学支原体立克次体.pptx

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1、柔膜体纲支原体目支原体科 无胆甾原体科 螺原体科支原体属 脲原体属第1页/共71页主要病原性支原体主要病原性支原体肺炎支原体肺炎支原体 M.pneumoniaeM.pneumoniae人型支原体人型支原体 M.NominisM.Nominis生殖器支原体生殖器支原体 M.genitaliumM.genitalium穿透支原体穿透支原体 M.penetrausM.penetraus溶脲脲原体溶脲脲原体 U.urealyticumU.urealyticum第2页/共71页第一节第一节 概概 述述第3页/共71页一、生物学性状一、生物学性状1.1.形态结构形态结构最小的原核细胞生物；最小的原核细胞生

2、物；球形、球杆形、长丝球形、球杆形、长丝状及分枝状等状及分枝状等多多种形态；种形态；G-，着色困难，常，着色困难，常用用Giemsa染色法染染色法染成淡紫色。成淡紫色。第4页/共71页第5页/共71页细胞膜由细胞膜由蛋白质和脂质蛋白质和脂质（固醇固醇）组成）组成三层结构三层结构第6页/共71页第7页/共71页 特殊的顶端结构：粘附宿主上皮 细胞表面，与支原 体的致病有关。第8页/共71页2.2.培养特性培养特性:荷包蛋样菌落荷包蛋样菌落培养基中含人或动培养基中含人或动物的血清物的血清(1020%)及酵母浸液。及酵母浸液。多数支原体能在鸡多数支原体能在鸡胚绒毛尿囊膜或细胚绒毛尿囊膜或细胞培养中生

3、长。胞培养中生长。第9页/共71页固体培养基：固体培养基：27天天长长出出直直径径约约10600m的的典典型型的的“荷荷包包蛋蛋样样”菌菌落落：低低倍倍镜镜下下见见菌菌落落呈呈圆圆形形，心心致致密密隆隆起起，深深入入琼脂，外周由颗粒包绕琼脂，外周由颗粒包绕。液体培养基：液体培养基：清亮清亮需需需需用用用用放放放放大大大大镜镜镜镜/低低低低倍倍倍倍显显显显微微微微镜观察镜观察镜观察镜观察第10页/共71页第11页/共71页支原体是污染细胞培养的重要原因之一支原体是污染细胞培养的重要原因之一第12页/共71页 鉴别点 支原体 细菌L型细胞壁缺失原因 在遗传上与细菌无关 与原菌相关，可以回复细胞膜

4、含高浓度固醇 细胞膜不含固醇 培养特性 需要胆固醇 大多需要高渗培养 菌落大小 生长慢，菌落小 菌落稍大(0.61.0)液体培养 液体培养混浊度极低 一定混浊度，可附壁支原体与细菌支原体与细菌L L型的异同点型的异同点n 不同点缺乏细胞壁，形态多样，能通过滤菌器。缺乏细胞壁，形态多样，能通过滤菌器。缺乏细胞壁，形态多样，能通过滤菌器。缺乏细胞壁，形态多样，能通过滤菌器。固体培养固体培养固体培养固体培养菌落呈荷包蛋样或颗粒状。菌落呈荷包蛋样或颗粒状。菌落呈荷包蛋样或颗粒状。菌落呈荷包蛋样或颗粒状。临床表现相似临床表现相似临床表现相似临床表现相似间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等间质性肺炎、泌尿生

5、殖道感染、不育等间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等n 相同点第13页/共71页 支原体支原体 葡萄糖葡萄糖 精氨酸精氨酸 尿素尿素 吸附细胞吸附细胞 致病性致病性 肺炎支原体肺炎支原体 +红细胞红细胞 肺炎、支气管炎肺炎、支气管炎人型支原体人型支原体 +泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染生殖器支原体生殖器支原体 +泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染穿透支原体穿透支原体 +红细胞红细胞 条件感染条件感染 CD4+T细胞细胞 多见于艾滋病多见于艾滋病 巨噬细胞巨噬细胞 溶脲脲原体溶脲脲原体 +泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染 流产及不孕不育流产及不孕不育 3、生化反应、生化反应第

6、14页/共71页溶脲脲原体分解尿素产氨，是酚红变红，液体清亮，为阳性（右）第15页/共71页 （四）抗原结构抗原结构 来自细胞膜，胞膜外层蛋白质是主要抗原，来自细胞膜，胞膜外层蛋白质是主要抗原，常用生长抑制试验常用生长抑制试验(GIT)与代谢抑制试验与代谢抑制试验 (MIT)鉴定。鉴定。GIT是将吸有型特异性抗血清的滤纸片置于接种有是将吸有型特异性抗血清的滤纸片置于接种有支原体的固体培养基上，支原体的固体培养基上，经孵育出现同型血清抑经孵育出现同型血清抑制该型支原体生长现象。制该型支原体生长现象。MIT是将支原体接种在含有抗血清培养基中，若是将支原体接种在含有抗血清培养基中，若抗体与支原体型一

7、致，则抑制该支原体不能分解抗体与支原体型一致，则抑制该支原体不能分解葡萄糖产酸。此两种方法可将支原体分成若干血葡萄糖产酸。此两种方法可将支原体分成若干血清型。清型。第16页/共71页（五）（五）抵抗力抵抗力 对对对对脂溶剂脂溶剂脂溶剂脂溶剂化学消毒剂敏感，对结化学消毒剂敏感，对结化学消毒剂敏感，对结化学消毒剂敏感，对结 晶紫、醋酸铊、亚碲酸钾有抵抗力晶紫、醋酸铊、亚碲酸钾有抵抗力晶紫、醋酸铊、亚碲酸钾有抵抗力晶紫、醋酸铊、亚碲酸钾有抵抗力；对影响细胞壁合成的抗生素如青对影响细胞壁合成的抗生素如青对影响细胞壁合成的抗生素如青对影响细胞壁合成的抗生素如青 霉素类天然耐受，但对干扰蛋白霉素类天然耐受

8、，但对干扰蛋白霉素类天然耐受，但对干扰蛋白霉素类天然耐受，但对干扰蛋白 质合成的抗生素如强力霉素等敏感质合成的抗生素如强力霉素等敏感质合成的抗生素如强力霉素等敏感质合成的抗生素如强力霉素等敏感。第17页/共71页二、致病性与免疫性顶端结构与宿主细胞上受体结合而粘附于细胞上顶端结构与宿主细胞上受体结合而粘附于细胞上荚膜或微荚膜的抗吞噬作用荚膜或微荚膜的抗吞噬作用产生毒性代谢产物产生毒性代谢产物超抗原，刺激炎症细胞分泌大量细胞因子超抗原，刺激炎症细胞分泌大量细胞因子粘附、侵入粘附、侵入CD4 TCD4 T淋巴细胞（穿透支原体）淋巴细胞（穿透支原体）第18页/共71页免疫性免疫性 体液免疫：抗膜蛋白

9、的抗体包括体液免疫：抗膜蛋白的抗体包括体液免疫：抗膜蛋白的抗体包括体液免疫：抗膜蛋白的抗体包括 IgMIgM、IgGIgG和和和和SIgASIgA 细胞免疫细胞免疫细胞免疫细胞免疫：主要是特异性主要是特异性主要是特异性主要是特异性CD4CD4Th1Th1 细胞分泌细胞因子细胞分泌细胞因子细胞分泌细胞因子细胞分泌细胞因子 第19页/共71页第二节第二节 主要致病性支原体主要致病性支原体第20页/共71页一一 肺炎支原体肺炎支原体n是下呼吸道重要的致病性支原体，所引起的人类是下呼吸道重要的致病性支原体，所引起的人类支原体肺炎占细菌性肺炎支原体肺炎占细菌性肺炎50%左右，其病理变化以左右，其病理变化

10、以间质性肺炎为主，又称之原发性非典型性肺炎。间质性肺炎为主，又称之原发性非典型性肺炎。症状轻，与胸片严重程度不符症状轻，与胸片严重程度不符第21页/共71页（一）致病性 1.主要经飞沫传播，主要经飞沫传播，但但大多数发生于夏大多数发生于夏 末秋初，末秋初，515岁青少年发病率最高岁青少年发病率最高。2.含含特特殊殊的的顶顶端端结结构构：P1表表面面蛋蛋白白（170 kDa）和和P30（32 kDa）为为主主要要的的粘附粘附蛋白，使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮蛋白，使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮。3.肺肺炎炎支支原原体体具具有有超超抗抗原原作作用用，能能刺刺激激炎炎症症细细胞胞在在感感染染部部位位释

11、释放放大大量量的的淋淋巴巴因因子（如子（如TNF-、IL-1、IL-6）引起组织损伤）引起组织损伤。致病性与免疫性致病性与免疫性第22页/共71页所致疾病-支原体肺炎传播途径 经飞沫传播发病年龄 儿童及青少年多见潜伏期 2 23W3W临床表现发热（约3939）、头痛、持续性顽固咳嗽、胸痛等。一般经3 310d10d主要症状消失，但咳嗽可以持续1 1个月之久。第23页/共71页第24页/共71页第25页/共71页免疫性免疫性 血血血血清清清清特特特特异异异异性性性性IgMIgM、IgGIgG及及及及SIgASIgA和和和和致致致致敏敏敏敏的的的的淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞；呼呼呼呼吸吸吸吸

12、道道道道局局局局部部部部黏黏黏黏膜膜膜膜产产产产生生生生的的的的SIgASIgA对对对对防防防防止止止止再再再再感染有较强保护作用感染有较强保护作用感染有较强保护作用感染有较强保护作用；出出出出现现现现IgEIgE介介介介导导导导的的的的I I型型型型超超超超敏敏敏敏反反反反应应应应，促促促促使使使使哮哮哮哮喘病急性发作喘病急性发作喘病急性发作喘病急性发作 第26页/共71页（一）分离培养 痰或咽拭子接种在SP-4培养基，挑选可疑菌落，经形态学、糖发酵、溶血性、血细胞吸附试验进行初步鉴定，进一步鉴定需用特异性抗血清做GIT与MIT实验。三三、微生物学检查法、微生物学检查法第27页/共71页三三

13、、微生物学检查法、微生物学检查法（二）（二）血清学检查血清学检查 冷凝集试验冷凝集试验冷凝集试验冷凝集试验：即即即即用用用用病病病病人人人人血血血血清清清清与与与与人人人人OO型型型型血血血血红红红红细细细细胞胞胞胞或或或或自自自自身身身身红红红红细细细细胞胞胞胞混混混混合合合合，4 4过过过过夜夜夜夜时时时时可可可可发发发发生生生生凝凝凝凝集集集集，而而而而在在在在3737时时时时这这这这种种种种凝凝凝凝集集集集又又又又分分分分散散散散解解解解离离离离开开开开，但但但但仅仅仅仅5050左左左左右右右右的的的的患患患患者者者者才才才才出出出出现现现现阳阳阳阳性性性性。此此此此反反反反应应应应为

14、非特异性为非特异性为非特异性为非特异性。快速诊断快速诊断快速诊断快速诊断 ELISAELISA：检测检测检测检测P1P1和和和和P30P30蛋白蛋白蛋白蛋白mAbsmAbs PCRPCR：从从从从痰标本痰标本痰标本痰标本中中中中检测检测检测检测16S rRNA16S rRNA或或或或 P1P1蛋白基因蛋白基因蛋白基因蛋白基因第28页/共71页ELISA：此此法法敏敏感感，特特异异性性高高，快快速速、经经济济，并并可可检检测测IgM和和IgG抗抗体体，为为目目前前诊诊断断的的可可靠靠方方法法。检检测测分分子子量量190kDa的的P1蛋蛋白白，3h可可完完成成试试验验，特特异异性性高，敏感性为高，

15、敏感性为10 4CFUl标本。标本。第29页/共71页防治原则 大环内酯类药物 喹诺酮类药物四四、防治原则、防治原则第30页/共71页二二 解脲脲原体解脲脲原体溶脲脲原体溶脲脲原体 U.urealyticumU.urealyticum人型支原体人型支原体 M.NominisM.Nominis生殖器支原体生殖器支原体 M.genitaliumM.genitalium性传播疾病（性传播疾病（STD）的病原体）的病原体第31页/共71页解脲脲原体解脲脲原体 通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起非淋非淋菌性尿道炎菌性尿道炎，也能引起盆腔等部位的感染。，也能引起盆腔等部位

16、的感染。还可通过胎盘感染胎儿，出现早产和死胎。还可通过胎盘感染胎儿，出现早产和死胎。也能引起妇女也能引起妇女不孕不育症不孕不育症。常与衣原体、淋球菌合并感染常与衣原体、淋球菌合并感染第32页/共71页1.寄居泌尿生殖道，寄居泌尿生殖道，2.传播途径为传播途径为性接触和母婴传播性接触和母婴传播。3.致病机制致病机制-粘附粘附于宿主细胞表面，引起细胞膜损伤；于宿主细胞表面，引起细胞膜损伤；-产产生生毒毒性性代代谢谢产产物物如如NH3，对对宿宿主主细细胞胞有有急急性性毒毒性作用；性作用；-磷脂酶损伤宿主的细胞膜磷脂酶损伤宿主的细胞膜。解脲脲原体解脲脲原体 第33页/共71页2.引引起起非非淋淋菌菌性

17、性尿尿道道炎炎(NGU)，上上行行感感染染，可可引引起起前前列列腺腺炎炎或或附附睾睾炎炎；阴阴道道炎炎和和宫宫颈颈炎炎，并并可可导导致致流流产产。因因为为与与人人精精子子膜膜有有共共同同抗抗原原，对对精精子子可可造造成成免免疫疫损损伤伤而致不育。而致不育。常与衣原体、淋球菌合并感染常与衣原体、淋球菌合并感染第34页/共71页引起男性不孕的原因：UuUu吸附于精子表面，使其运动受阻，并蔽盖了精子识别卵细胞的部位 UuUu产生神经氨酸样物质，干扰精子与 卵细胞结合。UuUu与精子膜有共同抗原，从而产生抗 精子抗体 第35页/共71页 病原体检测 接种液体培养基，分解尿素产碱，酚红指示剂由橘黄色变为

18、红色；培养2448h，用低倍镜观察菌落，进一步鉴定需用特异抗血清做GIT与MIT。三三、微生物学检查法、微生物学检查法第36页/共71页核酸检测 PCR检测：检测：检检测测尿尿素素酶酶基基因因、多多带带抗抗原原（MB-Ag）基基因因和和16S rRNA基基因因。此此法法快快速速、特特异异，适适宜宜于于大大批批量量标标本本检测检测。三三、微生物学检查法、微生物学检查法第37页/共71页生殖支原体生殖支原体与泌尿生殖道感染有关与泌尿生殖道感染有关人型支原体人型支原体能引起渗出性咽炎及尿道炎，也与卵能引起渗出性咽炎及尿道炎，也与卵巢脓肿、产褥热等有关。巢脓肿、产褥热等有关。第38页/共71页思考题思

19、考题1 1、名词解释：支原体、名词解释：支原体(mycoplasma)(mycoplasma)2 2、简述致病性支原体的种类及其致病性。、简述致病性支原体的种类及其致病性。3 3、支原体与细菌、支原体与细菌L L型的比较型的比较第39页/共71页第第20章章 立克次体立克次体（Rickettsia）概念概念 ：立克次体是一类以：立克次体是一类以节肢动物节肢动物为传播为传播媒介，媒介，严格活细胞内寄生严格活细胞内寄生的原核细胞型微的原核细胞型微生物，可以引起斑疹伤寒、生物，可以引起斑疹伤寒、Q Q热、恙虫病、热、恙虫病、斑点热等传染病。斑点热等传染病。第40页/共71页 1906年首次被发现，第

20、一个被发现的立克次体病是斑疹伤寒。为了纪念因研究斑疹伤寒被感染而牺牲的年仅39岁的医师，将这类微生物统称为立克次体。第41页/共71页立克次体的共同特点：立克次体的共同特点：专性活细胞内寄生，以二分裂方式繁殖专性活细胞内寄生，以二分裂方式繁殖有有DNADNA和和RNARNA两类核酸两类核酸球杆状或多形态，革兰染色阴性球杆状或多形态，革兰染色阴性寄生在吸血性节肢动物体内，以节肢动物为传播媒介或储存宿主寄生在吸血性节肢动物体内，以节肢动物为传播媒介或储存宿主引起自然疫源性疾病引起自然疫源性疾病对多种抗生素敏感对多种抗生素敏感第42页/共71页第一节第一节 概概 述述第43页/共71页一、生物学性状

21、一、生物学性状大小:(0.3m-0.6m)(0.8m-2.0m)(0.3m-0.6m)(0.8m-2.0m)形态:类似球杆菌,多形性 (球形、哑铃形、长杆状或丝状等)染色:Giemsa Giemsa染色法:紫色或蓝色 马氏染色法(Macchiavello stain):(Macchiavello stain):红色排列:散在于细胞浆中、核旁成堆 (斑点热立克次体在胞浆或核内)培养:专性细胞内(活细胞内)寄生培养方法:鸡胚卵黄囊内接种，组织细胞培养 动物接种 第44页/共71页第45页/共71页抗原构造：群特异性抗原,种特异性外膜抗原外斐反应(Weil-Felix reaction):(Weil

22、-Felix reaction):斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X X菌株（OX19、OX2、OXk）有共同的耐热多糖类抗原。利用这些变形杆菌菌株代替立克次体抗原，进行定量非特异凝集反应（交叉凝集反应），以检测人或动物血清中的相应抗体。协助诊断斑疹伤寒,恙虫病,滴度超过1:1601:160有意义.第46页/共71页立克次体立克次体变形杆菌变形杆菌抗体抗体交叉反应交叉反应 外裴氏反应示意图外裴氏反应示意图第47页/共71页抵抗力:热、消毒剂:较弱(56,(56,数分钟,0.5%,0.5%石碳酸、0.5%0.5%来苏,75%,75%酒精中数分钟)抗生素:敏 感:氯霉素和四环素 不敏感:磺胺类，磺

23、胺药刺激生长 低温、干燥:较强(-20(-20或冷冻干燥半年以上)第48页/共71页二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性传播媒介：传播媒介：吸血节肢动物，如虱、蚤、蜱、螨等。吸血节肢动物，如虱、蚤、蜱、螨等。致病物质：致病物质：脂多糖（发热、微循环障碍、脂多糖（发热、微循环障碍、DICDIC、休克、休克 磷脂酶磷脂酶A A（溶解宿主细胞膜或吞噬体膜）（溶解宿主细胞膜或吞噬体膜）微荚膜（粘附、抗吞噬）微荚膜（粘附、抗吞噬）第49页/共71页致病过程致病过程 体虱体虱 鼠蚤鼠蚤 人体人体 局部淋巴结及小血管内皮细局部淋巴结及小血管内皮细胞胞 恙螨恙螨 第一次入血第一次入血 全身小血管全身小血管内皮

24、细胞内皮细胞 高热、皮疹高热、皮疹 神经系统症状神经系统症状 临床症状临床症状 第二次第二次入血入血 心血管系统症状心血管系统症状生长繁殖生长繁殖大量繁殖大量繁殖第50页/共71页螨虫螨虫蜱蜱第52页/共71页吃饱的跳蚤吃饱的跳蚤人体虱人体虱第53页/共71页致病性与免疫性致病性与免疫性所致疾病所致疾病 人畜共患性疾病人畜共患性疾病 流行性斑疹伤寒流行性斑疹伤寒 地方性斑疹伤寒地方性斑疹伤寒 恙虫病恙虫病 Q Q热热第54页/共71页免疫性：免疫性：以细胞免疫为主，体液免疫为辅。以细胞免疫为主，体液免疫为辅。多数可获得持久的免疫。多数可获得持久的免疫。第55页/共71页三、微生物学诊断与防治三

25、、微生物学诊断与防治病原体的分离培养与鉴定病原体的分离培养与鉴定血清学试验（外斐反应、血清学试验（外斐反应、ELISA）控制和消灭媒介昆虫；控制和消灭媒介昆虫；抗生素治疗（氯霉素、四环素，但禁用磺胺类药物）；抗生素治疗（氯霉素、四环素，但禁用磺胺类药物）；全细胞灭活疫苗全细胞灭活疫苗立克次体易引起实验室感染，注意无菌操作！立克次体易引起实验室感染，注意无菌操作！第56页/共71页第二节第二节 主要致病性立克次体主要致病性立克次体第57页/共71页一、普氏立克次体一、普氏立克次体 (R.prowazekii)流行性斑疹伤寒（epidemic typhus）虱型斑疹伤寒（louse-borne t

26、yphus）第58页/共71页流行环节流行环节 传染源：传染源：病人病人 储存宿主：储存宿主：病人病人 传播媒介：传播媒介：人虱人虱 传播方式：传播方式：人人 人虱人虱 人人第59页/共71页第60页/共71页所致疾病所致疾病流行性斑疹伤寒临床表现:潜伏期 （101014d14d）高热、头痛、肌肉痛等 （4 47d7d）皮疹 神经、心血管和其他器官病变第61页/共71页免疫力免疫力 病后免疫持久病后免疫持久 与地方性斑疹伤寒与地方性斑疹伤寒 有交叉免疫有交叉免疫第62页/共71页二、斑疹伤寒立克次体二、斑疹伤寒立克次体 (R.typhi)莫氏立克次体莫氏立克次体（R.mooseri）地方性斑疹

27、伤寒（endemic typhus）鼠型斑疹伤寒（murine typhus）第63页/共71页流行环节流行环节 传染源：传染源：鼠储存宿主：储存宿主：啮齿类动物啮齿类动物(主要为老鼠主要为老鼠)传播媒介：传播媒介：鼠蚤或鼠虱鼠蚤或鼠虱传播方式：传播方式：鼠 鼠蚤 人 人虱 鼠蚤 鼠虱鼠虱 鼠鼠第64页/共71页鼠蚤鼠蚤第65页/共71页所致疾病所致疾病地方性斑疹伤寒临床表现：临床表现：与流行性斑疹伤寒相似，但病情较轻，发病缓慢，持续时间短，很与流行性斑疹伤寒相似，但病情较轻，发病缓慢，持续时间短，很少侵害中枢神经系统少侵害中枢神经系统第66页/共71页免疫力免疫力 病后免疫持久病后免疫持久

28、与流行性斑疹伤寒与流行性斑疹伤寒 有交叉免疫有交叉免疫第67页/共71页三、恙虫病立克次体三、恙虫病立克次体 (R.tsutsugamushi)恙虫病（akamushi disease，or yochubio）第68页/共71页流行环节流行环节 传染源：传染源：鼠鼠储存宿主：储存宿主：恙螨恙螨传播媒介：传播媒介：恙螨恙螨 寄生于恙螨体内，可经卵传代。人若寄生于恙螨体内，可经卵传代。人若进入恙螨的孳生地，可能受感染进入恙螨的孳生地，可能受感染(亦称亦称“丛林热丛林热”)第69页/共71页流行环节流行环节传播方式：传播方式：若虫若虫成虫成虫虫卵虫卵 鼠等鼠等幼虫幼虫 幼虫幼虫人人 虫卵虫卵成虫成虫若虫若虫第70页/共71页感谢您的观看。第71页/共71页