一轮复习微生物的培养与应用.pptx

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1、考点一微生物的实验室培养考点一微生物的实验室培养1.培养基培养基(1)概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质。(2)营养组成：一般都含有和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对、氧气以及的要求。(3)种类：按照物理性质可分为培养基和固体培养基。营养物质生长繁殖水、碳源、氮源pH特殊营养物质液体第1页/共49页2.无菌技术无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止的方法。(2)关键：防止的入侵。(3)不同对象的无菌操作方法(连线)杂菌污染外来杂菌第2页/共49页3.大肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基操作步骤倒平板的方法及注意事项称量灭菌倒

2、平板第3页/共49页a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：。b.甲、乙、丙中的灭菌方法是。c.丁中的操作需要等待才能进行。(2)纯化大肠杆菌的方法纯化培养原理：想方设法在培养基上得到_的肉眼可见的，即可获得较纯的菌种。纯化大肠杆菌的关键步骤：。常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：是通过在琼脂固体培养基表面_的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。丙乙甲丁灼烧灭菌平板冷却凝固由一个细胞繁殖而来菌落接种接种环连续划线第4页/共49页b.法：是将菌液进行一系列的，然后将的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。(3)菌种的保存方法对于频繁使用的菌种，可以采用的方法。对于需要

3、长期保存的菌种，可以采用的方法。稀释涂布平板梯度稀释不同稀释度临时保藏甘油管藏第5页/共49页1.(教教材材P16旁旁栏栏思思考考题题解解答答)请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。培养细菌用的培养基与培养皿 玻棒、试管、烧瓶和吸管 实验操作者的双手提示提示、需要灭菌；需要灭菌；需要消毒。需要消毒。第6页/共49页为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？提示提示通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。平板冷凝后，为什么要将平板倒置？提提示示平平板板冷冷凝凝后后，皿皿盖盖上上会会凝凝结结水水珠珠，凝凝固固后后的的培培养养基基表

4、表面面的的湿湿度度也也比比较较高高，将将平平板板倒倒置置，既既可可以以使使培培养养基基表表面面的的水水分分更更好好地地挥挥发发，又又可可以以防防止止皿皿盖盖上上的的水水珠珠落落入入培培养养基，造成污染。基，造成污染。2.(教材教材P17“倒平板操作讨论倒平板操作讨论”解答解答)第7页/共49页3.下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请思考：(1)图甲是利用_法进行微生物接种，图乙是利用_法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是_和_；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是_和酒精消毒。第8页/共49页(2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？_。(3)下图是采用上述接种方法接种后

5、培养的效果图解，其接种方法是_(填“图甲”或“图乙”)。提提示示(1)平平板板划划线线稀稀释释涂涂布布平平板板接接种种环环涂涂布布器器灼灼烧烧灭灭菌菌(2)火火焰焰附附近近存存在在着无菌区域着无菌区域(3)图乙图乙第9页/共49页1.(2016全全国国课课标标卷卷，39)空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：配置培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；制作无菌平板；设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；将各组平板置于37恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均

6、数。第10页/共49页回答下列问题：(1)该培养基中微生物所需的氮来源于_。若要完成步骤，该培养基中的成分X通常是_。(2)步骤中，实验组的操作是_。(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了_现象。若将30(即366)个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法_(填“正确”或“不正确”)。第11页/共49页解解析析(1)牛牛肉肉膏膏和和蛋蛋白白胨胨都都含含有有蛋蛋白白质质的的水水解解产产物物，都都可可以以作作为为氮氮源源；平平板板为为固固体体培培养养基基，故故需需要要加加入入凝凝固固剂剂琼琼脂脂。(2)实

7、实验验探探究究的的是是教教室室内内“不不同同高高度度空空气气”中中微微生生物物的的分分布布，其其中中变变量量为为不不同同高高度度，故故需需在在不不同同高高度度下下放放置置开开盖盖平平板板。同同时时，为为了了保保证证单单一一变变量量，需需要要保保证证开开盖盖放放置置时时间间一一致致。为为了了保保证证实实验验可可靠靠性性，需需要要设设置置多多个个平平行行组组。(3)在在完完全全正正确确的的操操作作情情况况下下，空空白白对对照照组组中中不不应应出出现现菌菌落落。若若出出现现菌菌落落，表表明明操操作作过过程程中存在杂菌污染，属于实验失误，所有实验数据均不应采用。中存在杂菌污染，属于实验失误，所有实验数

8、据均不应采用。答答案案(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间(3)污染不正确第12页/共49页2.(2016深深圳圳六六校校联联盟盟模模拟拟)人们使用含三丁基锡、三苯基锡等有机锡化合物的油漆涂于船只、海洋建筑物等的表面，有效防止了海洋生物附着生长，但近年来的研究发现油漆中的有机锡可释放入海，对多种生物造成毒害。现欲从海洋底泥中分离分解三丁基锡的微生物。回答下列问题：(1)为了获得能降解三丁基锡的微生物菌种，可在被三丁基锡污染的海洋底泥中取样，并应选用以为碳源的培养基进行选择培养。除含有碳源外，培养基还应含有_、_、_、无机盐和蒸馏水等。(2

9、)实验过程中，玻璃器皿和金属用具可以采用干热灭菌法来灭菌，原因是_。第13页/共49页(3)常用的微生物接种方法有两种，但只有_可用于微生物的计数，运用该方法计数的结果往往比实际数目_(填“高”或“低”)。在平板划线操作中，接种环在使用前要先灼烧，其目的是_，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是_。(4)将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在含少量三丁基锡的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜)，观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时，则应选择微生物_作为菌种进行后续培养。第14页/共49页答答案案(1)三丁

10、基锡氮源琼脂(2)玻璃器皿和金属用具能耐高温，且要保持干燥(3)稀释涂布平板法低杀灭接种环上的微生物使微生物数目能够随着划线次数的增加而逐步减少，以达到分离的效果(4)乙第15页/共49页3.工厂的污水池含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。第16页/共49页(1)加入化合物A的培养基属于_培养基。化合物A可为目的菌提供生长所需的_等营养物质。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_。(2)微生物培养过程中，防止杂菌污染的关键技

11、术是_，为了排除杂菌污染如何设计对照实验_。(3)在农业生产研究中，常需要进行微生物的培养和计数。下图是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上有很多注意事项。请列举两项。第17页/共49页答案答案(1)选择碳源和氮源稀释涂布平板法(2)无菌技术用不接种的空白培养基作对照，证明培养基制备是否被杂菌污染(3)每次划线前要灼烧接种环冷却后从上一区划线末端开始划首尾区不重叠(任选两个答案)第18页/共49页1.无菌技术无菌技术条件条件结果结果常用方法常用方法应用范围应用范围消毒消毒较为温和较为温和的物理或的物理或化学方法化学方法仅杀死物体表面仅杀死

12、物体表面或内部的部分微或内部的部分微生物生物煮沸消毒法煮沸消毒法日常用品日常用品巴氏消毒法巴氏消毒法不耐高温的液体不耐高温的液体化学药剂消毒法化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源用氯气消毒水源灭菌灭菌强烈的理强烈的理化因素化因素杀死物体内外所杀死物体内外所有的微生物，包有的微生物，包括芽孢和孢子括芽孢和孢子灼烧灭菌法灼烧灭菌法接种工具接种工具干热灭菌法干热灭菌法玻璃器皿、金属玻璃器皿、金属用具用具高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法培养基及容器培养基及容器第19页/共49页2.两种纯化细菌的方法的比较两种纯化细菌的方法的比较项目项目优点优点缺点缺点适用范围适用范围平板划线平板划

13、线法法可以观察菌落特可以观察菌落特征，对混合菌进征，对混合菌进行分离行分离不能计数不能计数适用于好氧菌适用于好氧菌稀释涂布稀释涂布平板法平板法可以计数，可以可以计数，可以观察菌落特征观察菌落特征吸收量较少，吸收量较少，较麻烦，平板较麻烦，平板不干燥效果不不干燥效果不好，容易蔓延好，容易蔓延适用于厌氧菌适用于厌氧菌和兼性厌氧菌和兼性厌氧菌第20页/共49页考点二微生物的筛选和计数考点二微生物的筛选和计数1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数项目项目详细内容详细内容实验原理实验原理(1)能合成能合成_的细菌才能分解尿素的细菌才能分解尿素(2)配制以配制以_为唯一氮源的

14、培养基，能够生长的细菌就是为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌能分解尿素的细菌数量统计数量统计(1)_法法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板)(2)间接计数法：间接计数法：_实验流程实验流程土壤取样土壤取样配制土壤溶液和制备培养基配制土壤溶液和制备培养基_涂布平板涂布平板与培养与培养菌落菌落_脲酶尿素直接计数稀释涂布平板法系列稀释计数第21页/共49页2.分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离(1)纤维素酶组成：纤维素酶是一种，一般认为它至少包括三种组分，即。作用复合酶C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖第22页/共4

15、9页(2)纤维素分解菌的筛选原理筛选方法：染色法，即通过是否产生来筛选纤维素分解菌。培养基：以为唯一碳源的选择培养基。红色复合物透明圈刚果红透明圈纤维素第23页/共49页实验流程纤维素选择培养基梯度稀释鉴别纤维素分解菌透明圈第24页/共49页(3)分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较分离纤维素分解菌的实验中先用培养基，再用培养基。选择培养基为培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长。鉴别培养基含琼脂，为培养基，细菌可在培养基上形成肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用的就是鉴别培养基。选择鉴别液体固体第25页/共49页3.结果分析与评价结果分析与评价内容现

16、象结论有无杂菌污染的判断对照的培养皿中无菌落生长未被杂菌污染培养物中菌落数偏高被杂菌污染菌落形态多样，菌落数偏高培养物中混入其他氮源选择培养基的筛选作用牛肉膏培养基上的菌落数目大于选择培养基上的数目选择培养基具筛选作用样品的稀释操作得到2个或2个以上菌落数目在30300的平板操作成功重复组的结果若选取同一种土样，统计结果应接近第26页/共49页1.(2016四四川川卷卷，10)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。第27页/共49页(1)图中选择培养基应以_为唯一氮源；鉴别培养基还需添加_作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变

17、成_色。(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是_，每克土壤样品中的细菌数量为_108个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较_。(3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。突变基因转录的mRNA中，终止密码为_，突变基因表达的蛋白质含_个氨基酸。第28页/共49页解解析析(1)脲脲酶酶能能够够催催化化尿尿素素分分解解为为

18、氨氨，故故图图中中选选择择培培养养基基应应以以尿尿素素作作为为唯唯一一氮氮源源。由由于于尿尿素素被被分分解解成成了了氨氨，氨氨会会使使培培养养基基的的碱碱性性增增强强，pH升升高高，使使酚酚红红指指示示剂剂变变红红色色。(2)用用于于计计数数细细菌菌菌菌落落数数的的接接种种方方法法是是稀稀释释涂涂布布平平板板法法，统统计计的的菌菌落落数数应应介介于于30300之之间间，故故选选择择细细菌菌菌菌落落数数为为156、178和和191的的平平板板计计数数，每每克克土土壤壤样样品品中中的的细细菌菌数数量量为为(156178191)/30.11051.75108。由由于于两两个个或或多多个个细细菌菌连连

19、接接在在一一起起时时，往往往往统统计计的的是是一一个个菌菌落落，故故用用此此方方法法测测得得的的细细菌菌数数偏偏少少。(3)密密码码子子由由三三个个相相邻邻的的碱碱基基组组成成，271个个碱碱基基和和后后面面2个个碱碱基基一一起起共共构构成成91个个密密码码子子，插插入入的的70个个核核苷苷酸酸和和后后面面2个个碱碱基基一一起起共共构构成成24个个密密码码子子，紧紧随随其其后后是是UGA，应应为为终终止止密密码码，翻翻译译结结束束，因因此此表表达达的的蛋蛋白白质质含含115个氨基酸。个氨基酸。答案答案(1)尿素酚红红(2)稀释涂布平板法1.75少(3)UGA115第29页/共49页2.(201

20、6河河南南郑郑州州二二模模)某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。(1)根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？_(填“能”或“不能”)，原因是_。KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O蛋白胨葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g1.0g10.0g1.0g15.0g第30页/共49页(2)培养基用_方法灭菌，培养皿用_方法灭菌，待培养基冷却到_(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右时，在_附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，

21、可以防止_，以免造成污染。(3)要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用_法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的_就能大约推测出样品中活菌数。(4)培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。第31页/共49页(5)某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)_。解析解析(1)据表分析，表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源，所以不能分离尿素据表分析，表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源，所以不能分离尿素分解菌，筛选纤维素分解菌需要以纤

22、维素为唯一的碳源的选择培养基。分解菌，筛选纤维素分解菌需要以纤维素为唯一的碳源的选择培养基。(2)微生物培养微生物培养中的培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，玻璃器皿可以使用干热灭菌。倒平板时需要培中的培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，玻璃器皿可以使用干热灭菌。倒平板时需要培养基冷却至养基冷却至50左右时在酒精灯火焰旁进行，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，左右时在酒精灯火焰旁进行，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基造成污染。可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基造成污染。第32页/共49页第33页/共49页答答案案(1)不能培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出

23、只以尿素为氮源的微生物(培养基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素)(2)高压蒸汽灭菌干热灭菌50酒精灯火焰培养皿盖上的水珠落入培养基(3)(稀释)涂布平板菌落数目(4)将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(5)2.34109第34页/共49页3.秸秆还田技术既是减少秸秆焚烧的重要措施，也是农业可持续发展的战略抉择。某校生物兴趣小组研究发现，秸秆还田的过程中施加外源纤维素酶能起到较好的效果。请回答下列问题：(1)纤维素酶是一种_酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种，其中能够将纤维二糖分解为葡萄糖的是_。(2)自然界中纤维素分解菌大多分布在_的环境中。从该环境取回的土

24、样中含有多种微生物，该兴趣小组可在培养基中加入_来帮助筛选纤维素分解菌。若下图为培养结果，应选择的菌株为_(填“菌”“”“菌”或“菌”)。第35页/共49页(3)对筛选得到的微生物还需进一步纯化培养以增加菌种的数量，为方便后续的计数，宜采用的纯化方法是_。(4)为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行_的实验。利用纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖这一特性，可利用_试剂判断微生物提取物是否起到了降解纤维素的作用。答答案案(1)复合葡萄糖苷酶(2)富含纤维素刚果红菌(3)稀释涂布平板法(4)发酵产生纤维素酶斐林第36页/共49页1.菌株筛选原理的比较菌株筛选原理的比较土壤中分解尿素的细菌土

25、壤中分解尿素的细菌分解纤维素的微生物分解纤维素的微生物选择培养基的成分：尿素选择培养基的成分：尿素作为唯一的氮源作为唯一的氮源鉴定方法：在培养基中加鉴定方法：在培养基中加入酚红指示剂，若入酚红指示剂，若pH升高，升高，指示剂变红，说明细菌能分指示剂变红，说明细菌能分解尿素解尿素选择培养基的成分：纤维选择培养基的成分：纤维素作为唯一的碳源素作为唯一的碳源鉴定方法：刚果红染色法，鉴定方法：刚果红染色法，即刚果红与纤维素形成红色即刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，复合物，当纤维素被分解后，培养基出现以纤维素分解菌培养基出现以纤维素分解菌为中心的透明圈为中心的透明圈第37页/共49页2.

26、选择培养基与鉴别培养基的比较选择培养基与鉴别培养基的比较种类种类制备方法制备方法原理原理用途用途举例举例选择培选择培养基养基培养基中加培养基中加入某些化学入某些化学物质物质依据某些微生物对某依据某些微生物对某些物质或环境条件的些物质或环境条件的嗜好、抗性而设计嗜好、抗性而设计从众多微生物从众多微生物中分离所需的中分离所需的微生物微生物加入青霉素分加入青霉素分离得到酵母菌离得到酵母菌和霉菌和霉菌鉴别培鉴别培养基养基培养基中加培养基中加入某种指示入某种指示剂或化学药剂或化学药品品依据微生物产生的某依据微生物产生的某种代谢产物与培养基种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学中的特定试剂或化学药品反应，产

27、生明显药品反应，产生明显的特征变化而设计的特征变化而设计鉴别不同种类鉴别不同种类的微生物的微生物伊红美蓝培伊红美蓝培养基可以鉴别养基可以鉴别大肠杆菌大肠杆菌第38页/共49页易错易错防范清零防范清零易错清零易错点易错点1误认为所有微生物培养基中均需加入误认为所有微生物培养基中均需加入“生长因子生长因子”点点拨拨碳碳源源、氮氮源源、水水分分、无无机机盐盐、生生长长因因子子是是微微生生物物生生长长必必需需的的五五大大营营养养成成分分，但但大大多多数数培培养养基基中中都都含含碳碳源源、氮氮源源、水水分分、无无机机盐盐四四类类物物质质，可可能能不不需需额额外外添添加加“生生长长因因子子(如如维维生生素

28、素)”，这这是是因因为为许许多多微微生生物物可可自自行行合合成成这这些些生生长长因因子子，而而对对那那些些合合成成能能力力有有限限或或不不能能合合成成生生长长因因子子的的微微生生物物(如如乳乳酸酸菌菌)，则则需需在在培培养养基基中中添添加加诸如维生素等生长因子。诸如维生素等生长因子。第39页/共49页易错点易错点2混淆两种混淆两种“对照组对照组”与与“重复组重复组”点拨点拨(1)两种对照组作用比较两种对照组作用比较判断培养基中判断培养基中“是否有杂菌污染是否有杂菌污染”，需将未接种的培养基同时进行培养。，需将未接种的培养基同时进行培养。判判断断选选择择培培养养基基“是是否否具具有有筛筛选选作作

29、用用”，需需设设立立牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨胨培培养养基基进进行行接接种种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。(2)重复组的设置及作用重复组的设置及作用为为排排除除偶偶然然因因素素对对实实验验结结果果的的干干扰扰，在在每每一一稀稀释释度度下下宜宜设设置置3个个平平板板作作重重复复组组，选选择择菌菌落落数数均均在在30300且且数数目目相相差差不不大大的的三三个个平平板板，用用“平平均均值值”代代入入计计数数公公式予以计算菌落数。式予以计算菌落数。第40页/共49页易错点易错点3混淆消毒与灭菌混淆消毒与灭菌点点拨拨对对于于活活体体

30、宜宜消消毒毒不不可可说说成成灭灭菌菌，而而对对于于培培养养基基、接接种种工工具具、培培养养皿皿等等必必须须灭菌。灭菌。第41页/共49页易易错错点点4不不明明确确每每次次划划线线操操作作中中“灼灼烧烧接接种种环环”的的目目的的或或误误认认为为划划线线结结束束后后“不不必必灼烧接种环灼烧接种环”点拨点拨平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。每每次次划划线线之之前前：杀杀死死上上次次划划线线后后接接种种环环上上残残留留的的菌菌种种，使使下下次次划划线线的的菌

31、菌种种直直接接来源于上次划线的末端。来源于上次划线的末端。划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。第42页/共49页易错点易错点5不知道菌落计数比实际值不知道菌落计数比实际值“偏高偏高”还是还是“偏低偏低”点拨点拨稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目“低低”。这是因为。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。而显微计数法中当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。而显微计数法中由于不能区分死菌与活菌，故所得

32、数值可能由于不能区分死菌与活菌，故所得数值可能“偏高偏高”。第43页/共49页规范答题甲醛是一种来源广泛的挥发性有机污染物，具有强烈的致癌和致畸作用，利用微生物降解甲醛来治理甲醛污染，具有高效、环保、无二次污染等优点。如图甲为采集活性污泥作为优良菌源，通过筛选分离出能以甲醛为唯一碳源的高效降解菌的实验过程。请分析回答下列问题：第44页/共49页(1)上述实验材料中，不需要进行灭菌处理的是_，培养基灭菌的常用方法为_。该实验过程所用的选择培养基只能以甲醛作为唯一碳源，其原因是_。(2)由的分离活性污泥中细菌的接种方法(如图乙)为_法，接种时，对接种环应进行_，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，这样做的目的是_。(3)图乙表示在平板培养基上的第一次和第二次划线，请在图乙中画出第三次划线。第45页/共49页(4)为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响，进行了相应实验。当甲醛的初始浓度小于1200mg/L时，菌株可以完全降解甲醛；当甲醛的初始浓度增高至1600mg/L时，48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱，甚至失去降解能力，其原因可能是_。为了使该实验所得结果准确可靠，还应该设置_的对照实验，以排除甲醛自然挥发对实验结果的干扰。第46页/共49页答卷采样原处纠错纠错依据答题不规范记忆不准确混淆“消毒”与“灭菌”第47页/共49页混淆两种对照组第48页/共49页