微生物学第二章纯培养.ppt

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1、1 1、微生物培养的常用器具及其灭菌、微生物培养的常用器具及其灭菌灭菌方法：高压蒸汽灭菌灭菌方法：高压蒸汽灭菌 干热灭菌干热灭菌1 1、微生物培养的常用器具及其灭菌、微生物培养的常用器具及其灭菌生物安全超净柜生物安全超净柜小型无菌箱小型无菌箱平板（平板（plate）又称）又称培养平板（培养平板（culture plate）接种针接种针解剖镜解剖镜.培养培养武汉大学中国典型培养物保藏中心武汉大学中国典型培养物保藏中心几种常用菌种保藏方法的比较几种常用菌种保藏方法的比较方法名称方法名称方法名称方法名称主要措施主要措施主要措施主要措施适宜菌种适宜菌种适宜菌种适宜菌种保藏期保藏期保藏期保藏期评价评价评

2、价评价冰箱保藏法（斜面）冰箱保藏法（斜面）冰箱保藏法（斜面）冰箱保藏法（斜面）冰箱保藏法（半固体）冰箱保藏法（半固体）冰箱保藏法（半固体）冰箱保藏法（半固体）石蜡油封藏法石蜡油封藏法石蜡油封藏法石蜡油封藏法*沙土保藏法沙土保藏法沙土保藏法沙土保藏法冷冻干燥法冷冻干燥法冷冻干燥法冷冻干燥法低温低温低温低温低温低温低温低温低温、缺氧低温、缺氧低温、缺氧低温、缺氧干燥、无营养干燥、无营养干燥、无营养干燥、无营养干燥、无氧、低干燥、无氧、低干燥、无氧、低干燥、无氧、低温、有保护剂温、有保护剂温、有保护剂温、有保护剂各大类各大类各大类各大类细菌、酵母菌细菌、酵母菌细菌、酵母菌细菌、酵母菌各大类各大类各大

3、类各大类*产孢子微生物产孢子微生物产孢子微生物产孢子微生物各大类各大类各大类各大类3-63-63-63-6月月月月6-126-126-126-12月月月月1-21-21-21-2年年年年1-101-101-101-10年年年年5-155-155-155-15年年年年简便简便简便简便简便简便简便简便简便简便简便简便简便简便简便简便有效有效有效有效简便简便简便简便有效有效有效有效矿油斜面覆盖保藏矿油斜面覆盖保藏 武汉大学中国典型培养物保藏中心武汉大学中国典型培养物保藏中心无菌技术、菌落、纯培养、二元培养物；无菌技术、菌落、纯培养、二元培养物；掌握固体培养基分离纯培养的方法、选择培养分离法；掌握固体

4、培养基分离纯培养的方法、选择培养分离法；了解液体培养基分离纯培养的方法、单孢分离法；了解液体培养基分离纯培养的方法、单孢分离法；掌握获得目的微生物分离纯化的基本流程；掌握获得目的微生物分离纯化的基本流程；掌握菌种保藏的意义、常用菌株保藏方法；掌握菌种保藏的意义、常用菌株保藏方法；了解国内外菌种保藏机构。了解国内外菌种保藏机构。本章要求本章要求第二章第二章 纯培养纯培养1 1一般说来，严格的无菌操作是一切微生物学工作的基本要一般说来，严格的无菌操作是一切微生物学工作的基本要求，但在分离与培养极端嗜盐菌时，常在没有点酒精灯的普求，但在分离与培养极端嗜盐菌时，常在没有点酒精灯的普通实验台上倾倒培养平

5、板、在日常环境中直接打开皿盖观察通实验台上倾倒培养平板、在日常环境中直接打开皿盖观察和挑取菌落，而其研究结果并没有因此受到影响，你知道这和挑取菌落，而其研究结果并没有因此受到影响，你知道这是为什么吗？是为什么吗？答：培养极端嗜盐菌的培养平板需要添加很高浓度的氯化钠答：培养极端嗜盐菌的培养平板需要添加很高浓度的氯化钠（25%25%），实验室环境中的一般微生物都不能在这种选择培），实验室环境中的一般微生物都不能在这种选择培养基上生长，因此在实验过程中，即使不采取无菌操作技术，养基上生长，因此在实验过程中，即使不采取无菌操作技术，实验结果仍不会受到影响。实验结果仍不会受到影响。2如果希望从环境中分离

6、得到厌氧固氮菌，你该如如果希望从环境中分离得到厌氧固氮菌，你该如何设计实验？何设计实验？答：（答：（1）根据选择分离的原理设计不含氮的培养基，在这）根据选择分离的原理设计不含氮的培养基，在这种培养基上生长的细菌，其氮素应来自固氮作用。（种培养基上生长的细菌，其氮素应来自固氮作用。（2）将环境样品（例如土样）稀释涂布到选择平板上，放置于将环境样品（例如土样）稀释涂布到选择平板上，放置于厌氧罐中。对厌氧罐采用物理、化学方法除去氧气，保留厌氧罐中。对厌氧罐采用物理、化学方法除去氧气，保留氮气。培养后在平板上生长出来的细菌应是厌氧固氮菌或氮气。培养后在平板上生长出来的细菌应是厌氧固氮菌或兼性厌氧固氮菌

7、。（兼性厌氧固氮菌。（3）挑取一定数量的菌落，对应点种）挑取一定数量的菌落，对应点种到两块缺氮的选择平板上，分别放置于厌氧罐内、外保温到两块缺氮的选择平板上，分别放置于厌氧罐内、外保温培养。在厌氧罐内外均能生长的为兼性厌氧固氮菌，而在培养。在厌氧罐内外均能生长的为兼性厌氧固氮菌，而在厌氧罐外的平板上不能生长，在厌氧罐内的平板上生长的厌氧罐外的平板上不能生长，在厌氧罐内的平板上生长的即为可能的厌氧固氮菌。即为可能的厌氧固氮菌。3、对细菌的细胞形态进行观察和描述时应注意哪些方面、对细菌的细胞形态进行观察和描述时应注意哪些方面?你是你是否能很快地在显微镜下区分同为单细胞的细菌、酵母菌和原生否能很快地

8、在显微镜下区分同为单细胞的细菌、酵母菌和原生动物动物?答：答：(1)首先应使用稀释涂布等方法对待检菌株的纯度、群落首先应使用稀释涂布等方法对待检菌株的纯度、群落形态、生理特性等进行检查、确认。形态、生理特性等进行检查、确认。(2)选用正常的新鲜培养选用正常的新鲜培养基和新鲜培养物进行培养和观察，避免培养过程中一些物理、基和新鲜培养物进行培养和观察，避免培养过程中一些物理、化学条件的改变或培养时间过长等因素对细胞形态的影响。化学条件的改变或培养时间过长等因素对细胞形态的影响。(3)报告细胞大小时应选用多个细胞检测的平均数，并记录所报告细胞大小时应选用多个细胞检测的平均数，并记录所用的实验方法，包

9、括培养条件、培养时间、样品制备方法和染用的实验方法，包括培养条件、培养时间、样品制备方法和染色方法等。色方法等。(4)可从大小和形态上对细菌、酵母菌和原生动物可从大小和形态上对细菌、酵母菌和原生动物进行区分。酵母菌、原生动物个体较大，一般可用低倍镜观察，进行区分。酵母菌、原生动物个体较大，一般可用低倍镜观察，酵母菌细胞一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形，不具运动酵母菌细胞一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形，不具运动性，原生动物细胞形态多变，能够运动。相比较而言，细菌细性，原生动物细胞形态多变，能够运动。相比较而言，细菌细胞一般较小，需用高倍镜或油镜才能看清。胞一般较小，需用高倍镜或油镜才能看清。4、菌种保藏的意义、常用菌株保藏方法、菌种保藏的意义、常用菌株保藏方法