尿液干化学检查资料课件.ppt
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1、尿液干化学及沉渣尿液干化学及沉渣镜检镜检原理、影响因素和临床意义原理、影响因素和临床意义一尿干化学概述1956年美国人发明了以葡萄糖氧化酶和过氧化物酶为基础检测葡萄糖的第一条“浸入即读”的干化学试纸。发展到今天已经成为一次可以测十几个项目的多联试纸带。检测手段也由目测发展到半自动、全自动。具有快速、简便、用量少的优点,但是同时也存在着影响因素多,检测不精确等缺点。一、尿液酸碱度一、尿液酸碱度PHPH原理原理:采用酸碱指示剂法。尿中采用酸碱指示剂法。尿中pHpH可使试纸测定区可使试纸测定区中的甲基红和溴麝香草酚蓝两种指示剂发生颜色中的甲基红和溴麝香草酚蓝两种指示剂发生颜色改变改变,可表达可表达p
2、H5pH5(黄色)(黄色)pH7pH7(绿色)(绿色)pH9pH9(蓝(蓝色)的变色范围。参考范围色)的变色范围。参考范围PH4.5-8.0PH4.5-8.0(随机尿)(随机尿)方法学评价方法学评价:尿标本必须新鲜尿标本必须新鲜,时间过长的尿液可时间过长的尿液可滋生细菌滋生细菌,如变形杆菌等如变形杆菌等,可分解尿素产生氨可分解尿素产生氨,使尿使尿液变碱液变碱;含过多碳酸氢盐时并放置时间过久也可导含过多碳酸氢盐时并放置时间过久也可导致挥发致挥发,使酸度增高。测定具有一定的局限性使酸度增高。测定具有一定的局限性:结结果间隔大果间隔大,每级间隔每级间隔0.50.5;测定范围小,从;测定范围小,从pH
3、pH5pH95pH9,不适宜精确测定尿的酸碱度。但因携带方便不适宜精确测定尿的酸碱度。但因携带方便,无需无需设备设备,检查方便且便于实现自动化检查方便且便于实现自动化,适合于过筛试适合于过筛试验。验。二、尿比重二、尿比重SGSG原理原理:采用采用多聚电解质离子解离法多聚电解质离子解离法。高分子电解质。高分子电解质甲甲基乙烯基醚和顺丁烯二酸的共聚体是弱酸性基乙烯基醚和顺丁烯二酸的共聚体是弱酸性(COOHCOOH基基)离离子交换体,而尿中含有以子交换体,而尿中含有以NaclNacl为主的电解质为主的电解质,在水中解离为在水中解离为NaNa+和和clcl-,可与离子交换体中的氢离子可与离子交换体中的
4、氢离子(H(H+)置换置换,在水溶液在水溶液中放出中放出H H+。随着尿液中不断增加的。随着尿液中不断增加的H H+浓度浓度,使得指示剂溴麝使得指示剂溴麝香草酚蓝的颜色发生改变。香草酚蓝的颜色发生改变。参考范围:参考范围:1.015-1.0251.015-1.025方法学评价方法学评价:其优点是不受高浓度的葡萄糖、尿素、放射其优点是不受高浓度的葡萄糖、尿素、放射造影剂的影响,该方法灵敏度略低造影剂的影响,该方法灵敏度略低,只能按只能按0.0050.005的梯度色的梯度色阶表达结果阶表达结果,精密度差精密度差,测试范围窄测试范围窄,并且受强酸强碱性尿并且受强酸强碱性尿和高蛋白质尿的影响和高蛋白质
5、尿的影响,不适宜小儿及肾脏浓缩稀释功能严不适宜小儿及肾脏浓缩稀释功能严重减低者使用。不能作为评价肾功能变化的指标。重减低者使用。不能作为评价肾功能变化的指标。三、尿蛋白三、尿蛋白PROPRO原理原理:采用采用PH PH 指示剂蛋白质误差的原理。在一定条件下指示剂蛋白质误差的原理。在一定条件下(3.23.2时时),),由于蛋白质离子对带相反电荷指示剂由于蛋白质离子对带相反电荷指示剂(溴酚蓝)离溴酚蓝)离子吸引而造成溶液中指示剂进一步电离子吸引而造成溶液中指示剂进一步电离,当超越缓冲范围时,当超越缓冲范围时,可使指示剂改变颜色。可使指示剂改变颜色。方法学评价方法学评价:对清蛋白的敏感性明显高于球蛋
6、白,不与血红对清蛋白的敏感性明显高于球蛋白,不与血红蛋白,本周蛋白和黏蛋白反应蛋白,本周蛋白和黏蛋白反应,因此阴性的结果并不能排除因此阴性的结果并不能排除这些蛋白质的存在。对清蛋白测定的敏感性约在这些蛋白质的存在。对清蛋白测定的敏感性约在0.150.30g/L0.150.30g/L。混浊尿不影响测定结果和判断混浊尿不影响测定结果和判断,但肉眼血尿、血红蛋白尿、但肉眼血尿、血红蛋白尿、黄疸尿等显著异常的尿色会影响到对结果的判别。该试验方黄疸尿等显著异常的尿色会影响到对结果的判别。该试验方法对标本的酸碱性非常敏感。强酸性法对标本的酸碱性非常敏感。强酸性(pH3)(pH9),(PH9),前者导致假阴
7、性后者导致假阳性。含高浓度青霉素,庆大霉前者导致假阴性后者导致假阳性。含高浓度青霉素,庆大霉素、磺胺、含碘造影剂导致假阴性。如服用奎宁和嘧啶等药素、磺胺、含碘造影剂导致假阴性。如服用奎宁和嘧啶等药物时物时,尿液可呈强碱性尿液可呈强碱性,超出了试剂带本身的缓冲能力超出了试剂带本身的缓冲能力,可造可造成干化学法假阳性。含非那吡啶、聚乙烯吡咯酮、有机碘造成干化学法假阳性。含非那吡啶、聚乙烯吡咯酮、有机碘造影剂的尿样、被某些清洁剂和消毒剂污染的尿标本会出现假影剂的尿样、被某些清洁剂和消毒剂污染的尿标本会出现假阳性。阳性。四、葡萄糖四、葡萄糖GLUGLU原理原理:采用葡萄糖采用葡萄糖-过氧化酶法。尿中葡
8、萄糖在试纸上的葡萄过氧化酶法。尿中葡萄糖在试纸上的葡萄糖氧化酶催化下糖氧化酶催化下,与与O O2 2生成葡萄糖酸内脂和过氧化氢生成葡萄糖酸内脂和过氧化氢,试纸上试纸上的过氧化物酶进一步将过氧化氢分解为水并放出新生态氧使的过氧化物酶进一步将过氧化氢分解为水并放出新生态氧使色素原氧化产生颜色的变化,颜色深浅与葡萄糖浓度成正比。色素原氧化产生颜色的变化,颜色深浅与葡萄糖浓度成正比。方法学评价方法学评价:葡萄糖氧化酶法具有特异性强葡萄糖氧化酶法具有特异性强,灵敏度高灵敏度高(1.672.78mmol/L)(1.672.78mmol/L)。适用于常规及过筛检查尿中的葡萄糖。而对乳适用于常规及过筛检查尿中
9、的葡萄糖。而对乳糖、半乳糖、果糖等其他还原糖不发生反应。高比重尿液可糖、半乳糖、果糖等其他还原糖不发生反应。高比重尿液可使尿葡萄糖反应性减低。低糖高维使尿葡萄糖反应性减低。低糖高维C C时,维时,维C C与试剂发生竞争与试剂发生竞争性抑制反应性抑制反应,造成假阴性造成假阴性,如果使用了大剂量维生素治疗如果使用了大剂量维生素治疗,5h,5h内最好不要做尿糖检查。尿酮体过高内最好不要做尿糖检查。尿酮体过高500ml/L,500ml/L,尿液搁置时尿液搁置时间过长,细菌分解也会引起假阴性。一些强氧化性物质(漂间过长,细菌分解也会引起假阴性。一些强氧化性物质(漂白粉、次亚氯酸等)或尿比重过低时,会导致
10、假阳性。白粉、次亚氯酸等)或尿比重过低时,会导致假阳性。五、尿酮体五、尿酮体KETKET原理原理:采用亚硝基铁氰化钠法。尿中的丙酮或乙酰采用亚硝基铁氰化钠法。尿中的丙酮或乙酰乙酸与试纸上的亚硝基铁氰化钠反应乙酸与试纸上的亚硝基铁氰化钠反应,产生浅紫色产生浅紫色到深紫色变化。到深紫色变化。方法学评价方法学评价:对乙酰乙酸的灵敏度为对乙酰乙酸的灵敏度为100ml/L,100ml/L,对丙对丙酮的灵敏度为酮的灵敏度为700ml/L,700ml/L,与与B-B-羟丁酸不反应。早期羟丁酸不反应。早期酮症排出的酮症排出的B B羟丁酸占酮体总量的羟丁酸占酮体总量的78%,78%,因而对早期因而对早期酮症检出
11、不敏感。由于丙酮和乙酰乙酸具有挥发酮症检出不敏感。由于丙酮和乙酰乙酸具有挥发性性,故标本应新鲜故标本应新鲜,最好在采集后最好在采集后3030内测定。肉眼内测定。肉眼血尿等有明显颜色变异的尿和含大量左旋多巴代血尿等有明显颜色变异的尿和含大量左旋多巴代谢物、肌酐、肌酸的标本可出现假阳性。谢物、肌酐、肌酸的标本可出现假阳性。六、胆红素六、胆红素BILBIL原理原理:以偶氮反应为基本原理。在强酸介质以偶氮反应为基本原理。在强酸介质中胆红素与重氮盐发生偶联反应中胆红素与重氮盐发生偶联反应,生成红色生成红色偶氮化合物。偶氮化合物。方法学评价方法学评价:过量的维过量的维c c和亚硝酸盐可抑制和亚硝酸盐可抑制
12、偶氮反应而呈假阴性偶氮反应而呈假阴性,而大量的氯丙嗪和高而大量的氯丙嗪和高浓度的盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物在酸性浓度的盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物在酸性条件下会呈假阳性反应。尿标本保存不当,条件下会呈假阳性反应。尿标本保存不当,尿胆红素遇光分解。尿胆红素遇光分解。七、尿胆原七、尿胆原UROURO原理原理:采用改良采用改良EhrlichEhrlich醛反应法。在强酸性条件醛反应法。在强酸性条件下下,尿胆原与试纸中二氯苯胺重氮盐产生偶联反应尿胆原与试纸中二氯苯胺重氮盐产生偶联反应,生成樱红色缩合物生成樱红色缩合物,试剂模块发生黄色到红色的改试剂模块发生黄色到红色的改变。变。方法学评价方法学评价:尿胆原排
13、出后很容易氧化为尿胆素尿胆原排出后很容易氧化为尿胆素,故应尽快测定。应用大量抗生素、维生素和尿中故应尽快测定。应用大量抗生素、维生素和尿中含有高浓度亚硝酸盐或甲醛时容易抑制试验含有高浓度亚硝酸盐或甲醛时容易抑制试验,出现出现假阴性结果。使用氯噻嗪类、非那吡啶类、对假阴性结果。使用氯噻嗪类、非那吡啶类、对-氨氨基硫酸和磺胺等药物时基硫酸和磺胺等药物时,可出现假阳性。可出现假阳性。八、亚硝酸盐八、亚硝酸盐NITNIT原理原理:采用亚硝酸盐还原法。尿中含有的亚硝酸盐在酸性采用亚硝酸盐还原法。尿中含有的亚硝酸盐在酸性环境中先与对氨基苯磺酸反应环境中先与对氨基苯磺酸反应,形成重氮盐形成重氮盐,再与再与-
14、萘胺萘胺结合而产生粉红色偶氮化合物。结合而产生粉红色偶氮化合物。方法学评价方法学评价:尿液必须新鲜尿液必须新鲜,无外界污染无外界污染,最好用晨尿或在最好用晨尿或在膀胱中潴留膀胱中潴留4h4h以上的尿液。出现阳性结果意味着尿液中细以上的尿液。出现阳性结果意味着尿液中细菌数量在菌数量在1010万/ml/ml以上。阴性结果并不表明尿液中无细菌以上。阴性结果并不表明尿液中无细菌,可能为非硝酸盐还原性细菌引起的尿道感染可能为非硝酸盐还原性细菌引起的尿道感染;也可能为尿也可能为尿液在膀胱中潴留不足液在膀胱中潴留不足4h4h或饮食中缺乏硝酸盐等情况。高比或饮食中缺乏硝酸盐等情况。高比密尿液或含有大量维密尿液
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