第一章-组织学绪论.pptx

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1、组织学分三大部分：（1）绪论；（2）总论：四大基本组织（上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织）；（3）各论：器官系统（神经系统、眼与耳、循环系统、皮肤、免疫系统、内分泌系统、消化系统、呼吸系统、泌尿系统、男性生殖系统、女性生殖系统）。学习目的：达到掌握正常人体组织器官微细结构及其相关功能的知识。胚胎学分二部分：（1）绪论、总论（人胚发生和早期发育）；（2）各论：器官发生（颜面和四肢的发生、消化系统和呼吸系统的发生、泌尿系统和生殖系统的发生、心血管系统的发生、神经系统和眼耳的发生、畸形学概述）。学习目的：达到掌握个体发生、发育及其发生机理的知识。第1页/共51页第一章第一章 组织学绪论组织学绪论

2、第2页/共51页组织学是一门什么样的科学？组织学在医学研究体系中的地位是什么？组织学需要掌握的基本内容研究方法第3页/共51页 组织学组织学:是研究机体是研究机体微细结构微细结构和和相关功能相关功能的科学。的科学。A.微细结构微细结构:1.光学显微镜光学显微镜(Light microscope，LM):计量单位是微米计量单位是微米(m)。(1 m=0.001 mm)。2.电子显微镜电子显微镜(Electron microscope，EM):计量单位是计量单位是纳纳米米(nm)。(1 nm=0.001 m)。第4页/共51页光学显微镜基本结构光学显微镜基本结构：1.照明灯照明灯(Lamp)2.聚

3、光器聚光器(Condenser)3.载物台和切片夹载物台和切片夹(Mechanical stage and specimen retainer)4.推进器推进器(Mechanical stage adjustment knob)5.物镜物镜(Objectives)6.粗细螺旋粗细螺旋(Course and fine focus knob)7.目镜目镜(Oculars)8.照相机等接口照相机等接口(Connection to camera,etc.)第5页/共51页EM技术技术:1.EM可分为透射电可分为透射电镜镜(TEM)和扫描电镜和扫描电镜(SEM)2类。类。2.EM的原理和的原理和LM相相

4、似，但用电子束代似，但用电子束代替光线，磁场代替替光线，磁场代替玻璃透镜。分辨率玻璃透镜。分辨率约为约为0.2 nm。第6页/共51页(1)(1)(1)(1)透射电镜（透射电镜（透射电镜（透射电镜（EMEM）:观察观察观察观察C C C C内部更细微的结构内部更细微的结构内部更细微的结构内部更细微的结构,即即即即超微结构超微结构超微结构超微结构。第7页/共51页(2)扫描电镜扫描电镜观察组织观察组织C的的表面立体结构表面立体结构。第8页/共51页B.相关功能相关功能:微观结构和其功能相适应，反之亦然。微观结构和其功能相适应，反之亦然。C.人体结构的人体结构的4个层次个层次:1.细胞细胞(Cel

5、l):人体结构的基本结构和功能单位。人体结构的基本结构和功能单位。2.组织组织(Tissue):由一群结构和功能相同或相似的细胞由一群结构和功能相同或相似的细胞(及其细胞间质及其细胞间质)构成。人体内有构成。人体内有4种基本组织：上皮组种基本组织：上皮组织，结缔组织，肌组织和神经组织。织，结缔组织，肌组织和神经组织。3.器官器官(Organ):由组织有机地结合起来而构成。由组织有机地结合起来而构成。4.系统系统(System):由结构相似且功能相关的器官构成。由结构相似且功能相关的器官构成。第9页/共51页细胞细胞（cellC）组织组织（tissue）器官器官（organ）系统系统（syste

6、m）第10页/共51页研究内容研究内容研究内容研究内容:细胞、组织、器官细胞、组织、器官细胞、组织、器官细胞、组织、器官和和和和系统系统系统系统几部分几部分几部分几部分,又称又称又称又称显微解剖学显微解剖学显微解剖学显微解剖学。第11页/共51页细胞细胞细胞细胞l l C C膜膜膜膜、C C质、质、质、质、C C核核核核l l 是人体结构和功能的最小单位是人体结构和功能的最小单位是人体结构和功能的最小单位是人体结构和功能的最小单位l l 光学显微镜（光学显微镜（光学显微镜（光学显微镜（light microscopelight microscopeLMLM）即可观察到。即可观察到。即可观察到。

7、即可观察到。第12页/共51页细胞膜细胞膜细胞膜细胞膜细胞核细胞核细胞核细胞核细胞质细胞质细胞质细胞质卵细胞卵细胞第13页/共51页 组织组织:结构相同或相似的结构相同或相似的C C群群及及 C C外基质外基质构成。构成。l l 四大基本组织：四大基本组织：上皮组织上皮组织 结缔组织结缔组织 肌组织肌组织 神经组织神经组织第14页/共51页器官器官器官器官:不同的组织按一定的比例、数量及方式组合成器官。不同的组织按一定的比例、数量及方式组合成器官。不同的组织按一定的比例、数量及方式组合成器官。不同的组织按一定的比例、数量及方式组合成器官。系统系统系统系统:若干功能相关的器官构成系统。若干功能相

8、关的器官构成系统。若干功能相关的器官构成系统。若干功能相关的器官构成系统。第15页/共51页细胞细胞细胞细胞组织组织组织组织器官器官器官器官系统系统系统系统组织学各论组织学各论组织学各论组织学各论组织学总论组织学总论组织学总论组织学总论第16页/共51页 1.1.光学显微镜光学显微镜(光镜光镜)的发明的发明 Light microscope Light microscope（LM)LM)2.2.细胞学说的提出和组织学的建立细胞学说的提出和组织学的建立 十九世纪三大发现十九世纪三大发现 3.3.电子显微镜电子显微镜(电镜电镜)的发明和超微的发明和超微 结构的发现结构的发现Electron mic

9、roscopeElectron microscope（EMEM）亚细胞水平：亚细胞水平：0.20.2um-0.2nmum-0.2nm 4.4.当代组织学当代组织学二.组织学的发展简史和当代组织学第17页/共51页 问题问题 解决方法解决方法 观察对象太小观察对象太小 放大放大 显微镜显微镜 观察对象无色，无反差观察对象无色，无反差 染色染色（HEHE染色染色）观察对象生化成分不同观察对象生化成分不同 细胞化学细胞化学、免疫组织化学免疫组织化学 观察对象是活体观察对象是活体 培养培养组织胚胎学研究技术组织胚胎学研究技术第18页/共51页 苏木精苏木精-伊红伊红染色法染色法 苏木精苏木精：碱性染料

10、，使：碱性染料，使C C核核内的染色质及内的染色质及C C质内的核糖体染成质内的核糖体染成紫蓝色紫蓝色。伊红伊红：酸性染料，：酸性染料，C C质质和和C C外基质中的成分染成外基质中的成分染成红色红色。最常用的组织切片染色法最常用的组织切片染色法最常用的组织切片染色法最常用的组织切片染色法HE染色染色第19页/共51页苏木精苏木精（Hematoxylin）伊红伊红（Eosin）染色染色碱性染料碱性染料酸性染料酸性染料将嗜碱性物质将嗜碱性物质（本身酸本身酸性性）染成蓝色染成蓝色将嗜酸性物质将嗜酸性物质（本身碱本身碱性性）染成红色染成红色细胞核中的细胞核中的DNA、RNA细胞质中细胞质中的RNA细

11、胞质细胞质、膜性结构膜性结构（线粒体线粒体、溶酶体溶酶体、滑面内质网滑面内质网）HE染色第20页/共51页中性中性中性中性:对于两种染料亲和力都不对于两种染料亲和力都不对于两种染料亲和力都不对于两种染料亲和力都不强的性质强的性质强的性质强的性质,HEHE染色着色淡。染色着色淡。染色着色淡。染色着色淡。第21页/共51页第22页/共51页(一一)光镜技术光镜技术 1.1.石蜡切片术石蜡切片术 取材和固定取材和固定;脱水和包埋脱水和包埋;切片和染色切片和染色;封片。封片。第23页/共51页1.切片切片(Section):将组织切薄使光线可以透过。将组织切薄使光线可以透过。a.固定固定(Fixati

12、on):为保存新鲜组织的微观结构，尽快将组织浸入到酒为保存新鲜组织的微观结构，尽快将组织浸入到酒精，甲醛，苦味酸，精，甲醛，苦味酸，Bouins 液或液或Zenkers液等固定剂中。液等固定剂中。第24页/共51页b.石蜡包埋石蜡包埋(Paraffin embedding):*脱水脱水(Dehydration):用浓度逐渐升高的酒精用浓度逐渐升高的酒精(70100%)将组织中的水完全置换出来。将组织中的水完全置换出来。*透明透明(Clearing):用二甲苯完全置换出酒精。用二甲苯完全置换出酒精。*浸蜡浸蜡(Infiltration):在在6062C时，用液态石蜡时，用液态石蜡完全置换出二甲苯

13、。室温时石蜡凝固成固态，内含完全置换出二甲苯。室温时石蜡凝固成固态，内含待切组织。待切组织。第25页/共51页切片切片:用切片机将组织切成用切片机将组织切成120m厚的蜡片，然后将其厚的蜡片，然后将其放到放到温水上，待其完全展开后，温水上，待其完全展开后，捞到有粘附剂的载玻片上捞到有粘附剂的载玻片上.第26页/共51页 其他切片技术其他切片技术:火棉胶包埋火棉胶包埋,冰冻冰冻 切片切片,涂片涂片,铺片铺片,磨片。磨片。其他染色法其他染色法:硝酸银硝酸银神经细胞神经细胞(黑黑)。第27页/共51页第28页/共51页第29页/共51页镀银染色 示大脑皮质神经细胞第30页/共51页第31页/共51页

14、1.1.透射电镜透射电镜 必须制备超薄切片必须制备超薄切片 用戊二醛和锇酸两次固定，脱水、包埋，用戊二醛和锇酸两次固定，脱水、包埋，用超薄切片机切片，再经醋酸铀和柠檬酸铅用超薄切片机切片，再经醋酸铀和柠檬酸铅染色，因为不同细胞成分的密度及吸附重金染色，因为不同细胞成分的密度及吸附重金属铀、铅、锇的程度不同，发生散射，产生属铀、铅、锇的程度不同，发生散射，产生电镜照片的黑和灰色电镜照片的黑和灰色(二)电镜技术第32页/共51页第33页/共51页扫描电镜技术不需要制备切片，组织块用戊二醛和锇酸固定后，戊二醛和锇酸固定后，戊二醛和锇酸固定后，戊二醛和锇酸固定后，脱水、干燥，再于表面喷镀薄层碳与金属膜

15、脱水、干燥，再于表面喷镀薄层碳与金属膜脱水、干燥，再于表面喷镀薄层碳与金属膜脱水、干燥，再于表面喷镀薄层碳与金属膜第34页/共51页巨嗜细胞细胞分裂第35页/共51页2.扫描电镜扫描电镜观察组织观察组织C的的表面立体结构表面立体结构。第36页/共51页 组织化学术组织化学术:为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学原理和技术为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学原理和技术,与组织学技术相结合而产生的技术与组织学技术相结合而产生的技术,能在组织切片定性、定位、定量地显示某能在组织切片定性、定位、定量地显示某种物质的存在与否以及分布状态。种物质的存在与否以及分布状态。细胞化学术细胞化

16、学术:前述技术用于游离细胞样品则称为前述技术用于游离细胞样品则称为(cytochemistry)cytochemistry)。(三)组织化学术第37页/共51页1.一般组织化学术 基本原理是在切片上添加某种试剂,和组织 中待测反应物发生反应,其终产物或为有色 沉淀,以用光镜观察,或为重金属沉淀以用电 镜观察。(1)糖类:PAS反应,pariodic acid Schiff reaction (2)脂类:油红、尼罗蓝及苏丹类染料 (3)核酸:福而根反应DNA;甲基绿-派若宁反应DNA绿色,RNA红色。(4)酶类:酶组织化学术。通过显示酶的 催化活性以表示酶的存在。第38页/共51页第39页/共5

17、1页 2.2.免疫组织化学术免疫组织化学术immunohistochemistry:immunohistochemistry:是根据抗原与抗体特异性是根据抗原与抗体特异性结合的原理结合的原理,检检 测组织中肽和蛋白质的技术。肽和蛋白质均具有抗原性测组织中肽和蛋白质的技术。肽和蛋白质均具有抗原性,当把人或动物的当把人或动物的某种蛋白质作为抗原注入另一种动物某种蛋白质作为抗原注入另一种动物,其体内则会产生针对该抗原的特异性其体内则会产生针对该抗原的特异性抗体。将抗体从动物血清中提出后抗体。将抗体从动物血清中提出后,与标记物相结合与标记物相结合,即成为标记抗体。即成为标记抗体。第40页/共51页 用

18、标记抗体与组织切片孵育用标记抗体与组织切片孵育,抗体抗体 则与组织中相应抗原特异性结合在则与组织中相应抗原特异性结合在 显微镜下通过观察标记物而获知肽显微镜下通过观察标记物而获知肽 或蛋白质的分布部位。常用的标记或蛋白质的分布部位。常用的标记 物有物有荧光素荧光素,辣根过氧化物酶、胶辣根过氧化物酶、胶 体金体金。第41页/共51页第42页/共51页第43页/共51页 3.原位杂交技术即核酸分子杂交组 织化学术。其原理为用带有标记物的已知碱基序列的核酸探针，与细胞内待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性原位结合，即杂交。然后，通过对标记物的显示和检测而获得待测核酸的有无及相对量。常用的标记物有放射

19、性核素（35S，32P，3H等）和地高辛。第44页/共51页原位杂交术（地高辛标记）第45页/共51页(四)放射自显影技术(五)图象分析术(六)细胞培养术和组织 工程第46页/共51页第47页/共51页学习组织学应注意的问题学习组织学应注意的问题:1.体内结构为立体的，三维的，而课本、讲义和显微镜下体内结构为立体的，三维的，而课本、讲义和显微镜下的结构均为平面的，二维的。的结构均为平面的，二维的。2.学习组织学应注意静态与动态、理论与实践相结合学习组织学应注意静态与动态、理论与实践相结合第48页/共51页为什么要学习组织学为什么要学习组织学?地位地位1.组织学又叫微观解剖学组织学又叫微观解剖学

20、(Microanatomy)，是解剖学知识的进一步完善。，是解剖学知识的进一步完善。2.结构是功能的基础，学好组织学是学好结构是功能的基础，学好组织学是学好生理学生理学(Physiology)的基础。的基础。3.只有了解正常结构，才能学习其异常变只有了解正常结构，才能学习其异常变化。因此组织学是病理学化。因此组织学是病理学(Pathology)的的基础。基础。第49页/共51页怎样学习组织学怎样学习组织学?1.1.对组织学内容的审视角度对组织学内容的审视角度对组织学内容的审视角度对组织学内容的审视角度2.2.注意形态与功能的统一注意形态与功能的统一注意形态与功能的统一注意形态与功能的统一3.3.注意培养观察与空间思维的能力注意培养观察与空间思维的能力注意培养观察与空间思维的能力注意培养观察与空间思维的能力第50页/共51页感谢您的观看！第51页/共51页