2022届高考生物一轮复习第2讲微生物的培养和应用课件新人教版选修1202106052279.pptx

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1、第2讲微生物的培养和应用考情研读考情研读备考定位备考定位考点展示考点展示核心素养核心素养1进进行微生物的分离和培养。行微生物的分离和培养。2测测定某种微生物的数量。定某种微生物的数量。3研究培养基研究培养基对对微生物的微生物的选择选择作用。作用。4探探讨讨微生物的利用。微生物的利用。5活活动动：用用大大肠肠杆杆菌菌为为材材料料进进行行平平板培养，分离菌落。板培养，分离菌落。6活活动动：分分离离土土壤壤中中分分解解尿尿素素的的细细菌，并菌，并进进行行计计数。数。1理理性性思思维维分分析析培培养养基基的的成成分分及及其其作作用用；比比较较平平板板划划线线法法和和稀稀释释涂布平板法的异同。涂布平板法

2、的异同。2科科学学探探究究设设计计实实验验探探究究微微生物培养的条件。生物培养的条件。3社社会会责责任任关关注注有有害害微微生生物物的控制和宣的控制和宣传传健康生活方式。健康生活方式。考点一微生物的实验室培养考点一微生物的实验室培养考点二微生物的筛选与计数考点二微生物的筛选与计数1培养基培养基(1)概概念念：人人们们按按照照微微生生物物对对_的的不不同同需需求求，配配制制出出供供其其_的营养基质。的营养基质。(2)营营养养构构成成：一一般般都都含含有有_和和无无机机盐盐。此此外外还还需需要满足微生物生长对要满足微生物生长对_、_以及氧气的要求以及氧气的要求。考点一微生物的实验室培养考点一微生物

3、的实验室培养营养物质营养物质自主回顾自主回顾素养储备素养储备生长繁殖生长繁殖水、碳源、氮源水、碳源、氮源pH特殊营养物质特殊营养物质(3)种类种类按按照照物物理理性性质质可可分分为为_培培养养基基、固固体体培培养养基基、半半固固体体培培养养基。基。按照成分的来源可分为天然培养基和按照成分的来源可分为天然培养基和_培养基。培养基。按照功能用途可分为选择培养基、按照功能用途可分为选择培养基、_培养基等。培养基等。液体液体合成合成鉴别鉴别类类型型实实例例选择选择培养基培养基培养基中加入培养基中加入_分离得到酵母菌和霉菌分离得到酵母菌和霉菌培养基中加入高培养基中加入高浓浓度的食度的食盐盐用于分离得到金

4、黄色葡萄球菌用于分离得到金黄色葡萄球菌以尿素作以尿素作为为唯一氮源的培养基用于分离唯一氮源的培养基用于分离_石石油油是是唯唯一一碳碳源源时时，可可以以抑抑制制不不能能利利用用石石油油的的微微生生物物的的生生长长，使使能能够够利利用用石石油油的的微微生生物物生生存存，达达到到分分离离能能消消除除石石油油污污染染的的微微生物的目的生物的目的培养基放在高温培养基放在高温环环境中培养只能得到耐高温的微生物境中培养只能得到耐高温的微生物鉴别鉴别培养基培养基伊伊红红美美蓝蓝培养基可以培养基可以_(菌落呈菌落呈_)青霉素青霉素分解尿素的细菌分解尿素的细菌鉴别大肠杆菌鉴别大肠杆菌黑色黑色(4)培培养养基基的的

5、制制备备步步骤骤：计计算算称称量量_调调pH灭灭菌菌 _。溶化溶化倒平板倒平板2无菌技术无菌技术(1)目的：获得目的：获得_。(2)关键：防止关键：防止_的入侵。的入侵。(3)常用方法：灭菌和消毒，二者的比较见下表。常用方法：灭菌和消毒，二者的比较见下表。纯净的培养物纯净的培养物外来杂菌外来杂菌项项目目条件条件结结果果常用方法常用方法应应用用举举例例消毒消毒较为较为温和温和的物理或的物理或化学方法化学方法杀杀死死物物体体表表面面或或内内部部的的部部分分微微生生物物(不不包包括括芽芽孢孢和和孢孢子子)煮沸消毒法煮沸消毒法日常用品日常用品_法法不不耐耐高高温温的的液液体体，如如牛奶牛奶_法法用用酒

6、酒精精擦擦拭拭双双手手、用用氯氯气消毒水源气消毒水源巴氏消毒巴氏消毒化学药化学药剂消毒剂消毒项项目目条件条件结结果果常用方法常用方法应应用用举举例例灭灭菌菌强强烈的理烈的理化因素化因素杀杀死死物物体体内内外外所所有有的的微微生生物物，包包括括芽芽孢孢和和孢孢子子_法法接种工具接种工具_法法玻璃器皿、玻璃器皿、金属用具金属用具_法法培养基及容器培养基及容器灼烧灭菌灼烧灭菌干热灭菌干热灭菌高压蒸汽高压蒸汽灭菌灭菌3大肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养(1)原原理理：在在培培养养基基上上将将聚聚集集的的菌菌种种稀稀释释或或分分散散成成_细细胞胞，使使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。其长

7、成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。(2)两种微生物纯化培养的方法比较两种微生物纯化培养的方法比较单个单个项项目目平板划平板划线线法法稀稀释释涂布平板法涂布平板法纯纯化化原理原理通通过过_操作操作实现实现将将菌菌液液进进行行一一系系列列的的_和涂布平板操作和涂布平板操作实现实现注意事注意事项项 每次划每次划线线前后均需灼前后均需灼烧烧接种接种环环 稀稀释释度要足度要足够够_菌体菌体获获取取在在具具有有显显著著的的菌菌落落特特征征的的区区域域菌落中挑取菌体菌落中挑取菌体从从适适宜宜稀稀释释度度的的平平板板上上的的菌菌落落中中挑取菌体挑取菌体优优点点可可以以根根据据菌菌落落的的菌菌落落特特征

8、征获获得得某种微生物的某种微生物的单细单细胞菌落胞菌落既既可可以以获获得得单单细细胞胞菌菌落落，又又能能对对微生物微生物计计数数缺点缺点不能不能对对微生物微生物计计数数操作复操作复杂杂，需要涂布多个平板，需要涂布多个平板连续划线连续划线梯度稀释梯度稀释高高(3)菌种的保藏方法菌种的保藏方法临临时时保保藏藏法法：对对于于频频繁繁使使用用的的菌菌种种，先先将将菌菌种种接接种种到到试试管管的的_培养基上培养，然后将试管放入培养基上培养，然后将试管放入_的冰箱中保藏。的冰箱中保藏。甘甘油油管管藏藏法法：对对于于需需要要长长期期保保存存的的菌菌种种，先先将将菌菌液液转转入入灭灭菌菌后后的的_中，充分混匀

9、后放在中，充分混匀后放在_冷冻箱中保存。冷冻箱中保存。固体斜面固体斜面4甘油甘油20易易错错警警示示(1)灼灼烧接接种种环，待待其其冷冷却却后后才才能能伸伸入入菌菌液液，以以免免温温度度太高太高杀死菌种。死菌种。(2)划划线时最后一区的划最后一区的划线不要与第一区相不要与第一区相连。(3)划划线时用力大小要适当，用力大小要适当，这是是为了防止用力了防止用力过大将培养基划破。大将培养基划破。(4)用用稀稀释涂涂布布平平板板法法统计的的菌菌落落数数往往往往比比活活菌菌的的实际数数目目低低，这是是因因为当两个或多个当两个或多个细胞胞连在一起在一起时，平板上，平板上观察到的只是一个菌落。察到的只是一个

10、菌落。易错整合，判断正误。易错整合，判断正误。(1)培培养养基基一一般般都都含含有有水水、碳碳源源、氮氮源源和和无无机机盐盐，有有时时还还需需要要加加入入一一些特殊的物质些特殊的物质()(2)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上()(3)消消毒毒的的原原则则是是既既杀杀死死材材料料表表面面的的微微生生物物，又又减减少少消消毒毒剂剂对对细细胞胞的的伤害伤害()(4)用用稀稀释释涂涂布布平平板板法法纯纯化化大大肠肠杆杆菌菌时时，只只要要稀稀释释度度足足够够高高，就就能能在在培养基表面形成单个菌落培养基表面形成单个菌落()1选择

11、无菌技术的原则是什么？选择无菌技术的原则是什么？提示提示(1)考考虑无菌技无菌技术的效果：的效果：灭菌的效果比消毒要好。菌的效果比消毒要好。(2)考考虑操操作作对象象的的承承受受能能力力：活活体体生生物物材材料料、操操作作者者的的手手等等只只能能采采用消毒，而不能用消毒，而不能灭菌。菌。2在在微微生生物物的的分分离离与与培培养养的的过过程程中中，为为了了防防止止杂杂菌菌的的污污染染，需需要要进进行行严严格格的的无无菌菌操操作作，接接种种环环和和接接种种针针及及培培养养基基的的无无菌菌操操作作技技术术相相同同吗吗？接种针或接种环操作时经灭菌后就可以挑取菌落吗？接种针或接种环操作时经灭菌后就可以挑

12、取菌落吗？提提示示不不相相同同，接接种种环和和接接种种针需需要要灼灼烧灭菌菌，培培养养基基需需要要高高压蒸蒸汽汽灭菌菌。不不可可以以，接接种种针或或接接种种环操操作作时经灼灼烧灭菌菌后后需需要要在在培培养养基基上上接触冷却后才能挑取菌落接触冷却后才能挑取菌落。3某某同同学学在在利利用用稀稀释释涂涂布布平平板板法法纯纯化化土土壤壤中中的的大大肠肠杆杆菌菌时时，发发现现培培养养基基上上的的菌菌落落连连成成一一片片，最最可可能能的的原原因因是是什什么么？为为了了防防止止杂杂菌菌污污染染，有有同学建议加入抗生素，你觉得可以吗？并说明理由。同学建议加入抗生素，你觉得可以吗？并说明理由。提提示示菌菌液液浓

13、度度过高高(土土壤壤溶溶液液稀稀释不不够)。不不可可以以，因因为抗抗生生素素不不但但杀灭杂菌菌，而而且且也也可可以以杀灭大大肠杆杆菌菌，因因此此在在培培养养基基上上不不可可以以加加入入抗抗生生素。素。剖析难点剖析难点考点突破考点突破1培养基的配制原则培养基的配制原则(1)目目的的要要明明确确：配配制制时时应应根根据据微微生生物物的的种种类类、培培养养目目的的等等确确定定配配制制的培养基种类。的培养基种类。(2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要要适适宜宜：细细菌菌为为6.57.5，放放线线菌菌为为7.58.5，真真菌菌为为5.06.

14、0，培养不同微生物所需的，培养不同微生物所需的pH不同。不同。2培养基的种类与培养基的种类与应用应用分分类类依据依据种种类类特点特点应应用用物理性物理性质质液体培养基液体培养基不加凝固不加凝固剂剂工工业业生生产产半固体培养基半固体培养基加凝固加凝固剂剂(少少)观观察察微微生生物物的的运运动动、微微生生物的分离、物的分离、鉴鉴定定固体培养基固体培养基加凝固加凝固剂剂(多多)微微生生物物的的分分离离、鉴鉴定定，活活菌菌计计数、保藏数、保藏分分类类依据依据种种类类特点特点应应用用化学成分化学成分天然培养基天然培养基含化学成分不明的天然物含化学成分不明的天然物质质工工业业生生产产合成培养基合成培养基培

15、培养养基基成成分分明明确确或或用用一一定定化化学物学物质质配制配制分分类类、鉴鉴定定用途用途选择选择培养基培养基添添加加某某物物质质，抑抑制制杂杂菌菌生生长长，促促进进所需微生物生所需微生物生长长培养分离出特培养分离出特定微生物定微生物鉴别鉴别培养基培养基根根据据微微生生物物的的代代谢谢特特点点，在在培养基中加入某种指示培养基中加入某种指示剂剂鉴别鉴别微生物微生物3平板划线操作的注意事项平板划线操作的注意事项(1)灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。(2)第第二二次次及及其其以以后后的的划划线线操操作作总总是是从从

16、上上一一次次划划线线末末端端开开始始，能能使使微微生生物物的的数数目目随随着着划划线线次次数数的的增增加加而而逐逐渐渐减减少少，最最终终得得到到由由单单个个细细菌菌繁繁殖殖而来的菌落。而来的菌落。(3)划线时最后一区不要与第一区相连。划线时最后一区不要与第一区相连。(4)划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。(5)操操作作第第一一步步即即取取菌菌种种之之前前及及每每次次划划线线之之前前都都需需要要进进行行火火焰焰灼灼烧烧灭灭菌，划线操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼烧的目的如下表菌，划线操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼烧的目的如下表：第一次

17、操作第一次操作每次划每次划线线之前之前划划线结线结束束目的目的杀杀死死接接种种环环上上原原有有的的微微生物生物杀杀死死上上次次划划线线后后接接种种环环上上残残留留的的菌菌种种，使使下下次次划划线线的的菌菌种种直直接接来来源源于于上上次次划划线线的的末末端端，使使每次划每次划线线菌种数目减少菌种数目减少杀杀死死接接种种环环上上残残存存的的菌菌种种，避避免免微微生生物物污污染染环环境和感染操作者境和感染操作者(2019全国卷全国卷)回答下列与细菌培养相关的问题。回答下列与细菌培养相关的问题。(1)在在细细菌菌培培养养时时，培培养养基基中中能能同同时时提提供供碳碳源源、氮氮源源的的成成分分是是_(填

18、填“蛋蛋白白胨胨”“”“葡葡萄萄糖糖”或或“NaNO3”)。通通常常，制制备备培培养养基基时时要要根根据据所所培培养养细细菌菌的的不不同同来来调调节节培培养养基基的的pH，其其原原因因是是_。硝硝 化化 细细 菌菌 在在 没没 有有 碳碳 源源 的的 培培 养养 基基 上上_(填填“能能够够”或或“不不能能”)生生长长，原原因因是是_。典例剖析典例剖析例例1蛋白胨蛋白胨不同细菌不同细菌生长生长繁殖所需的最适繁殖所需的最适pH不同不同能够能够硝化细菌可以利用硝化细菌可以利用空气中的空气中的CO2作为碳源作为碳源(2)用用平平板板培培养养细细菌菌时时一一般般需需要要将将平平板板_(填填“倒倒置置”

19、或或“正正置置”)。(3)单单个个细细菌菌在在平平板板上上会会形形成成菌菌落落，研研究究人人员员通通常常可可根根据据菌菌落落的的形形状状、大大小小、颜颜色色等等特特征征来来初初步步区区分分不不同同种种的的微微生生物物，原原因因是是_。(4)有有些些使使用用后后的的培培养养基基在在丢丢弃弃前前需需要要经经过过_处处理理，这这种种处处理理可以杀死丢弃物中所有的微生物可以杀死丢弃物中所有的微生物。倒置倒置在一定的在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征灭菌灭菌解解析析(1)蛋蛋白白胨中中含含有有碳碳元元素素和和氮氮元元素素，可可为细菌菌

20、生生长提提供供碳碳源源和和氮氮源源，葡葡萄萄糖糖不不能能提提供供氮氮源源，NaNO3不不能能提提供供碳碳源源。不不同同细菌菌生生长繁繁殖殖所所需需要要的的最最适适pH不不同同，制制备培培养养基基时要要根根据据所所培培养养细菌菌种种类的的不不同同来来调节pH。硝硝化化细菌菌是是自自养养生生物物，可可通通过化化能能合合成成作作用用利利用用空空气气中中的的CO2合合成成有有机机物物，所所以以在在没没有有碳碳源源的的培培养养基基上上也也能能生生长。(2)用用平平板板培培养养细菌菌时，一般将平板倒置，防止皿盖上的水滴滴到培养基中造成，一般将平板倒置，防止皿盖上的水滴滴到培养基中造成污染染。(3)在在一一

21、定定的的培培养养条条件件下下，不不同同微微生生物物表表现出出各各自自稳定定的的菌菌落落特特征征，因因此此研研究究人人员可可根根据据菌菌落落的的这些些特特征征初初步步区区分分微微生生物物的的种种类。(4)消消毒毒仅杀死死物物体体表表面面或或内内部部的的部部分分微微生生物物，灭菌菌可可杀死死物物体体内内外外所所有有的的微微生生物物，包包括括芽芽孢和和孢子子。因因此此，使使用用后后的的培培养养基基在在丢弃弃前前要要进行行灭菌菌处理理，防防止其中的微生物止其中的微生物污染染环境境。1(2021锡锡山山区区月月考考)牛牛奶奶是是微微生生物物生生长长的的良良好好培培养养基基。牛牛奶奶在在饮饮用用前前都都要

22、要经经过过巴巴氏氏消消毒毒，以以杀杀死死有有害害微微生生物物。为为检检测测自自制制酸酸奶奶是是否否被被杂杂菌污染，进行如图所示操作。请回答下列问题。菌污染，进行如图所示操作。请回答下列问题。对应训练对应训练(1)牛牛奶奶用用巴巴氏氏消消毒毒的的好好处处是是_。(2)图图中中所所用用培培养养基基在在灭灭菌菌过过程程中中，需需用用到到高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌锅锅。下下面面是是关关 于于 高高 压压 蒸蒸 汽汽 灭灭 菌菌 锅锅 使使 用用 过过 程程 中中 的的 操操 作作，正正 确确 的的 先先 后后 顺顺 序序 是是_。(有的操作可以重复有的操作可以重复)装装入入待待灭灭菌菌物物品品；加加盖盖

23、；加加热热灭灭菌菌锅锅；打打开开排排气气阀阀；关关闭闭排排气气阀阀；切切断断电电源源；压压力力表表的的压压力力降降到到零零；打打开开盖盖子子；取取出出灭菌灭菌物品物品牛奶的营养成分不被破坏牛奶的营养成分不被破坏(营养营养成分成分没有损失没有损失)(3)取取最最终终的的牛牛奶奶稀稀释释液液0.1mL滴滴在在培培养养基基上上进进行行涂涂布布，应应选选择择的的工工具是下图中具是下图中_。(4)理理想想情情况况下下，稀稀释释涂涂布布培培养养一一段段时时间间后后可可在在培培养养基基表表面面形形成成菌菌落落，如如果果培培养养基基上上出出现现_的的菌菌落落，说说明明自制酸奶已被杂菌污染自制酸奶已被杂菌污染。

24、B(形状、大小、颜色、光泽度形状、大小、颜色、光泽度)不同不同(5)已已知知酸酸奶奶中中的的有有益益菌菌主主要要是是乳乳酸酸菌菌，要要进进一一步步分分离离纯纯化化乳乳酸酸菌菌采采用用下下图图所所示示的的划划线线分分离离操操作作，正正确确的的是是_，其其正正确确操操作作过过程程中中，培培养基在划线时划线工具至少要灼烧养基在划线时划线工具至少要灼烧_次。次。B5解解析析(1)常常用用的的消消毒毒方方法法主主要要有有煮煮沸沸消消毒毒法法、巴巴氏氏消消毒毒法法、化化学学药剂消消毒毒法法、紫紫外外线消消毒毒法法。巴巴氏氏消消毒毒的的方方法法是是指指7075煮煮30分分钟或或80煮煮15分分钟，使使用用这

25、种种方方法法对新新鲜牛牛奶奶进行行消消毒毒的的好好处是是牛牛奶奶的的营养养成成分分不不被被破破坏坏。(2)高高压蒸蒸汽汽灭菌菌锅使使用用过程程中中的的操操作作，正正确确的的先先后后顺序序是是：装装入入待待灭菌菌物物品品、加加盖盖、加加热灭菌菌锅、打打开开排排气气阀、关关闭排排气气阀、切切断断电源源、压力力表表的的压力力降降到到零零、打打开开排排气气阀、打打开开盖盖子子、取取出出灭菌菌物物品品。特特别注注意意两两次次打打开开气气阀，第第一一次次是是排排出出冷冷气气，第第二二次次是是排排出出灭菌菌锅中中多多余余的的蒸蒸汽汽。(3)涂涂布布时所所用用的的接接种种工工具具是是涂涂布布器器，即即图中的中

26、的B。(4)如如果果培培养养基基上上出出现(形形状状、大大小小、颜色色、光光泽度度)不不同同的的菌菌落落，说明明自自制制酸酸奶奶已已被被杂菌菌污染染。(5)平平板板上上划划线的的工工具具为接接种种环。A图很很难得得到到由由单个个细胞胞发育育而而来来的的菌菌落落，A错误；B图划划线从从上上次次划划线末末端端开开始始，容容易易得得到到由由单个个细胞胞发育育而而来来的的菌菌落落，B正正确确；C图划划线没没有有从从上上次次划划线的的末末端端开开始始，接接种种环上上没没有有菌菌种种，不不能能得得到到由由单个个细胞胞发育育而而来来的的菌菌落落，C错误；D图划划线不不是是从从上上次次划划线末末端端开开始始，

27、不不容容易易得得到到由由单个个细胞胞发育育而而来来的的菌菌落落，D错误。由由于于每每次次划划线之之前前和和之之后后都都要要灼灼烧接接种种环，因因此此培养基在划培养基在划线时划划线工具至少要灼工具至少要灼烧5次次。1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)筛筛选选菌菌株株的的原原理理：人人为为提提供供有有利利于于目目的的菌菌株株生生长长的的条条件件(包包括括营营养、养、_、pH等等)，同时，同时_或或_其他微生物的生长。其他微生物的生长。(2)统计菌落数目的方法：统计菌落数目的方法：_法和显微镜直接计数法法和显微镜直接计数法。考点二微生物的筛选与计数考点二微生物的筛

28、选与计数自主回顾自主回顾素养储备素养储备温度温度抑制抑制阻止阻止稀释涂布平板稀释涂布平板样品样品稀释稀释培养培养观察观察氨氨增强增强尿素尿素酚红酚红复合酶复合酶C1酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶纤维二糖纤维二糖刚果红染色刚果红染色红色复合物红色复合物透明圈透明圈有机质有机质纤维素纤维素梯度稀释梯度稀释鉴别纤维素分解菌鉴别纤维素分解菌透明圈透明圈易错整合，判断正误。易错整合，判断正误。(1)纤维素酶只包括三种组分：纤维素酶只包括三种组分：C1酶、酶、CX酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶()(2)选择培养基可以鉴定某种微生物的种类选择培养基可以鉴定某种微生物的种类()(3)对对细细菌菌进进行行计计数数只只能

29、能采采用用稀稀释释涂涂布布平平板板法法，而而不不能能用用平平板板划划线线法法()(4)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素()(5)筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源()(6)在在以以尿尿素素为为唯唯一一氮氮源源的的培培养养基基中中加加入入酚酚红红指指示示剂剂，若若指指示示剂剂变变蓝蓝，则说明筛选到分解尿素的细菌则说明筛选到分解尿素的细菌()(7)刚刚果果红红可可以以与与纤纤维维素素形形成成透透明明复复合合物物，所所以以可可以以通通过过是是否否产产生生透透明圈来筛选纤维素分解菌明圈来筛选纤维素分解菌(

30、)(8)刚果红染色法只能在培养微生物的时候加入刚果红刚果红染色法只能在培养微生物的时候加入刚果红()(9)在在筛筛选选能能分分解解纤纤维维素素的的细细菌菌的的实实验验中中，选选择择培培养养的的目目的的是是增增大大样样品中目的菌株的浓度品中目的菌株的浓度()(1)该该培培养养基基对对微微生生物物是是否否具具有有选选择择作作用用？如如果果具具有有，又又是是如如何何进进行行选择的？选择的？(2)你能否设计一个对照实验，说明选择培养的作用？你能否设计一个对照实验，说明选择培养的作用？(3)如果用该培养基来鉴别纤维素分解菌，需要加入的成分有哪些？如果用该培养基来鉴别纤维素分解菌，需要加入的成分有哪些？提

31、提示示(1)具具有有选择作作用用。纤维素素为唯唯一一碳碳源源，只只有有能能分分解解纤维素素的的微生物才能生微生物才能生长繁殖，而不能分解繁殖，而不能分解纤维素的微生物被抑制。素的微生物被抑制。(2)用接种了的完全培养基用接种了的完全培养基(牛肉膏蛋白牛肉膏蛋白胨培养基培养基)作作为对照。照。(3)需要加入的成分有凝固需要加入的成分有凝固剂(琼脂脂)和染色和染色剂(刚果果红)。2测定活菌的数量时不用平板划线法，请说出其中的原因。测定活菌的数量时不用平板划线法，请说出其中的原因。提提示示用用平平板板划划线法法接接种种时，一一般般只只有有最最后后一一次次划划线的的末末端端才才会会形形成成只只由由一一

32、个个活活菌菌形形成成的的菌菌落落，而而其其他他一一些些菌菌落落往往往往由由两两个个或或多多个个活活菌菌繁繁殖殖而而成成，还有有一一些些不不能能形形成成菌菌落落，而而在在计数数时一一个个菌菌落落对应着着一一个个活活菌菌，这样在在划划线所所得得的的平平板板中中，菌菌落落数数目目低低于于活活菌菌的的实际数数值，所所以以不不能能用用平板划平板划线法法测定活菌的数量。定活菌的数量。3研研究究人人员员用用含含有有刚刚果果红红的的培培养养基基培培养养纤纤维维素素分分解解菌菌时时，筛筛选选到到了了几株有透明降解圈的菌落如图所示。据图回答以下问题：几株有透明降解圈的菌落如图所示。据图回答以下问题：(1)透明圈是

33、如何形成的？透明圈是如何形成的？(2)推推测测与与图图中中透透明明圈圈大大小小有有关关因因素素主主要要是是什什么么？降降解解纤纤维维素素能能力力最最强的菌种是哪种强的菌种是哪种？提提示示(1)刚果果红可可以以与与纤维素素形形成成红色色复复合合物物，但但并并不不与与纤维素素降降解解产物物纤维二二糖糖和和葡葡萄萄糖糖发生生这种种反反应。细菌菌分分泌泌的的纤维素素酶能能将将培培养养基中的基中的纤维素降解成素降解成纤维二糖和葡萄糖，形成透明圈。二糖和葡萄糖，形成透明圈。(2)纤维素素酶的的产量和活性。菌落量和活性。菌落对应的菌种。的菌种。剖析难点剖析难点考点突破考点突破1两种微生物计数方法的比较两种微

34、生物计数方法的比较间间接接计计数法数法(稀稀释释涂布平板法涂布平板法)直接直接计计数法数法(显显微微计计数法数法)原原理理当当样样品品的的稀稀释释度度足足够够高高时时，培培养养基基表表面面生生长长的的一一个个菌菌落落，来来源源于于样样品品稀稀释释液液中中的的一一个个活活菌菌，通通过过统统计计平平板板上上的的菌菌落落数数，就能推就能推测测出出样样品中大品中大约约含有多少活菌含有多少活菌利利用用特特定定细细菌菌计计数数板板或或血血细细胞胞计计数数板板，在在显显微微镜镜下下计计算算一一定定容容积积的的样样品品中中微微生物的数量生物的数量2微生物的筛选与鉴别方法微生物的筛选与鉴别方法(1)微生物的筛选

35、方法微生物的筛选方法单单菌落挑取法菌落挑取法利利用用平平板板划划线线法法或或稀稀释释涂涂布布平平板板法法接接种种到到固固体体平平板板培培养养基基表表面面，直直接接根根据据微微生生物物菌菌落落的的特特征征利利用用单单菌菌落落挑挑取取的的方法方法获获得目的微生物得目的微生物选择选择培养法培养法利利用用选选择择培培养养基基对对微微生生物物进进行行选选择择培培养养，直直接接获获得得目目的的微生物微生物鉴鉴定培养法定培养法利利用用鉴鉴别别培培养养基基使使目目的的微微生生物物菌菌落落呈呈现现特特有有的的特特征征，然然后后筛选筛选目的微生物目的微生物(2)微生物的鉴别方法微生物的鉴别方法菌落特征菌落特征鉴别

36、鉴别法法根根据据微微生生物物在在固固体体培培养养基基表表面面形形成成的的菌菌落落的的形形状状、大大小、隆起程度和小、隆起程度和颜颜色等特征色等特征进进行行鉴别鉴别指示指示剂鉴别剂鉴别法法如如培培养养基基中中加加入入酚酚红红指指示示剂剂，培培养养某某种种微微生生物物后后，培培养基养基变红说变红说明明该该种微生物能种微生物能够够分解尿素分解尿素染色染色鉴别鉴别法法如如利利用用刚刚果果红红染染色色法法，根根据据培培养养基基中中出出现现以以纤纤维维素素分分解菌解菌为为中心的透明圈来中心的透明圈来筛选筛选分解分解纤维纤维素的微生物素的微生物3微生物的分离与计数实验中对照组和重复组的设置及作用微生物的分离

37、与计数实验中对照组和重复组的设置及作用(1)两种对照组的设置及作用两种对照组的设置及作用判判断断培培养养基基中中“是是否否有有杂杂菌菌污污染染”，需需将将未未接接种种的的培培养养基基同同时时进进行培养。行培养。判判断断选选择择培培养养基基“是是否否具具有有筛筛选选作作用用”，需需设设置置牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨胨培培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。(2)重复组的设置及作用重复组的设置及作用为为排排除除偶偶然然因因素素对对实实验验结结果果的的干干扰扰，在在每每一一稀稀释释度度下下宜宜设设置置3个个平平板

38、板作作重重复复组组，选选择择菌菌落落数数均均在在30300且且数数目目相相差差不不大大的的三三个个平平板板，用用“平平均值均值”代入计数公式予以计算菌落数代入计数公式予以计算菌落数。4常用的选择培养基与鉴别培养基常用的选择培养基与鉴别培养基类类型型实实例例选择选择培培养基养基培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌培养基中加入高培养基中加入高浓浓度的食度的食盐盐用于分离金黄色葡萄球菌用于分离金黄色葡萄球菌以尿素作以尿素作为为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细细菌菌以以纤维纤维素作素作为为唯一碳源的培养基用于分离唯一碳源的培

39、养基用于分离纤维纤维素分解菌素分解菌不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物类类型型实实例例选择选择培培养基养基石石油油是是唯唯一一碳碳源源时时，可可以以抑抑制制不不能能利利用用石石油油的的微微生生物物的的生生长长，使使能能够够利利用用石石油油的的微微生生物物生生存存，达达到到分分离离能能消消除除石石油油污污染染的的微生物的目的微生物的目的培养基放在高温培养基放在高温环环境中培养能得到耐高温的微生物境中培养能得到耐高温的微生物鉴别鉴别培培养基养基加入伊加入伊红红美美蓝蓝可以可以鉴别鉴别大大肠肠杆菌杆菌(菌落呈黑色菌落呈黑色)加入酚加入酚红红指示指示剂剂可以可以鉴

40、别鉴别尿素分解菌尿素分解菌加入加入刚刚果果红红可以可以鉴别纤维鉴别纤维素分解菌素分解菌(2019江江苏苏高高考考)下下列列关关于于产产纤纤维维素素酶酶菌菌分分离离及及运运用用的的叙叙述述，不合理的是不合理的是()A筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养B可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌C在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力D用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值价值

41、典例剖析典例剖析例例2A解解析析分分离离产纤维素素酶菌菌时，筛选培培养养基基中中应以以纤维素素作作为唯唯一一碳碳源源，A项错误。富富含含腐腐殖殖质的的林林下下土土壤壤中中纤维素素多多，故故含含有有能能分分解解纤维素素的的产纤维素素酶菌菌，B项正正确确。用用筛选培培养养基基分分离离得得到到的的菌菌落落只只是是初初步步筛选，还需需进一一步步确确定定其其产纤维素素酶的的能能力力，C项正正确确。用用产纤维素素酶菌菌发酵酵处理理农作作物物秸秸秆，可可将将纤维素素分分解解为小小分分子子物物质，动物物食食用用后后易消化吸收，故可提高其易消化吸收，故可提高其饲用价用价值，D项正确。正确。2(2021城城固固县

42、县月月考考)二二硝硝基基甲甲苯苯遇遇碱碱变变红红，如如图图表表示示从从被被二二硝硝基基甲甲苯苯污污染染的的土土壤壤中中分分离离具具有有降降解解二二硝硝基基甲甲苯苯能能力力的的光光合合细细菌菌球球形形红红细菌的过程。请回答下列问题：细菌的过程。请回答下列问题：对应训练对应训练(1)将将10g土土壤壤样样品品加加入入装装有有无无菌菌水水的的三三角角瓶瓶中中制制备备土土壤壤浸浸出出液液。过过 程程 的的 目目 的的 是是 _；过过 程程 所所 用用 的的 接接 种种 方方 法法 为为_法。法。(2)在在5个个培培养养基基平平板板上上分分别别接接种种稀稀释释倍倍数数为为105的的土土壤壤样样液液0.1

43、mL，培培养养一一段段时时间间后后，平平板板上上长长出出的的细细菌菌菌菌落落数数分分别别为为13、156、462、178和和191，则则每每毫毫升升土土壤壤样样液液中中的的细细菌菌数数量量约约为为_个个。用用此此方方法法测测定定的的球球形形红红细细菌菌数数量量比比实实际际活活菌菌数数量量少少，原原因因是是_。获得单个菌落获得单个菌落平板划线平板划线1.75108一个菌落可以一个菌落可以由一个或多个球形红细菌由一个或多个球形红细菌形成形成(3)图图中中甲甲、乙乙培培养养基基需需置置于于有有光光条条件件下下培培养养，主主要要原原因因是是_。挑挑出出纯纯化化获获得得的的菌菌落落接接种种在在含含二二硝

44、硝基基甲甲苯苯的的培培养养基基中中，培培养养结结束束后后，可可通通过过_来判断菌种降解二硝基甲苯的能力。来判断菌种降解二硝基甲苯的能力。球形红细菌进行光合作用需要光球形红细菌进行光合作用需要光调节培养基的调节培养基的pH至至碱性碱性后观察培养基颜色后观察培养基颜色(3)由由于于球球形形红细菌菌进行行光光合合作作用用需需要要光光，因因此此图中中甲甲、乙乙培培养养基基需需置置于于有有光光条条件件下下培培养养。挑挑出出纯化化获得得的的菌菌落落接接种种在在含含二二硝硝基基甲甲苯苯的的培培养养基基中中，由由于于二二硝硝基基甲甲苯苯遇遇碱碱变红，因因此此培培养养结束束后后，可可通通过调节培培养养基基的的p

45、H至碱性后至碱性后观察培养基察培养基颜色来判断菌种降解二硝基甲苯的能力。色来判断菌种降解二硝基甲苯的能力。3(2020江江西西省省新新余余市市高高三三期期末末)目目前前微微博博传传言言手手机机细细菌菌比比马马桶桶多多。如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题：(1)该该实实验验需需制制备备_(填填“固固体体”或或“液液体体”)培培养养基基。在在液液体体培养基中加入培养基中加入_可配置成固体培养基。可配置成固体培养基。(2)据据图图，两两电电视视台台均均采采用用_法法接接种种，接接种种前前需需要要采采用用_法对培养基进行

46、灭菌。法对培养基进行灭菌。(3)通通过过观观察察菌菌落落_初初步步鉴鉴定定手手机机屏屏幕幕和和马马桶桶按按钮钮上上的的生生物物类类群群。两两电电台台实实验验操操作作均均正正确确且且完完全全一一致致，但但报报道道结结果果截截然然不不同同，你你认认为为原原因因是是：_。固体固体琼脂琼脂稀释涂布平板稀释涂布平板高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌形状、大小、隆起程度和颜色等形状、大小、隆起程度和颜色等手机的取样和马桶的取样都手机的取样和马桶的取样都不不相同相同(4)按按图图操操作作取取样样面面积积，实实验验员员测测定定某某手手机机屏屏幕幕的的细细菌菌数数量量，将将10mL菌菌悬悬液液进进行行梯梯度度稀稀释释，分

47、分别别取取0.1mL稀稀释释倍倍数数为为100的的样样品品液液接接种种到到三三个个培培养养基基上上，培培养养一一段段时时间间后后，统统计计菌菌落落数数分分别别为为98、100、102，则则该该手手机机屏屏幕幕的的细细菌菌数数为为_个个/平平方方厘厘米米。该该实实验验对对照照组组要要取取培培养养基涂布基涂布_进行培养。进行培养。41040.1mL无菌水无菌水解解析析(1)该实验需需制制备固固体体培培养养基基。在在液液体体培培养养基基中中加加入入琼脂脂做做凝凝固固剂即即可可。(2)图中中，均均要要用用稀稀释涂涂布布平平板板法法接接种种，培培养养基基的的灭菌菌方方法法是是高高压蒸蒸汽汽灭菌菌法法。(

48、3)不不同同的的菌菌落落形形态、大大小小不不同同，图示示两两个个电视台台调查的的手手机机屏屏幕幕和和马桶桶按按钮都都有有多多种种形形态的的菌菌落落，即即存存在在多多种种微微生生物物。两两电视台台实验操操作作均均正正确确且且完完全全一一致致，但但报道道结果果截截然然不不同同，可可能能是是因因为手手机机的的取取样和和马桶桶的的取取样都都不不相相同同。(4)根根据据题意意分分析析，三三个个菌菌落落的的平平均均数数 为(98 100 102)/3 100(个个)，则 该 手手 机机 屏屏 幕幕 的的 细 菌菌 数数 100100(100.1)(55)4104(个个/cm2)。该实验对照照组应该取取培培养养基基涂涂布布0.1mL无菌水无菌水进行培养行培养。