药物定量分析精选课件.ppt

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1、关于药物定量分析第一页，本课件共有120页2取样的基本原则？取样的基本原则？均匀、合理。均匀、合理。药物鉴别的目的？药物鉴别的目的？判断药物及其制剂的真伪判断药物及其制剂的真伪。药物检查的目的？药物检查的目的？纯度纯度药物含量测定？药物含量测定？主要有效成分的含量。主要有效成分的含量。2第二页，本课件共有120页3n鉴别试验鉴别试验(identification test)：根据药物根据药物的分子结构、理化性质，采用化学、物的分子结构、理化性质，采用化学、物理化学或生物学方法来判断药物的真伪理化学或生物学方法来判断药物的真伪n药物的鉴别试验包括：药物的鉴别试验包括：性状性状和和鉴别鉴别n一般鉴

2、别实验：一般鉴别实验：是指依据某一类药物的是指依据某一类药物的共同的共同的化学结构化学结构或相同的或相同的理化特性理化特性，通，通过过化学反应化学反应来鉴别药物的来鉴别药物的真伪真伪。n专属鉴别实验专属鉴别实验：是证实某一种药物的依是证实某一种药物的依据。据。n根据一类药物中每一种药物化学结构的根据一类药物中每一种药物化学结构的差异及理化特性，选用某些特有的灵敏差异及理化特性，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪的定性反应，来鉴别药物的真伪。第三页，本课件共有120页4取样的基本原则？取样的基本原则？均匀、合理。均匀、合理。药物鉴别的目的？药物鉴别的目的？判断药物及其制剂的真伪判断药

3、物及其制剂的真伪。药物检查的目的？药物检查的目的？纯度纯度4第四页，本课件共有120页5药物检查需要解决以下四个问题？1、什么是杂质？、什么是杂质？2、药物中杂质从哪里来？、药物中杂质从哪里来？3、杂质如何分类？、杂质如何分类？4、杂质的检查方法有哪些？如何计算、杂质的检查方法有哪些？如何计算?5第五页，本课件共有120页6什么是杂质？n1.有毒副作用的物质 n2.本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质n3.本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质 药物纯度药物纯度药物的纯净程度药物的纯净程度6第六页，本课件共有120页7药物检查需要解决以下四个问题？1、

4、什么是杂质？、什么是杂质？2、药物中杂质从哪里来药物中杂质从哪里来？3、杂质如何分类？、杂质如何分类？4、杂质的检查方法有哪些？如何计算、杂质的检查方法有哪些？如何计算?7第七页，本课件共有120页8杂质的来源 生产中引入生产中引入原料原料中间体中间体副产物副产物降解产物降解产物 两大来源两大来源 贮藏过程中产生贮藏过程中产生水解水解氧化氧化分解分解异构化异构化8第八页，本课件共有120页9药物检查需要解决以下四个问题？1、什么是杂质？、什么是杂质？2、药物中杂质从哪里来？、药物中杂质从哪里来？3、杂质如何分类杂质如何分类？4、杂质的检查方法有哪些？如何计算、杂质的检查方法有哪些？如何计算?9

5、第九页，本课件共有120页10杂质的分类杂质的分类依杂质来源分类：依杂质来源分类：一般杂质：含义，品种一般杂质：含义，品种特殊杂质：含义特殊杂质：含义依杂质毒性分类：依杂质毒性分类：依杂质理化性质分类：依杂质理化性质分类：信号杂质信号杂质毒性杂质毒性杂质有机杂质有机杂质无机杂质无机杂质残留溶剂残留溶剂10第十页，本课件共有120页11药物检查需要解决以下四个问题？1、什么是杂质？、什么是杂质？2、药物中杂质从哪里来？、药物中杂质从哪里来？3、杂质如何分类？杂质如何分类？4、杂质的检查方法有哪些？如何计算杂质的检查方法有哪些？如何计算?11第十一页，本课件共有120页12杂质限量：指药物中所含杂

6、质的最大允许量，通杂质限量：指药物中所含杂质的最大允许量，通常用百分之几或百万分之几（常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示）来表示杂质量杂质量 杂质限量杂质限量 杂质量杂质量药品合格药品合格药品不合格药品不合格12第十二页，本课件共有120页1313药物的杂质检查法药物的杂质检查法1.1.限量检查法限量检查法 （Limit TestLimit Test）对照法对照法2.2.定量检查法定量检查法第十三页，本课件共有120页14杂质限量的计算杂质限量的计算14第十四页，本课件共有120页15练习题：练习题：1.1.临临床床所所用用药药物物的的纯纯度度与与化化学学品品及及试试剂剂纯纯度度的的主要

7、区别是主要区别是A.A.所含杂质的生理效应不同所含杂质的生理效应不同B.B.所含有效成分的量不同所含有效成分的量不同 C.C.所含杂质的绝对量不同所含杂质的绝对量不同D.D.化学性质及化学反应速度不同化学性质及化学反应速度不同E.E.所含有效成分的生理效应不同所含有效成分的生理效应不同15第十五页，本课件共有120页162 2在药物生在药物生产过程中引入杂质的途径为产过程中引入杂质的途径为 A.A.原料不纯或部分未反应完全的原料造成原料不纯或部分未反应完全的原料造成 B.B.合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成 C.C.需需加加入入的的各各种种试

8、试剂剂产产生生吸吸附附，共共沉沉淀淀生生成成混混晶晶等等造造成成 D.D.所用金属器皿及装置等引入杂质所用金属器皿及装置等引入杂质 E.E.由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质的杂质 讨论讨论16第十六页，本课件共有120页173.检查维生素C中的重金属时，若取样量为1.0g，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每1ml0.01mg的Pb）多少ml？A.0.2ml B.0.4ml C2mlD.1ml E.20ml17第十七页，本课件共有120页1818第十八页，本课件共有120页194.4.谷氨酸钠中重金属的检查谷氨酸钠中重金

9、属的检查取取本本品品1.0g1.0g，加加水水23ml23ml溶溶解解后后，加加醋醋酸酸盐盐缓缓冲冲液液（pH3.5pH3.5）2ml2ml，依依法法检检查查，与与标标准准铅铅溶溶液液(10(10g g Pb/ml)Pb/ml)所所呈呈颜颜色色相相比比较较，不不得得更更深深，重重金金属属限限量量为为百百万万分分之之十十，求求取取标标准准铅铅溶溶液液多多少少毫升？毫升？19第十九页，本课件共有120页20讨论讨论5.5.药物纯度药物纯度符符合规定系指（）。合规定系指（）。A.A.含量符合药典的规定含量符合药典的规定B.B.纯度符合优级纯试剂的规定纯度符合优级纯试剂的规定C.C.绝对不存在的杂质绝

10、对不存在的杂质D.D.对患者无不良反应对患者无不良反应E.E.杂质含量不超过限度规定杂质含量不超过限度规定20第二十页，本课件共有120页21阿司匹林的质量标准阿司匹林的质量标准n阿司匹林阿司匹林nAsipilinAsipilinnAspirinAspirinnC9H8O4 180.16C9H8O4 180.16第二十一页，本课件共有120页22n本品为本品为2-(2-(乙酰氧基乙酰氧基)苯甲酸。含苯甲酸。含C9H8O4C9H8O4不得少于不得少于99.599.5。n【性状性状】本品为白色结晶或结晶性粉本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭或微带醋酸臭，味微酸；遇湿末；无臭或微带醋酸臭，味微酸；遇湿

11、气即缓缓水解。气即缓缓水解。n本品在乙醇中易溶，在氯仿或乙醚中溶本品在乙醇中易溶，在氯仿或乙醚中溶解，在水或无水乙醚中微溶；在氢氧化解，在水或无水乙醚中微溶；在氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液中溶解，但同时分钠溶液或碳酸钠溶液中溶解，但同时分解。解。第二十二页，本课件共有120页23【鉴别鉴别】（1 1）取本品约）取本品约0.1g0.1g，加水，加水10ml10ml，煮沸，煮沸，放冷，加三氯化铁试液放冷，加三氯化铁试液1 1滴，即显紫堇滴，即显紫堇色。色。（2 2）取本品约）取本品约0.5g0.5g，加碳酸钠试液，加碳酸钠试液10ml10ml，煮沸，煮沸2 2分钟后，放冷，加过量的稀硫分钟后，放冷，加

12、过量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气。气。（3)3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱谱(光谱集光谱集209209图图)一致一致。第二十三页，本课件共有120页24n【检查检查】溶液的澄清度溶液的澄清度 取本品取本品0.50g0.50g，加，加温热至约温热至约4545的碳酸钠试液的碳酸钠试液10ml10ml溶解后，溶解后，溶液应澄清。溶液应澄清。第二十四页，本课件共有120页25n游离水杨酸游离水杨酸 取本品取本品0.10g0.10g，加乙醇，加乙醇lmllml溶解溶解后，加冷水适量使成后，加冷水适量使成50ml50m

13、l，立即加新制的稀，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液硫酸铁铵溶液 取盐酸溶液取盐酸溶液(9100)1ml(9100)1ml，加，加硫酸铁铵指示液硫酸铁铵指示液2ml2ml后，再加水适量使成后，再加水适量使成100m11ml100m11ml，摇匀；，摇匀；3030秒钟内如显色；与对秒钟内如显色；与对照液照液(精密称取水杨酸精密称取水杨酸0.1g0.1g，加水溶解后，加水溶解后，加冰醋酸加冰醋酸1ml1ml，摇匀，再加水使成，摇匀，再加水使成1000ml1000ml，摇匀；精密量取摇匀；精密量取lmllml，加乙醇，加乙醇lmllml、水、水48ml48ml与与上述新制的稀硫酸铁铵溶液上述新制的稀硫酸铁

14、铵溶液1ml1ml，摇匀，摇匀)比较比较，不得更深，不得更深(0.1(0.1)。第二十五页，本课件共有120页26n易炭化物易炭化物 取本品取本品0.5g0.5g，依法检查，依法检查(附录附录 K)K)，与对照液，与对照液(取比色用氯化钴液取比色用氯化钴液0.25ml0.25ml、比、比色用重铬酸钾液色用重铬酸钾液0.25ml0.25ml、比色用硫酸铜液、比色用硫酸铜液0.40ml0.40ml，加水使成，加水使成5m1)5m1)比较，不得更深。比较，不得更深。n炽灼残渣炽灼残渣 不得过不得过0.10.1(附录附录 N)N)。n重金属重金属 取本品取本品1.0g1.0g，加乙醇，加乙醇23ml2

15、3ml溶解后，溶解后，加醋酸盐缓冲液加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml(pH3.5)2ml，依法检查，依法检查(附录附录 H H第一法第一法)，含重金属不得过百万分之十。，含重金属不得过百万分之十。第二十六页，本课件共有120页27n【含量测定含量测定】取本品约取本品约0.4g0.4g，精密称定，加中，精密称定，加中性乙醇性乙醇(对酚酞指示液显中性对酚酞指示液显中性)20ml)20ml溶解后，加溶解后，加酚酞指示液酚酞指示液3 3滴，用氢氧化钠滴定液滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol(0.1molL)L)滴定。每滴定。每lmllml氢氧化钠滴定液氢氧化钠滴定液(0.1mol(0.1molL)L

16、)相相当于当于18.02mg18.02mg的的C9H8O4C9H8O4。n【类别类别】解热、消炎镇痛药解热、消炎镇痛药。n【贮藏贮藏】密封，在干燥处保存密封，在干燥处保存。n【制剂制剂】（1 1）阿司匹林片）阿司匹林片n （2 2）阿司匹林肠溶片）阿司匹林肠溶片n （3 3）阿司匹林栓）阿司匹林栓第二十七页，本课件共有120页28取样的基本原则？取样的基本原则？均匀、合理。均匀、合理。药物鉴别的目的？药物鉴别的目的？判断药物及其制剂的真伪判断药物及其制剂的真伪。药物检查的目的？药物检查的目的？纯度纯度药物含量测定？药物含量测定？主要有效成分的含量。主要有效成分的含量。28第二十八页，本课件共有

17、120页29药物的含量测定药物的含量测定第二十九页，本课件共有120页30基本内容基本内容一、概述一、概述二、容量分析法二、容量分析法三、光谱分析法三、光谱分析法四、色谱分析法四、色谱分析法 练习与思考练习与思考第三十页，本课件共有120页31一、概 述 药品的含量测定药品的含量测定是指准确测定药品有效成分或指标性成分的含量。含量测定含量测定是评价药品质量、判断药物优劣和保证药品疗效的重 要手段。含量测定需在鉴别无误和杂质检查符合规定的基础上进行。除个别品种不收载含量测定外，原则上均按药品质量标准进行含量测定。应根据所测成分的物理化学性质选择相应的测定方法。第三十一页，本课件共有120页32测

18、定药物含量的方法(1)容量分析法：仪器设备简单、易于操作、不需要使用化学对照品，成本低、速度较快，其准确度和精密度都较高。(2)仪器分析法：当组分复杂、干扰成分较多难于用容量分析法测定含量时，选用专属性较高的仪器分析方法。第三十二页，本课件共有120页33二、容量分析法（滴定分析法）（一）概念及特点（一）概念及特点n将已知浓度的标准溶液由滴定管滴加到被将已知浓度的标准溶液由滴定管滴加到被测药物的溶液中，至与被测药物反应完全测药物的溶液中，至与被测药物反应完全（通过适当方法指示），然后根据标准溶液（通过适当方法指示），然后根据标准溶液的浓度和被消耗的体积，按的浓度和被消耗的体积，按化学计量关系化

19、学计量关系计计算出被测药物的含量算出被测药物的含量 第三十三页，本课件共有120页2022/12/934指示剂显示终指示剂显示终点到达点到达C滴定滴定B+B（标准物）（标准物）A（被测物）（被测物）A传统分析方法；传统分析方法；主要用于主成分含量较高的试样分析主要用于主成分含量较高的试样分析；特点：简单、准确、费用低。特点：简单、准确、费用低。第三十四页，本课件共有120页35几个基本术语几个基本术语n滴定液滴定液(标准溶液标准溶液)：已知准确浓度的试剂：已知准确浓度的试剂n化学计量点：被测物与标准物按化学计化学计量点：被测物与标准物按化学计量关系完全反应的点。量关系完全反应的点。n指示剂：用

20、以指示滴定终点的试剂指示剂：用以指示滴定终点的试剂 n滴定终点：指示剂颜色变化的点。滴定终点：指示剂颜色变化的点。n终点误差：由于滴定终点和化学计量点终点误差：由于滴定终点和化学计量点的差异所引起的相对误差的差异所引起的相对误差.第三十五页，本课件共有120页36按药典规定，精密标定的滴定液（如盐酸按药典规定，精密标定的滴定液（如盐酸及其及其浓度）正确表示为浓度）正确表示为nA.盐酸滴定液（盐酸滴定液（0.152mol/L）nB.盐酸滴定液（盐酸滴定液（0.1524mol/L）nC.盐酸滴定液（盐酸滴定液（0.152M/L）nD.0.1524M/L盐酸滴定液盐酸滴定液nE.0.152mol/L

21、盐酸滴定液盐酸滴定液 答案：答案：B第三十六页，本课件共有120页37例题：滴定分析中，一般利用指示剂的突变来判断例题：滴定分析中，一般利用指示剂的突变来判断化化学计量点的到达，在指示剂变色时停止滴定，这学计量点的到达，在指示剂变色时停止滴定，这一点一点为：为：nA.化学计量点化学计量点nB.滴定分析滴定分析nC.滴定等当点滴定等当点nD.滴定终点滴定终点nE.滴定误差滴定误差 答案：答案：D第三十七页，本课件共有120页38（二）容量分析法的分类按化学反应类型分类按化学反应类型分类n1.酸碱滴定法酸碱滴定法:测定物质酸碱度计算酸碱测定物质酸碱度计算酸碱的含量。的含量。n2.沉淀滴定法沉淀滴定

22、法:主要测定卤素及银的含量。主要测定卤素及银的含量。n3.配位滴定法（络合滴定法）配位滴定法（络合滴定法）:测定金属测定金属离子的含量。离子的含量。n4.氧化还原滴定法：测定氧化还原性物质氧化还原滴定法：测定氧化还原性物质的含量。的含量。n 非水滴定法非水滴定法第三十八页，本课件共有120页39（三）滴定分析的方式（三）滴定分析的方式1.1.直接滴定直接滴定:2.2.返滴定法：返滴定法：3.3.置换滴定法：置换滴定法：4.4.间接滴定法：间接滴定法：第三十九页，本课件共有120页402.2.返滴定法返滴定法：待待测测物物质质与与滴滴定定剂剂反反应应很很慢慢，或或待待测测物物是是固固体体时时，反

23、反应应不不能能立立刻刻完完成成。可可以以先先准准确确加加入入过过量量的的标标准准溶溶液液，使使之之与与待待测测物物质质反反应应完完全全后后，再再用用另另一一种种标标准准溶溶液液滴滴定剩余的标准溶液。定剩余的标准溶液。例：例：Al3+过量过量EDTA Zn2+或或Cu 2+标液返滴定。标液返滴定。例：例：CaCO3 过量过量HCl NaOH标液返滴定。标液返滴定。第四十页，本课件共有120页413.3.置换滴定法置换滴定法：没没有有定定量量关关系系或或有有副副反反应应时时，可可以以先先用用适适当当试试剂剂与与待待测测物物反反应应，使使其其定定量量地地置置换换为为另另一一种种物物质，再用适当的标准

24、溶液滴定这种物质。质，再用适当的标准溶液滴定这种物质。例：例：K2Cr2O7 滴定滴定NaS2O3K2Cr2O3 过量过量KI I2 NaS2O3 滴定。滴定。第四十一页，本课件共有120页424.4.间接滴定法间接滴定法：不不能能与与滴滴定定剂剂反反应应，可可以以通通过过另另外外的的化化学学反反应应以以滴定法间接完成。滴定法间接完成。例：例：Ca2+的测定。的测定。Ca2+CaC2O4 H2SO4溶解溶解 C2O42-用用KMnO4滴定滴定第四十二页，本课件共有120页43例：例：TVc/I2=8.806mg/mL即：中国药典规定，每即：中国药典规定，每1mL碘滴定液（碘滴定液（0.05 m

25、ol/L）相当于）相当于8.806 mg的维生素的维生素C。（四）容量分析法的计算问题（四）容量分析法的计算问题 1.1.滴定度滴定度（T T）：）：每每1 1mlml规定浓度的滴定液相当于被测物质规定浓度的滴定液相当于被测物质的质量的质量(mg)mg)第四十三页，本课件共有120页44 2.2.滴定度的计算滴定度的计算 aAaA（待测物）（待测物）+bB bB（滴定液）（滴定液）cC cC+dD dD a ba b T/MT/M 1c1cT=ca/bMc：滴定液浓度：滴定液浓度(mol/L)M：被测物分子量：被测物分子量第四十四页，本课件共有120页45例：用碘量法测定维生素例：用碘量法测定

26、维生素CM(CCM(C6 6H H8 8OO6 6)176.13176.13的含量时，碘滴定液的摩尔浓度为的含量时，碘滴定液的摩尔浓度为0.05mol/L0.05mol/L（以（以I I2 2为单元），化学反应式如为单元），化学反应式如下：下：滴定度滴定度(T T)=?)=?T T=8.806 8.806mg/mLmg/mL C C6 6H H8 8OO6 6I I2 2C C6 6H H6 6OO6 6+2HI+2HI第四十五页，本课件共有120页463.3.百分含量的计算百分含量的计算 WW：供试品取样量供试品取样量 设至终点时，消耗滴定液体积为设至终点时，消耗滴定液体积为V mlV ml

27、则药物理论质量为则药物理论质量为V VT T浓度校正因数浓度校正因数（1 1）直接滴定法（用滴定液直接滴定被测药物）直接滴定法（用滴定液直接滴定被测药物）第四十六页，本课件共有120页47例题：非那西丁含量测定：精密称取本品0.3630g加稀盐酸回流1小时后，放冷，用亚硝酸钠液（0.1010mol/L）滴定，用去20.00m1。每1ml亚硝酸钠液（0.1mol/L）相当于17.92mg的C10H13O2N。计算非那西丁的含量为？第四十七页，本课件共有120页48例：精密称取青霉素钾供试品0.4021g，按药典规定用剩余碱量法测定含量。先加入氢氧化钠液(0.1mol/L)25.00ml，回滴时消

28、耗0.1015mol/l的盐酸液14.20ml，空白试验消耗0.1015mol/l的盐酸液24.68ml。求供试品的含量，每1ml氢氧化钠液(0.1mol/L)相当于37.25mg的青霉素钾。第四十八页，本课件共有120页49（2 2）间接滴定法）间接滴定法1 1）生成物滴定法）生成物滴定法 药物药物 +A B 滴定滴定滴定剂滴定剂 2 2）剩余滴定法（回滴法）剩余滴定法（回滴法）药物药物 +A（定、过量）（定、过量）剩余的剩余的 A+B （回滴）（回滴）V 空白试验空白试验V0第四十九页，本课件共有120页WW司可巴比妥钠司可巴比妥钠=0.1022g=0.1022g，cBr2=0.05mol

29、/LcBr2=0.05mol/L，cNa2S2O3cNa2S2O30.1mol/L0.1mol/L；V1=15.73mlV1=15.73ml，V0=23.21mlV0=23.21ml；MMC12H17N2NaO3C12H17N2NaO3=260.27=260.27，FNa2S2O3FNa2S2O31.0381.038。司可巴比妥钠的含量测定司可巴比妥钠的含量测定1.1.计算滴定度；计算滴定度；2.2.计算百分含量。计算百分含量。第五十页，本课件共有120页51第五十一页，本课件共有120页52光谱分析法光谱分析法 紫外紫外可见分光光可见分光光度法度法 UVVis 原子吸收分光光原子吸收分光光度

30、法度法 AAS 荧光分析法荧光分析法 二、光谱分析法二、光谱分析法第五十二页，本课件共有120页53（一）紫外（一）紫外-可见分光光度法可见分光光度法 灵敏度高，可达灵敏度高，可达10-4g/ml 10-7g/ml 1.特点特点 准确度高，准确度高，RSD（%）为为2%5%5%仪器价格低廉，操作简单，易普及，应用广泛仪器价格低廉，操作简单，易普及，应用广泛 2.2.朗伯朗伯-比耳定律比耳定律 A=ECLA=ECL 吸收系数：摩尔吸收系数吸收系数：摩尔吸收系数 研究分子结构研究分子结构 百分吸收系数百分吸收系数 含量测定含量测定吸收光谱范围：紫外：吸收光谱范围：紫外：200200400nm400

31、nm 可见：可见：400400760nm760nm 第五十三页，本课件共有120页543.3.仪器的校正和检定仪器的校正和检定 吸收度准确性的检定：吸收度准确性的检定：重铬酸钾的硫酸溶液，规定波重铬酸钾的硫酸溶液，规定波 长处测定长处测定 ，应符合，应符合P P9191表表1 1中规定中规定 波长的校正：波长的校正：汞灯中的几根较强的谱线或用仪器自身汞灯中的几根较强的谱线或用仪器自身 所带的氘灯的特定谱线为参照进行校正所带的氘灯的特定谱线为参照进行校正杂散光的检查：杂散光的检查：一定浓度的碘化钠和亚硝酸钠溶液，一定浓度的碘化钠和亚硝酸钠溶液，规定波长处测定规定波长处测定透光率透光率，应符合应符

32、合P91表表2 中规定中规定第五十四页，本课件共有120页554.4.对溶剂的要求对溶剂的要求:含杂原子的有机溶剂通常具有很强的含杂原子的有机溶剂通常具有很强的末端吸收末端吸收它们的使用范围均不能小于截止使用波长它们的使用范围均不能小于截止使用波长 石英石英吸收池、吸收池、空气空气为空白为空白 (nm)(nm)溶剂溶剂+吸收池吸收池A 220 220240 240 0.40 0.40 241 241250 250 0.20 0.20 251 251300 300 0.10 0.10 300 300以上以上 0.050.05第五十五页，本课件共有120页565.5.测定方法测定方法确定波长确定波

33、长 要求供试品溶液的要求供试品溶液的A A应在应在0.30.30.70.7 狭缝调整狭缝调整 第五十六页，本课件共有120页57供试品溶液的吸光度供试品溶液的吸光度对照品溶液的吸光度对照品溶液的吸光度供试品溶液的浓度供试品溶液的浓度对照品溶液的浓度对照品溶液的浓度5.5.测定方法测定方法1 1）对照品比较法：）对照品比较法：条件：条件：A.A.待测物与对照品在相同条件下测定待测物与对照品在相同条件下测定B.B.待测物与对照品浓度相近待测物与对照品浓度相近第五十七页，本课件共有120页58制剂：制剂：原料药：原料药：稀释倍数取样量取样量平均片重平均片重片粉量片粉量第五十八页，本课件共有120页5

34、92 2）吸收系数法（绝对法）吸收系数法（绝对法）吸光度吸光度百分吸收系数百分吸收系数液层厚度，液层厚度，cmcm，如无特，如无特别注明，别注明，L L=1cm=1cm可在手册或文献中查到可在手册或文献中查到第五十九页，本课件共有120页60盐酸氯丙嗪（规格盐酸氯丙嗪（规格1ml:10mg1ml:10mg，E E1%1%1cm1cm915)915)的含量的含量测定：精密量取本品测定：精密量取本品5ml5ml，置，置200ml200ml量瓶中，用盐量瓶中，用盐酸溶液（酸溶液（9100091000）稀释至刻度，摇匀；精密量取）稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml2ml，置，置100ml100ml量瓶中

35、，用盐酸溶液（量瓶中，用盐酸溶液（9100091000）稀释至刻度，摇匀，在稀释至刻度，摇匀，在254nm254nm波长处测定吸光度为波长处测定吸光度为0.4690.469。计算其百分含量。计算其百分含量。第六十页，本课件共有120页613 3）计算分光光度法：）计算分光光度法：多种，具体按每种药物规定的方法进行多种，具体按每种药物规定的方法进行 如：如：V VA A的三点校正法的三点校正法4 4）比色法）比色法 加入显色剂后，按照对照品比较法测定。加入显色剂后，按照对照品比较法测定。影响显色因素很多，故需注意平行操作。影响显色因素很多，故需注意平行操作。空白溶剂：溶剂空白溶剂：溶剂+显色剂，

36、同法处理显色剂，同法处理第六十一页，本课件共有120页62三、色谱分析法三、色谱分析法 特点：高灵敏度、特点：高灵敏度、高效能、高速度、应用广泛高效能、高速度、应用广泛 按分离原理：吸附；分配；离子交换；排阻色谱按分离原理：吸附；分配；离子交换；排阻色谱分类分类 按分离方法：按分离方法：PCPC；TLCTLC；柱色谱；柱色谱；GCGC；HPLCHPLC 根据混合物中各组分的根据混合物中各组分的色谱行为差异色谱行为差异，先，先行分离后再在线或离线对各组分逐一进行分析的行分离后再在线或离线对各组分逐一进行分析的方法，方法，是分离分析混合物的最有力手段是分离分析混合物的最有力手段。第六十二页，本课件

37、共有120页63 1.1.对仪器一般要求对仪器一般要求 固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变 其他均可适当改变其他均可适当改变 色谱图色谱图2020分钟分钟内记录完毕内记录完毕 2.2.系统适用性试验系统适用性试验 色谱柱的色谱柱的理论板数理论板数：n n=5.54(=5.54(t tR R/WWh/2h/2)2 2 分离度分离度：R R=2=2（t tR2R2 t tR1R1)/()/(WW1 1+WW2 2););应大于应大于1.51.5 重复性重复性：对照液连续进样：对照液连续进样5 5次，峰面积次，峰面积RSDRSD2.02.0

38、拖尾因子拖尾因子：T T=WW0.05h0.05h/2/2 应在应在0.9 0.9 5 5 1.05 1.05 流出方向流出方向（一）（一）HPLCHPLC法法第六十三页，本课件共有120页64（1 1）内标法加校正因子测定供试品中主成分含量）内标法加校正因子测定供试品中主成分含量对照品对照品+内标物内标物对照溶液，进样，测定，计算校正因子对照溶液，进样，测定，计算校正因子 3.3.在含量测定中的应用在含量测定中的应用供供试试品品+内内标标供供试试品品溶溶液液，进进样样，测测定定供供试试品品和和内内标标物质的峰面积或峰高，计算含量物质的峰面积或峰高，计算含量第六十四页，本课件共有120页65

39、（2 2）外标法测定供试品主成分含量）外标法测定供试品主成分含量供试品供试品供试品溶液供试品溶液对照品对照品对照品溶液对照品溶液进样，测定，计算含量进样，测定，计算含量 缺点：不易准确控制缺点：不易准确控制进样量，宜用定量环进样量，宜用定量环进样进样第六十五页，本课件共有120页661.1.对对GCGC仪器一般要求仪器一般要求 载载 气：气：氮气氮气 色谱柱：色谱柱：填充柱或毛细管柱填充柱或毛细管柱 填充柱：内径填充柱：内径2 24mm4mm，长，长1 110m10m，内装吸附剂，内装吸附剂 高分子多孔小球或涂渍固定液的载体高分子多孔小球或涂渍固定液的载体 毛细管柱：内径毛细管柱：内径0.20

40、.20.5mm0.5mm，长，长1010100m100m，一，一 般为空心柱，内壁或载体经涂渍或交联般为空心柱，内壁或载体经涂渍或交联 固定液固定液检测器：检测器：氢火焰离子化检测器氢火焰离子化检测器色谱图：色谱图：3030分钟内记录完毕分钟内记录完毕 （二）（二）GCGC法法色谱适用性实验、色谱适用性实验、测定法：同测定法：同HPLCHPLC第六十六页，本课件共有120页67 第二节第二节 样品分析的前处理方法样品分析的前处理方法 第一节第一节 定量分析样品的前处理方法定量分析样品的前处理方法 一、概述一、概述 1.1.结构特征与分析方法之间的关系结构特征与分析方法之间的关系(2)(2)含金

41、属有机药物含金属有机药物 (1)(1)含卤素有机药物含卤素有机药物 R-X R-X（F F，Cl,Br,I Cl,Br,I）卤素与脂肪链相连卤素与脂肪链相连 R-X 结合较不牢固，不需有机破坏结合较不牢固，不需有机破坏含金属有机药物含金属有机药物 R-O-Me，有机酸或酚的金属盐，有机酸或酚的金属盐/配位化合物；配位化合物；结合不牢固，可直接测定结合不牢固，可直接测定 有机金属药物有机金属药物 R-Me，结合牢固，适当处理后测定结合牢固，适当处理后测定 卤素与芳环相连卤素与芳环相连 Ar-X 结合牢固，结合牢固，需需/不需有机破坏不需有机破坏泛影酸泛影酸三氯叔丁醇三氯叔丁醇富马酸亚铁富马酸亚铁

42、硬脂酸镁硬脂酸镁醋酸苯汞醋酸苯汞第六十七页，本课件共有120页682.2.药物分析中常用的分析方法药物分析中常用的分析方法经有机破坏的分析方法经有机破坏的分析方法不经有机破坏的分析方法不经有机破坏的分析方法第六十八页，本课件共有120页69二、不经有机破坏的分析方二、不经有机破坏的分析方法法 终点：终点：邻二氮菲邻二氮菲(+Fe3+)溶于热稀矿酸溶于热稀矿酸Fe2+铈量法铈量法Ce4+Fe3+指示剂指示剂:邻二氮菲邻二氮菲(+Fe2+)红色红色淡蓝色淡蓝色（一）直接测定法（一）直接测定法 例如：富马酸亚铁的含量测定例如：富马酸亚铁的含量测定第六十九页，本课件共有120页70（二）经水解后测定法

43、（二）经水解后测定法 CCl3-C(CH3)2-OH+4NaOH (CH3)2CO+3NaCl+HCOONa+2H2O NaCl +AgNO3 AgCl +NaNO3 AgNO3 +NH4SCN AgSCN +NH4NO3 Mg(C17H35COO)2 +H2SO4 MgSO4 +2C17H35COOH H2SO4 +2NaOH Na2SO4 +2H2O 1.1.碱水解后测定法碱水解后测定法适用于适用于X X与脂肪链相连的卤代烷烃与脂肪链相连的卤代烷烃例如：三氯叔丁醇的含量测定例如：三氯叔丁醇的含量测定 2.2.酸水解后测定法酸水解后测定法 例如：硬脂酸镁的含量测定例如：硬脂酸镁的含量测定 第

44、七十页，本课件共有120页71（三（三）经还原分解后测定法经还原分解后测定法 指示剂：曙红钠指示剂：曙红钠终点：黄终点：黄红红适用于适用于Ar-IAr-I的药物的药物 例如：泛影酸的含量测定例如：泛影酸的含量测定第七十一页，本课件共有120页72三、经有机破坏的分析方法三、经有机破坏的分析方法凯氏定氮法凯氏定氮法 金属原子、卤素等与金属原子、卤素等与C C结合牢固者，必须有机破坏结合牢固者，必须有机破坏药物分析中常用的有机破坏的方法有药物分析中常用的有机破坏的方法有 干法破坏干法破坏湿法破坏湿法破坏 (一一)湿法破坏湿法破坏H H2 2SOSO4 4-HNO-HNO3 3法法H H2 2SOS

45、O4 4-HClO-HClO4 4法法H H2 2SOSO4 4-硫酸盐法硫酸盐法H H2 2SOSO4 4-H-H2 2O O2 2,HNO,HNO3 3-KMnO-KMnO4 4法等法等第七十二页，本课件共有120页73（二）干法破坏（二）干法破坏 2.2.氧瓶燃烧法氧瓶燃烧法适用于含卤素、适用于含卤素、S S、P P等有机药物分析的前处理，也用等有机药物分析的前处理，也用于某些药物中于某些药物中SeSe及砷盐的检查及砷盐的检查1.1.高温炽灼法高温炽灼法 加加无水无水Na2CO3、硝酸镁、氢氧化钙、硝酸镁、氢氧化钙或或ZnO以助灰化以助灰化第七十三页，本课件共有120页74 1）仪器装置

46、仪器装置 500ml,1000ml,2000ml,磨口、硬质磨口、硬质 玻璃锥形瓶玻璃锥形瓶 2 2）称样）称样 固体样；液体样；固体样；液体样；软膏类样品软膏类样品要求要求3）燃烧分解操作法燃烧分解操作法 4）吸收液的选择吸收液的选择 用于用于X、S、Se等的鉴别、检查、等的鉴别、检查、含量测定时多数是含量测定时多数是H2O或或H2O-NaOH；少数为少数为H2O-NaOH-H2O2.第七十四页，本课件共有120页75应用示例：碘苯酯的测定应用示例：碘苯酯的测定返 回第七十五页，本课件共有120页76第三节第三节 药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证均需对分析方法进行验证均需对分

47、析方法进行验证验证内容验证内容：准确度、精密度、专属性、检测限、定量：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性限、线性、范围和耐用性目的：证明采用的方法适合于相应检测要求。目的：证明采用的方法适合于相应检测要求。起草药品质量标准起草药品质量标准生产工艺变更生产工艺变更制剂组分改变制剂组分改变原分析方法修订原分析方法修订第七十六页，本课件共有120页77一、准确度一、准确度是指用该方法是指用该方法测定结果与真实值接近的程度测定结果与真实值接近的程度，用用回收率回收率表示表示（一）含量测定方法的准确度（一）含量测定方法的准确度 1.1.原料药：可用已知纯度对照品或供试品进行测定；

48、原料药：可用已知纯度对照品或供试品进行测定；或与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较或与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较第七十七页，本课件共有120页782.2.制剂：考察制剂：考察其他组分和辅料对回收率的影响其他组分和辅料对回收率的影响用用含已知量被测物含已知量被测物的的制剂各组分混合物（包括制制剂各组分混合物（包括制剂辅料）剂辅料）进行测定，回收率计算同原料药进行测定，回收率计算同原料药向制剂中加入已知量的被测物进行测定向制剂中加入已知量的被测物进行测定与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较第七十八页，本课件共有120页79（二）具体做法：

49、测定高、中、低三个浓度，（二）具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3,n=3,共共9 9个个数据来评价回收率数据来评价回收率；用用UVUV和和HPLCHPLC法时，一法时，一般回收率可达般回收率可达9898.0%.0%102102.0%.0%；容量法可达；容量法可达99.7%99.7%100.3%100.3%第七十九页，本课件共有120页80回收率试验回收率试验精密称取盐酸小檗碱约精密称取盐酸小檗碱约40mg 40mg，按处方比例加入，按处方比例加入其它组分和辅料，其它组分和辅料，用适量沸腾的用适量沸腾的 0.05mol/L H0.05mol/L H2 2SOSO4 4 溶解。放冷溶解。放冷

50、置室温，定量转移至置室温，定量转移至250ml 250ml 量瓶中，并稀释至刻度。过滤，弃量瓶中，并稀释至刻度。过滤，弃去初滤液，取续滤液去初滤液，取续滤液 5.00ml 5.00ml 于于100ml 100ml 量瓶中并稀释至刻度，量瓶中并稀释至刻度，按所选定的方法计算回收率按所选定的方法计算回收率。测定结果见下表。测定结果见下表。三波长分光光度法测定连蒲双清片中盐酸小檗碱的含量三波长分光光度法测定连蒲双清片中盐酸小檗碱的含量 第八十页，本课件共有120页81回收率试验回收率试验取连蒲双清片粉适量（约相当于盐酸小檗碱取连蒲双清片粉适量（约相当于盐酸小檗碱40mg)40mg)，精密称取，精密加