生物化学蛋白质化学.pptx

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1、会计学1生物化学生物化学(shn w hu xu)蛋白质化学蛋白质化学第一页，共59页。第一节第一节 氨基酸氨基酸n n氨基酸的通式(tngsh)第1页/共59页第二页，共59页。20种氨基酸的结构种氨基酸的结构(jigu)第2页/共59页第三页，共59页。第3页/共59页第四页，共59页。第4页/共59页第五页，共59页。第5页/共59页第六页，共59页。第6页/共59页第七页，共59页。第7页/共59页第八页，共59页。第8页/共59页第九页，共59页。两种两种C原子原子(yunz)的的标示方法（易混淆）标示方法（易混淆）第9页/共59页第十页，共59页。氨基酸的构型氨基酸的构型第10页/

2、共59页第十一页，共59页。蛋白质中的氨基酸都是蛋白质中的氨基酸都是L型型第11页/共59页第十二页，共59页。不常见不常见(chn jin)氨基酸氨基酸4-羟脯氨酸羟脯氨酸5-羟赖氨酸羟赖氨酸第12页/共59页第十三页，共59页。硒代半胱氨酸硒代半胱氨酸 （有时（有时(yush)被认为是第被认为是第21种氨基种氨基酸）酸）第13页/共59页第十四页，共59页。氨基酸的性质氨基酸的性质(xngzh)n n氨基酸的两性(lingxng)性质第14页/共59页第十五页，共59页。氨基酸的滴定曲线氨基酸的滴定曲线(qxin)（甘氨（甘氨酸为例）酸为例）第15页/共59页第十六页，共59页。第16页/

3、共59页第十七页，共59页。等电点（概念等电点（概念(ginin)）n n氨基酸所带净电荷为零时(ln sh)氨基酸溶液的pH值称为该氨基酸的等电点（pI）。第17页/共59页第十八页，共59页。侧链基团带有可解离侧链基团带有可解离基团的氨基酸的等电基团的氨基酸的等电点怎么点怎么(zn me)计算计算？第18页/共59页第十九页，共59页。pK1=2.19 pKR=4.25 pK2=9.67第19页/共59页第二十页，共59页。第20页/共59页第二十一页，共59页。第21页/共59页第二十二页，共59页。第22页/共59页第二十三页，共59页。必需必需(bx)氨基酸氨基酸n n人体（或其它(

4、qt)脊椎动物）必不可少，而机体内又不能合成的，必须从食物中补充的氨基酸，称必需氨基酸。n n对成人来说，这类氨基酸有8种，包括赖氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸和苯丙氨酸。对婴儿来说，组氨酸和精氨酸也是必需氨基酸。第23页/共59页第二十四页，共59页。请记住请记住(j zh)上述必需氨基酸上述必需氨基酸n n携（缬）一（异）两（亮）本（苯）单（蛋）色书（苏）来（赖）携一两本单色书来 n n笨蛋来宿舍(ssh)晾凉鞋 第24页/共59页第二十五页，共59页。茚三酮反应茚三酮反应(fnyng)氨氨基基酸酸与与茚茚三三酮酮水水合合物物共共热热，可可生生成成蓝蓝紫紫色色化化合

5、合物物，其其最最大大吸吸收收峰峰在在570nm处处。由由于于此此吸吸收收峰峰值值与与氨氨基基酸酸的的含含量量(hnling)存存在在正正比比关关系系，因因此此可可作作为为氨氨基基酸酸定定量量分分析析方方法。法。氨基酸参与(cny)的化学反应第25页/共59页第二十六页，共59页。氨基酸与茚三酮反应氨基酸与茚三酮反应(fnyng)(fnyng)但脯但脯氨酸氨酸与茚与茚三酮三酮反应反应(fnyng)生成生成黄色黄色第26页/共59页第二十七页，共59页。纸层析纸层析(cn x)法法第27页/共59页第二十八页，共59页。氨基酸与氨基酸与2,42,4一二硝基一二硝基(xio j)(xio j)氟苯氟

6、苯(DNFB)(DNFB)的的反应反应（sangersanger反应）反应）DNFB（dinitrofiuorobenzene）DNP-AA(DNP-AA(黄色黄色)+HF弱碱中弱碱中氨基酸氨基酸第28页/共59页第二十九页，共59页。氨基酸与苯异硫氰酯（氨基酸与苯异硫氰酯（PITCPITC）的反应）的反应(fnyng)(fnyng)（EdmanEdman反应反应(fnyng)(fnyng)）PITC（phenylisothiocyanate）+苯乙内酰硫脲衍生物苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-AA)（phenylisothiohydantion-AA）弱碱中弱碱中(400 C)(硝基甲烷硝基甲烷

7、 400 C)H+第29页/共59页第三十页，共59页。第二节第二节 肽肽n n肽是氨基酸通过肽键连接在一起形成(xngchng)的化合物。通常把分子量小于10000的称为肽，而分子量更大的称为蛋白质。第30页/共59页第三十一页，共59页。肽键肽键(ti jin)(peptide bond)第31页/共59页第三十二页，共59页。氨基氨基(nj)末端末端羧基羧基(su j)末端末端Ser-Gly-Tyr-Ala-Leu氨基酸残基氨基酸残基第32页/共59页第三十三页，共59页。几种几种几种几种(j zhn)(j zhn)(j zhn)(j zhn)生物生物生物生物活性肽活性肽活性肽活性肽 1

8、.谷胱甘肽谷胱甘肽(glutathione,GSH)GSH是体内是体内(t ni)重要的还原重要的还原剂剂第33页/共59页第三十四页，共59页。GSH过氧过氧化物化物(u yn hu w)酶酶H2O2 2GSH 2H2O GSSG GSH还原酶还原酶NADPH+H+NADP+谷胱甘肽在体内参与氧化还原过程，作为(zuwi)某些氧化还原酶的辅因子，或保护巯基酶，或防止过氧化物积累。第34页/共59页第三十五页，共59页。体内许多激素(j s)属寡肽或多肽2.多肽多肽(du ti)类激素及神类激素及神经肽经肽 由下丘脑分泌由下丘脑分泌(fnm)，其功能是促进腺垂体释放促甲状腺，其功能是促进腺垂体

9、释放促甲状腺素素(调节糖代谢调节糖代谢)。第35页/共59页第三十六页，共59页。n n当我们搬进一个新寝室时，我们会如当我们搬进一个新寝室时，我们会如何向我们的外校的同学何向我们的外校的同学(tng xu)对其对其进行描述？进行描述？第36页/共59页第三十七页，共59页。当你看到这张图片时，当你看到这张图片时，你怎么你怎么(zn me)向别人向别人描述？描述？第37页/共59页第三十八页，共59页。第三节第三节 蛋白质的结构蛋白质的结构(jigu)蛋白质的分子结构包括蛋白质的分子结构包括(boku)一级结构一级结构(primary structure)二级结构二级结构(secondary

10、structure)三级结构三级结构(tertiary structure)四级结构四级结构(quaternary structure)第38页/共59页第三十九页，共59页。第39页/共59页第四十页，共59页。蛋蛋白白质质结结构构的的主主要要(zhyo)层层次次一级结构一级结构(jigu)四级结构四级结构(jigu)二级结构二级结构三级结构三级结构primary structureprimary structuresecondary structuresecondary structureTertiary structureTertiary structurequariernary str

11、ucturequariernary structure超二级结构超二级结构结构域结构域 supersecondary structuresupersecondary structureStructure domanStructure doman第40页/共59页第四十一页，共59页。一级结构是蛋白质空间构象和特异一级结构是蛋白质空间构象和特异(ty)(ty)生物学生物学功能的基础。功能的基础。蛋白质一级结构蛋白质一级结构(jigu)第41页/共59页第四十二页，共59页。蛋白质一级结构蛋白质一级结构(jigu)测定测定流程流程(lichng)(lichng)：u确定多肽链的数目u拆开并分离出每

12、条肽链u水解测定肽链的氨基酸组成u测定肽链两末端氨基酸残基u肽链水解为小片段并测序u片段重叠得出整个(zhngg)肽链的序列u确定二硫键的位置第42页/共59页第四十三页，共59页。肽链末端肽链末端(m dun)分析分析n nN-末端(m dun)测定（1）DNFB法n n（2）PTH法第43页/共59页第四十四页，共59页。DNP-氨基酸氨基酸第44页/共59页第四十五页，共59页。第45页/共59页第四十六页，共59页。n nC-末端(m dun)测定n n（1）肼解法缺点缺点(qudin)：Asn，Gln，Cys被破坏，被破坏，Arg转变为鸟转变为鸟氨酸。氨酸。第46页/共59页第四十七

13、页，共59页。（2）羧肽酶法 羧肽酶能特异水解C末端氨基酸残基，其中(qzhng)羧肽酶A能释放除Pro，Arg，Lys以外所有的氨基酸残基，羧肽酶B只能水解以Arg和Lys为C末端残基的肽链。第47页/共59页第四十八页，共59页。n n二硫键的断裂(dun li)第48页/共59页第四十九页，共59页。第49页/共59页第五十页，共59页。n n肽链的断裂(dun li)n n （1）酶裂解法第50页/共59页第五十一页，共59页。（2）化学裂解法 溴化氰(CNBr)只断裂Met羧基参与形成的肽键(ti jin)。由于大多数蛋白质只含有很少的Met，因此CNBr断裂产生的肤段不多。第51页/共59页第五十二页，共59页。Sample第52页/共59页第五十三页，共59页。DNP-Glu第53页/共59页第五十四页，共59页。第54页/共59页第五十五页，共59页。第55页/共59页第五十六页，共59页。第56页/共59页第五十七页，共59页。蛋白质的化学合成蛋白质的化学合成第57页/共59页第五十八页，共59页。第58页/共59页第五十九页，共59页。