微量分光光度计.ppt

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1、NanoDrop 2000超微量分光光度计内容简介一.NanoDrop 2000超微量分光光度计 (1)仪器描述及规格 (2)检测原理及优点二.软件 (1)使用前准备工作及软件操作界面介绍三.应用 NanoDrop 2000分光光度计可以检测0.5-2ul 的样本，而且检测是非常高的准确性和重复性。样本保留系统应用了表面张力来把样本保留在两根检测光纤中间，这使得仪器可以检测较高浓度的样本而不用稀释。应用这个技术，NanoDrop 2000分光光度计检测样本的最高浓度是标准比色皿的200 倍。样品臂检测基座一一.NanoDrop 2000超微量分光光度计超微量分光光度计(1)仪器描述仪器描述仪器

2、类型：分光光度计最小样品量：0.5ul波长：1mm（可以自动调整到0.05mm）光源：氙闪烁灯检测器类型：2048象素线型硅CCD阵列波长范围：190840nm波长准确性：1 nm光谱分辨率：1.8nm吸收光精确性：0.002吸光值（1mm光程）吸收光准确性：2（257nm波长下，0.76个吸光值）吸光值范围：0.02300（等同于10mm光程时）检测极限：2ng/ul dsDNA最大检测浓度：15,000ng/ul（dsDNA）检测时间：5秒仪器占地面积;14cm20cm重量：2kg样本基座材料：303不锈钢以及石英光纤工作电压;12V工作功率;1218W（最大30W）软件兼容性;Windo

3、ws XP 和Vista（32bit仪器规格仪器规格(2)检测原理检测原理 利用表面张力保持样本形态的专利技术进行检测。只需使用加样器将1ul的样品直接加在检测表面上，而无需其他容器或检测装置。使用两根光纤将样本拉开，形成固定光程的检测通路，自动进行检测。优点优点1.检测所需样微量，0.5-2ul，可以节省辛苦得到的样品2.检测范围宽，比传统的分光光度计的上限高200倍，吸光度0.02-300，对于多数样品而言，无需稀释3.无需检测容器，日常消耗低，直接将样品加在检测面上，检测完以后把检测表面擦干净即可，保证样品间无交叉污染，也不干扰后续检测4.全波长190-840nm，分辨率1nm，对于任何

4、一个样品的测量，仪器都自动给出全波长的扫描结果190-840nm5.使用方便快速，1个样品只需5秒6.无需预热，直接测量二二.软件软件(1)在使用仪器进行样品检测前，需要使用USB连接线把仪器和电脑相连，把12V的电源线接到仪器背面的插口上，并连接电源。任务栏工具栏功能选择使用NanoDrop 2000/2000c分光光度计可以方便的使用微量样品进行紫外可见分光检测。NanoDrop 2000可以应用于如下检测：12345678910111.核酸的浓度和质量2.筛选有效的荧光标记杂交探针3.功能同普通的紫外-可见分光光度计4.检测细胞悬液的光散射5.蛋白定量6.蛋白定量(主要检测还有还原剂或去

5、污剂的总蛋白含量)7.检测非纯蛋白的浓度8.蛋白的浓度和荧光染料的浓度9.蛋白A280检测10.编辑新程序11.蛋白定量(区别于5，测试浓度较低)例：核酸Sample ID-输出样品名称Type-DNA-50做dsDNA检测，RNA-40做RNA检测，ssDNA-33做单链DNAConc-结果结果A260显示10mm光程下的260nm处的吸光值A280显示10mm光程下的280nm处的吸光值。260/280260nm和280nm处的吸光值的比值（）核酸浓度检测1 在主菜单中选择核酸模式，如果显示波长校准窗口，放 下基座臂点击OK。2 选择检测的样品类型，默认的设定为DNA-50。3 选择浓度单

6、位，默认的为ng/ul。4 默认的校准波长为340nm，重新选择一个校准波长或者 去选择Baseline来不选择校准波长。5 选择Add to Report自动把检测结果添加到当前报告中 去，默认设置是把每个样品都添加到报告中。要把样 品数据保存到工作薄中，在检测前必须选上Add to report。6选择Overlay spectra可以在同一时间显示多个光谱。7使用合适的液体建立空白对照，空白对照液体是溶解目标分子的液体。空白对照液体的pH值和离子浓度应和检测样品一样。注意：1.每次检测的样品都必须是新加的。2.使用干净的无尘纸擦干净上下基座，这样仪器就可以进行下一个样品检测了。Oligo

7、 Calc 用来计算特定核酸序列的分子量，消光系数，浓度因子要使用Oligo Calc：1.使用如下方法来输入一个碱基序列：使用碱基序列显示框下的按键。键盘（仅仅能使用A，C，G，T，和U来输入碱基）复制和粘贴一个序列到显示框（仅仅能使用A，C，G，T，和U来输入碱基）清除碱基序列框中的序列，点击序列框右侧的Clear键，单个可以手动来删除。2.选择磷酸化程度，可以选择：DNA单磷酸化，RNA单磷酸化和三磷酸化。3.如果需要可以选择双链，互补的双链序列能够包括在计算中。4.在下拉框中，选择检测的核酸类型，默认的为DNA。5.如果要添加序列选择Modification并输入相关的分子量。thanks