叶绿素的提取和分离.ppt

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1、试剂试剂原理原理绿叶中的色素溶绿叶中的色素溶于有机溶剂于有机溶剂无水乙醇，而不溶于水无水乙醇，而不溶于水。各种色素在层析液中的溶解各种色素在层析液中的溶解度不同，度不同，溶解度高的随层析溶解度高的随层析液在滤纸条上扩散得快液在滤纸条上扩散得快，反，反之则慢。之则慢。无水乙醇无水乙醇层析液层析液色素提取色素提取色素分离色素分离（层析液：（层析液：20份石油醚份石油醚,2份丙酮和份丙酮和1份苯混合而成，份苯混合而成，93号汽油也可做层析液用号汽油也可做层析液用）一、实验原理：一、实验原理：二、实验步骤：二、实验步骤：三、实验结果：三、实验结果：色素种类色素种类吸收光吸收光吸收光谱吸收光谱叶绿素叶绿

2、素（含量（含量约占约占3/4）叶绿素叶绿素a（蓝绿色）（蓝绿色）叶绿素叶绿素b（黄绿色）（黄绿色）类胡萝类胡萝卜素卜素（含量（含量约占约占1/4）胡萝卜素胡萝卜素（橙黄色）（橙黄色）叶黄素叶黄素（黄色）（黄色）四、色素种类及吸收光谱：四、色素种类及吸收光谱：吸收吸收蓝紫蓝紫光和光和红红（橙）光（橙）光 吸收吸收蓝蓝紫光紫光五、叶绿体色素的分布和功能五、叶绿体色素的分布和功能1、分布：叶绿体的、分布：叶绿体的 上。上。2、功能：、功能：光能（四种色素）、光能（四种色素）、光能（只有光能（只有少量特殊状态的叶少量特殊状态的叶绿素绿素a）类囊体类囊体薄膜薄膜吸收、传递吸收、传递转化转化考点考点1 1

3、 绿叶中色素的提取和分离绿叶中色素的提取和分离题组一：考察实验选材、试剂的作用和实验操作：题组一：考察实验选材、试剂的作用和实验操作：(2013江苏单科江苏单科，5)关于叶关于叶绿绿体中色素的提取和分离体中色素的提取和分离实验实验的操作，的操作，正确的是正确的是 ()。A使用定性使用定性滤纸过滤滤纸过滤研磨液研磨液B将干燥将干燥处处理理过过的定性的定性滤纸滤纸条用于条用于层层析析C在划出一条在划出一条滤滤液液细线细线后后紧紧接着重复划接着重复划线线23次次D研磨叶片研磨叶片时时，用体，用体积积分数分数为为70%的乙醇溶解色素的乙醇溶解色素解析解析本题可排除错误选项。色素易被滤纸吸附，故用纱布过

4、滤，本题可排除错误选项。色素易被滤纸吸附，故用纱布过滤，A错误；每次重复画色素滤液细线时，需等干燥后再进行，错误；每次重复画色素滤液细线时，需等干燥后再进行，C错错误；由于叶绿体中的色素不溶于水，因此研磨叶片时需用无水乙误；由于叶绿体中的色素不溶于水，因此研磨叶片时需用无水乙醇或丙酮，醇或丙酮，D错误。错误。答案答案B易错警示！易错警示！1、实验中的注意事项及操作目的实验中的注意事项及操作目的过过程程注意事注意事项项操作目的操作目的提提取取色色素素(1)选选新新鲜绿鲜绿色的叶片色的叶片使使滤滤液中色素含量高液中色素含量高(2)研磨研磨时时加无水乙醇加无水乙醇溶解色素溶解色素(3)加少量加少量S

5、iO2研磨充分研磨充分(4)加少量加少量CaCO3保保护护色素，防止叶色素，防止叶绿绿素被破坏素被破坏(5)迅速、充分研磨迅速、充分研磨防止乙醇防止乙醇挥发挥发，充分溶解色素，充分溶解色素(6)盛放盛放滤滤液的液的试试管管口加棉塞管管口加棉塞防止乙醇防止乙醇挥发挥发和色素氧化和色素氧化分分离离色色素素(1)滤纸预滤纸预先干燥先干燥处处理理使使层层析液在析液在滤纸滤纸上快速上快速扩扩散散(2)滤滤液液细线细线要直、要直、细细、匀、匀使分离出的色素使分离出的色素带带平整不重叠平整不重叠(3)滤滤液液细线细线干燥干燥后再画两次后再画两次 使分离出的色素使分离出的色素带带清晰分明清晰分明(4)滤滤液液

6、细线细线不触及不触及层层析液析液防止色素直接溶解到防止色素直接溶解到层层析液中析液中题组二：考察实验结果分析及实验误差题组二：考察实验结果分析及实验误差种类种类颜色颜色含量含量叶绿素叶绿素b b胡萝卜素胡萝卜素叶黄素叶黄素叶绿素叶绿素a叶绿素叶绿素(占总量占总量3/4)3/4)类胡萝卜素类胡萝卜素(占总量占总量1/4)1/4)(蓝绿色蓝绿色)(黄绿色黄绿色)(橙黄色橙黄色)(黄色黄色)注意：注意：1.色素带的位置代表什么？宽度呢？色素带的位置代表什么？宽度呢？2.若分离得到的色素带不明显，可能的原因？若分离得到的色素带不明显，可能的原因？溶解度含量2、绿叶中色素提取分离异常现象分析绿叶中色素提

7、取分离异常现象分析:（1）收集到的滤液绿色过浅的原因分析收集到的滤液绿色过浅的原因分析:未加石英砂未加石英砂)(二氧化硅二氧化硅),研磨不充分研磨不充分.使用使用放置数天放置数天的菠菜叶的菠菜叶,滤液色素滤液色素(叶绿素太少叶绿素太少).一次加入大量的无水乙醇一次加入大量的无水乙醇,提取浓度太低提取浓度太低(正确做正确做法法:分次加入少量无水乙醇分次加入少量无水乙醇)。未加碳酸钙或者加入过少未加碳酸钙或者加入过少，叶绿素叶绿素被破坏。被破坏。（2）滤纸条色素带重叠）滤纸条色素带重叠滤液细线不直滤液细线不直滤液细线过粗滤液细线过粗（3）滤纸条无色素带：）滤纸条无色素带：忘记画滤液细线忘记画滤液细

8、线滤液细线接触到层析液，且时间较长，色素全部滤液细线接触到层析液，且时间较长，色素全部溶解到层析液中。溶解到层析液中。红红橙橙绿绿黄黄蓝蓝青青紫紫可见光可见光:390-760nm 不可见光不可见光:紫外线紫外线(5-370nm)和红外线红外线(750-1000000nm)光合作光合作用利用用利用可见光可见光叶绿素叶绿素a、b吸收吸收蓝紫光和蓝紫光和红（橙）光红（橙）光 类胡萝卜素吸收类胡萝卜素吸收蓝紫光蓝紫光题组二：考察实验结果分析及实验误差题组二：考察实验结果分析及实验误差(经典高考题经典高考题)某研究某研究组获组获得了水稻的叶黄素缺失突得了水稻的叶黄素缺失突变变体。将其叶体。将其叶片片进进

9、行了行了红红光照射光吸收光照射光吸收测测定和色素定和色素层层析条析条带带分析分析(从上至从上至下下)，与正常叶片相比，与正常叶片相比，实验结实验结果是果是()。A光吸收差异光吸收差异显显著，色素著，色素带带缺第缺第2条条B光吸收差异不光吸收差异不显显著，色素著，色素带带缺第缺第2条条C光吸收差异光吸收差异显显著，色素著，色素带带缺第缺第3条条D光吸收差异不光吸收差异不显显著，色素著，色素带带缺第缺第3条条 解析解析叶绿体中的叶绿素叶绿体中的叶绿素a和叶绿素和叶绿素b主要吸收蓝紫光和红光，主要吸收蓝紫光和红光，胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光，所以当水稻叶黄素缺失突胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光，

10、所以当水稻叶黄素缺失突变体进行红光照射时，光吸收差异不显著；对正常叶片叶绿体变体进行红光照射时，光吸收差异不显著；对正常叶片叶绿体中的色素提取后，层析的结果自上而下依次是胡萝卜素、叶黄中的色素提取后，层析的结果自上而下依次是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素素、叶绿素a和叶绿素和叶绿素b，故，故B正确。正确。答案答案BB(经典高考题经典高考题)图图中中代表新代表新鲜鲜菠菜叶的光合色素菠菜叶的光合色素纸层纸层析析结结果，果，则图则图所示所示结结果最有可能来自果最有可能来自 ()。A水培的洋葱叶水培的洋葱叶B生生长长的柳的柳树树幼叶幼叶C培养的衣藻培养的衣藻D秋冬的秋冬的银银杏落叶杏落叶解析解析新鲜菠菜叶中

11、的光合色素种类齐全、含量丰富、完整，据新鲜菠菜叶中的光合色素种类齐全、含量丰富、完整，据图图可知，滤纸上的四条色素带完整，从上到下依次为胡萝卜可知，滤纸上的四条色素带完整，从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素、叶绿素b。图。图滤纸上的色素带不完整，滤纸上的色素带不完整，只有胡萝卜素、叶黄素。秋冬的银杏落叶呈黄色只有胡萝卜素、叶黄素。秋冬的银杏落叶呈黄色(或橙黄色或橙黄色)，这，这是由于低温破坏了叶绿素所致，因此叶片中几乎不含叶绿素。是由于低温破坏了叶绿素所致，因此叶片中几乎不含叶绿素。其他选项中的材料中都含有四种色素。其他选项中的材料中都含有四种色素。答案答案DD

12、(2017(2017全国全国)植物光合作用的作用光谱是通过测量光合作用对植物光合作用的作用光谱是通过测量光合作用对不同波长光的反应（如不同波长光的反应（如O O2 2的释放）来绘制的。下列叙述错误的释放）来绘制的。下列叙述错误的是的是()()A A类胡萝卜素在红光区吸收的光能可用于光反应中类胡萝卜素在红光区吸收的光能可用于光反应中ATPATP的合成的合成B B叶绿素的吸收光谱可通过测量其对不同波长光的吸收值来绘叶绿素的吸收光谱可通过测量其对不同波长光的吸收值来绘制制C C光合作用的作用光谱也可用光合作用的作用光谱也可用COCO2 2的吸收速率随光波长的变化的吸收速率随光波长的变化来表示来表示D D叶片在叶片在640660 nm640660 nm波长光下释放波长光下释放O O2 2是由叶绿素参与光合作用是由叶绿素参与光合作用引起的引起的A