《芳酸类药物的分析》PPT课件.ppt

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1、第五章第五章 芳酸类药物的分析芳酸类药物的分析 第一节第一节 结构与性质结构与性质 第二节第二节 鉴别试验鉴别试验 第三节第三节 特殊杂质检查特殊杂质检查 第四节第四节 含量测定含量测定脂肪胺芳 胺羧 酸芳 酸常见的芳酸类药物 (可分3类）水杨酸类水杨酸类 解热镇痛药解热镇痛药消毒药消毒药水杨酸类水杨酸类 苯甲酸类苯甲酸类防腐药防腐药布美他尼布美他尼苯甲酸类苯甲酸类布洛芬布洛芬其他芳酸类其他芳酸类第一节第一节 结构与性质结构与性质 一、结构分析结构分析包括：芳酸、芳酸盐、芳酸酯共同点：苯环、羧基共同点：苯环、羧基 不同点：不同的取代基（如酚羟基、不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）芳伯

2、氨基等）二、性质性质（一）物理性质（1 1）固体）固体 具有一定的熔点具有一定的熔点 （2）溶解性 芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。游离芳酸类兽药几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；（二）化学性质 1.芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在36之间，属中等强度的酸或弱酸；X、NO2等吸电子取代基存在使酸性增强酸性增强 CH3、NH2、OH等斥电子取等斥电子取代基存在使酸性减弱代基存在使酸性减弱 邻位取代间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强（二）化学性质 2.芳酸碱金属盐易溶于水，水解，溶液呈碱性，但碱性太弱，所以其含量测定方法为双相滴定法或非水碱量法。（

3、二）化学性质 利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，可用水解后剩余滴定法测定其含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。3.芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；化化学学性性质质 4.取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如如:具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别；具芳伯氨基的药物可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。（二）化学性质 第二节第二节 鉴别试验鉴别试验 1、FeCl3反应反应 具酚羟基或水解后能产生酚羟基具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物的药物 水杨酸水杨酸(紫堇色紫堇色)对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠(紫红色紫红色)水杨酸二乙胺水杨

4、酸二乙胺对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚(蓝紫色蓝紫色)直 接 FeCl3 反应：酚酚羟羟基基鉴别鉴别直 接 FeCl3反应反应：芳芳羧羧基基加加稀盐酸稀盐酸碱式苯甲酸铁盐碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀的赭色沉淀 白白 色色鉴别鉴别 间 接 FeCl3反应：阿司匹林阿司匹林 Ch.P（2000）鉴别鉴别 取本品约取本品约0.1g，加水，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁，煮沸，放冷，加三氯化铁试液试液1滴，即显紫堇色。滴，即显紫堇色。鉴别鉴别2、重氮化、重氮化偶合反应偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物 鉴别鉴别重重氮氮化化对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚（扑

5、热息痛）（扑热息痛）对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠 直接：盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 间接：鉴别鉴别3、水解反应、水解反应鉴别鉴别水煮水煮4 4、溴代反应、溴代反应+3Br2+3HBr+CO2鉴别鉴别分解产物的反应5、特殊反应、特殊反应鉴别鉴别管壁凝结成白色升华物管壁凝结成白色升华物 UV TLCHPLC鉴别鉴别UV max:265nm、273nm TLC仪器法仪器法鉴别鉴别仪器法仪器法 O-H 31002500 cm-1 酯酯 c=o 1760 cm-1 羧基羧基c=o 1690 cm-1 芳环芳环c-c 1610,1485 cm-1 芳环邻二取代芳环邻二取代C-H 750 cm-1 O-H 9

6、20 cm-1IR 3000 2000 1800 1600 1000 800第三节第三节 特殊杂质检查特殊杂质检查 一、水杨酸中苯酚的检查 1.杂质来源杂质来源 原料残存（生产过程生产过程中原料反应不完全）特杂特杂2.检查方法标准对照法 原理 苯酚在碱性条件下可被铁氰化钾氧化为苯醌，进一步与4-氨基安替比林缩合 有色产物（CHCl3萃取比色)限 量：0.10%（USP用用 HPLC 检查检查）特杂特杂 二、阿司匹林中水杨酸的检查 原料残存（生产过程生产过程中乙酰化不完全）水解产生（贮存过程贮存过程中水解产生）1.杂质来源杂质来源（有毒、氧化为醌有色物质）有毒、氧化为醌有色物质）2.检查方法 标

7、准对照法 反应原理：酚羟基可直接与高铁盐Fe3+反应 限 量 原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）法）特杂特杂其他杂质：其他杂质：乙酰水杨酸酐（乙酰水杨酸酐（ASAN）乙酰水杨酰水杨酸（乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）水杨酰水杨酸（水杨酰水杨酸（SSA）特杂特杂第四节第四节 含量测定含量测定一、中和法一、中和法1.直接滴定法 pKa 36SolutionSample阿司匹林阿司匹林 Ch.P（2000）取取本本品品约约0.4g，精精密密称称定定，加加中中性性乙乙醇醇（对对酚酚酞酞指指示示液液显显中中性性）20ml，溶溶解解后后，加加酚酚

8、酞酞指指示示液液3滴滴，用用氢氢氧氧化化钠滴定液（钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。）滴定。每每lml的的氢氢氧氧化化钠钠滴滴定定液液（0.1mo1/L）相相当当于于18.02mg的的C9H8O4。含量含量含量含量醇中醇中阿司匹林阿司匹林直接滴定法酚酞酚酞（1）测定方法及计算 Ka=3.2710-4 ；反应摩尔比为11（2 2）讨论）讨论 含量含量 中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言 优点：简便、快速 缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）酸性杂质干扰（如水杨酸）适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合合格格原原料料药药的含量测定含量含量2.2

9、.水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法 阿司匹林原料药阿司匹林原料药含量含量酯的一般含量测定方法酯的一般含量测定方法USP（25）方法：取本品约）方法：取本品约1.5g，精密，精密称定，加入称定，加入NaOH滴定液滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，放冷，加酚酞指示液，用用H2SO4滴定液（滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的）滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。，并将滴定结果用空白试验校正。每每1ml的的NaOH滴定液（滴定液（0.5mol/l）相当）相当于于45.04mg的的C9H8O4。2NaOH（过量）H2SO

10、4 Na2SO42H2O剩余滴定：水解：含量含量 反应摩尔比为反应摩尔比为1 2 优点：优点：消除了酯键水解的干扰消除了酯键水解的干扰缺点：缺点：酸性杂质干扰酸性杂质干扰尚存在尚存在水解后水解后剩余滴定法剩余滴定法含量含量每每1 ml的的NaOH滴定液（滴定液（0.5 mol/l）相当于）相当于 45.04 mg 的的C9H8O4 3.3.两步滴定法两步滴定法 如阿司匹林片的测定：如阿司匹林片的测定：阿司匹林片、阿司匹林肠溶片含量含量 取取本本品品10片片，精精密密称称定定，研研细细，精精密密称称取取适适量量（约约相相当当于于阿阿司司匹匹林林0.3g），置置锥锥形形瓶瓶中中，加加中中性性乙乙醇

11、醇（对对酚酚酞酞指指示示液液显显中中性性）溶溶解解后后，振振摇摇使使阿阿司司匹匹林林溶溶解解，加加酚酚酞酞指指示示液液3滴滴，滴滴加加NaOH滴滴定定液液（0.1mol/L）至至溶溶液液显显粉粉红红色色，再再精精密密加加NaOH滴滴定定液液（0.1mol/L）40m1，置置水水浴浴上上加加热热15分分钟钟并并时时时时振振摇摇，迅迅速速放放冷冷至至室室温温，用用硫硫酸酸滴滴定定液液（0.05mol/L）滴滴定定，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每lml的的NaOH滴滴定液（定液（0.1mo1/L）相当于）相当于18.02mg的的C9H8O4。第第一一步步 中中和和含量

12、含量两步滴定法两步滴定法第二步 水解后剩余滴定 含量含量两步滴定法两步滴定法2NaOH（过量）H2SO4 Na2SO42H2O 反应摩尔比为11剩余滴定：含量含量降低了降低了 酯键水解的干扰酯键水解的干扰本法消除了酸性杂质的干扰，本法消除了酸性杂质的干扰，片剂含量测定结果的计算片剂含量测定结果的计算 含量含量剩余滴定：4.双相滴定法 芳酸碱金属盐 如苯甲酸钠 Ch.P(2000)溶剂：水乙醚 取本品取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，精密称定，置分液漏斗中，加水加水25m1、乙醚、乙醚50ml及甲基红指示液及甲基红指示液2滴，用滴，用HCl滴定液（滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇

13、，）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙加乙醚醚20m1，继续用，继续用HCl滴定液滴定液(0.5mo1/L)滴定，滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每。每1ml的的HCl滴定液（滴定液（0.5mol/L）相当于）相当于72.06mg的的C7H5NaO2。乙乙醚醚的的作作用用是：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清

14、晰。优点：消除了反应产物的干扰优点：消除了反应产物的干扰二、亚硝酸钠滴定法二、亚硝酸钠滴定法 含量含量 具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物酰氨基水解或硝基还原）的药物1.直接紫外分光光度法直接紫外分光光度法 *注射液注射液 Ch.P（2000）三、紫外分光光度法三、紫外分光光度法含量含量2.柱分配色谱柱分配色谱紫外分光光度法紫外分光光度法水杨酸的限量测定水杨酸的限量测定 固定相：固定相：FeCl3,SA保留，冰醋酸洗脱，保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量测水杨酸的量USP（25）阿司匹林胶囊）阿司匹林胶囊 可同时定量可同时定量测定阿司匹林

15、和水杨酸测定阿司匹林和水杨酸 1.阿司匹林栓剂阿司匹林栓剂 Ch.P（2000）离子抑制离子抑制 色谱法色谱法 内标法定量内标法定量 2.对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠 USP（25）离子对反相离子对反相 HPLC 内标法定量内标法定量四、四、HPLC 3.酚磺乙胺酚磺乙胺 Ch.P（2000）正相正相 HPLC 内标法定量内标法定量*鉴鉴别别水水杨杨酸酸及及其其盐盐类类，最最常常用用的的试试液是（液是（C）A.碘化钾 B.碘化汞钾C.三氯化铁三氯化铁 D.硫酸亚铁E.亚铁氰化钾*测测定定阿阿司司匹匹林林片片和和栓栓中中药药物物的的含含量量可采用的方法是（可采用的方法是（BC）A.重量法B.酸碱

16、滴定法酸碱滴定法C.高效液相色谱法高效液相色谱法 D.络合滴定法E.高锰酸钾法*两两步步滴滴定定法法测测定定阿阿司司匹匹林林片片的的含含量量 时时，每每 1ml氢氢 氧氧 化化 钠钠 溶溶 液液（0.1mol/L）相相当当于于阿阿司司匹匹林林（分分子子量量=180.16）的量是（）的量是（A）A.18.02mg B.180.2mgC.90.08mg D.45.04mgE.450.0mg 反应摩尔比为11T滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数c滴定液浓度，mol/LM被测物的摩尔质量，g/moln1mol 样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比 为1n*苯苯 甲甲 酸酸

17、 钠钠 的的 含含 量量 测测 定定，Ch.P（2000）采采用用双双相相滴滴定定法法，其其所用的溶剂体系为（所用的溶剂体系为（D）A.水乙醇 B.水冰醋酸C.水氯仿 D.水水乙醚乙醚E.水丙酮*双相滴定法可适用的药物为（双相滴定法可适用的药物为（E）A.阿司匹林B.对乙酰氨基酚C.水杨酸D.苯甲酸E.苯甲酸钠苯甲酸钠*含量测定方法(Ch.P 2000）为:A.直接中和滴定法直接中和滴定法 B.两步滴定法两步滴定法C.两者均可两者均可 D.两者均不可两者均不可阿司匹林片（B）阿司匹林原料药（A）阿司匹林栓剂（D）阿司匹林肠溶剂（B）A两步酸碱滴定法两步酸碱滴定法 B直接酸碱滴定法直接酸碱滴定法

18、C两者皆是两者皆是 D两者皆不是两者皆不是1.苯甲酸钠的测定（苯甲酸钠的测定（D）2.盐酸的测定（盐酸的测定（B）3.酸碱滴定法（酸碱滴定法（C）4.阿司匹林片的测定（阿司匹林片的测定（A）*阿阿司司匹匹林林加加碳碳酸酸钠钠试试液液加加热热后后，再再加加稀稀硫硫酸酸酸酸化化，此此时时产产生生的的白白色色沉沉淀应是（淀应是（C）A.苯酚 B.乙酰水杨酸C.水杨酸水杨酸 D.醋酸钠 E.醋酸苯酯*水水杨杨酸酸与与三三氯氯化化铁铁试试液液生生成成紫紫堇堇色色产产物物的的反反应应，要要求求溶溶液液的的pH值值是是（D）A.pH10.0 B.pH2.0C.pH78 D.pH46 E.pH2.00.1*两

19、两步步滴滴定定法法测测定定阿阿司司匹匹林林片片或或阿阿司司匹匹林林肠肠溶溶片片时时，第第一一步步滴滴定定反反应应的的作用是（作用是（B）A.测定阿司匹林含量B.消除共存酸性物质的干扰消除共存酸性物质的干扰C.使阿司匹林反应完全D.便于观测终点 E.有利于第二步滴定*能能用用与与FeC13试试液液反反应应产产生生现现象象鉴鉴别的药物有（别的药物有（ABC）A苯甲酸钠苯甲酸钠 B水杨酸水杨酸 C对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 D氢化可的松 E丙酸睾酮*采采用用双双相相滴滴定定法法测测定定苯苯甲甲酸酸钠钠含含量时，加入乙醚的目的是（量时，加入乙醚的目的是（A）A.防止反应产物的干扰防止反应产物的干扰 B.

20、乙醚层在水上面，防止样品被氧化 C.消除酸碱性杂质的干扰 D.防止样品水解 E.以上都不对*采采用用双双步步滴滴定定法法测测定定阿阿司司匹匹林林制制剂剂含含量量时时，被被测测组组分分与与标标准准溶溶液液的的反反应摩尔比为（应摩尔比为（C）A.2:1 B.1:2 C.1:1 D.3:1 E.以上都不对*区别水杨酸和苯甲酸钠，最常用区别水杨酸和苯甲酸钠，最常用的试液是（的试液是（C）A.碘化钾B.碘化汞钾C.三氯化铁三氯化铁 D.硫酸亚铁 E.亚铁氰化钾*在中性条件下，可与三氯化铁试在中性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成赭色沉淀的药物是（液反应，生成赭色沉淀的药物是（D）A.水杨酸钠B.对氨基水

21、杨酸钠C.乙酰水杨酸D.苯甲酸钠苯甲酸钠 E.扑热息痛*用直接滴定法测定阿司匹林含量用直接滴定法测定阿司匹林含量（ABE）A.反应摩尔比为反应摩尔比为1：1 B.在中性乙醇溶液中滴定在中性乙醇溶液中滴定 C.用盐酸滴定液滴定 D.以中性红为指示剂 E.滴定时应在不断振摇下稍快进行滴定时应在不断振摇下稍快进行 第六章第六章 巴比妥类药物的分析巴比妥类药物的分析（Analysis of Barbitals Drugs）一、化学结构与性质一、化学结构与性质 二、鉴别试验二、鉴别试验 三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查 四、含量测定四、含量测定 巴巴比比妥妥类类药药物物是是一一类类临临床床常常用用的的催

22、催眠眠镇镇静静药药。由由于于这这类类药药物物应应用用广广泛泛，容容易易因因不不合合理理使使用用而而引引起起中中毒毒，因因此此，需需要要对对本本类类药药物物的的原原料料、制制剂剂进进行行分分析析，有有时时也也需需要要对对生生物物样样品品中中微微量量巴巴比比妥妥类类药物进行分析。药物进行分析。第六章第六章第一节第一节 结构与性质结构与性质(The structure and properties)一、结构分析 结结构构通通式式基本基本第六章第六章5,5-取代的巴比妥类药物 5结构与性质结构与性质5区别各种巴比妥类药物 环状丙二酰脲、1,3-二酰亚胺基团 决定巴比妥类药物的特性 1.环状母核部分2.

23、取代基部分结构与性质结构与性质二、性质(Physical and chemical properties)（一）物理性质 1.白色结晶或结晶性粉未，具有固定的熔点 2.游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂；其钠盐则易溶于水，而不溶于有机溶剂。（二）化学性质 巴比妥类药物分子结构中都有1,3-二酰亚胺基团，能发生酮式和烯醇式的互变异构，在水溶液中可以发生二级电离。因此，本类药物的水溶液显弱酸性（pKa为7.3-8.4），可与强碱形成水溶性的盐类。1.弱酸性弱酸性性质弱酸性与强碱的成盐反应：与强碱的成盐反应：弱酸性2.水解反应水解反应红色石蕊变蓝红色石蕊变蓝性质3.与重金属离子反

24、应与重金属离子反应（1）与银盐的反应与银盐的反应 性质AgNO3+（2）与铜盐的反应与铜盐的反应 与重金属离子反应与重金属离子反应紫色紫色配位化合物配位化合物（3）与钴盐的反应与钴盐的反应无水：无水：所用试剂均应不含水分所用试剂均应不含水分反应条件：反应条件：碱性：碱性：异丙胺异丙胺与重金属离子反应与重金属离子反应与重金属离子反应与重金属离子反应（4）与汞盐的反应与汞盐的反应巴比妥类药物巴比妥类药物+汞盐汞盐白色白色 （可溶于氨试液）（可溶于氨试液）与重金属离子反应与重金属离子反应4.4.与香草醛（与香草醛（vanillinvanillin）的反应）的反应 性质 芳环取代基的反应芳环取代基的反

25、应 5.取代基的反应取代基的反应 性质a.与NaNO2H2SO4反应 苯巴比妥与NaNO2H2SO4反应生成橙黄色橙红色橙红色 苯巴比妥与甲醛H2SO4反应生成 玫瑰红色环玫瑰红色环 b.与甲醛H2SO4反应性质6.6.紫外吸收光谱特征紫外吸收光谱特征A.H2SO4溶液溶液(0.05mol/L)B.pH9.9缓冲溶液缓冲溶液C.NaOH溶液溶液D.(0.1mol/L)(pH 13)巴比妥类药物的紫外吸收光谱巴比妥类药物的紫外吸收光谱Anm与电离程度有关性质 5,5-5,5-取代的巴比妥类药物取代的巴比妥类药物 在pH=2的酸性溶液中，因不电离，几乎无明显的紫外吸收。在pH=10的碱性溶液中，发

26、生一级电离，于240 nm处有最大吸收。在pH=13的强碱性溶液中，发生二级电离，最大吸收红移至255 nm处。性质酰胺基团酰胺基团 取代基取代基7.IR吸收光谱特征吸收光谱特征 性质 取巴比妥类药物取巴比妥类药物50g，点于硅胶，点于硅胶GF254薄层板上，以氯仿薄层板上，以氯仿-丙酮（丙酮（4：1）为展开剂）为展开剂展开，薄层板干燥后，喷洒展开，薄层板干燥后，喷洒2%的的HgCl2乙乙醇溶液，随之再喷洒醇溶液，随之再喷洒2%的的1，5-二苯卡巴二苯卡巴腙的乙醇溶液，在紫色背景下可观察到巴腙的乙醇溶液，在紫色背景下可观察到巴比妥类药物的白色斑点。比妥类药物的白色斑点。8.TLC 特征特征 性

27、质第二节第二节 鉴别试验鉴别试验 (Test of identification)苯巴比妥 Ch.P（2000）【鉴别】（1）本品显丙二酰脲类的鉴别反应一、丙二酰脲类反应 取取供供试试品品约约0.1g0.1g，加加碳碳酸酸钠钠试试液液1ml1ml与与水水10m110m1，振振摇摇2min2min，滤滤过过，滤滤液液中中逐逐滴滴加加入入硝硝酸酸银银试试液液，即即白白色色沉沉淀淀，振振摇摇，沉沉淀淀即即溶溶解解；继继续续滴滴加加过过量量的的硝硝酸酸银银试试液液，白白色色沉淀不再溶解。沉淀不再溶解。1.与银盐的反应与银盐的反应鉴别鉴别 取取供供试试品品约约50mg50mg，加加吡吡啶啶溶溶液液（11

28、0110）5m15m1，溶溶解解后后，加加铜铜吡吡啶啶试试液液（硫硫酸酸铜铜4g4g，水水90ml90ml溶溶解解后后，加加吡吡啶啶30m130m1，即即得得）1m11m1，即即显显紫紫色或生成紫色沉淀。色或生成紫色沉淀。2.与铜盐的反应与铜盐的反应鉴别鉴别 巴比妥类的钠盐酸 游离巴比妥类药物 过滤 洗涤 干燥 测熔点 二、熔点测定及衍生物熔点测定二、熔点测定及衍生物熔点测定 1.熔点测定熔点测定鉴别鉴别 取取本本品品约约0.5 0.5 g g，加加水水5 5 mlml溶溶解解后后，加加稍稍过过量量稀稀盐盐酸酸，即即析析出出白白色色结结晶晶性性沉沉淀淀，滤滤过过；沉沉淀淀用用水水洗洗净净，在在

29、105105干干燥燥后后，依依法法测测定，熔点为定，熔点为174-178174-178。苯巴比妥钠的鉴别苯巴比妥钠的鉴别 Ch.P（2000）苯巴比妥钠 Ch.P（2000）【鉴别】三、钠盐的鉴别反应三、钠盐的鉴别反应本品显钠盐的鉴别反应鉴别鉴别钠盐的鉴别反应钠盐的鉴别反应 2.与醋酸氧铀锌反应 取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试液，即生成黄色1.焰色反应 2.取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色 苯巴比妥 Ch.P（2000）【鉴别】取本品约10 mg，加硫酸2滴与亚硝酸钠约5 mg，混合，即显橙黄色，随即转橙红色.芳环取代基的反应四、取代基的反应四、取代基的反

30、应 鉴别鉴别（3）取本品约50 mg，置试管中，加甲醛试液1 ml，加热煮沸，冷却，沿管壁缓缓加硫酸0.5 ml，使成两液层，置水浴中加热。界面显玫瑰红色甲醛硫酸的反应与【鉴别】苯巴比妥 异异戊戊巴巴比比妥妥、巴巴比比妥妥、取取异异戊戊巴巴比比妥妥或或巴巴比比妥妥0.2 g，加加氢氢氧氧化化钠钠试试液液10 m1，加加热热煮煮沸沸，则则产产生生具氨臭的气体。具氨臭的气体。五、水解反应五、水解反应鉴别鉴别 戊巴比妥戊巴比妥 于于瓷瓷盘盘中中放放入入戊戊巴巴比比妥妥10 10 mgmg和和香香草草醛醛10 10 mgmg，加加浓浓硫硫酸酸0.15 0.15 m1m1，混混合合后后，放放在在水水浴浴

31、上上加加热热30 30 s s，即即产产生生棕棕红红色色。放放冷冷，加加9696的的乙乙醇醇0.5 m10.5 m1，颜色则转变为暗蓝色。，颜色则转变为暗蓝色。六、与香草醛的反应六、与香草醛的反应鉴别鉴别七、紫外吸收光谱特征七、紫外吸收光谱特征 1.1.对照品对照法；对照品对照法；2.2.规定吸收波长法；规定吸收波长法；3.3.规定吸收波长和相应的吸收度法；规定吸收波长和相应的吸收度法；4.4.规定吸收波长和吸收系数法；规定吸收波长和吸收系数法；5.5.规定吸收波长和吸收度比值法。规定吸收波长和吸收度比值法。紫外光谱鉴别常用的方法：紫外光谱鉴别常用的方法：鉴别鉴别【鉴别】八、红外光谱法八、红外

32、光谱法 试验药品的红外光吸收图谱与试验药品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集对照的图谱（光谱集*图）一致。图）一致。鉴别鉴别TLC：一一般般采采用用对对照照品品（或或标标准准品品）比比较较法法，要要求求供供试试品品斑斑点点的的Rf 值值应与对照品斑点一致。应与对照品斑点一致。九、色谱行为特征九、色谱行为特征TLC、GC、HPLC 鉴别鉴别十、显微结晶鉴别十、显微结晶鉴别特色鉴别反应特色鉴别反应 巴比妥：巴比妥：长方形长方形 苯巴比妥：苯巴比妥：球形球形花瓣状花瓣状1 1药物本身的晶形药物本身的晶形鉴别鉴别 巴巴比比妥妥 铜铜吡吡啶啶试试液液 十字形紫色结晶十字形紫色结晶 苯苯巴巴比比妥妥 铜

33、铜吡吡啶啶试试液液 细细小不规则或似菱形的浅紫色结晶小不规则或似菱形的浅紫色结晶 2 2反应产物的晶形反应产物的晶形鉴别鉴别 以苯巴比妥为例，特殊杂质有苯以苯巴比妥为例，特殊杂质有苯丙二酰脲丙二酰脲 以苯巴比妥钠为例，游离的以苯巴比妥钠为例，游离的苯巴比妥为特殊杂质苯巴比妥为特殊杂质第三节第三节 特殊杂质检查特殊杂质检查(The relative substance test)用用碱碱滴滴定定液液测测定定酸酸类类物物质质的的中中和和法称为法称为酸量法酸量法 用用酸酸滴滴定定液液测测定定碱碱类类物物质质的的中中和和法称为法称为碱量法碱量法 第四节第四节 含量测定含量测定(Assay)一、酸量法一

34、、酸量法1.在水醇混合溶剂中的滴定法 弱酸性 pKa 7.38.4 麝香草酚酞NaOH淡蓝色淡蓝色水醇溶溶 解解苯巴比妥苯巴比妥含量含量 取取本本品品约约0.5g0.5g，精精密密称称定定，加加乙乙醇醇20m120m1溶溶解解后后，加加麝麝香香草草酚酚酞酞指指示示液液6 6滴滴，用用氢氢氧氧化化钠钠滴滴定定液液（0.1 0.1 mo1/Lmo1/L）滴滴定定，并并将将滴滴定定结结果果用用空空白白试试验验校校正正，即即得得。每每l l mlml氢氢氧氧化化钠钠滴滴定定液液（0.1 0.1 mol/Lmol/L）相当于相当于22.63 mg22.63 mg的的C C1111H H1818N N2

35、2O O3 3。苯巴比妥苯巴比妥的含量测定的含量测定 原料药：直接滴定法（空白校正）T滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数 V滴定时，供试品消耗滴定液的体积（ml）V0滴定时，空白消耗滴定液的体积（ml）ms供试品的质量 F浓度校正因子 溶溶 剂剂：二甲基甲酰胺：二甲基甲酰胺 滴定剂滴定剂：甲醇钠（钾）：甲醇钠（钾）指示剂指示剂：麝香草酚蓝：麝香草酚蓝 2.非水溶液滴定法非水溶液滴定法含量含量 终终点点指指示示：电位法指示（Ag电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比电极）自身指示 二、银量法二、银量法1.1.原原 理：理：反应摩尔比（反应摩尔比（1111）溶剂系统溶剂系统：甲醇+3%无水碳

36、酸钠含量含量 苯巴比妥：苯巴比妥：取本品约取本品约0.2 g0.2 g，精密称定，加甲，精密称定，加甲醇醇40 ml40 ml使溶解，再加新制的使溶解，再加新制的3 3无水无水碳酸钠溶液碳酸钠溶液15 m115 m1，照电位滴定法，用，照电位滴定法，用硝酸银滴定液（硝酸银滴定液（0.1 mol/L0.1 mol/L）滴定。每）滴定。每1 ml 1 ml 硝酸银滴定液（硝酸银滴定液（0.1 mo1/L0.1 mo1/L）相）相当于当于23.22 mg23.22 mg的的C C1212H H1212N N2 2O O3 3。2.测定方法与计算测定方法与计算含量含量原料药：直接滴定法 含量含量3.注

37、意事项注意事项（1 1）无水碳酸钠应新鲜配制）无水碳酸钠应新鲜配制（2 2）AgNOAgNO3 3滴定液应新鲜配制滴定液应新鲜配制（3 3）银电极使用前应进行处理）银电极使用前应进行处理含量含量 凡凡取取代代基基中中含含有有双双键键的的巴巴比比妥妥类类药药物物，其其不不饱饱和和键键可可与与溴溴定定量量地地发发生生加加成成反反应应，故故可可采采用用溴溴量量法法进进行行测测定定。如如司司可可巴巴比比妥妥钠钠及及其其胶胶囊囊的的测测定定原原理理为：为：三、溴量法三、溴量法1.原理原理 含量含量I22Na2S2O32NaINa2S4O6KBrO35KBr6HCl3Br26KCl3H2O Br22KI2

38、KBrI2 取溴酸钾3.0 g与溴化钾15 g，加水适量使溶解成1000 ml，摇匀。溴滴定液（0.1 mol/L）的配制：反应摩尔比反应摩尔比1 2含量含量司可巴比妥钠司可巴比妥钠 Ch.P（2000）：）：取取本本品品约约0.1g，精精密密称称定定，置置250ml碘碘瓶瓶中中，加加水水10m1，振振 摇摇 使使 溶溶 解解，精精 密密 加加 溴溴 滴滴 定定 液液（0.1mol/L）25ml，再再加加盐盐酸酸5m1，立立即即密密塞塞并并振振摇摇1min，在在暗暗处处静静置置15min后后，注注意意微微开开瓶瓶塞塞，加加碘碘化化钾钾试试液液10m1，立立即即密密塞塞，摇摇匀匀后后，用用硫硫代

39、代硫硫酸酸钠钠滴滴定定液液（0.1mol/L）滴滴定定，至至近近终终点点时时，加加淀淀粉粉指指示示液液，继继续续滴滴定定至至蓝蓝色色消消失失，并并将将滴滴定定结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每1ml溴溴滴滴定定液液（0.1mo1/L）相相当当于于13.01mg的的C12H17N2NaO3。2.测定方法与计算测定方法与计算原料药：剩余滴定法 含量含量3.注意事项注意事项（1 1）操作中要防止溴和碘的逸失）操作中要防止溴和碘的逸失（2 2）平行条件进行空白试验可减）平行条件进行空白试验可减少溴和碘逸失带来的误差。少溴和碘逸失带来的误差。含量含量四、四、紫外分光光度法紫外分光光度法（一）直接

40、（一）直接UVUV法法 本本法法是是将将样样品品溶溶解解后后，根根据据溶溶液液的的pHpH值值选选用用其其相相应应的的 maxmax处处进进行行直接测定。直接测定。单组分定量方法：单组分定量方法：含量含量1.吸收系数法吸收系数法2.2.标准曲线法标准曲线法含量含量3.对照法对照法 (单标法单标法)含量含量 取取硫硫喷喷妥妥钠钠约约100 mg，精精密密称称定定，置置于于200 ml量量瓶瓶中中，加加NaOH溶溶液液（1250）使使溶溶解解，并并稀稀释释至至刻刻度度，摇摇匀匀。精精密密量量取取该该溶溶液液5 ml移移入入500 ml量量瓶瓶中中，加加NaOH溶溶液液并并稀稀释释至至刻刻度度，摇摇

41、匀匀。另另取取硫硫喷喷妥妥对对照照品品适适量量，精精密密称称定定，加加NaOH溶溶液液溶溶解解，并并定定量稀释至浓度约为量稀释至浓度约为5 g/ml的对照品溶液。的对照品溶液。随随即即于于大大约约304 nm波波长长处处分分别别测测定定以以上上两两种种溶液的吸收度，以溶液的吸收度，以NaOH溶液作空白。溶液作空白。USP（24）测定硫喷妥钠的方法为：）测定硫喷妥钠的方法为：对照法对照法n稀释倍数（二）经提取分离后的紫外分光光度法（二）经提取分离后的紫外分光光度法 四、四、UV UV 称取供试品称取供试品苯巴比妥钠苯巴比妥钠50mg,50mg,置于分液漏斗置于分液漏斗中中,加水加水15mL15m

42、L使溶解使溶解,加盐酸加盐酸2mL,2mL,振摇振摇,析出苯巴比析出苯巴比妥妥,用氯仿提取用氯仿提取4 4次次,每次每次25mL,25mL,用脱脂棉滤入用脱脂棉滤入250mL250mL量瓶中量瓶中,以少量氯仿洗涤分液漏斗和滤器以少量氯仿洗涤分液漏斗和滤器,加氯仿加氯仿至刻度至刻度,摇匀。精密量取氯仿溶液摇匀。精密量取氯仿溶液5mL5mL，水蒸干。，水蒸干。残渣先用乙醇残渣先用乙醇5mL5mL，再用，再用pH9.6pH9.6硼酸盐缓冲溶液溶硼酸盐缓冲溶液溶解，移入解，移入100mL100mL量瓶中，用此缓冲溶液稀释至刻度，量瓶中，用此缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。摇匀，即为供试品溶液

43、。含量含量多组分混合物不经分离的定量方法多组分混合物不经分离的定量方法计算分光光度法计算分光光度法 解方程组法解方程组法 双波长分光光度法双波长分光光度法 差示分光光度法差示分光光度法 导数光谱法导数光谱法 三波长法三波长法含量含量 取取两两份份相相等等的的供供试试溶溶液液，分分别别制制成成两两种种不不同同的的化化学学环环境境（如如在在其其一一中中加加酸酸、碱碱或或缓缓冲冲液液改改变变溶溶液液的的pH，或或在在其其一一中中加加能能与与供供试试品品发发生生某某种种化化学学反反应应的的试试剂剂），然然后后将将两两者者分分别别稀稀释释至至同同样样浓浓度度，一一份份置置样样品品池池中中，另另一一份份置

44、置参参比比池池中中，于于适适当当波波长长处，测其吸收度的差值（处，测其吸收度的差值（A值）。值）。（三）差示分光光度法（三）差示分光光度法（A法）法）1.测定方法测定方法含量含量2.必要条件必要条件（1 1）供供试试品品在在不不同同的的化化学学环环境境中中以以不不同同的的分分子子形形式式存存在在，它它们们的的吸吸收收光谱有显著的差异。光谱有显著的差异。（2 2）干扰物的吸收不受测定时化学）干扰物的吸收不受测定时化学环境的影响，光谱行为不变。环境的影响，光谱行为不变。含量含量 供试品在两种不同的化学环境中分供试品在两种不同的化学环境中分别以别以x x、y y 表示，干扰物用表示，干扰物用 z z

45、 表示表示3.定量依据定量依据含量含量即，吸收度差值（即，吸收度差值（A）仅与待测组分）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，即的浓度有关，而与干扰组分无关，即干扰组分的干扰被消除。干扰组分的干扰被消除。可用对照法或标准曲线法定量可用对照法或标准曲线法定量 保留了通常的分光光度法简保留了通常的分光光度法简易快速、直接读数的优点，又无易快速、直接读数的优点，又无需事先分离，并能消除干扰。需事先分离，并能消除干扰。4.特点特点含量含量 （1 1）于波长）于波长240 nm240 nm处，测定处，测定pH10pH10和和pH2pH2两种溶液的吸收度之差两种溶液的吸收度之差5.应用应用 （2 2）

46、于波长）于波长260 nm260 nm处，测定处，测定pH10pH10和和强碱溶液的吸收度之差强碱溶液的吸收度之差 含量含量第四章第四章 巴比妥类药物的分析巴比妥类药物的分析1掌握巴比妥类药物的化学结构与分析方法间的关系：（1）弱酸性（2）水解性（3）与重金属离子的反应 2掌握巴比妥类药物的鉴别：（1）与重金属的反应（2）特殊取代基（不饱和烃基取代、芳环取代）和硫元素的鉴别试验 3 3掌握巴比妥类药物含量测定掌握巴比妥类药物含量测定的原理与方法：的原理与方法：（2）紫外分光光度法测定（计算）（1）银量法测定的原理与含量计算 练习题1.巴比妥类药物具有的特性为：A.弱碱性B.弱酸性C.易与重金属

47、离子络合D.易水解E.具有紫外特征吸收 2.苯苯巴巴比比妥妥钠与铜盐的鉴别反应生成物为:A.紫色B.绿色C.蓝色D.黄色 E.紫堇色 3巴比妥类药物在吡啶溶液中与铜吡啶试液作用，生成配位化合物，显绿色的药物是:A.苯巴比妥B.异戊巴比妥C.司可巴比妥D.巴比妥E.硫喷妥钠 5.巴比妥类药物的鉴别方法有:A.与钡盐反应生成白色化合物B.与镁盐反应生成红色化合物C.与银盐反应生成白色沉淀D.与铜盐反应生成有色产物E.与氢氧化钠反应生成白色沉淀 8.于Na2CO3溶液中加AgNO3试液，开始生成白色沉淀经振摇即溶解，继续加AgNO3试液，生成的沉淀则不再溶解，该药物应是:A.盐酸可待因 B.咖啡因C

48、.新霉素 D.维生素CE.苯巴比妥9.与NaNO2H2SO4反应生成橙黄至橙红色产物的药物是:A.苯巴比妥B.司可巴比妥C.巴比妥D.硫喷妥钠E.硫酸奎宁 10.中国药典（2000年版）采用AgNO3滴定液（0.1 mol/L）滴定法测定苯巴比妥的含量时，指示终点的方法应是:A.K2CrO4溶液B.荧光黄指示液C.Fe(III)盐指示液D.电位法指示终点法E.永停滴定法 11.银量法测定苯巴比妥钠含量时,若用自身指示法来判断终点,样品消耗标准溶液的摩尔比应为:A.1:2 B.2:1C.1:1D.1:4E.以上都不对 12.非水溶液滴定法测定巴比妥类药物含量时，下面哪些条件可采用:A.冰醋酸为溶剂B.二甲基甲酰胺为溶剂C.高氯酸为滴定剂D.甲醇钠为滴定剂E.结晶紫为指示剂 13.下列哪些性质适用于巴比妥类药物:A.母核为7-ACAB.母核为1,3-二酰亚胺基团C.母核中含2个氮原子D.与碱共热，有氨气放出E.水溶液呈弱碱性 14.用酸量法测定巴比妥类药物含量时，适用的溶剂为:A.碱性B.水C.酸水D.醇水E.以上都不对 18.中国药典（2000年版）采用银量法测定苯巴比妥片剂时，应选用的试剂有:A.甲醇B.AgNO3C.3无水碳酸钠溶液D.终点指示液E.KSCN