生物期末复习选修.ppt

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1、判断判断1.1.将目的基因整合到受体细胞染色体将目的基因整合到受体细胞染色体DNADNA上的过程上的过程属于基因重组属于基因重组2.2.若能在植物细胞中检测到抗性基因，则说明该若能在植物细胞中检测到抗性基因，则说明该基因工程成功了基因工程成功了3.3.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体抗体4.4.动物可通过细胞融合技术培养出新品种动物可通过细胞融合技术培养出新品种 5.5.一种基因探针能检测水体中的各种病毒一种基因探针能检测水体中的各种病毒6.6.人工种子相比天然种子可随意改变植物的遗传性状人工种子相比天然种子可随意改变植物的遗传性状10.10

2、.一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列11.11.生产单克隆抗体时，在培养液中加入某种试剂能够筛生产单克隆抗体时，在培养液中加入某种试剂能够筛选出杂交瘤细胞，因为该试剂能选择性地抑制骨髓瘤细胞选出杂交瘤细胞，因为该试剂能选择性地抑制骨髓瘤细胞的的DNADNA复制。复制。7.7.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的愈伤组织基因相同。愈伤组织基因相同。8.8.将人的胰岛素基因导入大肠杆菌细胞内，使大肠杆菌生将人的胰岛素基因导入大肠杆菌细胞内，使大肠杆菌生产人的胰岛素技术属于蛋白质工程。产人的胰岛素技术属

3、于蛋白质工程。9.9.利用利用PCRPCR技术扩增目的基因，在技术扩增目的基因，在PCRPCR合成仪中应加入的物合成仪中应加入的物质不应该有解旋酶。质不应该有解旋酶。12.12.小鼠骨髓瘤细胞和小鼠骨髓瘤细胞和B B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体。淋巴细胞融合可制备单克隆抗体。1313.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性无生物活性1414.在植物细胞组织培养中胚不能作为组织培养的在植物细胞组织培养中胚不能作为组织培养的材料材料16.16.植物体细胞杂交过程就是原生质体融合的过程植物体细胞杂交过程就是原生质体融合的过程17.17.将目的基因直

4、接导入大肠杆菌，然后让其感染将目的基因直接导入大肠杆菌，然后让其感染 并转入某植物细胞中并转入某植物细胞中15.15.对胚胎进行性别鉴定时可取囊胚的滋养层细胞对胚胎进行性别鉴定时可取囊胚的滋养层细胞 做做DNADNA分析。分析。18.18.外源外源DNADNA必须位于重组质粒的启动子和终止子必须位于重组质粒的启动子和终止子 之间才能进行复制之间才能进行复制 19.19.重组质粒与探针能进行分子杂交是因为重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNADNA分分 子脱氧核糖和磷酸交替连接子脱氧核糖和磷酸交替连接20.20.无论动物细胞的原代培养，还是传代培养过程无论动物细胞的原代培养，还是传代培养过程中

5、都会发生细胞贴壁和接触抑制的现象。中都会发生细胞贴壁和接触抑制的现象。21.21.目的基因是否被整合到受体细胞目的基因是否被整合到受体细胞DNADNA上，检测上，检测 方法是用同位素标记的目的基因做探针，进行方法是用同位素标记的目的基因做探针，进行 DNADNA分子杂交实验。分子杂交实验。22.22.排卵是指卵子从卵泡中排出排卵是指卵子从卵泡中排出1.DNA1.DNA重组技术的重组技术的工具酶工具酶：限制酶限制酶 、DNADNA连接酶连接酶 2.DNA 2.DNA重组技术的重组技术的工具工具：限制酶限制酶 、DNADNA连接酶、运载体连接酶、运载体(载体）载体）3.3.在基因工程中使用的在基因

6、工程中使用的载体载体：质粒、质粒、噬菌体衍生物、动植物病毒噬菌体衍生物、动植物病毒4.4.天然质粒是否能直接用做载体？天然质粒是否能直接用做载体？不能不能5.5.不同生物的不同生物的DNADNA分子（或基因）能重组的原因分子（或基因）能重组的原因是：是：结构和基本单位相同结构和基本单位相同基因工程基因工程6.6.基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序第一步、获取目的基因第一步、获取目的基因第二步、构建表达载体第二步、构建表达载体第三步、将目的基因导入受体细胞第三步、将目的基因导入受体细胞第四步、目的基因的检测与鉴定第四步、目的基因的检测与鉴定（核心）（核心）7.7.目的基因的获取目的基因

7、的获取途径途径基因文库、基因文库、PCRPCR技术扩增、人工合成技术扩增、人工合成8.PCR8.PCR技术扩增目的基因技术扩增目的基因DNADNA双链复制双链复制(1)(1)原理：原理：(2)(2)前提：前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列(3)(3)互补链延伸时所用酶：互补链延伸时所用酶：TaqTaq酶（热稳定性酶（热稳定性DNADNA聚合酶）聚合酶）9.9.基因表达载体的组成基因表达载体的组成(1)(1)目的基因目的基因(2)(2)启动子启动子(3)(3)终止子终止子(4)(4)标记基因标记基因(抗性基因或荧光蛋白基因抗性基因或荧光蛋白基因）10.10.将

8、目的基因导入植物细胞将目的基因导入植物细胞（1 1）采用最多的方法：）采用最多的方法：农杆菌转化法农杆菌转化法（2 2）农杆菌）农杆菌TiTi质粒上有可转移的质粒上有可转移的 T-DNA11.11.将目的基因导入动物细胞将目的基因导入动物细胞（2 2）常用的受体细胞）常用的受体细胞 受精卵受精卵（1 1）采用最多、最有效方法）采用最多、最有效方法显微注射技术显微注射技术12.12.将目的基因导入微生物细胞将目的基因导入微生物细胞 常用处理方法常用处理方法CaCa2+2+处理处理使细胞呈感受态使细胞呈感受态13.13.目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定n（1 1）检测）检测:分子水平分子水

9、平是否插入目的基因是否插入目的基因（关键）：（关键）：是否转录：是否转录：是否翻译：是否翻译：（2 2）鉴定）鉴定:个体水平个体水平做接种实验做接种实验分子杂交分子杂交分子杂交分子杂交抗原抗原抗体杂交抗体杂交探针：探针：用同位素标记的目的基因的片段用同位素标记的目的基因的片段14.14.将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等重组在将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等重组在一起得到的转基因动物，称为一起得到的转基因动物，称为乳腺（乳房）生物反应器乳腺（乳房）生物反应器15.15.治疗遗传病的最有效手段是：治疗遗传病的最有效手段是：基因治疗基因治疗16.16.蛋白质工程直接操作对象是：蛋白质工程

10、直接操作对象是：基因基因是否遵循中心法则？是否遵循中心法则？遵循遵循是否需要基因工程中的工具酶？是否需要基因工程中的工具酶？需要需要被喻为：被喻为：第二代基因工程第二代基因工程1.1.植物组织培养技术植物组织培养技术 脱分化脱分化营养、营养、激素激素再分化再分化光照光照胚状体或丛芽胚状体或丛芽离体离体植物组植物组织、器官、织、器官、细胞细胞(外植外植体）体）试管苗试管苗(1)(1)当生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织当生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织脱分化和根原基形成脱分化和根原基形成(2)(2)反之则诱导反之则诱导再分化和芽原基形成再分化和芽原基形成愈伤组织愈伤组织细胞

11、工程细胞工程2.2.植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术(1)(1)去壁的常用方法：去壁的常用方法：酶解法（纤维素酶和果胶酶）酶解法（纤维素酶和果胶酶）(2)(2)原生质体融合方法：原生质体融合方法：物理法：离心、振动、电激等物理法：离心、振动、电激等 化学法：聚乙二醇（化学法：聚乙二醇（PEGPEG）(3)(3)细胞融合的原理：细胞融合的原理：细胞膜的流动性细胞膜的流动性(4)(4)意义意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍克服了远缘杂交不亲和的障碍3.3.动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件(1)(1)无菌、无毒的环境无菌、无毒的环境(2)(2)营养营养(3)(3)温度和温度和pHpH(4)(4

12、)气体环境气体环境对对 和培养用具进行无菌处理；和培养用具进行无菌处理；在培养液中添加一定量的在培养液中添加一定量的 ;定期更换定期更换 ；合成培养基：合成培养基：葡萄糖、氨基酸、无机盐、葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素等、微量元素等还需要加还需要加 等天然成分。等天然成分。温度温度 0.5 0.5度，度，pH7.2pH7.27.47.495%95%空气加空气加 的混合气体。的混合气体。O O2 2是是 所必需的所必需的;COCO2 2是是培养液培养液抗生素抗生素培养液培养液促生长因子促生长因子动物血清、血浆动物血清、血浆36.55%CO2细胞代谢细胞代谢维持培养液维持培养液PHM中期卵母细胞

13、中期卵母细胞4.体细胞核移植的受体细胞通常为体细胞核移植的受体细胞通常为5.杂交瘤细胞的特点：杂交瘤细胞的特点：即能迅速大量繁殖、又能产生专一抗体即能迅速大量繁殖、又能产生专一抗体特异性强、灵敏度高、可大量制备特异性强、灵敏度高、可大量制备6.6.单克隆抗体的主要优点单克隆抗体的主要优点7.7.利用单克隆抗体可制作利用单克隆抗体可制作“生物导弹生物导弹”，其，其作用为：作用为：导向作用导向作用(特异性）特异性）8.8.制备单克隆抗体是，选择制备单克隆抗体是，选择B B淋巴细胞的原因淋巴细胞的原因是是每个每个B淋巴细胞只产生一种特异性抗体淋巴细胞只产生一种特异性抗体9.9.诱导动物细胞间融合的方

14、法与植物细胞不诱导动物细胞间融合的方法与植物细胞不同的是：同的是：用灭活的病毒用灭活的病毒10.10.目前使用的或冷冻保存的正常细胞为：目前使用的或冷冻保存的正常细胞为：1010代以内，以保持代以内，以保持正常正常二倍体核型二倍体核型11.11.当当 培养时，少部分细胞克服自然寿命极限，已经发生了培养时，少部分细胞克服自然寿命极限，已经发生了 ，并朝向，并朝向 方向发展。方向发展。传代传代突变突变癌细胞癌细胞接触抑制接触抑制12.12.无论原代还是传代培养，细胞都会出现的现象：无论原代还是传代培养，细胞都会出现的现象：贴壁生长贴壁生长13.13.精子细胞变形中的主要变化：精子细胞变形中的主要变

15、化：1)1)细胞核细胞核2)2)高尔基体高尔基体3)3)中心体中心体4)4)线粒体线粒体5)5)细胞内其他物质细胞内其他物质精子头的主要部分精子头的主要部分头部的顶体头部的顶体精子的尾精子的尾线粒体鞘线粒体鞘 原生质滴原生质滴 14.14.卵子受精的重要标志：卵子受精的重要标志：在卵细胞膜和透明带间隙观察到两个极体在卵细胞膜和透明带间隙观察到两个极体15.15.获能的精子和卵子相遇时，依次会发生什么获能的精子和卵子相遇时，依次会发生什么现象？（防止多精入卵的两个屏障是什么？）现象？（防止多精入卵的两个屏障是什么？）透明带反应透明带反应卵细胞膜反应卵细胞膜反应16.16.哺乳动物的受精过程主要包

16、括：哺乳动物的受精过程主要包括：顶体反应顶体反应卵细胞膜反应）卵细胞膜反应）（透明带反应（透明带反应精子穿越放射冠和透明带，进入卵细胞膜，精子穿越放射冠和透明带，进入卵细胞膜，原核的形成和融合。原核的形成和融合。17.17.卵子的发生卵子的发生n(1)(1)发生部位：发生部位：n(2)(2)时间：时间：n减数第一次分裂是在雌性动物减数第一次分裂是在雌性动物 完成；完成；减数第二次分裂是在减数第二次分裂是在 的过程完成的。的过程完成的。卵巢卵巢始于胚胎时期性别分化后始于胚胎时期性别分化后排卵前后排卵前后精卵结合精卵结合18.18.胚胎发育胚胎发育卵裂期：卵裂期：在透明带内进行在透明带内进行 ，细

17、胞数量不断增加，但，细胞数量不断增加，但胚胎胚胎 并不增加，或略有减少。并不增加，或略有减少。有丝分裂有丝分裂总体积总体积桑椹胚：桑椹胚：由具有由具有 构成，细胞数在构成，细胞数在3232个左右。个左右。全能性细胞全能性细胞囊胚：囊胚：细胞开始出现了细胞开始出现了 。分化分化内细胞团：内细胞团：滋养层：滋养层：发育成胎儿各组织发育成胎儿各组织发育成胎膜和胎盘发育成胎膜和胎盘19.19.试管动物技术是指通过试管动物技术是指通过 使卵使卵子和精子在子和精子在 下成熟和受精，并通下成熟和受精，并通过培养发育为过培养发育为 后，再经移植产生后，再经移植产生后代的技术。后代的技术。人工操作人工操作体外条

18、件体外条件早期胚胎早期胚胎20.20.对实验小鼠用对实验小鼠用 处理，使其排出更处理，使其排出更多的卵子，然后，从多的卵子，然后，从 中冲取卵子，中冲取卵子，与获能的精子在体外受精。与获能的精子在体外受精。促性腺激素促性腺激素输卵管输卵管直接直接21.21.通常采用的对精子获能处理的方法有：通常采用的对精子获能处理的方法有：培养法和化学诱导法培养法和化学诱导法（肝素或钙离子载体（肝素或钙离子载体A23187溶液）溶液）22.22.胚胎移植的实质是：胚胎移植的实质是：早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移23.23.精子和卵子在体外受精后，应将受精卵

19、移入精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入 中继续培养，其成分有中继续培养，其成分有发育培养液发育培养液无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等。无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等。24.24.冲卵是指冲卵是指:从子宫内冲洗出胚胎从子宫内冲洗出胚胎25.25.将将 均等分割，否则影响分割后胚胎均等分割，否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。的恢复和进一步发育。内细胞团内细胞团26.26.胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移植的成功率也移植的成功率也 。越低越低27.27.胚胎分割可以看做动物胚胎分割可以看做动物 的的方法之

20、一方法之一无性繁殖或克隆无性繁殖或克隆来源：来源：28.28.胚胎干细胞胚胎干细胞早期胚胎或原始性腺早期胚胎或原始性腺形态特点：形态特点：体积小体积小,细胞核大细胞核大,核仁明显核仁明显功能特点：功能特点：发育的全能性发育的全能性29.29.胚胎移植的生理学基础胚胎移植的生理学基础生理学基础生理学基础意义意义同种动物的供体和受体发情排卵同种动物的供体和受体发情排卵后生殖器官的后生殖器官的 是相同的是相同的生理变化生理变化为供体的胚胎移入受体提供为供体的胚胎移入受体提供相同的相同的 。生理环境生理环境早期胚胎形成后，在一定时间内早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联不会与母体子

21、宫建立组织上的联系，而是处于系，而是处于 状态。状态。为胚胎的收集提供了可能为胚胎的收集提供了可能游离游离受体对移入子宫的外来胚胎受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生基本上不发生 。免疫排斥反应免疫排斥反应供体胚胎可与受体子宫建立正常供体胚胎可与受体子宫建立正常的的 和和 联系，但其联系，但其 不受影响。不受影响。生理生理组织组织遗传特性遗传特性为胚胎在受体内的存活为胚胎在受体内的存活提供了可能提供了可能为移植后的胚胎继续发育为移植后的胚胎继续发育提供了营养等方面的保障提供了营养等方面的保障选择选择供体母牛供体母牛受体母牛受体母牛 供体公牛供体公牛配种配种 质量检查、培养质量检查、培养 分娩（胚胎移植的犊牛）分娩（胚胎移植的犊牛）30.30.胚胎移植的基本程序胚胎移植的基本程序同期发情处理同期发情处理超数排卵超数排卵冲卵冲卵胚胎移植胚胎移植妊娠检查妊娠检查