常见缓冲液的配制44953.pdf

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1、附溶液配制方法：L PBS KH2PO4 Na2HPO4 (或 Na2HPO412H2O2.58g)NaCl 蒸馏水加至 1000mL PBS/T NaCl KH2PO4 Na2HPO412H2O(或 Na2HPO47H2O)（或）KCl 吐温 20 蒸馏水加至 1000mL 碳酸盐缓冲液 Na2CO3 1.59g NaHCO3 2.93g 蒸馏水加至 1000mL L 氯化钾低渗液 氯化钾，蒸馏水 100ml 甲醇冰醋酸（3:1）固定液 甲醇 3 份 冰醋（乙）酸 1 份 姬姆萨染液 Giemsa 原液 1ml 1/15mol/L 磷酸缓冲液（或）10ml%柠檬酸钠溶液 柠檬酸钠（Na C

2、H O 2H O）2.3g 蒸馏水 100ml 明胶显影液 明胶粉 0.2g 三蒸水 10ml 甲酸 1%醋酸 冰醋（乙）酸 1ml 蒸馏水 99ml Ho33342-若丹明 123 染液 Ho33342（Hoechst 33342）g 若丹明 123（Rhodamine 123）g PBS 1ml DPH 贮备液 DPH（,3,5hexatriene,）四氢呋喃 10ml DPH 工作液(210-6mol/L)DPH 贮备液 PBS 100ml FDA 贮备液 二醋酸脂荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)丙酮 1ml FDA 工作液 FDA 贮备液 PBS 100ml

3、 M-缓冲液（）咪唑 50mmol/L 3.404g 氯化钾 50mmol/L 3.7g 氯化镁（MgCl 6H O）L EGTA(乙二醇双（a-氨基乙基）醚四乙酸)1mmol/L EDTA(乙二胺四乙酸)L 疏基乙醇 1mmol 4mol/L 甘油 292ml 蒸馏水 加至 1000ml 1%TritonX-100 液 Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚）1ml M-缓冲液 99ml 3%戊二醛液 戊二醛 25%3ml PBS 液（）97ml%考马斯亮蓝 R250 染液 考马斯亮蓝 R250（Coomassie brilliant blue R250）0.2g 甲醇 冰醋（乙）酸

4、7ml 蒸馏水 生理盐水%氯化钠)氯化钠 8.5g 三蒸水 1000ml L 蔗糖水溶液（含 L 氯华钙）蔗糖 85.5g 无水氯华钙 0.33g 蒸馏水 1000ml L 氯化铵液 氯化铵 4.574g 蒸馏水 500ml L 硝酸钠液 硝酸钠 7.224g 蒸馏水 500ml L 硫酸钠液 硫酸钠（Na SO H O）19.333g 蒸馏水 500ml L 草酸铵液 草酸铵（NH）C o H O）8.527g 蒸馏水 500ml L 醋酸铵液 醋酸铵 6.552g 蒸馏水 500ml L 葡萄糖液 葡萄糖 28.83g 蒸馏水 500ml L 甘油液 甘油（C H(OH)1.26g/ml)

5、蒸馏水 500ml L 乙醇液 无水乙醇 蒸馏水 500ml L 丙醇液 正丙醇（比重）蒸馏水 500ml 化学名：2-4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinylethanesulfonic acid 中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸 分子式：C8H18N2O4S HEPES 是一种非离子两性缓冲液,其在 pH -范围内具有较好的缓冲能力。其最大优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的 PH 值.在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中.大多数培养液中含有酚红作为 pH 指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色.HEPES 有

6、些昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒.原则上,HEPES 作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度 CO2 培养环境的限制.实际操作中并非如此简单.溶解的 CO2 与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。HEPES 使用方法有两种：(1)HEPES 可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml 培养液中加入克 HEPES,待溶后用 lN NaOH 调 pH 至,滤过除菌后使用.此时 HEPES 的使用浓度为 10 mmol/L.(2)亦可配成 100 x 贮存液（l mol/L），使用前取 99ml 培养液加入 lml贮存液，最终应用浓度仍为 10mmol/L。l mol/L（100 x）HEPES 贮存液配制方法:取 HEPES 溶于 90ml 双蒸水中,用 lN NaOH 调 pH 至一,然后用水定容至 100ml,过滤除菌,分装小瓶（2ml/瓶）,4或-20保存.