乙型肝炎病毒的生物危害评估报告.docx

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1、乙型肝炎病毒的生物危害评估报告1. 危害程度分类1.1 分类等级依据中华人民共和国传染病防治法，乙型肝炎病毒HBV属于乙类传染病。在卫生部2023年公 布的人间传染的病原微生物名录中将其列为危害程度第三类病原微生物。运输包装仅病毒培育物为 A类，UN编号为UN2814。1.2 试验室操作生物安全试验室级别要求依据人间传染的病原微生物名录要求：乙肝血清学检测未经培育的感染材料的操作，应在级生物安全试验室BSL-2试验室中进展。2. 背景资料2.1 一般生物学特性乙型肝炎病毒属嗜肝DNA 病毒，有包膜，病毒颗粒为直径 42nm 的圆球形。在病毒感染者的外周血中还有直径 22nm 的圆形和管形颗粒。

2、这种颗粒为乙型肝炎外表抗原，没有核酸，无传染性。1） 大球形颗粒：亦称Dane 颗粒，它是一种由一个囊膜和一个含有DNA 分子的核衣壳组成的病毒颗粒，直径约42nm。核衣壳为20 面体对称构造。游离的核衣壳只能在肝细胞核内观看到。血中Dane 颗粒浓度以急性肝炎埋伏期后期为最高，在疾病起始后则快速下降。Dane 颗粒外表含有HBsAg，核心中还含有双股有缺口的DNA 链和依靠DNA 的 DNA 多聚酶。目前认为Dane 颗粒即完整的HBV。HBV DNA 的两链长短不一，长链L完整，为负链，长度恒定，约3200 个核苷酸。短链S为正链，长度可变，约为长链长度的 50100%，链的增生按 5-3

3、挨次进展。在不同分子中短链 3端的位置是可变的，而短链和长链的 5端位置固定点为粘性末端，通过 250300 个核苷酸碱基配对，以维持 DNA 分子的环状构造。在粘性末端两侧，两链 5端各有一个由 11 个bp 组成的直接重复序列Direct repeat DR-5 TTCACCTCTCC，该DR 位于第 1824 个核苷酸者称DR1，位于第 1590 个核苷酸者称DR2，在病毒复制中起作用。2） 小形球颗粒：直径约22nm 的小球形颗粒是HBV 感染后血液中最多见的一种。它由HBsAg，即病毒的囊膜组成。化学组成为脂蛋白，可按其特有的密度与正常血清蛋白局局部别。在此颗粒中未检出达DNA 多聚

4、酶活性。目前认为HBV 的小颗粒不是HBV，可能是它感染肝细胞时合成过剩的囊膜而游离于血循环中。3） 管形颗粒：直径约 22nm，长度可在 100700nm 之间。实际上它是一串聚合起来的小颗粒，但同样具有HBsAg 的抗原性。2.2 对外界环境的稳定性HBV 对外界抵抗力环境抵抗力较强，对枯燥、紫外线、75%乙醇等均有耐受性，60可存活 2 小时， 30-32至少可存活 6 个月，20可存活 5 年。但 100煮沸 10 分钟；高压蒸汽灭菌、0.5%过氧乙酸、5%次氯酸钠等均能灭活病毒，因此，注射器具、医疗用具通过高温消毒、煮沸或蒸汽消毒完全可以 到达消毒目的。2.3 传播途径及致病性乙型肝

5、炎病毒通常是经过肠道外途径传播,其典型的传播途径是输入污染的血及血制品。HBV 的传染性很强，外科和口腔手术、针剌、使用公用剃刀、牙刷等物品，皮肤微小操作污染含少量病毒的血液， 均可成为传染源。另外, 由于乙型肝炎患者和HBsAg 携带者的精液、阴道分泌物均可检出HBsAg，因此， 两性接触传播乙型肝炎的可能性是存在的。近来有人报告在急性乙型肝炎患者和慢性HBsAg 携带者唾液3标本中检测到HBsAg 及 Dane 颗粒，因此，HBsAg 随唾液经口传播的途径应当重视。孕妇在妊娠后期患急性乙型肝炎，生儿易感染此病。2.4 乙型肝炎预防、诊断和治疗2.4.1 预防措施1） 安康教育：应向群众宣传

6、乙肝学问，认清乙肝病毒传播途径的简洁性和乙肝在我国人群中的普遍性，树立预防为主，自我保护意识。2） 执行生儿乙肝疫苗打算免疫，做好产前检查，特别是HBsAg 伴有HBeAg 的双阳母亲生儿， 用乙肝疫苗联合乙肝高效价免疫球蛋白注射以阻断母婴传播。3） 献血员的筛选：献血员必需做到每次献血前检测血清转氨酶ALT，以敏感的方法ELISA 检测 HBsAg，两项中任何一项阳性均不得献血。4） 防止医源性传播，各级医疗卫生单位，应严格实行一人一针一管。2.4.2 试验室检查及其诊断乙型肝炎的临床表现形式多样，诊断的依据除病人病症，体征外，须依据流行病学，试验室检查和或肝活检等手段进展综合分析，动态观看

7、诊断。1） 流行病学资料：半年内承受过血及血制品或曾有其他医源性感染，生活中的亲热接触，尤其是性接触。2） 病症：近期消灭的无其他缘由可解释的持续一周以上的明显乏力和消化道病症。3） 体征：肝肿大，伴有触痛或叩痛；皮肤，巩膜黄染。4） 肝功能检查：谷丙转氨酶ALT明显增高。5） HBV 标记物检查：乙型肝炎外表抗原HBsAg阳性。2.4.3 治疗病毒性肝炎目前还缺乏牢靠的特效治疗方法。各型肝炎的治疗原则均以足够的休息、养分为主，辅以适当药物，避开饮洒、过劳或损害肝脏药物。1） 急性肝炎以一般及支持疗法为主。休息与隔离 应强调早期卧床休息，至病症明显减退，可逐步增加活动。饮食 饮食宜清淡，热量足

8、够，蛋白质摄入争取到达每日 11.5g/kg，适当补充维生素 B 族和C， 不强调高糖和低脂肪饮食。2） 轻度慢性肝炎除一般及支持疗法以外，还需要进展对症和抗病毒治疗。休息 无需确定卧床休息，宜用动静结合的疗养措施。处于活动期的患者，应以静养为主；处于静止期的患者，可从事力所能及的轻工作。病症消逝，肝功能正常3 个月以上者，可恢复其原来工作， 但仍需随访 12 年。饮食 应适当进食较多的蛋白质，避开过高热量饮食。以防止肝脏脂肪变性。也不宜进食过多的糖，以免导致糖尿病。对症治疗 包括降低转氨酶制剂，如联苯双脂、垂盆草、齐墩果酸等，具有非特异性降低ALT 的作用。这些降酶药物虽然可能具有护肝的作用

9、，但停药后简洁产生ALT 反跳。故在显效后应留意渐渐停药。一般的非特异性护肝药物，主要包括维生素类B 族、C、E、K 等，促进解毒功能药物如葡醛内脂肝泰乐、复原型谷胱甘肽、维丙胺、硫辛酸等，促进能量代谢药三磷酸腺苷ATP、促进蛋白 质合成药物肝安、水解蛋白等以改善微循环药物丹参、低分子右旋糖酐等可作为关心治疗，但宜精简，避开使用过多药物。抗病毒治疗：a.干扰素 慢性乙型肝炎时干扰素使用的指征为：HBV 在活动性复制中；肝炎处于活动期；HBV DNA 血浓度低；抗-HBc IgM 阳性。使用干扰素治疗时剂量应偏大300 万600 万 U/次， 疗程应偏长6 个月1 年。干扰素一般仅能抑制 HBV

10、 复制，使 HBeAg 和 HBV DNA 转阴，而难以使 HBsAg 转阴。b. 核苷类似物 拉米夫定lamivudine，3TC，TM主要通过抑制HBV DNA 逆转录酶的活性及抑制共价闭合环DNAcovalently closed circle DNA,cccDNA的合成而抑制 HBV DNA 的合成。它不抑制线粒体DNA 和骨髓，无直接调整免疫作用，因而根本上无不良反响。长期6 个月以上用药可使 HBV DNA 发生变异而产生耐药性。3. 从事试验室活动的危急性分析及相应的预防措施3.1 试验室试验活动背景资料本试验室主要从事HBV/HCV/HIV 病毒及梅毒螺旋体的血清学检测。HBV

11、 抗体筛查试验: 酶免法(ELISA)3.2 可能危害在试验操作过程中，接收样本时样本包装密封性不好造成样本泄露；操作过程中如翻开容器盖时样本外溅，加样、孵育、震荡、分别保存血清等时由于操作不慎导致样本溅出、离心管裂开崩溅、气溶胶等。试验室工作环境的污染，试验人员假设接触污染的试验仪器外表、冰箱、加样器、试验台、门把手及试验废弃物等均可能被感染。3.3 预防及处置措施3.3.1 预防避开职业性血液及体液暴露是试验室预防HBV 传播的主要措施。1) 试验检测过程均应在生物安全防护级试验室内进展。2) 操作者在试验全过程包括样品接收，都应穿戴好一切生物安全防护装备，一次性的口罩、帽子、乳胶手套，防

12、护衣、必要时配戴防护镜等，操作全过程应严格执行试验室的标准操作规程SOP。3) 尽量避开在试验室使用针头、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺伤。假设必需使用，在处理或清洗时应实行措施防止刺伤或划伤，并应对用过的物品进展消毒处理。4） 完成乙型肝炎病接种程序，并且进展抗体检测。5） 经过标准的生物安全培训，并经过严格考核和取得上级主管部门人员许可；近期较深的开放性伤口的人员应当制止或限制其进入相关试验操作区。6） 限制在妊娠早期的工作人员进展病毒相关的感染性材料的操作。7) 如接触物传染性危急大，可戴双层两付手套以增加保护。操作时手套破损，应马上丢弃、洗手并戴上手套。8) 制止承受口腔吸液管，必需使用

13、移液器来操作试验室的全部液体。9) 工作完毕，要对工作台面消毒。工作台面应当用0.1% 0.2%次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要枯燥 20min 以上；10) 工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作衣，用肥皂和流淌水洗手。3.3.2 处置措施1) 全部的血液、血清血浆均应视为有潜在传染性，都应以安全的方式进展操作。应按操作未知的有传染风险样品一样，留神存放、拿取和使用全部可能有传染性的质量把握和参考物质。2) 接收样本时，核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏，如觉察溢漏应马上将尚存留的 样品移出，假设样本外漏到标本容器外面，应马上用浸有5%含氯消毒液的多重软布及擦拭标本容器，必要时通知重留

14、取标本。翻开标本容器时要留神，以防内容物泼溅。废弃的标本视为高危物质放置到高压灭菌锅内消毒，同时马上更换污染的手套，污染的手套也应放到高压灭菌锅内灭菌。3) 在进展操作时，假设发生液体外溅，应将被溅的地方用 5%含氯消毒液浸泡的物质掩盖，待消毒液起作用 10-15 分钟后清理该地方，移走吸水性物质。全部试验用品应按污染物质处理，放入高压灭菌锅内灭菌。4) 在离心过程中，假设发生离心管裂开及样本外溅，应马上停顿离心，待离心机自动停顿并发出提 示信号 30 分钟后，确保穿戴好一切防护用品后，方可翻开离心机盖，用止血钳子夹出离心的碎片，被样本污染的地方，防置浸泡有 5%含氯消毒剂的吸水性物质，待消毒

15、剂起作用后 10-15 分钟再清理污染处， 移走吸水性物质，并用 0.5%含氯消毒剂或 2%戊二醛屡次消毒污染处全部消毒处理用过的物品应按高危物质处理，放入高压灭菌锅内灭菌。4. 试验室职业暴露后的马上处理职业暴露发生后，应马上报告。尽快地使用HBIG、乙型肝炎疫苗。1) 皮肤针刺伤或切割伤：马上用肥皂和大量流水冲洗，过程中挤压伤口尽可能挤出损伤处的血液， 持续 1520min 后并用 75%酒精或者 0.5%碘伏进展消毒。2) 皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当的消毒剂浸泡，如75%乙醇或其它皮肤消毒剂。3) 粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位。4) 衣物污染：尽快脱掉污

16、染的衣物，进展消毒处理。5) 污染物泼溅：发生小范围污染物泼溅事故时，应马上进展消毒处理。发生大范围污染物泼溅事故时，应马上通知试验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清状况，确定消毒的程序。5. 职业暴露后预防与治理5.1 职业暴露后的预防应考虑几个因素：a.暴露源的 HBsAg 状态、暴露者的乙型肝炎疫苗接种状况和疫苗反响状态。对未免疫接种的工作人员的血液或体液暴露，应启动乙型肝炎疫苗接种。并对暴露者的乙型肝炎疫苗接种情 况和疫苗反响状态进展评估。推举预防方案见表1。表 1 暴露于HBV 的推举方案暴露者的免疫接种和抗体反响状况未免疫接种暴露源 HBsAg 阳性注射乙型肝炎免疫球蛋白、乙型

17、肝炎疫苗接种处理暴露源 HBsAg 阴性乙型肝炎疫苗接种暴露源不明确或未检测乙型肝炎疫苗接种已免疫接种有反响者不需处理不需处理不需处理已免疫接种但抗体反响未知测试抗-HBs，假设有，不需处理；否则施与 HBIG 和疫苗增强不需处理测试抗-HBs，假设有，不需处理；否则施与疫苗增加和在 12 个月后再检测抗体滴度* HBIG乙型肝炎免疫球蛋白，剂量 200U，肌肉注射。* 有反响者为HBsAg 血清外表抗体阳性的暴露者* 无反响者为对免疫接种反响缺乏的暴露者检测外表抗体为阴性。当需要应用HBIG 时，应在暴露后尽可能快地使用最好在24 小时内。在暴露 7 天后HBIG 的有效性不明确。当需要应用

18、乙型肝炎疫苗时，也应在暴露后尽可能快地使用最好在24 小时内；并且可与 HBIG 同时注射。乙型肝炎疫苗是安全的，接种乙型肝炎疫苗的最常见副反响为注射点苦痛和轻度至中度发热，严峻 副反响的发生率格外低。对免疫球蛋白有过敏反响史的暴露者不应承受HBIG。妊娠和哺乳期妇女暴露者都可注射乙型肝炎疫苗接种和HBIG。5.2 职业暴露后的治理职业暴露事故的事故发生单位应建立“医务人员职业血液暴露登记表”，对职业暴露状况进展登记、 保存和上报。具体记录职业暴露发生的时间、地点及经过；暴露方式；损伤的具体部位、程度；暴露物 种类血液、血清或血浆；处理方法及处理经过；是否承受暴露后预防药物，并具体记录用药状况、 首次用药时间、药物毒副作用状况包括肝肾功能化验结果、用药的依从性状况，定期检测暴露后 即刻、4 周、8 周、12 周检测乙肝两对半及随访状况。对涉及的职业暴露者，均应留意做好保密工作。每一个得到信息的机构或个人均应做好保密工作6. 工作人员素养试验室共有技术人员 9 名，其中申请进入 BSL-2 试验室 9 名。全部技术人员均参与过生物安全培训， 熟知 HBV 试验SOP 及流程。7. 评估结论结合我站试验室的状况BSL-2，依据卫生部病原微生物试验室生物安全治理条例中的相关要求，符合开展微生物病原体检测的条件。