课题 菊花组织培养.pptx

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1、 通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？组织培养营养繁殖扦插嫁接压条 第1页/共24页扦插嫁接压条 第2页/共24页 植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。植物组织培养简介第3页/共24页发展简史 1838-1839年，德国科学家Schleide 和Schwann发表了细胞学说，奠定了组织培养的理论基础。1902年，德国植物学家Haberlandt 根据细胞学说，提出单个细胞的植物细胞全能性（

2、totipotency）理论。1904年，Hanning 最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。1922年，Knudson 采用胚培养法获得大量兰花幼苗。1934年，White 用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无性繁殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。1958年，英国科学家Steward 等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养的技术程序奠定了基础。1962年，Murashinge 和Skoog 在烟草培养中筛选出至今仍被广泛使用的MS培养基。1964-1966年，印度科学家Guha 和Maheswari 在曼陀

3、罗花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。1972年，Carlson 通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。外植体灭菌与接种操作第4页/共24页在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。组织培养1、植物组织培养的原理是什么？植物细胞具有全能性，即生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。思考：第5页/共24页植物组织培养过程取未开花植株茎上部新萌生的侧枝第6页/共24页愈伤组织细胞疏松、无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞第7页/共24页第8页/共24页离体的植物器官、组织、细胞脱分化愈

4、伤组织再分化根芽植物体植物组织培养过程植物组织培养条件 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。第9页/共24页愈伤组织第10页/共24页植物细胞全能性的表达 脱分化：将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的分裂活性。再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。第11页/共24页MS固体培养基成分及比例第12页/共24页植物组织培养过程示意图 2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的？没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。第13页/共24页一、污染的定义一、污染的定义指在组织培养过

5、程中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。第14页/共24页1、细菌污染：菌斑呈粘液状，界限比较明显，一般接种后12天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌二、污染原因二、污染原因第15页/共24页2、真菌污染：菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子接种后310天才能发现。主要是霉菌污染。二、污染原因二、污染原因第16页/共24页正常苗污染苗第17页/共24页1、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清洁三、污染途径第18页/共24页四、污染的预防措施（一）防止外植体带菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌（三）操作人员严格

6、遵守无菌操作规程（四）保证接种与培养环境清洁第19页/共24页激素配比模式生长素与细胞分裂素的比例决定着发育的方向，是愈伤组织、长根还是长芽。怎样调整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。第20页/共24页生长素和细胞分裂素作用生长素和细胞分裂素作用植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势使用顺序使用顺序实验结果实验结果先使用生长素，后使用先使用生长素，后使用细胞分裂素细胞分裂素有利于细胞分裂，但不有

7、利于细胞分裂，但不利分化利分化先使用细胞分裂素后使先使用细胞分裂素后使用生长素用生长素细胞既分裂也分化细胞既分裂也分化同时使用同时使用分化频率高分化频率高第21页/共24页生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素：有利于根的分化有利于根的分化生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素：有利于芽的分化，抑有利于芽的分化，抑制根的分化制根的分化生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素：促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响植物细胞发育方向的影响pHpH、温度、光照、温度、光照pHpH控制在控制在5.85.8左右，温度控制在左右，温度控制在18182222。C,C,每每日用日光灯照射日用日光灯照射12h12h第22页/共24页第23页/共24页感谢您的观看！第24页/共24页