高三生物一轮复习专题二微生物的培养与应用知识清单.docx

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1、专题二微生物的培养与应用1.实验室培养微生物需要解决哪两方面的问题?液体培养基和固体培养基的作用分别是什么?培养基中应具备哪些营养物质?实验室培养微生物要解决两方面问题:(1)需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件；(2)防止外来杂菌的入侵。液体培养基的作用:广泛应用于实验研究及大规模工业生产中，有利于广泛获得大量菌体或代谢产物。固体培养基的作用:广泛应用于微生物的分离培养、菌种鉴定和保藏。培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。2.霉菌和细菌适宜的pH分别是什么?消毒和灭菌的区别是什么?培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性；培养细菌时需将pH调至中性或微碱性。消毒是指使用较为温和的物理或化

2、学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。3.消毒和灭菌方法分别有哪些?适用范围分别是什么?实验室中常用的消毒方法:巴氏消毒法(如牛奶)、化学药制进行消毒(如酒精擦拭双手、氧气消毒水源)、实验室还用紫外线或化学药物消毒(如接种室、接种箱或超净工作台)、煮沸消毒法。实验室中常用的灭菌方法:灼烧灭菌(如接种环、接种针、或其他金属用具)、干热灭菌(如玻璃器皿、吸管、培养皿和金属用具)、高压蒸汽天菌(培养基)。4.配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是?什么时候调节叫值?平板为什么要倒置?配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的操

3、作步骤:计算一称量+溶化灭菌倒平板。调pH值应该在溶化后，灭菌前。平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠。将平板倒置，可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。5.平板划线法的操作过程是什么?平板划线法的操作流程:(1)将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红；(2)在火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞；(3)将试管口通过火焰；(4)将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液；(5)将试管口通过火焰，并塞上棉塞；(6)左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基；(7)灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线(原

4、因:将聚集的菌体逐步稀释便于获得单个菌落)。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区的相连。6.一般什么时候用平板划线法?什么时候用稀释涂布平板法?菌种该如何保存?一般需要观察菌落特征时用平板划线法。一般需要对活菌计数时用稀释涂布平板法。菌种临时保藏的方法:将菌种接种到试管的固体斜面培养基上(4的冰箱中保藏)(缺点:保存时间不长，菌种容易被污文成产生变异)菌种长期保存的方法:甘油管藏法(-20的冷冻箱中保存)7. 土壤中能分离出能分解尿素的细菌的原理是什么?-般来说到哪里去寻找目的菌株?又如何筛选目的菌株?原理:土壤中能分解尿素的细菌能合成脲酶，将尿素分解成氨。氨

5、使培养基碱性增强，遇酚红指示剂变红。一般来说，在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要大，到相应的环境中去寻找。筛选方法:人为提供有利于目的菌生长的条件包括营养、温度、pH等，同时抑制或阻止其他微生物生长。8.选择培养基和鉴别培养基的区别是什么?选择培养基:加入或不加入某种试剂(或营养物质)，允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。鉴别培养基:加入某种试剂，出现不同颜色或特征的菌落，如伊红美蓝培养基，大肠杆菌菌落呈现黑色。主要用于分离并区分不同的微生物。9.统计菌落数时一般选数目为多少的计数?统计的菌落数往往比实际菌落数低还是高?为什么?测定微生物数量的常用方法有哪

6、两种?统计菌落数时一般选择菌落数目在30300的平板进行计数;统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。常用测定微生物数量的方法:活菌计数法（稀释涂布平板法）、显微镜直接计数法(即用血细胞计数板，死菌活菌都计数在内，计数值比实际值高)。10.设置对照的目的是什么?要证明培养基是否被污集说么对照?要证明配制的培养基是否有选择作用又该设置什么对照?设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素（或无关变量）对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。要证明培养基是否被污染，将未接种的空白培养基在相同实验条件下培养，观察是否有菌落生长。要证明培养基是

7、否具有选择作用，在牛肉青蛋白陈培养基上接种与选择培养基等量的同种微生物。11.细菌的稀释度一般为多少?放线菌、真菌的稀释度呢?菌落有哪些特征?细菌的稀释度一般选用104、105、106倍。放线菌的稀释度一般选用103、104、105倍。真菌的稀释度一般选用102、103、104倍。菌落的特征有菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面。11. 鉴定尿素分解菌用什么指示剂?原理是什么?大肠杆菌用什么指示剂，菌落呈什么颜色?鉴定尿素分解菌用酚红指示剂，原理是细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，指示剂将变红。鉴定大肠杆菌用伊红美蓝指示剂，菌落呈现黑色。12. 筛选纤维素分解菌用什么?现象是什么?鉴定纤维素分解菌用刚果红染料。培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。13. 纤维素酶有哪些?纤维素被分解经历了哪些步骤?纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。15.用液体培养基选择培养微生物的作用是什么?要确定得到的是纤维素分解菌还需要进行什么实验?用液体培养基选择培养微生物可以增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。要确定得到的是纤维素分解菌需要进行发酵产纤维素酶的实验。学科网（北京）股份有限公司