06第6章-碳水化合物-2013解析.ppt
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1、第六章第六章 碳水化合物的测定碳水化合物的测定Carbohydratescomprisemorethan75%ofthedrymatterofPlants.eg:corn,vegetable,fruit,andsoon.Monosaccharides&Oligasaccharidesisusuallyfoundinthevegetableandfruit.Polysaccharidescanmainlybefoundincorn,seed,root,stemplants.第一节第一节概述概述食品中碳水化合物存在的形式食品中碳水化合物存在的形式动物性食品:动物性食品:葡萄糖、糖元、肌糖元、葡萄糖
2、、糖元、肌糖元、肝糖元。肝糖元。测定意义:对动物屠宰有意义,影响测定意义:对动物屠宰有意义,影响pH植物性食品:植物性食品:多样化,淀粉、纤维素、多样化,淀粉、纤维素、果胶等。果胶等。测定意义:营养、加工、质量指标等测定意义:营养、加工、质量指标等食品中碳水化合物的作用 提供人类能量的绝大部分提供人类能量的绝大部分 提供适宜的质地、口感和甜味提供适宜的质地、口感和甜味(如麦芽糊精作增稠剂、稳定剂)(如麦芽糊精作增稠剂、稳定剂)有利于肠道蠕动,促进消化有利于肠道蠕动,促进消化(如纤维素被称为膳食纤维,低聚糖可促(如纤维素被称为膳食纤维,低聚糖可促小孩肠道双歧杆菌生长,促消化)小孩肠道双歧杆菌生长
3、,促消化)测定方法测定方法一、化学法一、化学法碱性铜盐法、碘量法、蒽酮比色法等碱性铜盐法、碘量法、蒽酮比色法等二、物理法二、物理法三、酶法三、酶法四、色谱法四、色谱法第一节第一节 可溶性糖类的测定可溶性糖类的测定一、一、样品的处理样品的处理1.1 糖类的提取糖类的提取1.1.1 脱脂脱脂:含脂多的样品用石油醚浸泡:含脂多的样品用石油醚浸泡2-3次,再用水或醇水提取;含脂少的直接次,再用水或醇水提取;含脂少的直接用水或醇水提取。用水或醇水提取。第一节第一节 可溶性糖类的测定可溶性糖类的测定1.1.2 水作提取剂水作提取剂温度:温度:40-50度,度,1-2小时,温度度,时间小时,温度度,时间就要
4、短。就要短。防止酶水解防止酶水解:测还原糖时防止蔗糖等的:测还原糖时防止蔗糖等的水解;测单糖、低聚糖时,防止淀粉、水解;测单糖、低聚糖时,防止淀粉、糊精的水解。糊精的水解。酸性样品加酸性样品加CaCO3,粉未研磨,水提,加,粉未研磨,水提,加 HgCl2防止酶解。防止酶解。第一节第一节 可溶性糖类的测定可溶性糖类的测定1.1.3 醇醇-水作提取剂水作提取剂防止酶解,用防止酶解,用70-75的醇水溶液;弃大的醇水溶液;弃大分子杂质。分子杂质。1.2 提取液的纯化:提取液的纯化:加沉淀剂加沉淀剂对沉淀试剂的要求:对沉淀试剂的要求:a 较完全地除去干扰较完全地除去干扰物质;物质;b 不影响糖分的测定
5、不影响糖分的测定常用沉淀剂:常用沉淀剂:中性醋酸铅、乙酸铅和亚中性醋酸铅、乙酸铅和亚铁氰化钾溶液、硫酸铜和氢氧化钠溶液铁氰化钾溶液、硫酸铜和氢氧化钠溶液第一节第一节 可溶性糖类的测定可溶性糖类的测定2 糖的转化:糖的转化:测还原糖,不必转化测还原糖,不必转化测可溶性糖:还原糖法,先水解转化测可溶性糖:还原糖法,先水解转化 缩合反应法,不必转化缩合反应法,不必转化二、还原糖的测定二、还原糖的测定1 斐林试剂直接滴定法斐林试剂直接滴定法原理:原理:a 斐林试剂混合后产生深蓝色的酒斐林试剂混合后产生深蓝色的酒石酸钾钠铜络合物;石酸钾钠铜络合物;p65 b 还原糖能把还原糖能把Cu2+还原为还原为Cu
6、+,产生,产生Cu2O沉定;沉定;p66 c 过量的还原糖把次甲基蓝还原,过量的还原糖把次甲基蓝还原,溶液变为无色,即为滴定终点。溶液变为无色,即为滴定终点。p66斐林试剂直接滴定法斐林试剂直接滴定法适用范围及特点适用范围及特点国家标准分析方法之一。国家标准分析方法之一。操作和计算比较简便、快速,滴定终点操作和计算比较简便、快速,滴定终点明显。明显。但,对深色样品难判定终点。但,对深色样品难判定终点。试剂:试剂:甲液:甲液:乙液:乙液:标准糖液:标准糖液:仪器:仪器:步骤:步骤:标定标定 预滴定预滴定 正式滴定正式滴定结果计算:结果计算:以某种还原糖含量表示以某种还原糖含量表示有效数字保留位数
7、与质量有关有效数字保留位数与质量有关注意点1.甲、乙液用时混合2.乙液中加亚铁氰化钾3.2min内加热至沸,沸腾下滴定。4.预滴定二、还原糖的测定二、还原糖的测定2 高锰酸钾滴定法高锰酸钾滴定法(Bertrand)原理:原理:a 还原糖与碱性铜盐反应,生成还原糖与碱性铜盐反应,生成Cu2Ob Cu2O+Fe2(SO4)3+H2SO4=2CuSO4+2FeSO4+H2OC 10FeSO4+2KMnO4+8H2SO4=5Fe2(SO4)3+K2SO4+2MnSO4+8H2O由反应中氧化亚铜量查经验检索表可得出相当的由反应中氧化亚铜量查经验检索表可得出相当的还原糖量。还原糖量。高锰酸钾滴定法高锰酸钾
8、滴定法适用范围及特点适用范围及特点国家标准分析方法之一。国家标准分析方法之一。不受色素的干扰,准确度和重现性好。不受色素的干扰,准确度和重现性好。但,操作费时,需使用特制的高锰酸钾但,操作费时,需使用特制的高锰酸钾法糖类检索表。法糖类检索表。二、还原糖的测定二、还原糖的测定3 其它方法其它方法3.1 萨氏萨氏(Somogyi,1933)法:微量法法:微量法3.2 碘量法碘量法(1918):测醛糖:测醛糖3.3 蓝蓝-爱农爱农(Lane-Eynon)法:国际上常用。法:国际上常用。3.4 3,5-二硝基水杨酸比色法二硝基水杨酸比色法(1922):快速:快速3.5 半胱氨酸半胱氨酸-咔唑法:测定果
9、糖。咔唑法:测定果糖。三、蔗糖的测定三、蔗糖的测定测定意义:测定意义:食品加工工艺控制,原料品质,产品食品加工工艺控制,原料品质,产品质量指标。质量指标。方法:方法:1 物理法:物理法:纯度高的蔗糖溶液,可测其物理常纯度高的蔗糖溶液,可测其物理常数。数。2 盐酸水解法:盐酸水解法:用还原糖法来测定样品中蔗糖用还原糖法来测定样品中蔗糖水解水解(为葡萄糖和果糖为葡萄糖和果糖)前后还原糖的含量,计前后还原糖的含量,计算差值即为水解产生的还原糖量,乘以换算系算差值即为水解产生的还原糖量,乘以换算系数得出蔗糖含量。数得出蔗糖含量。3.HPLC法法(GB第一法第一法):氨基柱、示差检测):氨基柱、示差检测
10、器器四、总糖的测定四、总糖的测定测定意义:测定意义:重要质量指标、食品生产中重要质量指标、食品生产中常规分析项目。常规分析项目。总糖总糖指还原性糖和在测定条件下能水解指还原性糖和在测定条件下能水解为还原性单糖的蔗糖的总量。为还原性单糖的蔗糖的总量。方法:方法:直接滴定法、蒽酮比色法直接滴定法、蒽酮比色法蒽酮比色法蒽酮比色法 原理:原理:糖类遇浓硫酸时,脱水生成糠糖类遇浓硫酸时,脱水生成糠醛衍生物(醛衍生物(羟甲基呋喃甲醛),糠醛衍生),糠醛衍生物与蒽酮缩合成蓝色的化合物(物与蒽酮缩合成蓝色的化合物(620nm),),在一定糖含量的范围内(在一定糖含量的范围内(0.15mg/ml),其),其呈色
11、强度与溶液中的糖含量成正比,可用呈色强度与溶液中的糖含量成正比,可用于比色定量。于比色定量。第三节第三节 淀粉的测定淀粉的测定-1,4-苷键苷键-1,4-苷键苷键-1,6苷键苷键淀粉的主要性质如下:淀粉的主要性质如下:水水溶溶性性:直直链链淀淀粉粉不不溶溶于于冷冷水水,可可溶溶于于热热水水;支支链链淀淀粉粉常常压压下下不不溶溶于于水水,只只有有在加热并加压时才能溶解于水。在加热并加压时才能溶解于水。醇醇溶溶性性:不不溶溶于于浓浓度度在在30以以上上的的乙乙醇醇溶液。溶液。水水解解性性:在在酸酸或或酶酶的的作作用用下下可可以以水水解解,最终产物是葡萄糖。最终产物是葡萄糖。旋光性旋光性:淀粉水溶液
12、具有右旋性,:淀粉水溶液具有右旋性,第三节第三节 淀粉的测定淀粉的测定 酶水解法(酶水解法(GB第一法)第一法)酸水解法(酸水解法(GB第二法)第二法)旋光法旋光法熟肉制品中淀粉的测定熟肉制品中淀粉的测定植物性样品中淀粉的测定植物性样品中淀粉的测定一、酶水解法一、酶水解法1原理原理 样样品品经经除除去去脂脂肪肪和和可可溶溶性性糖糖类类后后,在在淀淀粉粉酶酶的的作作用用下下,使使淀淀粉粉水水解解为为麦麦芽芽糖糖和和低低分分子子糊糊精精,再再用用盐盐酸酸进进一一步步水水解解为为葡葡萄萄糖糖,然然后后按按还还原原糖糖测测定定法法测测定定其其还还原糖含量,并折算成淀粉含量。原糖含量,并折算成淀粉含量。
13、2适用范围及特点适用范围及特点 因因为为淀淀粉粉酶酶有有严严格格的的选选择择性性,它它只只水水解解淀淀粉粉而而不不会会水水解解其其他他多多糖糖,水水解解后后通通过过过过滤滤可可除除去去其其他他多多糖糖。所所以以该该法法不不受受半半纤纤维维素素、多多缩缩戊戊糖糖、果果胶胶质质等等多多糖糖的的干干扰扰,适适合合于于这这类类多多糖糖含含量量高高的的样样品品,分析结果准确可靠,但操作复杂费时。分析结果准确可靠,但操作复杂费时。(4)测定测定 按按还还原原糖糖测测定定法法的的高高锰锰酸酸钾钾法法或或直直接接滴定法进行。滴定法进行。做试剂空白试验。做试剂空白试验。注意点注意点1.专一性好,不受其他多糖的影
14、响2.淀粉先糊化再酶解。3.酶解产物主要是麦芽糖、葡萄糖。麦芽糖、葡萄糖。二、酸水解法二、酸水解法 1原理原理 样样品品经经乙乙醚醚除除去去脂脂肪肪,乙乙醇醇除除去去可可溶溶性性糖糖类类后后,用用酸酸水水解解淀淀粉粉为为葡葡萄萄糖糖,按按还还原原糖糖测测定定方方法法测测定定还还原原糖糖含含量量,再再折折算为淀粉含量。算为淀粉含量。2适用范围及特点适用范围及特点 此法适用于淀粉含量较高,而半纤此法适用于淀粉含量较高,而半纤维素和多缩戊糖等其他多糖含量较少的维素和多缩戊糖等其他多糖含量较少的样品。对富含半纤维素、多缩戊糖及果样品。对富含半纤维素、多缩戊糖及果胶质的样品,因水解时它们也被水解为胶质的
15、样品,因水解时它们也被水解为木糖、阿拉伯糖等还原糖,使测定结果木糖、阿拉伯糖等还原糖,使测定结果偏高。偏高。该法操作简单、应用广泛,但选择性和准该法操作简单、应用广泛,但选择性和准确性不及酶法。确性不及酶法。3测定方法测定方法 样品处理样品处理水解水解测定测定水解条件:样品液中含盐酸水解条件:样品液中含盐酸5%时,沸水时,沸水浴中回流浴中回流2小时。小时。根据淀粉的水解反应,把葡萄糖折算为根据淀粉的水解反应,把葡萄糖折算为淀粉含量的换算系数为淀粉含量的换算系数为162/180=0.9三、旋光法三、旋光法 1原理原理 淀淀粉粉具具有有旋旋光光性性,在在一一定定条条件件下下旋旋光光度度的的大大小小
16、与与淀淀粉粉的的浓浓度度成成正正比比。用用氯氯化化钙钙溶溶液液提提取取淀淀粉粉,使使之之与与其其他他成成分分分分离离,用用氯氯化化锡锡沉沉淀淀提提取取液液中中的的蛋蛋白白质质后后,测测定旋光度,即可计算出淀粉含量。定旋光度,即可计算出淀粉含量。2适用范围及特点适用范围及特点 本本法法适适用用于于淀淀粉粉含含量量较较高高,而而可可溶溶性性糖糖类类含含量量很很少少的的谷谷类类样样品品,如如面面粉粉、米米粉等。操作简便、快速。粉等。操作简便、快速。四、熟肉制品中淀粉的测定四、熟肉制品中淀粉的测定 1.原理原理 把把样样品品与与氢氢氧氧化化钾钾酒酒精精溶溶液液共共热热,使使蛋蛋白白质质、脂脂肪肪溶溶解
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