硕蛋白质化学.pptx

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1、一、蛋白质化学蛋白质是由许多氨基酸单位通过肽键连接起来的，具有特定分子结构的高分子化合物。通常将氨基酸残基数目在50个以上（分子量在6000道尔顿以上），且具有特定空间结构的肽称蛋白质；凡氨基酸残基数目在50个以下，且无特定空间结构者称多肽。蛋白质在生物体内分布广、含量高，具有重要的生物学功能。第1页/共108页7）氧化供能第2页/共108页蛋白质的元素组成1 1、一切蛋白质均含有、一切蛋白质均含有C C、H H、O O和和N N四种元素，部四种元素，部分蛋白质含分蛋白质含S S，某些蛋白质还含有少量金属元，某些蛋白质还含有少量金属元素。素。2 2、蛋白质是体内含量最多的含氮化合物，平均、蛋白

2、质是体内含量最多的含氮化合物，平均含氮含氮16%16%。只要测出生物样品中的含氮量，再。只要测出生物样品中的含氮量，再乘以乘以6.256.25，即可换算出蛋白质的含量（样品含，即可换算出蛋白质的含量（样品含氮量氮量 6.25=6.25=样品中蛋白质含量）。样品中蛋白质含量）。第3页/共108页（一）氨基酸（一）氨基酸(amino acids)(amino acids)(amino acids)(amino acids)组成蛋白质的基本单位是氨基酸。将天然的蛋白质完全水解，最后都可得到约二十种不同的氨基酸。除脯氨酸和甘氨酸外，其余均属于L-L-氨基酸。这2020种氨基酸都有各自的遗传密码。第4页

3、/共108页在体内，一些特殊蛋白质分子中还含有其它氨基酸，如胱氨酸、胶原蛋白中的羟脯氨酸及羟赖氨酸等，它们都是在蛋白质生物合成之后，相应的氨基酸残基被修饰形成的。第5页/共108页氨 基 酸 的 分 类氨基酸按侧链的理化性质(极性)分为4组，分别是：非极性、疏水性氨基酸:Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Pro极性、中性氨基酸:Trp、Ser、Tyr、Cys、Met、Asn、Gln、Thr酸性氨基酸:Asp、Glu碱性氨基酸:His、Lys、Arg第6页/共108页甘氨酸甘氨酸 glycine Gly G 5.97丙氨酸丙氨酸 alanine Ala A 6.00缬氨酸缬氨酸 v

4、aline Val V 5.96亮氨酸亮氨酸 leucine Leu L 5.98 异亮氨酸异亮氨酸 isoleucine Ile I 6.02 苯丙氨酸苯丙氨酸 phenylalanine Phe F 5.48脯氨酸脯氨酸 proline Pro P 6.301.非极性疏水性氨基酸非极性疏水性氨基酸第7页/共108页色氨酸色氨酸 tryptophan Try W 5.89丝氨酸丝氨酸 serine Ser S 5.68酪氨酸酪氨酸 tyrosine Try Y 5.66 半胱氨酸半胱氨酸 cysteine Cys C 5.07 蛋氨酸蛋氨酸 methionine Met M 5.74天冬酰胺

5、天冬酰胺 asparagine Asn N 5.41 谷氨酰胺谷氨酰胺 glutamine Gln Q 5.65苏氨酸苏氨酸 threonine Thr T 5.602.极性中性氨基酸极性中性氨基酸第8页/共108页天冬氨酸天冬氨酸 aspartic acid Asp D 2.97谷氨酸谷氨酸 glutamic acid Glu E 3.22赖氨酸赖氨酸 lysine Lys K 9.74精氨酸精氨酸 arginine Arg R 10.76组氨酸组氨酸 histidine His H 7.593.酸性氨基酸酸性氨基酸4.碱性氨基酸碱性氨基酸第9页/共108页根据R的化学结构:（1）含巯基的氨

6、基酸：Met、Cys（2）芳香族氨基酸：Phe、Tyr、Trp（3）含羟基的氨基酸：Ser、Thr（4）杂环亚氨基酸：Pro第10页/共108页（二）氨基酸的理化性质：（二）氨基酸的理化性质：1 1两性解离及等电点：氨基酸分子是一种两性电解质。通过改变溶液的pHpH可使氨基酸分子的解离状态发生改变。氨基酸分子带有相等正、负电荷时，溶液的pHpH值称为该氨基酸的等电点（pIpI）。2 2紫外吸收性质：组成天然蛋白质分子的2020种氨基酸中，只有色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸对紫外光有光吸收。其吸收峰在280nm280nm左右，以色氨酸吸收最强。可利用此性质采用紫外分分光度法测定蛋白质的含量。3 3茚三

7、酮反应：氨基酸可与茚三酮缩合产生蓝紫色化合物，其最大吸收峰在570nm570nm。可利用此性质测定氨基酸的含量。第11页/共108页蛋白质的颜色反应PH57茚三酮蛋白质的理化性质蛋白质的理化性质第12页/共108页（二）肽(peptides)肽键(peptide bond):(peptide bond):就是一个氨基酸的就是一个氨基酸的-羧基与另一个氨基羧基与另一个氨基酸的酸的-氨基脱水缩合形成的键。氨基脱水缩合形成的键。氨基酸之间通过肽键联结起来的化合物称为氨基酸之间通过肽键联结起来的化合物称为肽肽。第13页/共108页多肽链具有方向性，头端为N N端，尾端为C C端。N N端 C C端有自

8、由氨基的一端称氨基末端(aminoterminal)或N端，有自由羧基的一端称为羧基末端(carboxylterminal)或C端。氨基酸残基(reside):主链、侧链生物体内具有一定生物学活性的肽类物质称生物活性肽。重要的有谷胱甘肽、神经肽、肽类激素等。第14页/共108页（三）蛋白质的结构层次蛋白质的分子结构可人为划分为一、二、三、四级结构。除一级结构外，蛋白质的二、三、四级结构均属于空间结构，即构象(conformation)。构象是由于有机分子中单键的旋转所形成的。蛋白质的构象通常由非共价键（次级键）来维系。蛋白质的一级结构就是指多肽链中氨基酸残基的排列顺序，即氨基酸序列。l一级结构

9、是蛋白质最基本的结构，它是由基因上遗传密码的排列顺序所决定的第15页/共108页 胰岛素（InsulinInsulin）由5151个氨基酸残基组成，分为A A、B B两条链。A A链2121个氨基酸残基，B B链3030个氨基酸残基。第16页/共108页分子病(moleculardiseases)：蛋白质一级结构变异导致功能异常，引起的疾病。镰刀状红细胞贫血：由于基因突变导致血红蛋白-链第六位氨基酸残基由谷氨酸改变为缬氨酸，血红蛋白的亲水性明显下降，从而发生聚集，使红细胞变为镰刀状。第17页/共108页镰状细胞贫血（sick-cellanemia）从患者红细胞中鉴定出特异的镰刀型或月牙型细胞。

10、-链1234567Hb-AVal-His-Leu-Thr-Pro-Glu-LysHb-SVal-His-Leu-Thr-Pro-Val-LysVal取代Glu含氧-HbAO2O2粘性疏水斑点含氧HbS脱氧HbS疏水位点血红蛋白分子凝集第18页/共108页蛋白质的二级结构指多肽链中主链原子的局部空间排布即构象，不涉及侧链部分的构象。肽单元(peptide unite)：由参与肽键的6个原子Cl，C，O，N，H，C2构成的结构单位，它们位于同一平面上，是蛋白质二级结构的基本单位。又称为肽键平面。第19页/共108页 肽键(C-N)(C-N)有一定程度双键性能，不能自由旋转。C C分别与N N和C

11、C相连的键都是典型的单键，可以自由旋转。第20页/共108页多肽链可以看成是由C串联起来的无数个酰胺平面组成的。多肽链主链在空间沿一定方向可形成-螺旋、片层、转角或无规卷曲等特定空间构象，二级结构形式由氢键维系。第21页/共108页（1）-螺旋（-helix）Pauling和Corey于1965年提出。右手螺旋第22页/共108页右手螺旋左手螺旋第23页/共108页3)R侧链基团伸向螺旋的外侧。RRRRRRRRR螺旋的横截面4）Pro的N上缺少H，不能形成氢键，经常出现在-螺旋的端头，它改变多肽链的方向并终止螺旋。l极大的R R侧链基团（存在空间位阻）l连续存在的R R侧链带有相同电荷的R R

12、侧链（同种电荷的互斥效应）结构要点：1）螺旋的每圈有3.6个氨基酸。2）维持螺旋稳定的作用力是氢键（hydrogenbond）。第24页/共108页（2）-折叠结构（-pleatedsheet）-折迭是由若干肽段或肽链排列起来所形成的相当伸展的片层构象。CCCCCCRRRRRRNNCNNCCC平行反平行-折叠片中，相邻多肽链平行或反平行（较稳定）。第25页/共108页第26页/共108页第27页/共108页（3）-转角（-turn）为了紧紧折叠成紧密的球蛋白，多肽链常常反转方向，成发夹形状。一个氨基酸的羰基氧以氢键结合到相距的第四个氨基酸的氨基氢上。N1CHCC2CHNHO=C3CHNC4CH

13、NRRHOHRROHO-转角经常出现在连接反平行-折叠片的端头。第28页/共108页（4）无规卷曲没有一定规律的松散肽链结构。酶的活性部位。模体（motif)或超二级结构第29页/共108页第30页/共108页结构域（domain)是球状蛋白质的折叠单位。多肽链在超二级结构的基础上进一步绕曲折叠成紧密的近似球行的结构，具有部分生物功能。第31页/共108页蛋白质三级结构的稳定主要靠次级键，包括氢键、疏水键、盐键以及范德华力(VanderWasls力)等。肌红蛋白血红蛋白蛋白质的三级结构指多肽链上的所有原子（包括主链和侧链）在三维空间的分布。即多肽链在二级结构基础上折叠、盘旋所形成的棒状、球形或

14、椭球形等构象。第32页/共108页第33页/共108页l维系三级结构的化学键主要是非共价键（次级键），如疏水键、氢键、盐键、范德华氏（van der Waals)van der Waals)引力等，但也有共价键，如二硫键等。第34页/共108页蛋白质的四级结构l是指由多条各自具有一、二、三级结构的肽链通过是指由多条各自具有一、二、三级结构的肽链通过非共价键连接起来的结构形式；各个亚基在这些蛋白非共价键连接起来的结构形式；各个亚基在这些蛋白质中的空间排列方式及亚基之间的相互作用关系。质中的空间排列方式及亚基之间的相互作用关系。l这种蛋白质分子中，最小的单位通常称为亚基或亚这种蛋白质分子中，最小的

15、单位通常称为亚基或亚单位单位Subunit，它一般由一条肽链构成，无生理活性；，它一般由一条肽链构成，无生理活性；l由多个亚基聚集而成的蛋白质常常称为寡聚蛋白；由多个亚基聚集而成的蛋白质常常称为寡聚蛋白；l并非所有蛋白质分子均具有四级结构形式，三级结构是含单一肽链的蛋白质最高结构形式。第35页/共108页图血红蛋白亚基结合模式图第36页/共108页第37页/共108页第38页/共108页第39页/共108页共价键次级键化学键肽键一级结构氢键二硫键二、三、四级结构疏水键盐键范德华力三、四级结构蛋白质分子中的共价键与次级键第40页/共108页分子伴侣分子伴侣（chaperon）概念概念概念概念：帮

16、助新生多肽链正确折叠的一：帮助新生多肽链正确折叠的一 类蛋白质。类蛋白质。作用：作用：1.可逆地与未折叠肽段的疏水部分可逆地与未折叠肽段的疏水部分 结合，防止错误折叠。结合，防止错误折叠。2.与错误折叠的肽段结合，诱导其与错误折叠的肽段结合，诱导其 正确折叠。正确折叠。3.对蛋白质分子中二硫键的正确形对蛋白质分子中二硫键的正确形 成起重要作用。成起重要作用。第41页/共108页蛋白质的高级结构表现生物学功能。随蛋白质的变性或复性，蛋白质的生物学活性丧失或恢复，这一事实不仅证明一级结构决定高级结构，同时也说明高级结构表现生物学功能；蛋白质的别构效应(如血红蛋白结合氧、变构酶的调节机制)也是证明高

17、级结构与生物学功能密切相关的典型示例。第42页/共108页HbHb和和MbMb的氧解离曲线不同，前者为的氧解离曲线不同，前者为S S状曲线状曲线，后者为，后者为直角双曲线直角双曲线。HbHb与与0 02 2结合存在结合存在协同效应协同效应和和变构效应变构效应。第43页/共108页协同效应：Hb分子中一条链结合O2后，可以导致其构象的变化，使其它链结合O2的能力突然增强(正协同效应)。第44页/共108页别构效应：是某些寡聚蛋白质特有的现象。是指蛋白质与效应物结合改变蛋白质的构象，进而改变蛋白质的生物活性。在没有结合氧气时，Hb的四条链之间结合紧密，这种构象称为T态，由于屏蔽了分子表面疏水的空穴

18、，使Hb分子结合O2的能力降低。当一条链结合了氧气之后，Hb的四级结构随之改变，亚基间盐键断裂，这种构象称为R态，此时链表面疏水的空穴暴露在外，结合氧气的能力得以增强。Hb的另一个别构效应是波尔效应：H+和CO2对Hb与氧气结合的影响。表现为H+和CO2促进Hb释放O2，氧合曲线右移。另外，DPG降低Hb与O2的结合能力。第45页/共108页第46页/共108页第47页/共108页第48页/共108页第49页/共108页（五）蛋白质的理化性质1蛋白质的两性解离性质在酸性溶液中，蛋白质分子解离为阳离子；在碱性溶液中解离为阴离子。在某一特定pH的环境中，蛋白质分子不解离，或解离为阳离子和阴离子的趋

19、势相等，即成兼性离子。使蛋白质分子呈兼性离子的pH称为蛋白质的等电点(pI)。各种电泳法、离子交换层析法分离蛋白质，测定相对分子质量及酸、碱、盐沉淀蛋白质即是这一性质的应用。第50页/共108页两性电离阳离子PHPI兼性离子PH=PI2蛋白质的高分子特性 蛋白质分子是高分子化合物（分子量在1万到数十万之间），呈球状或纤维状。第51页/共108页3.亲水胶体特性：影响蛋白质溶液胶体稳定的因素有两个，一为电荷状态，二为蛋白质颗粒外层的水化膜。+带正电荷的蛋白质带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质在等电点的蛋白质水化膜水化膜+带正电荷的蛋白质带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白

20、质带负电荷的蛋白质不稳定的蛋白质颗粒不稳定的蛋白质颗粒酸酸碱碱酸酸碱碱酸酸碱碱脱水作用脱水作用脱水作用脱水作用脱水作用脱水作用第52页/共108页4.蛋白质的变性与复性在某些物理和化学因素作用下，蛋白质特定的空间构象被破坏，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失，称为蛋白质的变性(denaturation)。蛋白质的变性主要发生二硫键和非共价键的破坏，不涉及级结构的改变。在医学上，变性因素常被应用来消毒及灭菌。防止蛋白质变性是有效保存蛋白质制剂(如疫苗等)的必要条件。第53页/共108页l变性蛋白质的性质改变：物理性质：旋光性改变，溶解度下降，沉降率升高，粘度升高，光吸收度增加等。化学性质：

21、官能团反应性增加，易被蛋白酶水解。生物学性质：原有生物学活性丧失，抗原性改变。蛋白质在体外变性后，绝大多数情况下是不能复性的；如变性程度浅，蛋白质分子的构象未被严重破坏；或者蛋白质具有特殊的分子结构，并经特殊处理则可以复性。第54页/共108页盐酸胍第55页/共108页l 蛋白质分子相互聚集而从溶液中析出的现象称为沉淀（protein recipitation）。l加热使蛋白质变性并凝聚成块状称为凝固(proteincoagulation)。l 变性的蛋白质不一定沉淀，沉淀的蛋白质不一定都是变性的,只有凝固的蛋白质一定发生变性并沉淀。蛋白质的变性、沉淀和凝固：第56页/共108页组成蛋白质的氨

22、基酸中,酪氨酸和色氨酸具有吸收紫外光能力,吸收高峰在275280nm波长处,苯丙氨酸在260nm处有弱的紫外吸收能力。5蛋白质的紫外线吸收这是由蛋白质多肽链中芳香族氨基酸引起的，其对紫外线最大吸收波长是在280nm。紫外线吸收特性也可用于测定蛋白质含量。Aa（氨基酸）m（最大吸收波长：nM）E（消 光 系 数：A/Mol/L）Phe2572*102Tyr2751.4*103Trp2805.6*103第57页/共108页6.蛋白质的颜色反应：可以用来定量定性测定蛋白质考马斯亮蓝、氨基黑是染料。它们可与蛋白质多肽链中酚羟基呈色反应。银染法：银氨络离子可与蛋白质结合，经甲醛还原析出金属银，使电泳蛋白

23、质区带呈黄色。福林酚(Folin-Phenol)试剂反应：在碱性条件下，CuSO4与蛋白质生成蛋白质-铜复合物，再被磷钨酸-钼酸还原生成蓝色物质。主要由蛋白质中Tyr的酚基与磷钼酸和磷钨酸的反应。第58页/共108页（六）蛋白质的分离和纯化（六）蛋白质的分离和纯化1.1.根据分子大小的纯化方法（1 1）透析和超滤 蛋白质不能透过半透膜，因此采用透析方法可将蛋白质与小分子化合物彼此分离。（2 2）离心超速离心：超速离心：利用物质密度的不同，经超速离心后，分布于不同的液层而分离。超速离心也可用来测定蛋白质的分子量，蛋白质的分子量与其沉降系数S S成正比。S：单位离心场的沉降速度。1S=110-13

24、秒 第59页/共108页(3)凝胶过滤层析（分子筛）：在通过具有分子筛效应的凝胶(如凝胶葡聚糖)时，较大分子的蛋白质颗粒先滤出，较小分子的颗粒后滤出。利用蛋白质这一特性也可分离蛋白质，或测定相对分子质量。第60页/共108页2 2利用溶解度差别的纯化方法(1)(1)等电点沉淀 (2)(2)盐析 在蛋白质混合物中大量加入硫酸铵、氯化钠等中性盐，原来作为溶剂的大部分水变成盐离子的水化水，迫使蛋白质的疏水基团暴露出来，蛋白质因疏水作用而聚集、沉淀，最先沉淀的应当是表面 疏水基团最多的蛋白质。有机溶剂(丙酮、乙醇等)可以使蛋白质在低温下沉淀；在低温下控制温度能够使蛋白质分级沉淀，因为大部分球蛋白的溶解

25、度随温度的升高而增加。3 3根据电荷不同的纯化方法(1)(1)电泳 带电颗粒(蛋白质、核酸等)携带的净电荷不同，在电场中向其电性相反的电极移动。根据支持物的不同，电泳分为薄膜电泳、凝胶电泳等。第61页/共108页凝胶电泳常用的支持物有琼脂糖和聚丙烯酰胺等。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)(PAGE)的分辨率较高，当测定蛋白质的相对分子量时加入SDS(SDS(十二烷基硫酸钠)，SDSSDS携带的负电荷比蛋白质的电荷多，使蛋白质变性，而且消除蛋白质各组分在电荷、形状方面的差异，多肽链的质量成为决定迁移速度的惟因素。等电聚焦(IEF)(IEF)的原理是：在聚丙烯酰胺凝胶中含有两性电解质连续的线性pHp

26、H梯度，不同的蛋白质将分别“聚焦”在各自的等电点位置停止前进，形成一条条狭窄的区带，分辨率较高，可分离pIpI相差0 001 pH01 pH单位的蛋白质。双向电泳的大致步骤为：首先蛋白质混合物进行IEFIEF，然后将疑胶条取出进行SDSPAGESDSPAGE，电泳方向与IEFIEF垂直，可研究细胞蛋白质表达谱。毛细管电泳在内径很细(约50 um)50 um)的石英管中进行，以利于散热，特点是高效、快速和微量。第62页/共108页(2)(2)离子交换层析 以离子交换树脂作为固定相，其表面含有基团，吸引携带相反电荷的蛋质分子。利用盐离子浓度梯度，可以将吸附于树脂的蛋白质有选择地洗脱下来。高效液相层

27、析(HPLC)(HPLC)的树脂颗粒很细(直径只有普通树脂的几十分之一)，流动相必须借助于高压泵才能获得正常流速，分辨率高。所有经典的液相层析均可通过HPLCHPLC进行，例如离子交换、凝胶过滤和亲和层析等。4 4利用对配体的生物亲和力的纯化方法 亲和层析根据蛋白质的生物学特异性(对配体的亲和力)进行分离。如果将抗体(或酶的底物)作为配体共价连接在树脂上，就能使相应的抗原(或者特异的酶蛋白)吸附于亲和层析柱上。第63页/共108页A A1 1型题：-答题说明每一道题下面都有A A、B B、C C、D D、E E五个备选答案。在答题时，只能从中选择一个最合适的答案，将答题卡上相应的字母圈掉。-第

28、64页/共108页18.测得一蛋白质样品中的氮含量为0.40g，此样品约含蛋白质多少克A.2.00gB.2.50gC.6.40gD.3.00gE.6.25g第65页/共108页24.24.构成蛋白质分子的氨基酸的特点是A A.都含有-羧基B.B.都含有-氨基C.C.都含有-侧链D.D.都含有不对称碳原子E.E.都具有旋光性第66页/共108页4 45 5.能出现在蛋白质分子中的下列氨基酸，哪一种没有遗传密码 A A.色氨酸 B B.蛋氨酸 C C.谷氨酰胺 D D.脯氨酸 E E.羟赖氨酸 23当溶液的pH与某种氨基酸的pI一致时，该氨基酸在此溶液中的存在形式是 A兼性离子 B非兼性离子 C带

29、单价正电荷 D疏水分子 E带单价负电荷 第67页/共108页26.26.蛋白质的二级结构是指A.A.多肽链氨基酸的排列顺序B B.多肽链主链骨架的构象C.C.蛋白质分子所有原子的构象D.D.蛋白质分子亚基的构象E.E.蛋白质构象的改变第68页/共108页10.10.存在于蛋白质分子中的结合力，下列哪项不是次级键A.A.范德华氏力B.B.氢键C.C.盐键D.D.疏水键E E.肽键第69页/共108页60.60.蛋白质的三级结构是指A.A.亚基的立体排布B.B.多肽链的主链构象C.C.多肽链的侧链构象D D.蛋白质分子或亚基所有原子的构象E.E.肽键平面的构象第70页/共108页37.37.血清白

30、蛋白（pI=4.7pI=4.7）在下列哪种pHpH值溶液中带正电荷?A A.pH 4.0.pH 4.0B.pH 5.0B.pH 5.0C.pH 6.0C.pH 6.0D.pH 7.0D.pH 7.0E.pH 8.0E.pH 8.0第71页/共108页7.7.对具有四级结构的蛋白质分子进行末端分析时，所得结果应是A.A.只有一个自由的-氨基和-羧基B.B.只有自由的-氨基而无自由的-羧基C.C.只有自由的-羧基而无自由的-氨基D.D.既无自由的-氨基也无自由的-羧基E E.有一个以上的自由-氨基和-羧基第72页/共108页42.42.蛋白质分子中次级键的特点是A.A.数目多，键能高B B.数目多

31、，键能低C.C.参与主链结构与侧链结构的维系D.D.多为酰胺键E.E.只存在于亲水环境中第73页/共108页30.30.蛋白质的一级结构是指下面的哪种情况A.A.氨基酸的种类和数量B.B.分子中的各种化学键C.C.多肽链的形态和大小D D.氨基酸残基的排列顺序E.E.分子中的共价键第74页/共108页23.23.下列哪种氨基酸为非编码氨基酸A.A.半胱氨酸B.B.组氨酸C C.鸟氨酸D.D.丝氨酸E.E.亮氨酸第75页/共108页6.6.维系蛋白质二级结构的化学键是A.A.非共价键B.B.离子键C.C.范德华氏引力D.D.肽键E E.氢键第76页/共108页 42.42.蛋白质变性不包括 A.

32、A.氢键断裂 B.B.盐键断裂 C.C.疏水键断裂 D D.肽键断裂 E.E.二硫键断裂第77页/共108页39.39.变性蛋白的特点是A.A.不易被蛋白酶水解B.B.粘度下降C.C.溶解度增加D.D.颜色反应减弱E E.丧失原有的生物活性第78页/共108页2323蛋白质变性时，其溶液的黏度 A A降低 B B增高 C C不变D D增高或降低 E E增高或降低或不变163.163.分子伴侣可以协助蛋白质形成正确的空间构象.下列分子中,属于分子伴侣的是A.A.胰岛素原 B B.热休克蛋白 C.C.组蛋白 D.DNAD.DNA结合蛋白 E E胰岛素第79页/共108页19.19.处于等电点状态下

33、的蛋白质分子A.A.不含带电基团B B.含等量的正、负电荷基团C.C.在电场中向正极移动D.D.在溶液十分稳定E.E.在生理pHpH下多属此种状态第80页/共108页6565下列哪项不符合效应?浓度增高时，血红蛋白的氧解离曲线右移效应的机制能用别构作用来解释C C的效应实际上是由于降低而引起的D D血红蛋白的某些咪唑基质子化，使血红蛋白的 结构趋向紧密,-二磷酸甘油酸浓度增加，使血红蛋白的 氧解离曲线左移 第81页/共108页血红蛋白（HbHb）氧解离曲线呈S S形的原因是：A AHbHb含有Fe2+Fe2+B BHbHb含有四条肽链C CHbHb存在于红细胞内D DHbHb属于变构蛋白 E

34、E由于存在2 2，3-DDG3-DDG第82页/共108页A A2 2型题：-答题说明每一道题下面都有A A、B B、C C、D D、E E五个备选答案。在答题时，只能从中选择一个最合适的答案，将答题卡上相应的字母圈掉。-第83页/共108页已知类风湿因子通常是IgM，但并不总是IgM。那么，IgM(分子量950000）、IgA(分子量360000）和IgG(分子量150000）混合物在Sephadex-G200柱（分子筛）上层析时，会出现哪种洗脱情况?A.IgG最先洗出B.IgA最先洗出C.IgM最先洗出D.IgG先于IgM洗出E.IgA先于IgM洗出第84页/共108页 利用蛋白质颗粒带电

35、荷进行分离纯化的技术有：A、透析和薄层层析B、超速离心和超滤C、凝胶过滤D、亲和层析和免疫沉淀E、电泳和离子交换 第85页/共108页37.37.蛋白质在电场中移动的方向取决于A.A.蛋白质的分子量和它的等电点B.B.蛋白质所在溶液的pHpH值和离子强度C C.蛋白质的等电点和所在溶液的pHpH值D.D.蛋白质的分子量和所在溶液的pHpH值E.E.蛋白质的等电点所在溶液的离子强度第86页/共108页37.37.引起疯牛病（牛海绵脑病）的病原体是 A.A.一种DNA B.B.一种RNA C C.一种蛋白质 D.D.一种多糖 E.E.一种蛋白聚糖 第87页/共108页55.55.常温下能使沉淀出的

36、蛋白质保持天然活性的沉淀剂是A A.硫酸铵B.B.硫酸铜C.C.三氯醋酸D.D.酒精E.E.丙酮第88页/共108页47利用浓缩原理、分子筛和电荷原理分离蛋白质的技术称为：琼脂糖电泳醋酸纤维薄膜电泳不连续的聚丙烯酰胺凝胶电泳等电聚焦凝胶过滤 第89页/共108页19.19.利用分子筛原理来分离蛋白质的技术是A.A.阴离子交换层析B.B.阳离子交换层析C C.凝胶过滤D.D.亲和层析E.E.透析第90页/共108页61有一混合蛋白质溶液。所含5种蛋白质的pI分别为4.6、5.0、5.3、6.7和7.3，电泳时欲使其中4种泳向正极，电泳缓冲液的pH应是 A4.0 B5.0 C6.0 D7.0 E8

37、.0第91页/共108页B B型题：-答题说明 A A、B B、C C、D D、E E是备选答案。答题时，如果这道题只与答案A A有关，则请将答题卡上相应的字母A A圈掉；如果这道题只与答案B B有关，则请将相应的字母B B圈掉；余类推。每一备选答案可以选择一次或一次以上，也可以一次也不选。-第92页/共108页 A.-A.-螺旋B.-B.-折迭C.-C.-转角D.D.三股螺旋E.E.无规卷曲86.86.常见于多肽链折迭时进行180180回折处87.87.结构维系依赖于第一个氨基酸残基与第四个氨基酸残基形成氢键88.88.结构维系依赖于肽链或肽片段之间的氢键tccb第93页/共108页A.A.

38、凝胶过滤B.B.亲和层析C.C.离子交换层析D.D.醋酸纤维素薄膜电泳E.E.有机溶剂沉淀61.61.根据蛋白质的分子量不同进行分离纯化的方法62.62.根据蛋白质分子解离状态不同进行分离纯化的方法ac第94页/共108页A.A.亮氨酸B.B.脯氨酸C.C.赖氨酸D.D.半胱氨酸E.E.丝氨酸79.79.在生理条件下，能与酸性氨基酸生成盐键的氨基酸80.80.常使肽链转折的氨基酸81.81.其R R基在空间相聚可形成共价键的氨基酸cbd第95页/共108页A.A.表面电荷和水化膜B.B.氨基酸残基的连接方式C.C.溶液的离子强度D.D.溶液的温度E.E.蛋白质的等电点69.69.决定蛋白质在溶

39、液中稳定存在的因素70.70.决定蛋白质带电荷性质的因素ae第96页/共108页A.A.一级结构B.B.二级结构C.C.结构域D.D.三级结构E.E.四级结构68.68.是多肽链中氨基酸残基的排列顺序69.69.是整条多肽链中全部原子的空间排布70.70.是蛋白质分子中各亚基间的空间排布和相互作用nade第97页/共108页A.A.离子键B.B.疏水键C.C.氢键D.D.肽键E.E.范德华氏力89.89.蛋白质一级结构的维系键90.90.蛋白质-折迭结构的维系键ndc第98页/共108页A.A.饱和硫酸铵溶液B.B.半饱和硫酸铵溶液C.C.饱和氯化钠溶液D.D.半饱和氯化钠溶液E.E.半饱和硫

40、酸钠溶液80.80.可沉淀血浆球蛋白的是81.81.可沉淀血浆清蛋白的是ba第99页/共108页X X型选择题：-答题说明下列A A、B B、C C、D D四个备选答案中，至少有一个是正确的。请根据题意，有几个正确选项，就在答题卡上将相应的字母圈掉几个，多选或少选均不能计分。-第100页/共108页关于蛋白质中的肽键哪些叙述是正确的A具有部分双键性质。B比一般C-N单键短。C与肽键相连的氢原子和氧原子呈反式结构。D肽键可以自由旋转。nabc第101页/共108页9 94 4.组成人体蛋白质的氨基酸 A A.除脯氨酸外，都是-氨基酸 B B.除脯氨酸外，都是-氨基酸 C C.除甘氨酸外，都是L

41、L-氨基酸 D D.除甘氨酸外，都是D D-氨基酸nac第102页/共108页93.93.分离纯化蛋白质时主要利用哪些性质上的差异A.A.分子大小和形状B.B.溶解度C.C.所带净电荷D.D.对介质的吸附能力vabcd第103页/共108页测定蛋白质分子量的方法有：A.聚丙烯酰胺凝胶电泳B.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳C.紫外分光光度法D.超速离心nbd第104页/共108页95.关于血红蛋白结合氧的叙述，下列哪些是正确的A.氧结合曲线为S形B.血红蛋白与氧结合后，血红素中的Fe2+转变成Fe3+C.血红蛋白与氧的结合受CO2和H+浓度的影响D.血红蛋白是由两个亚基组成lac第105页/共108页97.97.蛋白质在电场中的泳动方向主要取决于A.A.分子构象B.B.所带净电荷C.C.溶液的温度D.D.溶液的pHpH值nbd第106页/共108页92.92.蛋白质变性时A.A.分子量增大B.B.溶解度降低C.C.溶液的粘度降低D.D.分子构象改变lbd第107页/共108页感谢您的观看！第108页/共108页