《食品酶学绪论》PPT课件.ppt
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1、食品酶学食品酶学课程课程n课程编码:课程编码:08383004n课程名称:课程名称:食品酶学n英文名称:英文名称:Food Enaymology n学时学时/学分:学分:30/1.5 n课程类型:课程类型:学科基础限选课n开课专业:开课专业:食品科学与工程专业、食品质量与安全专业n选用教材:选用教材:何国庆主编:食品酶学 化学工业出版社2006年版。食品酶学食品酶学教学内容教学内容n第一章第一章 绪论绪论n第二章第二章 酶在食品工业中的应用(重点)酶在食品工业中的应用(重点)n第三章第三章 酶学基础知识酶学基础知识n第四章第四章 酶工程酶工程(重点)(重点)n 酶的生产酶的生产n 酶的分离纯化
2、技术酶的分离纯化技术n 酶的固定化技术酶的固定化技术n 酶分子修饰与改造酶分子修饰与改造n第五章第五章 食品工业中应用的酶食品工业中应用的酶主要参考书主要参考书n1、王璋主编:、王璋主编:食品酶学食品酶学,中国轻工业出版社,中国轻工业出版社1997年版。年版。n2、彭志英主编:、彭志英主编:食品酶学导论食品酶学导论,中国轻工业出版社,中国轻工业出版社2002年版。年版。n3、郭勇,郑穗平主编:、郭勇,郑穗平主编:酶学酶学,华南理工大学出版社,华南理工大学出版社2000年版。年版。n4、主编,李雁群,肖功年译:、主编,李雁群,肖功年译:酶在食品加工中的应用酶在食品加工中的应用(第二版),中国轻工
3、业出版社(第二版),中国轻工业出版社2002年版。年版。n5、郭勇,郑穗平主编:、郭勇,郑穗平主编:酶在食品工业中的应用酶在食品工业中的应用,中国轻,中国轻工业出版社工业出版社1996年版。年版。n6、周晓云主编:、周晓云主编:酶学原理与酶工程酶学原理与酶工程,中国轻工业出版社,中国轻工业出版社2005年版。年版。n7、罗贵民主编:、罗贵民主编:酶工程酶工程,化学工业出版社,化学工业出版社2003年版。年版。几点要求几点要求n1、要求学生保证上课出勤率,、要求学生保证上课出勤率,病、事假需要病、事假需要有假条有假条,并在每次上课之前由班长或课代表转,并在每次上课之前由班长或课代表转交任课教师;
4、交任课教师;n2、课堂上请、课堂上请关闭手机关闭手机;n3、上课注意力集中,请保持与老师授课内容、上课注意力集中,请保持与老师授课内容同步,并同步,并认真记好各个补充的知识点认真记好各个补充的知识点;n4、成绩评定:、成绩评定:n n总成绩总成绩=10%出勤率出勤率+30%综述性论文综述性论文n n +60%期末闭卷考试成绩期末闭卷考试成绩n酶的应用可以追溯到几千年前;n对酶的真正发现和对酶本质的认识直到19世纪中叶才开始起步;n随着现代科技的发展和人们对酶本质认识的不断深化,酶的定义也不断变化。第一章第一章 绪论绪论n20世纪世纪80年代初,年代初,Cech和和Altman等发现等发现具有催
5、化功能的具有催化功能的RNA一一核酶,不但打破了酶是核酶,不但打破了酶是蛋白质的传统观念,开蛋白质的传统观念,开辟了酶学研究的新领域。辟了酶学研究的新领域。n n更加科学的定义:更加科学的定义:酶是由生物活细胞所产酶是由生物活细胞所产酶是由生物活细胞所产酶是由生物活细胞所产生的、具有高效和专一生的、具有高效和专一生的、具有高效和专一生的、具有高效和专一催化功能的生物大分子催化功能的生物大分子催化功能的生物大分子催化功能的生物大分子。nDixon和和Webb在在1979年的著作中对酶定义年的著作中对酶定义为:为:“酶是一种由于其特异的活性能力而酶是一种由于其特异的活性能力而具有催化特性的蛋白质具
6、有催化特性的蛋白质”。1.1 酶的定义酶的定义n n酶的核心本质:酶的核心本质:酶的核心本质:酶的核心本质:酶是催化剂;酶是催化剂;酶是催化剂;酶是催化剂;酶是生物催化剂。酶是生物催化剂。酶是生物催化剂。酶是生物催化剂。n n酶作为生物催化剂,具有一般催化酶作为生物催化剂,具有一般催化酶作为生物催化剂,具有一般催化酶作为生物催化剂,具有一般催化剂的共有特性:剂的共有特性:剂的共有特性:剂的共有特性:n n只改变反应的速率而不改变反应只改变反应的速率而不改变反应只改变反应的速率而不改变反应只改变反应的速率而不改变反应性质、反应方向和反应平衡点;性质、反应方向和反应平衡点;性质、反应方向和反应平衡
7、点;性质、反应方向和反应平衡点;n n在反应过程中不消耗;在反应过程中不消耗;在反应过程中不消耗;在反应过程中不消耗;n n可降低反应的活化能。可降低反应的活化能。可降低反应的活化能。可降低反应的活化能。n n酶作为生物催化剂,具有一般催化剂所不具有酶作为生物催化剂,具有一般催化剂所不具有酶作为生物催化剂,具有一般催化剂所不具有酶作为生物催化剂,具有一般催化剂所不具有的特殊性能:的特殊性能:的特殊性能:的特殊性能:n高效性高效性 酶参与反应比非酶促反应速率高1081020倍,比其他催化反应高1071013倍。n高度专一性高度专一性酶对催化反应的反应性质和反应底物都有严格的 选择性,只能催化一种
8、或一类的反应,作用于一 种或一类的底物。n易变性易变性 酶活力与结构状态密切相关,任何使其结构发生变化 的因素都会引起其催化功能的变化甚至完全丧失。因此,酶促反应必须在温和的条件下进行。n高度受控性高度受控性 酶的催化活力在体内或体外受到多种因素调节酶的催化活力在体内或体外受到多种因素调节 和控制,如基因表达、辅助因子、存在状态、和控制,如基因表达、辅助因子、存在状态、反馈抑制、底物水平、激素水平、激活剂、反馈抑制、底物水平、激素水平、激活剂、抑制剂、温度、抑制剂、温度、pH,酶原激活等。,酶原激活等。n代谢相关性代谢相关性 在生物体内,酶控制着所有重要生物大分子 (蛋白质、碳水化合物、脂类、
9、核酸)和小分子(氨基酸、糖和维生素)合成和分解。1.2 酶学研究内容酶学研究内容n酶学(酶学(Enzymology):):研究酶的性质 酶的作用规律 酶结构和作用原理 酶的生物学功能 酶的应用的一门科学。n n酶学的重点研究范畴:酶学的重点研究范畴:酶学的重点研究范畴:酶学的重点研究范畴:酶的生物合成机理 酶的生产及调节控制 酶的分离提纯 酶作用特性和反应动力学 酶的催化作用机制 酶的固定化技术 酶的应用等内容。n食品酶学食品酶学n(food enaymology)是酶学的基本理论在食是酶学的基本理论在食品科学与技术领域中应品科学与技术领域中应用的科学,是酶学的重用的科学,是酶学的重要分支学科
10、。要分支学科。n食品酶学主要研究内容:食品酶学主要研究内容:n食品原料和产品中酶的食品原料和产品中酶的性质、结构、作用规律性质、结构、作用规律以及对食品储藏、加工以及对食品储藏、加工和食用品质的影响,和食用品质的影响,n食品级酶的生产及其在食品级酶的生产及其在食品储藏、加工等环节食品储藏、加工等环节的应用理论与技术等。的应用理论与技术等。1.3食品酶学研究内容食品酶学研究内容1.4 食品酶学的发展简史食品酶学的发展简史n(一)无意识的应用阶段一)无意识的应用阶段n 远古时代远古时代n追溯到远古时代,但当时并不知道酶是何物,追溯到远古时代,但当时并不知道酶是何物,也不了解其性质,但根据生产和生活
11、的经验也不了解其性质,但根据生产和生活的经验积累,已经把酶利用到相当广泛的程度。积累,已经把酶利用到相当广泛的程度。n4000多年前的夏禹时代,酿酒就已经盛行;多年前的夏禹时代,酿酒就已经盛行;n3000多年前的周朝,利用麦曲将淀粉降解为多年前的周朝,利用麦曲将淀粉降解为麦芽糖制造饴糖;麦芽糖制造饴糖;n2500多年前的春秋战国时期,利用酒曲来治多年前的春秋战国时期,利用酒曲来治疗肠胃病,用鸡内金治疗消化不良等。疗肠胃病,用鸡内金治疗消化不良等。(二二)真真正正认认识识阶阶段段:19世纪开始认识酶的存在和作用,并在随后的近100多年内取得了奠定酶学研究的许多重要结果n1810年Jaseph G
12、aylussac发现酵母可将糖转化为酒精;n1833年,Payee和和Persoz从麦芽的水提物中用酒精沉淀法得到淀粉酶(diastase)。n当时抽提、沉淀等提纯方法,得到了一种无细胞制剂;n指出催化特性和不稳定性,已经开始触及到酶的一些本质问题,n因此一般认为他们是最早的酶的因此一般认为他们是最早的酶的发现者。发现者。n。n1836年,德国生理学家Theodor Schwann在研究消化过程时,分离出一种在胃内消化蛋白的物质,将它命名为胃蛋白酶。胃蛋白酶。n这是第一个从动物组织中提取到的酶。(二)真正认识阶段(二)真正认识阶段n1883年,Johan Kjeldahl建立了一套检测有机物中
13、-3价氮的方法,n即为测定氮含量的方法。(二)真正认识阶段(二)真正认识阶段n1857年,微生物学家年,微生物学家Louis Pasteur等人提出等人提出酒精发酵是酵母细胞活动的结果,酒精发酵是酵母细胞活动的结果,他认为只有活的酵母细胞才能进行发酵,使酶学的研究走了弯路。nLiebig反对这种观点,他认为发酵现象是由溶解于酵母细胞液中的酶引起的。n1878年,年,Kuhne将酶统一叫将酶统一叫Enzyme,来自希腊文,其意思“在酵母中”,中文译为“酶”或“酵素”。n1835 1837年,年,Berzelius提出了催化作用的提出了催化作用的概念,概念,该概念对酶学和化学的发展都十分重要。可见
14、对于酶的认识一开始就与它具有催化作用的能力联系在一起。(二)真正认识阶段(二)真正认识阶段n1894-1913年年,德德国化学家国化学家Emil Fishern根据糖化酶的特根据糖化酶的特点建立了钥匙点建立了钥匙-锁锁理论,理论,n用以解释酶作用用以解释酶作用的专一性。的专一性。(二)真正认识阶段(二)真正认识阶段n1896年,德国学者年,德国学者Buchner兄弟兄弟用石英砂磨碎的酵母细胞或酵母的无细胞抽提液也能使糖发酵产生酒精,这种能发酵的成分称为酒化酶(酒化酶(酒化酶(酒化酶(zymasezymase)。为此,BuchnerBuchner获得了获得了获得了获得了19111911年诺贝尔化
15、学年诺贝尔化学年诺贝尔化学年诺贝尔化学奖。奖。奖。奖。n一般认为酶学研究始于一般认为酶学研究始于1896年年Buchner的的发现。发现。n1903年,Henri提出了酶与底物作用的中间复合物学说。(二)真正认识阶段(二)真正认识阶段n1913年,年,Michaelis和和Menten总结了前总结了前人工作推导出了酶催化反应的动力学方人工作推导出了酶催化反应的动力学方程程米氏方程,米氏方程,对酶反应机理的研究是一个重大的突破。n1925年Briggs和Handane对米氏方程作了一项重要的修正,提出了稳态学说。但至此人们还没有搞清楚这种具有催化功能的物质究竟属于哪一类物质。(二)真正认识阶段(
16、二)真正认识阶段n1926年,美国化学家年,美国化学家Sumner从刀豆提取出了从刀豆提取出了脲酶(脲酶(crease)并获得)并获得结晶(这是第一个酶结结晶(这是第一个酶结晶),证明脲酶具有蛋晶),证明脲酶具有蛋白质性质。白质性质。n1953-1958年,Watson 和 Crick发现DNA是双螺旋结构。(二)真正认识阶段(二)真正认识阶段n19301936年,Northrop和Kunitz得到了胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶结晶,并证实酶是一种蛋证实酶是一种蛋证实酶是一种蛋证实酶是一种蛋白质白质白质白质,为此SummerSummer和和和和NorthropNorthrop于于于于194
17、91949年共同获得年共同获得年共同获得年共同获得诺贝尔化学奖诺贝尔化学奖诺贝尔化学奖诺贝尔化学奖。n20世纪5060年代,Koshland提出了“诱导契合”理论,搞清了某些酶的催化活性与生理条件的变化有关。n1965年,Phillips首次用X射线晶体衍射技术阐明了鸡蛋清溶菌酶的三维结构,为以后酶结构、功能以及催化机制的研究奠定了良好的基础。n nCech(1982年)和Altman(1983年)分别发现了具有催化功能的RNARNA一核酶一核酶一核酶一核酶,这一发现打破了酶是蛋白质的传统观念,开辟了酶学研究的新领域,为此CechCech和和和和AltrmanAltrman于于于于198919
18、89年获得诺贝尔化学奖。年获得诺贝尔化学奖。年获得诺贝尔化学奖。年获得诺贝尔化学奖。(二)真正认识阶段(二)真正认识阶段(三)酶制剂研究和应用阶段三)酶制剂研究和应用阶段n1894年,高峰让吉用米曲霉固体培养法生产世界上第一个商品酶制剂产品“他卡”淀粉酶。n从20世纪 50年代初开始酶及产酶细胞的固定化技术,使酶学从理论到生产实践得到了迅速的发展。n近54年来,酶科学飞速发展,特别是酶应用的推广,形成了酶工程。n1953年,Crubhofer和Schleith酶的固定化研究,将胃蛋白酶、淀粉酶等结合在重氮化的树脂上,实现了酶的固定化。n20世纪60年代起酶固定化研究渐成气候。n1969年日本千
19、烟一郎第一个把固定化酶应用于工业年日本千烟一郎第一个把固定化酶应用于工业生产生产固定化氨基酰化酶大规模生产固定化氨基酰化酶大规模生产L-氨基酸。氨基酸。n美国从美国从20世纪世纪70年代初使玉米淀粉液化、糖化和异年代初使玉米淀粉液化、糖化和异构化,并已成功地构化,并已成功地工业化生产第一代、第二代和第工业化生产第一代、第二代和第三代高果糖浆(三代高果糖浆(HFGS)。)。n高果糖浆可以代替蔗糖作为食品的甜味剂,仅美国高果糖浆可以代替蔗糖作为食品的甜味剂,仅美国的可口可乐和百事可乐两家饮料公司,每年就可消的可口可乐和百事可乐两家饮料公司,每年就可消耗高果糖浆五六百万吨,既提高了饮料质量。又有耗高
20、果糖浆五六百万吨,既提高了饮料质量。又有利于人的健康,是一个非常成功的技术革新。利于人的健康,是一个非常成功的技术革新。n尔后日本、法国、中国等国家先后投入高果糖浆的尔后日本、法国、中国等国家先后投入高果糖浆的生产,并且随着生产技术和工艺的不断改进,高果生产,并且随着生产技术和工艺的不断改进,高果糖浆的成本也不断下降。糖浆的成本也不断下降。n近年来。虽然蔗糖的价格不断下跌,但高果糖浆工近年来。虽然蔗糖的价格不断下跌,但高果糖浆工业已发展壮大,其价格仍比蔗糖低业已发展壮大,其价格仍比蔗糖低10%15%。(三)酶制剂研究和应用阶段三)酶制剂研究和应用阶段n1965-1974年,淀粉分解成糖的,不含
21、转葡萄糖苷酶的葡萄糖淀粉酶上市,微生物酶类应用于食品工业的首次重大突破于20世纪60年代发生。(三)酶制剂研究和应用阶段三)酶制剂研究和应用阶段n自20世纪80年代基因工程技术诞生以来,对酶学的研究与应用技术也产生了深刻的影响。n基因工程技术不但促进了基础酶学的研究,如酶基因的克隆、酶催化机理的研究等,同时也促进了酶在食品工业中的应用,奠定了现代食品酶学的重要发展方向。(三)酶制剂研究和应用阶段三)酶制剂研究和应用阶段n到目前为止,在基因工程中应用的工具酶已有在基因工程中应用的工具酶已有500多种,主要的工具酶有限制性内切酶多种,主要的工具酶有限制性内切酶,DNA连接酶连接酶,DNA聚合酶等聚
22、合酶等。n克隆酶新技术不断出现,特别是在微生物中高效表达,可通过发酵进行大量生产,目前已有100多种酶基因克隆成功。n制造干酪的凝乳酶,过去是从小牛皱胃中提取的,而每年需要宰杀4000多万头小牛,现在,采用基因工程技术,把小牛皱胃中凝乳酶的基因转移至大肠杆菌或酵母菌中,便可通过微生物发酵广泛生产凝乳酶了。(三)酶制剂研究和应用阶段三)酶制剂研究和应用阶段n食食品品工工业业中中应应用用酶酶来来源源:动动物物、植植物物和和微微生生物物,n主主要要为为水水解解酶酶。n作作为为食食品品工工业业应应用用酶酶则则必必须须考考虑虑:n安安全全性性n法法规规容容许许n成成本本n来来源源稳稳定定性性n纯纯度度n
23、专专一一性性n催催化化某某反反应应的的能能力力n在在加加工工过过程程中中保保持持稳稳定定等等。1.5 食品工业应用酶食品工业应用酶n动物的酶:从动物的脏器如胃黏膜、胰脏和肝脏中提取得到,如胃蛋白酶和凝乳酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等。n食品工业植物酶的:大麦芽、菠萝、木瓜、无花果和大豆粉等提取得到,淀粉酶、淀粉酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶及无花果蛋白酶等。n n食品工业应用酶主要包括:糖酶、蛋白酶、食品工业应用酶主要包括:糖酶、蛋白酶、食品工业应用酶主要包括:糖酶、蛋白酶、食品工业应用酶主要包括:糖酶、蛋白酶、酯酶、多酚氧化酶、葡萄糖氧化酶、过氧化酯酶、多酚氧化酶、葡萄糖氧化酶、过氧化酯酶、多酚氧
24、化酶、葡萄糖氧化酶、过氧化酯酶、多酚氧化酶、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、脂肪氧合酶等。物酶、脂肪氧合酶等。物酶、脂肪氧合酶等。物酶、脂肪氧合酶等。n(详见教材第六章,将在后面做专题讲授)(详见教材第六章,将在后面做专题讲授)1.5 食品工业应用酶食品工业应用酶酶制剂酶制剂来源来源主要用途主要用途-淀粉酶淀粉酶-淀粉酶淀粉酶糖化酶糖化酶蛋白酶蛋白酶纤维素酶纤维素酶果胶酶果胶酶葡萄糖异构酶葡萄糖异构酶葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶脂肪氧化酶脂肪氧化酶橘苷酶橘苷酶橙皮苷酶橙皮苷酶乳糖酶乳糖酶脂肪酶脂肪酶溶菌酶溶菌酶氨基酰化酶氨基酰化酶枯草杆菌枯草杆菌、米曲霉米曲霉、黑曲霉黑曲霉麦牙麦牙、芽孢杆菌芽孢杆菌根酶
25、根酶、黑曲霉黑曲霉、红曲霉等红曲霉等胰脏胰脏、木瓜木瓜、菠萝菠萝、无花果无花果、枯草杆菌枯草杆菌、霉菌霉菌木霉木霉、青霉青霉霉菌霉菌放线菌放线菌、细菌细菌黑曲霉黑曲霉、青霉青霉大豆大豆黑曲霉黑曲霉黑曲霉黑曲霉真菌真菌、酵母酵母真菌真菌、细菌细菌、动物动物霉菌霉菌、细菌细菌淀粉液化淀粉液化、生产葡萄糖生产葡萄糖、酿造等酿造等麦牙糖和啤酒生产麦牙糖和啤酒生产、焙烤食品焙烤食品糊精降解为葡萄糖糊精降解为葡萄糖肉软化肉软化、奶酪生产奶酪生产、啤酒去浊啤酒去浊、香香肠和蛋白胨及鱼胨加工肠和蛋白胨及鱼胨加工食品加工食品加工、发酵发酵果汁果汁、果酒的澄清果酒的澄清高果糖糖浆生产高果糖糖浆生产保持食品的风味和
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