两种2.固体火棉胶用无水酒精和等量乙醚混合液溶解，配制成5%、10%。液体火棉胶备用。3.2.摇动使其加速溶解4.3.密闭闭光保存，防止乙醚和酒精的挥发。5.4.配制火棉胶要保持绝对无

2、水。6.5.配制火棉胶要严禁烟火、高温和猛烈打击，避免引起燃烧或爆炸二、组织固定固定方法同石蜡切片，但是不易用含有苦味酸的固定液。三、脱水脱水时间要长一些，彻底除去组织中的水分。50%酒精24-36小时70%酒精24-36小时80%酒精12-24小时95%（）酒精12-16小时95%（）酒精12-16小时100%（）酒精8-12小时100%（）酒精8-12小时四、浸透1：1酒精乙醚12-24小时5%火棉胶4-6天10%火棉胶6-8天15%火棉胶8-106天20%火棉胶10-15天五、包埋20%火棉胶包埋用少量三氯甲烷使其硬化。放置70%酒精中长期保存。六、切片切片厚度10-15cm七、染色-贴

3、片-脱水和封固第三章 骨切片的制作技术概述一、骨磨片1、空气封闭制片法染色结果（1）取材取经过固定的人长骨一段，用细钢锯锯成1mm左右的骨片，纵切和横切个一。（2）研磨 分为人工和机器，先粗磨至100um再细磨50um（3）脱水与脱脂洗涤 酒精脱水 乙醚30分钟脱脂 干燥 封固观察结果二、骨切片1、取材 取长骨骨干，厚度0.5-1cm 为宜.2.固定(1)10%或25%甲醛水溶液固定24-36小时.(2)muller重铬酸钾2.5g 硫酸钠1g 蒸馏水100ml(3)Zenker(4)Zenker甲醛固定液 Zenker液45ml 甲醛5ml,该液对骨组织固定较好.3.脱钙分类:酸类单纯脱钙法

4、,酸类混合脱钙法,离子交换树脂法,电离脱钙法,脱钙机法.(1)酸类单纯脱钙法甲酸:10%或25%甲酸水溶液,2天更换一次.5%或8%的硝酸水溶液.5%盐酸水溶液.(2)酸类混合脱钙法甲酸为主的混合脱钙剂 Gooding;Stewants液甲酸5-25ml、甲醛5ml、蒸馏水加到100ml。密质骨5-10天完成脱钙。盐酸为主的混合脱钙剂（Von Ebners液）盐酸5ml、氯化钠175g、蒸馏水100ml，用时每200ml液内每日添加浓盐酸1ml硝酸为主的混合脱钙剂（Schciddes液）硝酸20ml、甲醛10ml、蒸馏水70ml，脱钙快速、完全，如果加温可以在数小时完成脱钙。（3）离子交换树脂脱钙法将氨型磺化树脂铺于容器底部，厚为1.5cm，将标本放置树胶上面，加入脱钙剂。乙二胺四乙酸（EDTA)（4）电解脱钙法电解脱钙法是将两电极插入脱钙剂中，使脱钙剂中有电流通过，将液中钙离子吸引到阴极，从而发生电离作用，加速脱钙过程。该方法可以用于大量标本或大标本的制作。（5）脱钙机脱钙法大部分脱钙机原为加热恒温法、电离法、超大型声波法、真空减压法等。还要靠酸类脱钙剂，组织容易破坏，影响染色，优点是脱钙速度快。4脱钙后流水冲洗12-24小时5用5%硫酸钠浸泡8-12小时中和强酸。6流水再冲洗8-12小时。7可以用冰冻切片，也可以用石蜡或火棉胶切片。其他制片技术冰冻切片、涂片、铺片