第2章 微生物学周德庆 原核生物.ppt
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1、第一节第一节 细菌细菌(4学时学时)第二节第二节 放线菌放线菌(0.5学时学时)第三节第三节 蓝细菌蓝细菌(0.5学时学时)第四节第四节 支原体、衣原体和立克次氏支原体、衣原体和立克次氏体体(1学时学时)本章内容安排本章内容安排 第一节第一节 细菌细菌 Bacteria工业:工业:生产各种氨基酸、有机酸、酶制剂、乙醇等;生产各种氨基酸、有机酸、酶制剂、乙醇等;农业:农业:生产杀虫菌剂、细菌肥料;沼气发酵、饲料青贮;生产杀虫菌剂、细菌肥料;沼气发酵、饲料青贮;医药:医药:生产菌苗、抗生素、类毒素、代血浆等;生产菌苗、抗生素、类毒素、代血浆等;环保:环保:污水处理、农药分解、秸秆利用等;污水处理、
2、农药分解、秸秆利用等;国防:国防:生物武器。生物武器。定义:定义:一类细胞一类细胞形态形态细而短细而短(0.5um0.5um0.50.55um5um)、)、结构结构简单、简单、细胞壁细胞壁坚韧、以坚韧、以二等分裂二等分裂方式方式繁殖繁殖和和水生性水生性较强的较强的原核原核微生物。微生物。生存环境:生存环境:温暖潮湿、富含有机物的地方。有特殊的臭味或酸温暖潮湿、富含有机物的地方。有特殊的臭味或酸败味,发粘、发滑。败味,发粘、发滑。应用:应用:危害:危害:人、动物、植物的传染病、食物和工农业产品腐烂变质。人、动物、植物的传染病、食物和工农业产品腐烂变质。一、细菌的形态构造及其功能一、细菌的形态构造
3、及其功能基本形态基本形态其它形状其它形状(一)形态(一)形态球形球形杆形杆形螺旋形螺旋形丝状丝状肾形肾形柄形等柄形等1 1球菌球菌Coocus Coocus(1 1)单球菌)单球菌 (2 2)双球菌)双球菌 (3 3)链球菌)链球菌(4 4)四联球菌)四联球菌 (5 5)八叠球菌)八叠球菌 (6 6)葡萄球菌)葡萄球菌2杆菌杆菌 Bacillus(bacilli)长杆菌长杆菌(1)长短不同)长短不同 短杆菌短杆菌 球杆菌等球杆菌等 棒状杆菌棒状杆菌(2)菌体某个部位是否膨大)菌体某个部位是否膨大 梭状杆菌梭状杆菌 无芽孢杆菌无芽孢杆菌(3)芽孢有无)芽孢有无 芽孢杆菌芽孢杆菌 丙酮丁醇梭菌丙酮
4、丁醇梭菌是细菌中种类最多的。是细菌中种类最多的。3.螺旋菌螺旋菌(spirilla)弧菌(弧菌(vibrio):螺旋不满一圈,菌体呈弧形或:螺旋不满一圈,菌体呈弧形或 逗号形逗号形.例:霍乱弧菌、逗号弧菌例:霍乱弧菌、逗号弧菌螺菌螺菌(spirillum):螺旋满:螺旋满26环,螺旋状。环,螺旋状。例:干酪螺菌例:干酪螺菌 根据其弯根据其弯曲情况曲情况幽门螺旋菌幽门螺旋菌左:显微数码摄像左:显微数码摄像右:结构示意图右:结构示意图 螺旋体螺旋体u是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的单细胞是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的单细胞型微生物。型微生物。u在生物学上的位置介于在生物学上的
5、位置介于细菌与原生动物细菌与原生动物之间。在分类学之间。在分类学上由于更接近于细菌而归属在细菌的范畴。上由于更接近于细菌而归属在细菌的范畴。分类:分类:5 5个属。个属。疏螺旋体属疏螺旋体属、密螺旋体属、密螺旋体属、钩端螺旋体属、脊螺旋体钩端螺旋体属、脊螺旋体属、螺旋体属属、螺旋体属。前三属中有引起人患回归前三属中有引起人患回归热、梅毒、钩端螺旋体病热、梅毒、钩端螺旋体病的致病菌,后二属不致病。的致病菌,后二属不致病。4.细菌特殊形态细菌特殊形态(二二)细菌的大小细菌的大小通常用通常用微米(微米(um)作为测量单位。作为测量单位。1.测量球菌:测量球菌:只测量其直径。一般为只测量其直径。一般为
6、0.52um。2.测量杆菌和螺旋菌:测量杆菌和螺旋菌:需测量其长度和宽度,用需测量其长度和宽度,用宽宽长长表示。表示。杆菌一般为杆菌一般为0.5l15um。测量螺旋菌长度时,一般只测量其测量螺旋菌长度时,一般只测量其弯曲形长度弯曲形长度。3.细菌大小的记录细菌大小的记录常是平均值或代表性数值。常是平均值或代表性数值。4.细菌细胞的重量细菌细胞的重量约为约为l10-9l10-10mg,即每,即每g细菌约含细菌约含1-10万亿个细菌菌体万亿个细菌菌体典型的大肠杆菌典型的大肠杆菌0.5um2um;重;重10-12克;克;1500个细胞的长径相连,相当于一个芝麻大个细胞的长径相连,相当于一个芝麻大12
7、0个相连,有一根人发的粗细;个相连,有一根人发的粗细;109个细胞才有个细胞才有1mg重;重;德国科学家德国科学家H.N.Schulz等等1999年在年在纳米比亚海岸的海底沉积物中发现的纳米比亚海岸的海底沉积物中发现的一种硫磺细菌(一种硫磺细菌(sulfur bacterium),),0.10.3 mm,其大小可达,其大小可达0.75 mm,Thiomargarita namibiensis,-“纳米比亚硫磺珍珠纳米比亚硫磺珍珠”最大的细菌最大的细菌纳米比亚嗜硫珠菌纳米比亚嗜硫珠菌最小的细菌最小的细菌纳米细菌(纳米细菌(nanobacteria)50 nm颤蓝菌属ProkaryotesEuka
8、ryotesViruses一般构造一般构造特殊构造特殊构造(三)构造(三)构造1.一般构造一般构造(1)细胞壁细胞壁A 定义定义 是位于细胞最外的一层厚实、坚韧富有弹性的是位于细胞最外的一层厚实、坚韧富有弹性的外被,主要由外被,主要由肽聚糖肽聚糖构成,赋予细菌以强度和构成,赋予细菌以强度和形状。形状。B 功能功能C 结构结构细胞壁功能细胞壁功能固定固定菌体外形和菌体外形和保护保护菌体的作用。菌体的作用。对有鞭毛的细菌来说,它又是鞭毛对有鞭毛的细菌来说,它又是鞭毛运动运动的必的必需条件。需条件。屏障屏障保护保护阻拦有害物质进入细胞;阻拦有害物质进入细胞;赋予细菌特定赋予细菌特定抗原性抗原性、致病
9、性致病性及对抗生素和及对抗生素和噬菌体的噬菌体的敏感性敏感性。3.染色染色细胞壁结构细胞壁结构由于细菌细胞微小又透明,一般先要经由于细菌细胞微小又透明,一般先要经过染色才能作显微观察过染色才能作显微观察.革兰氏染色革兰氏染色丹麦医生,丹麦医生,C.GramC.Gram于于18841884年年发明的一种鉴别不同类型细发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。菌的染色方法。染色步骤:染色步骤:结晶紫初染结晶紫初染-碘液媒染碘液媒染-乙醇脱色乙醇脱色-番红复染番红复染染色结果:染色结果:紫色:革兰氏阳性菌紫色:革兰氏阳性菌 红色:革兰氏阴性菌红色:革兰氏阴性菌细胞壁结构细胞壁结构G G+和和G G-的细
10、胞的细胞壁的构造不同壁的构造不同1)1)G G+细菌的细胞壁结构细菌的细胞壁结构(Staphylococcus Staphylococcus aureusaureus)细胞壁厚细胞壁厚(2080nm);化学成分简单:化学成分简单:肽聚糖:肽聚糖:90%磷壁酸磷壁酸:10%肽聚糖肽聚糖(Peptidoglycan)由大量由大量肽聚糖单体肽聚糖单体聚合而聚合而成;成;单体组成单体组成双糖单位双糖单位N-乙酰葡糖胺和乙酰葡糖胺和N-乙酰胞乙酰胞壁酸通过壁酸通过-1,4糖苷键糖苷键相连接;相连接;四肽尾四肽尾肽桥肽桥甘氨酸五肽甘氨酸五肽又称粘肽又称粘肽(mucopeptide)(mucopeptide
11、)、胞壁质、胞壁质(murein)(murein)或粘质复合物或粘质复合物(mucocomplex)(mucocomplex),是,是真细菌真细菌细胞壁中的细胞壁中的特有成分特有成分。原核生物所特有的已糖原核生物所特有的已糖肽聚糖单体肽聚糖单体由由四四个个氨氨基基酸酸分分子子按按L型型与与D型型交交替替方方式式连连接接而而成成双糖单位中的双糖单位中的-1,4-糖苷键糖苷键很容易被很容易被溶菌酶溶菌酶(lysozyme)所水解,从而引起所水解,从而引起细菌因肽聚糖细胞壁的细菌因肽聚糖细胞壁的“散架散架”而死亡。而死亡。单体间的连接单体间的连接目前所知的肽聚糖已超过目前所知的肽聚糖已超过100种,
12、在这一种,在这一“肽聚糖的多肽聚糖的多样性样性”中,主要的变化发生中,主要的变化发生在肽桥上。在肽桥上。COOHNHMM磷壁酸磷壁酸是结合在是结合在G G+细菌细胞壁上的一种细菌细胞壁上的一种酸性多糖酸性多糖;主要成分为甘油磷酸或主要成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸。核糖醇磷酸。可分为两类:可分为两类:壁磷壁酸和膜磷壁酸壁磷壁酸和膜磷壁酸因带负电荷,故可与环境中的因带负电荷,故可与环境中的MgMg等阳离子结等阳离子结合,保证膜结合酶维持高活性的需要;协助合,保证膜结合酶维持高活性的需要;协助肽聚糖加固细胞壁。肽聚糖加固细胞壁。保证革兰氏阳性致病菌与其宿主间的粘连保证革兰氏阳性致病菌与其宿主间的粘连赋
13、于革兰氏阳性细菌以特异的表面抗原赋于革兰氏阳性细菌以特异的表面抗原提供某些噬菌体以特异吸附受体提供某些噬菌体以特异吸附受体Cncnc-micro贮藏磷元素贮藏磷元素调节细胞内自溶素(调节细胞内自溶素(autolysinautolysin)的活力以调节细)的活力以调节细胞壁的增长胞壁的增长磷壁酸的功能磷壁酸的功能细胞壁薄;细胞壁薄;层次多、成分复杂;层次多、成分复杂;外膜外膜脂多糖脂多糖(LPS)外膜蛋白(外膜蛋白(20多种)多种)脂蛋白脂蛋白孔蛋白孔蛋白磷脂磷脂内膜内膜 肽聚糖肽聚糖 2)G-细菌的细胞壁结构细菌的细胞壁结构G-细菌的细胞壁结构细菌的细胞壁结构肽聚糖肽聚糖埋藏在外膜层之内,是仅
14、由埋藏在外膜层之内,是仅由12层肽聚糖网状分子层肽聚糖网状分子组成的薄层组成的薄层(23nm),含量约占细胞壁总重的,含量约占细胞壁总重的10%,故对机械强度的抵抗力较革兰氏阳性菌弱。,故对机械强度的抵抗力较革兰氏阳性菌弱。内消旋二氨基庚二酸内消旋二氨基庚二酸(m-DAP)(只在原核微生物细胞壁上发现)(只在原核微生物细胞壁上发现)没有特殊的肽桥,只形成较为疏没有特殊的肽桥,只形成较为疏稀、机械强度较差的肽聚糖网套稀、机械强度较差的肽聚糖网套G-细菌的细胞壁结构细菌的细胞壁结构G细菌细菌细胞壁所细胞壁所特有特有的结构,位于壁的最外层的结构,位于壁的最外层(810nm),为脂多糖、磷脂和若干种蛋
15、白。,为脂多糖、磷脂和若干种蛋白。外膜或外壁层外膜或外壁层脂多糖脂多糖脂多糖的主要功能脂多糖的主要功能LPS结构的多变,决定了革兰氏阴性细菌细胞表面抗原决定簇表面抗原决定簇的多样性的多样性;LPS负电荷较强,与磷壁酸相似与磷壁酸相似,也有吸附Mg2+、Ca2+等阳离子以提高其在细胞表面浓度的作用,对细胞壁结构起稳定稳定作用。类脂类脂A A是革兰氏阴性细菌致病物质内毒素的物质基础内毒素的物质基础;具有控制某些物质进出细胞的部分选择性屏障部分选择性屏障功能;许多噬菌体在细胞表面的吸附受体细胞表面的吸附受体;G+细菌和细菌和G-细菌细胞壁的比较细菌细胞壁的比较G+细菌与细菌与G-细菌细胞壁的比较细菌
16、细胞壁的比较项项 目目 革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌 1、革兰氏染色反应 能阻留结晶紫而染成紫色 可经脱色而复染成红色 2、肽聚糖层 厚,层次多 薄,一般单层 3、磷壁酸 多数含有 无 4、外膜 无 有 5、脂多糖(LPS)无 有 6、类脂和脂蛋白含量 低(仅抗酸性细菌含类脂)高 7、鞭毛结构 基体上着生两个环 基体上着生四个环 8、产毒素 以外毒素为主 以内毒素为主 9、对机械力的抗性 强 弱 10、细胞壁抗溶菌酶 弱 强 11、对青霉素和磺胺 敏感 不敏感 3)革兰氏染色的方法和机制)革兰氏染色的方法和机制染色机制染色机制 通过通过初染和媒染初染和媒染操作后,在细菌细
17、胞的膜或原生质体上染上了操作后,在细菌细胞的膜或原生质体上染上了不溶于水的不溶于水的结晶紫与碘的大分子复合物结晶紫与碘的大分子复合物。革兰氏阳性菌由于革兰氏阳性菌由于细胞壁厚细胞壁厚、肽聚糖含量较高肽聚糖含量较高和其和其分子交联度分子交联度较紧密较紧密,故在用,故在用乙醇洗脱乙醇洗脱时,肽聚糖网孔会因时,肽聚糖网孔会因脱水脱水而明显而明显收缩收缩;再加上它再加上它基本不含类脂基本不含类脂,故用乙醇处理,故用乙醇处理不能在壁上溶出缝隙不能在壁上溶出缝隙,因,因此结晶紫与碘复合物仍牢牢阻留在其细胞壁内,使其呈现蓝紫色。此结晶紫与碘复合物仍牢牢阻留在其细胞壁内,使其呈现蓝紫色。革兰氏阴性细菌因其革兰
18、氏阴性细菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交联松散壁薄、肽聚糖含量低和交联松散,故遇,故遇乙醇后,乙醇后,肽聚糖网孔不易收缩肽聚糖网孔不易收缩;加上它的;加上它的类脂含量高类脂含量高,所以当乙,所以当乙醇把类脂溶解后,在细胞壁上就醇把类脂溶解后,在细胞壁上就会出现较大的缝隙会出现较大的缝隙,这样,结晶,这样,结晶紫与碘的复合物就极易被溶出细胞壁,因此通过乙醇脱色后,细紫与碘的复合物就极易被溶出细胞壁,因此通过乙醇脱色后,细胞又呈无色。这时,再经番红等红色染料进行胞又呈无色。这时,再经番红等红色染料进行复染复染,就使革兰氏,就使革兰氏阴性获得了红色。阴性获得了红色。在古生菌中除Thermoplasma(
19、热原体属)无细胞壁外,其他都具有与真细菌功能相似的细胞壁,然而细胞壁的成分与真细菌差别甚大,已知的一些古生菌细胞壁中没有真正的肽聚糖,而是由多糖(假肽聚糖)、糖蛋白或蛋白质构成。由多糖组成由多糖组成 AG AG结构与细菌肽聚糖不同之处:结构与细菌肽聚糖不同之处:双糖骨架是由N-乙酰葡糖胺和N-乙酰塔罗糖胺糖醛酸乙酰塔罗糖胺糖醛酸以-1-1,3-3-糖苷键糖苷键(不被溶菌酶不被溶菌酶水解水解)交联而成;肽尾肽尾是由L-Glu、L-Ala和L-Lys 3个L型氨基酸组成;肽桥肽桥由1个L-Glu 组成。A)L型细菌(型细菌(L-form of bacteria)细菌在某些环境条件下(实验室或宿主体
20、内)通过细菌在某些环境条件下(实验室或宿主体内)通过自发突变自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。因因英国李斯德英国李斯德(Lister)预防研究所首先发现而得名)预防研究所首先发现而得名(1935年,念珠状链杆菌年,念珠状链杆菌 Streptobacillus moniliformis)大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链球菌、分枝杆菌和霍乱弧菌等大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链球菌、分枝杆菌和霍乱弧菌等20多种细菌中均有发现,被认为可能与针对细胞壁的抗菌治疗有关。多种细菌中均有发现,被认为可能与针对细胞壁的抗菌治疗有关。特点:特点:没有完整而坚韧的
21、细胞壁,细胞呈多形态;没有完整而坚韧的细胞壁,细胞呈多形态;有些能通过细菌滤器,故又称有些能通过细菌滤器,故又称“滤过型细菌滤过型细菌”;对渗透压敏感,在固体培养基上形成对渗透压敏感,在固体培养基上形成“油煎蛋油煎蛋”似似的小菌落(直径在的小菌落(直径在0.1mm左右);左右);B)原生质体(原生质体(protoplast)在在人为人为条件下,用溶菌酶处理或在含青霉素的培养基中培养而条件下,用溶菌酶处理或在含青霉素的培养基中培养而抑制新生细胞壁合成而形成的仅由一层细胞膜包裹的,圆球形、抑制新生细胞壁合成而形成的仅由一层细胞膜包裹的,圆球形、对渗透压变化敏感的细胞,一般由对渗透压变化敏感的细胞,
22、一般由革兰氏阳性细菌革兰氏阳性细菌形成。形成。特点特点对环境条件变化对环境条件变化敏感敏感,低渗透压、振荡、离心甚至,低渗透压、振荡、离心甚至通气等都易引起其破裂;通气等都易引起其破裂;有的原生质体有的原生质体具有鞭毛,但不能运动具有鞭毛,但不能运动,也不被相应,也不被相应噬菌体所感染;噬菌体所感染;在适宜条件(如高渗培养基)在适宜条件(如高渗培养基)可生长繁殖、形成菌可生长繁殖、形成菌落,形成芽孢落,形成芽孢。可。可恢复恢复成有细胞壁的正常结构。成有细胞壁的正常结构。比正常有细胞壁的细菌比正常有细胞壁的细菌更易导入外源遗传物质更易导入外源遗传物质,是,是研究遗传规律和进行原生质体育种的研究遗
23、传规律和进行原生质体育种的良好实验材料良好实验材料。C)球状体球状体(sphaeroplast)采用上述同样方法,针对采用上述同样方法,针对革兰氏阴性细菌革兰氏阴性细菌处理后而获得的残处理后而获得的残留部分细胞壁(外壁层)的球形体。与原生质体相比,它对留部分细胞壁(外壁层)的球形体。与原生质体相比,它对外界环境具有一定的抗性,可在普通培养基上生长。外界环境具有一定的抗性,可在普通培养基上生长。D)支原体)支原体(Mycoplasma)在长期进化过程中形成的、适应自然生活条件的无细胞壁的在长期进化过程中形成的、适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物。原核生物。因它的细胞膜中含有一般原核生物所没有的
24、甾醇,因它的细胞膜中含有一般原核生物所没有的甾醇,所以即使缺乏细胞壁,其细胞膜仍有较高的机械强度。所以即使缺乏细胞壁,其细胞膜仍有较高的机械强度。(2)(2)细胞膜(细胞膜(cell membranecell membrane)1)1)定义:定义:紧贴在细胞壁内侧的一层由紧贴在细胞壁内侧的一层由磷脂磷脂和和蛋白质蛋白质组组成的柔软、富有弹性的成的柔软、富有弹性的半透性薄膜;半透性薄膜;不含甾醇;不含甾醇;2)2)细胞膜的结构细胞膜的结构19721972年年SingerSinger和和NicolsonNicolson提出的液态镶嵌模型提出的液态镶嵌模型主要内容主要内容 以以液态的脂质双分子层为基
25、架,其液态的脂质双分子层为基架,其中镶嵌着具有不同分子结构、不同生理功能的蛋中镶嵌着具有不同分子结构、不同生理功能的蛋白质。白质。酯酯键键3)古生菌的细胞膜)古生菌的细胞膜 与细菌细胞膜的不同与细菌细胞膜的不同疏水尾由疏水尾由长链烃长链烃组成(异戊二烯的重复单位组成(异戊二烯的重复单位-四聚体植烷)四聚体植烷)亲水头与疏水尾通过亲水头与疏水尾通过醚键醚键连接连接甘油分子的甘油分子的C C3 3位上连接的基团(位上连接的基团(R R)与细菌和真核生物不同)与细菌和真核生物不同膜的结构有膜的结构有单分子层或单、双混合膜单分子层或单、双混合膜含有多种独特的脂类(含有多种独特的脂类(细菌红素、番茄红素
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- 第2章 微生物学周德庆 原核生物 微生物学 德庆 生物
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