血型不合异基因造血干细胞移植.pptx

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1、ABO血型不合的移植与输血 预处理的最终目的是破坏或最大程度的抑制患者自身的免疫系统，只有在机体不能识别和消灭外来抗原的情况下，植入的异基因造血干细胞才能存活，继而取代患者自身的造血系统，生产制造出正常的血细胞。干细胞的移植能否成功主要与人体HLAHLA(白细胞抗原、组织相容性抗原）系统有关，一般 认为HLAHLA系统位点相合度越高成功机率越 大。第1页/共49页ABO血型不合的移植与输血 而ABOABO血型系统在移植中并不起决定性作 用。只要供、受者的HLAHLA系统符合移植条件,ABO ABO血型不合也可以进行移植。这样带来的 问题就是，出现了大量ABOABO血型不合的移植 患者，大约占到

2、各类移植病人的1/31/3。其中 还可以细分为三类不同的情况：第2页/共49页ABO血型不合的移植与输血 1.1.1.1.主要血型不合移植：主要血型不合移植：主要血型不合移植：主要血型不合移植：受者血浆中含有抗供者红细胞抗原的抗体。举例：O O型患者接受A A型供者移植，(前)O)O型 A A型(后)O O型患者接受B B型供者移植，(前)O)O型 B B型(后)O O型患者接受ABAB型供者移植,(,(前)O)O型 ABAB型(后)A A型患者接受ABAB型供者移植,(,(前)A)A型 ABAB型(后)B B型患者接受ABAB型供者移植,(,(前)B)B型 ABAB型(后)第3页/共49页A

3、BO血型不合的移植与输血 2.2.2.2.次要血型不合移植：次要血型不合移植：次要血型不合移植：次要血型不合移植：供者血浆中含有抗受者红细胞抗原的抗体。举例：A A型患者接受O O型供者移植，(前)A A型 O O型(后)B B型患者接受O O型供者移植，(前)B B型 O O型(后)AB AB型患者接受O O型供者移植,(前)ABAB型 O O型(后)AB AB型患者接受A A型供者移植,(前)ABAB型 A A型(后)AB AB型患者接受B B型供者移植,(前)ABAB型 B B型(后)第4页/共49页ABO血型不合的移植与输血 3.3.3.3.主次侧血型均不合的移植主次侧血型均不合的移植

4、主次侧血型均不合的移植主次侧血型均不合的移植 供受者血浆中均含有对方红细胞抗原的抗体。举例：A A型患者接受B B型供者移植，(前)A)A型 B B型(后)B B型患者接受A A型供者移植，(前)B)B型 A A型(后)这些病人在接受预处理后，会出现骨髓功能严重受抑，全血细胞减少，尤其是粒细胞和血小板均降至危险水平。在这个危险阶段，及时输注 有效的血液成分是不可缺少的支持疗法。第5页/共49页ABO血型不合的移植与输血 如果病人能顺利度过危险期，新生的血细胞就可以开始工作维持机体各项功能正常运转。这些ABOABO血型不合移植患者在危险期的输血问题，提请大家千万注意注意注意注意，需要我们投入更多

5、的精力关注这类患者，否则输血容易出问题。因为这些病人在做移植以后，不论移植最后是否成功，在移植后的不同时期会在血型方面出 现各种各样的变化。第6页/共49页ABO血型不合的移植与输血 出现的血型变化，致使血库工作人员在给此此类病人配血、备血过程中，感到没有规律无从下手，对安全发血信心不足。为此，我们专门为ABOABO血型不合移植患者建立了登记本，制定了操作程序。连续连续连续连续观察每一个病人血型和抗体变化的情况，根据当下当下当下当下病人的血型、抗体效价等试验结果，给临床医师提出用血 建议，选择最合适的血型和血液品种最合适的血型和血液品种最合适的血型和血液品种最合适的血型和血液品种给 患者输注。

6、第7页/共49页ABO血型不合的移植与输血 需要特别提示：需要特别提示：需要特别提示：需要特别提示：移植后病人输注的红细胞悬液和血小板应进行白细胞过滤白细胞过滤白细胞过滤白细胞过滤和辐照辐照辐照辐照，目的是预防输血相关的移植物抗宿主病(TA-GVHD)(TA-GVHD)，达到安全输血的目的。移植病人登记本操作程序见下，是我们在实践中摸索总结建立的，不全面仅供参考。这样做了以后，血库工作人员重新恢复了信心，能够做 到安全供血，没有发生过不安全苗头。第8页/共49页ABO血型不合移植术后病人第一次血标本处理程序 一建立病人档案 在“移植病人登记本”上登记病人资料：科室、姓名、性别、年龄、病案号、诊

7、断、移植种类、移植物来源、移植日期及目前移植后的天数，移植前后的血型及RhDRhD血型，HLAHLA系统位点相合情况等。资料越完整越好。第9页/共49页ABO血型不合移植术后病人第一次血标本处理程序 二检测项目 1.1.血型鉴定:(:(用表格按1 14+4+表示)微柱凝胶卡式法 盐水试管法 2.2.不规则抗体筛查 3.3.直接抗人球蛋白试验（卡式法）4.4.自身对照试验 盐水试管法 卡式法或聚凝胺法（根据病人直接抗 人球蛋白试验结果选择）第10页/共49页ABO血型不合移植术后病人第一次血标本处理程序 5.5.抗体效价测定 微柱凝胶卡式法 盐水试管法 三结论 根据试验结果得出两方面结论，一是目

8、前病人血型状况；二是给病人选择目前最佳的输血血型和品种，提供给医师参考。四将以上各项检测内容记录在“移植病 人登记本”上。第11页/共49页ABO血型不合移植术后病人第二次以后血标本处理程序 一将日期、病人姓名、目前的移植后天数登记在“移植病人登记本”上；二检测项目 1.1.血型鉴定：要求每次新标本都做，用表格按1 14+4+表示 微柱凝胶卡式法 盐水试管法第12页/共49页ABO血型不合移植术后病人第二次以后血标本处理程序 2.2.不规则抗体筛查 距上一次抗体筛查时间2 2周或交叉配血主侧不合时，需再次进行抗体筛查 3.3.直接抗人球蛋白试验 4.4.自身对照试验:要求每次新标本都做 盐水试

9、管法 微柱凝胶卡式法 聚凝胺法（病人直接抗人球蛋白试验 结果阳性时选择）第13页/共49页ABO血型不合移植术后病人第二次以后血标本处理程序 5.5.抗体效价测定 要求：距上一次抗体效价测定时间1 1周时，再次进行效价测定。微柱凝胶卡式法 盐水试管法 三结论：结合病人血常规结果，选择目前最佳输血的血型和品种，提供医师参考。四将以上各项检测内容记录在“移植病 人登记本”上。第14页/共49页应该掌握的基本概念 异基因造血干细胞移植后，供者的血型出现在移植后2222222242424242天天天天，大约需要80808080天天天天才能完全转变为供者血型。但是对于ABOABO血型不合，特别是主要血型

10、不合的移植患者，可能会出现红系造血的延迟。主要原因是患者残留的抗-A-A和/或抗-B-B可破坏供者红细胞，发生溶血反应，影响红系造血的恢复。第15页/共49页应该掌握的基本概念 ABO ABO血型次要不合的移植，也可以发生溶血反应。主要是因为供者来源的血型抗体能识别受者残存的红细胞表面抗原而引起的。患者原有的血清凝集素(抗体)在移植后逐渐减少，至移植后40404040天甚至更长天甚至更长天甚至更长天甚至更长时间才能完全消失。干细胞表面不表达ABHABH抗原，所以ABOABO血型不合并不影响造血干细胞的植活。但是ABOABO血型不 合可以引起溶血反应、红系造血延迟和 并发纯红细胞再生障碍性贫血（

11、PRCAPRCA）。第16页/共49页ABO血型不合移植后的输血原则 ABO血型主要不合 早期输受者受者受者受者(患者患者患者患者)血型红细胞或O O型红细胞 血小板、血浆输供者供者供者供者血型或ABAB型 ABO血型次要不合 早期输供者供者供者供者血型红细胞或O O型红细胞 血小板、血浆输受者受者受者受者(患者患者患者患者)血型或ABAB型第17页/共49页ABO血型不合移植后的输血原则 ABO血型主次均不合 早期输O O型红细胞 待患者原有凝集素消失后才可以输供者血型红细胞 血小板和血浆输ABAB型 了解以上知识对我们正确地分析思了解以上知识对我们正确地分析思 考问题和给病人选择血液品种考

12、问题和给病人选择血液品种 和血型有着极大的帮助。和血型有着极大的帮助。第18页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：病历摘要：患者女性，4141岁，孕3 3产1 1，有输血史。因诊断为AML-M1AML-M1急性髓系白血病M1M1型，20072007年1010月1818日在某医院行骨髓移植术，患者为A A型血Rh(D)Rh(D)阳性；供者为其胞妹，血型B B型，Rh(D)Rh(D)阳性，HLAHLA提示6666相合。20082008年1 1月1010日行预防性造血干细胞回输。20082008年1212月1717日因移植后白血 病复发再次入院。第19页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：第

13、一次输血前第一次输血前：20092009年年1 1月月2 2日日 患者患者ABO/RhDABO/RhD 血型及相关检测，结果如下：血型及相关检测，结果如下：一、血型一、血型抗-A 抗-B 抗-D A1C BC Ctl血型凝胶卡血型凝胶卡 0 4 4 0 0 0 试管法试管法 0 4 4 0 0第20页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：二、抗体筛查33细胞：抗人球蛋白凝胶卡和盐水试管法均阴阴阴阴性性性性 三、直接抗人球蛋白试验：阴性阴性阴性阴性 四、自身对照试验：抗人球蛋白凝胶卡及盐水试管法均阴阴阴阴性性性性提问提问1 1：根据以上检查情况，患者目前的ABOABO血型是？已转为移植后供者的

14、血型：B B型，反定无 抗-A-A抗体是正常的第21页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：正定血型转为供者型，但正、反定型不符，还需加做其它试验明确原因 正定血型转为供者型，由于疾病导致自身血型抗体减弱，表现为反定无抗-A-A 抗体)直接抗人球蛋白试验阴性，说明患者红细胞表面无抗体包被 自身对照试验阴性，说明试验结果是可靠 的 第22页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：2009 2009年年1 1月月2 2日第一次输血前的血常规结果：日第一次输血前的血常规结果：血小板计数血小板计数8108109 9LL，申请输血。，申请输血。1 1月月2 2日至日至1 1月月1515日期间，共输注日

15、期间，共输注B B型辐照机型辐照机 采血小板采血小板6U6U。第二次检查：第二次检查：20092009年年1 1月月1515日复查患者日复查患者ABO/Rh(D)ABO/Rh(D)血型及相关检测，结果如下：血型及相关检测，结果如下：一、血型一、血型抗-A 抗-B 抗-D A1C BC Ctl 血型凝胶卡血型凝胶卡 0 4 4 3 s 0 0 试管法试管法 0 4 4 2 0 第23页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：二、抗体筛查（3 3细胞）：抗人球蛋白凝胶卡和盐水试管法均阴性阴性阴性阴性 三、直接抗人球蛋白试验：W W W W+抗人球蛋白凝胶卡 四、自身对照试验：抗人球蛋白凝胶卡W W

16、 W W+；盐水试管法：阴性阴性阴性阴性提问提问2 2：根据以上试验结果，患者正、反定型为何又 转为B B型表现？第24页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：通过临床治疗病情好转,故自身血型抗体恢复并出现 输入的B B型血小板血浆中带入抗-A-A抗体造成 直接抗球蛋白试验阳性，说明患者红细胞表面有抗体包被 直接抗球蛋白试验阳性，是因为患者存在自身抗体所致 自身对照试验抗人球蛋白凝胶卡阳性是因为直接抗球蛋白试验阳性 自身对照试验盐水试管法阴性，说明患者红细胞表面无IgMIgM抗体包被第25页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：提示：提示：20092009年年1 1月月1515日至日至2

17、2月月2525日期间，病人输日期间，病人输B B型辐照机采血小板型辐照机采血小板4U4U，B B型辐照悬浮红细胞型辐照悬浮红细胞6U6U。第三次检查：第三次检查：20092009年年2 2月月2525日复查日复查ABO/Rh(D)ABO/Rh(D)血型及相关检测，结果如下：血型及相关检测，结果如下：一、血型一、血型抗-A 抗-B 抗-DA1C BC Ctl血型凝胶卡血型凝胶卡 0 4 4 3 s 0 0试管法试管法 0 4 4 2 w 第26页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：二、抗体筛查（3 3细胞）：抗人球蛋白凝胶卡和盐水试管法均阴阴性性 三、直接抗人球蛋白试验：1+1+1+1+抗人

18、球蛋白凝胶卡 四、自身对照试验：抗人球蛋白凝胶卡1+1+1+1+）；盐水试管法W W+）提问提问3 3：根据以上试验结果，目前病人应选择以下 哪些血液品种输注？第27页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：B B型悬浮红细胞 O O型悬浮红细胞 B B型辐照悬浮红细胞 O O型辐照悬浮红细胞 O O型辐照洗涤红细胞 B B型机采血小板 B B型辐照机采血小板 AB AB型机采血小板 AB AB型辐照机采血小板第28页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：提示：提示：20092009年年2 2月月2525日至日至3 3月月1414日期间，病人输日期间，病人输B B型型辐照机采血小板辐照机采血

19、小板5U5U，O O型辐照洗涤红细胞型辐照洗涤红细胞4U4U，ABAB型辐照机采血小板型辐照机采血小板7U7U。第四次检查：第四次检查：20092009年年3 3月月1414日复查日复查ABO/(RhDABO/(RhD血血 型及相关检测，结果如下：型及相关检测，结果如下：一、血型一、血型抗-A 抗-B 抗-DA1C BC Ctl血型凝胶卡血型凝胶卡 0 4+dcp 4 2+0 0 试管法试管法+/-4+mf 4 1 W 第29页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：二、抗体筛查（3 3细胞）：抗人球蛋白凝胶卡和盐水试管法均阴阴性性 三、直接抗人球蛋白试验：1+1+1+1+抗人球蛋白凝胶卡 四

20、、自身对照试验：抗人球蛋白凝胶卡1+1+1+1+）；盐水试管法W W+）提问提问4 4：以下哪些因素可造成上述试验结果？第30页/共49页1.ABO血型主次均不合病例：移植后因白血病复发，患者原骨髓生成少量A A型红细胞 移植转型后产生的抗-A-A抗体减弱，有可能是与新生成的少量A A抗原结合并破坏 输入血液中的抗-A-A抗体减弱，有可能是与新生成的少量A A型红细胞结合并破坏 直接抗球蛋白试验阳性，说明患者红细胞表面有抗体包被 正定血型抗-B-B表现血球上下分离，说明B B抗原已减弱，部分红细胞上无B B抗原 患者出现的抗-B-B抗体是由于输血品种选 择不当引起第31页/共49页2.血型相容

21、性肝移植与输血病例 病历摘要：患者女性，5252岁，20062006年7 7月2828日因胆管癌在我院行肝移植术。无输血史，孕2 2产2 2。术前血红蛋白128g/L128g/L，血小板11710117109 9/L,/L,血型B B B B型型型型,RhD(+),RhD(+)，抗体筛查阴性。供肝者为O O O O型型型型。术中输配血相合的B B型红细胞悬液9U9U及新鲜冰 冻血浆2400ml2400ml，无不良反应。术后第1 1天查血红蛋白109g/L109g/L，血小板12510125109 9/L/L。1 1周后出现血 红蛋白下降，术后1313天时降至49g/L49g/L，申 请输血。第

22、32页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例 配血配血配血配血(微柱凝胶LISS-IATLISS-IAT卡)时发现:患者与1212名B B型供者主侧阳性主侧阳性主侧阳性主侧阳性，凝集强度2+2+2+2+s s。血液内科诊断溶血性贫血溶血性贫血溶血性贫血溶血性贫血，建议尽量不要输血。病人肝移植后重度贫血，血色素呈逐病人肝移植后重度贫血，血色素呈逐渐下降趋势，病情危重但无法输血，原因何渐下降趋势，病情危重但无法输血，原因何在？在？输血实验室快速开展各项检查，希望输血实验室快速开展各项检查，希望尽快尽快 查明原因，挽救病人生命！查明原因，挽救病人生命！第33页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病

23、例 试验结果如下：试验结果如下：1.1.患者血型鉴定：结果见表1 1和表2 2。2.2.抗体筛查：输血前阴性。配血不合后用谱细 胞做抗体鉴定，在盐水、凝聚胺和微柱凝胶 （LISS-IATLISS-IAT）卡中均阴性阴性阴性阴性。3.3.患者血清中抗-B-B抗体性质：结果见表3 3。4.4.患者直接抗人球蛋白试验：结果见表4 4。5.5.放散试验：患者洗涤的压积红细胞用三氯甲 烷放散，对放散液检测结果见表5 5。第34页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例 表表-1 -1 患者输血前血型鉴定结果患者输血前血型鉴定结果正正 定定 型型反反 定定 型型抗-A 抗-B 抗-DA1C BC Ctl

24、ABO血型卡 0 4+4+4+0 0 第35页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例 表表-2 -2 输血后输血后13d13d血型鉴定结果血型鉴定结果 （毛细管离心法分离患者自身红细胞）（毛细管离心法分离患者自身红细胞）正正 定定 型型反反 定定 型型试试 管管 法法抗抗-A 抗抗-B 抗抗-HA1c Bc Oc 自身自身 RT（立即离心）（立即离心）RT15415 0 4+2+0 4+2+0 4+2+s 4+-0 0 4+w+0 0 4+1+0 0第36页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例表表3 3 患者输血后血清用患者输血后血清用DTTDTT处理前后试验结果处理前后试验结果反应介质

25、 Bc Oc DTT处理前DTT处理后DTT处理后 室温盐水室温盐水抗人球蛋白试验 W+02+000 第37页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例表表4 4 患者输血前后直接抗人球试验结果患者输血前后直接抗人球试验结果IgG C3d ctl 输血前 000输血后(12天后)1+00第38页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例表表5 5 患者红细胞放散液检测结果患者红细胞放散液检测结果放散液+Oc 放散液+Bc LISS-IAT-W+第39页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例项目项目吸收前抗吸收前抗-B-B效价效价 吸收后抗吸收后抗-B-B效价效价放散液抗放散液抗-B-B效价效价患

26、者红细胞患者红细胞12812832321616标准标准B B型红细胞型红细胞1281282 28 8 吸收放散试验：患者出院吸收放散试验：患者出院2 2个月后复查，对其红细胞个月后复查，对其红细胞（DATDAT阴性）做吸收放散试验，阴性）做吸收放散试验，44吸收吸收2 2小时、小时、5656放散放散,结果见表结果见表6 6。亚型特点：吸收弱、放散强。亚型特点：吸收弱、放散强。表表6 6 患者红细胞吸收放散结果（出院患者红细胞吸收放散结果（出院2 2个月后）个月后）第40页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例 病例分析：病例分析：病史回顾 本例患者为ABOABO血型相容性肝移植，术前采 用达

27、亚美血型卡检测患者血型，其正反定血型 符合正常B B型表现，与B B型供者配血相合，输血 后无不良反应。术后1 1周患者出现不明原因贫 血，1313天血红蛋白降至49g/L49g/L，临床表现为溶 血性贫血。再次与B B型血配血主侧不合。第41页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例实验显示实验显示 用试管法做正反定型，室温立即离心结用试管法做正反定型，室温立即离心结果象果象正常正常B B型，室温和型，室温和44分别放置分别放置1515分钟后，检分钟后，检出患出患者血清中有弱的者血清中有弱的IgMIgM性质的抗性质的抗-B-B，患者红细胞，患者红细胞上上H H抗原增强，且比正常抗原增强，且比

28、正常B B型红细胞吸收弱放散强，型红细胞吸收弱放散强，证明患者为证明患者为B B B B亚型亚型亚型亚型，血清中有抗，血清中有抗-B-B抗体。抗体。对对血清中抗血清中抗-B-B抗体性抗体性质进质进行分析，行分析，证证明存明存在在 IgMIgM和和IgGIgG性性质质抗抗-B-B。第42页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例实验显示实验显示 患者红细胞直接抗人球蛋白试验阳性，经患者红细胞直接抗人球蛋白试验阳性，经直直 抗分型试验，发现患者红细胞上包被了抗分型试验，发现患者红细胞上包被了IgGIgG抗抗体。体。用三氯甲烷放散，放散液与用三氯甲烷放散，放散液与Bc LISS-IATBc LISS

29、-IAT试试验验阳性，与阳性，与OcOc不反应，说明患者红细胞上包被的不反应，说明患者红细胞上包被的是是IgGIgG性质抗性质抗-B-B抗体。抗体。第43页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例 经重新给患者进行相关实验室检查，确定其血型为B B亚型，输血后产生IgGIgG抗-B-B抗体导致主侧配血不合并引起迟发性溶血反应。查清原因后，通知肝胆外科医师病人可以输血治疗了。从术后第1414天起给患者输O O型洗涤红细胞2U/2U/日，连续5d5d共输10U10U，患者血红蛋白升至103g/L103g/L，病情稳定出院。两个月后患者复查血红 蛋白107g/L,107g/L,血小板22710227

30、109 9/L/L。第44页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例 讨论 B B亚型人血清中存在的天然IgMIgM抗-B-B，在3737 一般无反应活性，输配血相合的B B型血不会引起 溶血性输血反应。但如果患者因输血或妊娠免 疫产生IgGIgG抗-B-B，就会出现与B B型血配血不合，或发生溶血性输血反应。本例患者为B B亚型，患者血清中可能一直有 弱的IgMIgM抗-B-B抗体，但是用血型卡未检测到。术 前与B B型血用LISS-IATLISS-IAT法配血相合，说明 患者血清中无IgGIgG抗-B-B抗体。第45页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例 输O O型洗涤红细胞后，患者血

31、红蛋白逐渐上 升，病情稳定出院。两个月后患者复查血红蛋 白正常。本例为B B亚型患者接受O O型肝移植，当发生溶 血性贫血及配血不合时，应从多方面考虑问 题，根据实验结果客观分析原因。第46页/共49页2.血型相容性肝移植与输血病例启示：启示：1.1.肝移植手术前应加强与临床科沟通，了肝移植手术前应加强与临床科沟通，了解解供受体之间供受体之间ABOABO血型属于相同、相容还是不合，血型属于相同、相容还是不合，以便有的放矢地解决输血中出现的问题；以便有的放矢地解决输血中出现的问题；2.2.对对ABOABO血型相容性肝移植，还要注意排血型相容性肝移植，还要注意排除随除随供肝进入受体内的供肝进入受体内的“过客过客”淋巴细胞产生抗红淋巴细胞产生抗红细细胞抗体而发生的溶血性贫血。胞抗体而发生的溶血性贫血。第47页/共49页第48页/共49页感谢您的观看！第49页/共49页