植株全氮、全磷、全钾含量的测定(定1)(1)分解.pdf

《植株全氮、全磷、全钾含量的测定(定1)(1)分解.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《植株全氮、全磷、全钾含量的测定(定1)(1)分解.pdf（11页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、植株全氮、全磷、全钾的测定 一、待测液的制备（H2SO4H2O2消煮法）二、植株全氮的测定（H2SO4H2O2消煮，蒸馏法）三、植株全磷的测定（H2SO4H2O2消煮，钒钼黄比色法）四、植株全钾的测定（H2SO4H2O2消煮，火焰光度法 一、待测液的制备（H2SO4H2O2消煮法）1 H2SO4H2O2消煮原理 植物样品在浓 H2SO4溶液中，经过脱水、碳化、氧化等一系列的作用后，易分解的有机物则分解，然后再加入 H2O2，H2O2在热的浓 H2SO4溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化作用，可继续分解没被 H2SO4破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐。同时，样品中的有机磷也转化为无

2、机磷酸盐，故可用同一消煮液分别测定 N、P、K（植株中 K 以离子态存在）。2 主要仪器：万分之一电子天平、mm 筛、三角瓶（50ml）或消煮管、移液管（5、10ml）+吸耳球、弯颈小漏斗、消煮炉、吸管、漏斗、无磷钾滤纸、容量瓶（100ml）2 试剂：浓硫酸（GB T625）：化学纯、比重 30%H2O2（GB 6684）：阴凉处存放 3 操作步骤 称取烘干、磨细的植物样品(过 mm 筛)，置于 50ml 三角瓶（或消煮管）底部（勿将样品粘附在瓶颈上），加浓硫酸 5mL，摇匀（最好放置过夜），瓶口盖一弯颈小漏斗，在电炉上先缓缓加热，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度（在消煮炉上先 250消煮温

3、度稳定后计时，时间约 30min，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度至 400）。消煮至溶液呈均匀的棕黑色时，取下三角瓶，稍冷后提起弯颈漏斗，滴加 30%H2O210 滴，并不断摇动三角瓶。再加热(微沸)约 7-10 min，取下，稍冷后重复滴加 30%H2O2 510 滴，再消煮。如此反复进行 3-5 次，每次添加的 H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热 5-10min（以赶尽剩余的 H2O2)，取下三角瓶冷却，用少量水冲洗漏斗，洗液流入三角瓶中。将消煮液无损地洗入 100 ml 容量瓶中，用水定容，摇匀。过滤或放置澄清后供氮、磷、钾测定。二、植株全氮的测定（H2SO4H2O

4、2消煮，蒸馏法）1、方法原理 蒸馏过程的反应：】（NH4)2SO4+NaOH Na2SO+2NH3+2H2O NH3+H2O NH4OH NH4OH+H3BO3 NH4H2BO3 +H2O 滴定过程的反应：NH4H2BO3+H2SO4 （NH4)2SO4+2H3BO3 2、主要仪器、试剂（1）主要仪器：万分之一电子天平、移液枪(2ml)、移液管（5、10ml）、三角瓶（50、150ml）、容量瓶（100、1000ml）、量筒、研钵、酸式滴定管、pH 仪、定氮仪（2）需用的试剂：40%NaOH 溶液（10mol/L 氢氧化钠溶液）：称取 40g 氢氧化钠（GB 629 分析纯）溶于 100ml

5、水中 硫酸（GB 62577）：分析纯，L 硫酸（将 L 硫酸标准溶液用水稀释一倍）或 L 盐酸标准溶液 L 硫酸标准溶液：量取浓硫酸（），加蒸馏水稀释至 5000ml，此为 L 的（1/2H2SO4）标准溶液，然后用标准碱或硼砂标定之，将 L 的（1/2H2SO4）标准溶液用水稀释 4 倍。&硼酸指示剂溶液：硼酸-指示剂混合液：每升 A 溶液中加 20ml B 混合指示剂，并用稀碱调节至红紫色（pH 值约）。此液放置时间不宜过长，如在使用过程中 pH 值有变化，需随时用稀酸或稀碱调节之。A 2硼酸溶液：20g 硼酸（GB 628-78 分析纯）溶于 1L 约 60去离子水中。B 甲基红-溴甲

6、酚绿混合指示剂：溴甲酚绿（HG 3-1220-79）和甲基红（HG 3-958-76）于研钵中，加入少量 95乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加 95乙醇至 100ml。的水 3、测定步骤 在 150ml 三角瓶中，加入 2硼酸-指示剂混合液 5ml，放在定氮仪冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上 34cm 处。之后吸取待测液 mL（含 NH4+-N 约 1mg）置于蒸馏器的定氮内室中，于定氮仪相应位置上，盖上具塞并密封使之不漏气。然后从加液漏斗处向蒸馏室内缓缓加入 20ml 10mol/L 氢氧化钠溶液，立即关紧蒸汽发生器上排气口的旋钮，同时打开蒸汽发生器和定氮冷凝管连接橡皮管上的夹子。通入蒸汽蒸

7、馏，蒸馏约 15min 左右，馏出液体积约 50ml 时，即蒸馏完毕。取下三角瓶，关闭蒸汽发生器和定氮冷凝管连接橡皮管上的夹子，并打开蒸汽发生器上排气口的旋钮。用少量已调节至的水洗涤冷凝管的末端，取下三角瓶。之后，用气压差的原理，倒吸的方法洗蒸馏瓶中的废液，洗净蒸馏瓶。用 mol/L 硫酸（或 L 盐酸）标准溶液滴定馏出液由蓝绿色至刚变为紫红色。记录所用酸标准溶液的体积（ml）。空白测定所用酸标准溶液的体积，一般不得超过。4、结果计算 植株中 N（%）=（V1-V0）C14D10-3 100/m 式中：V1 样品测定所消耗标准酸 mL 数；V0 空白试验所消耗标准酸 mL 数；C标准酸（H+1

8、）的浓度 molL-1；14 氮原子的摩尔质量（gmol）；10-3 mL 换算为 L；D分取倍数，定容体积/分取体积，100/10 m 干样品质量（g）。5、注意事项（1）碱液要过量。要求中和完硫酸后再过量 2mL；（2）蒸馏装置不能漏气；：（3）硼酸要足量。估算方法：按 1mL 浓度为L-1的硼酸能吸收的 N 计算；（4）指示剂和硼酸最好分开配置保存。因二者混合过久，有指示终点不明显的可能。（5）指示剂和硼酸的 pH 要调到（变色点）。（6）定氮仪参数设置中，加碱量设置为 3S；定氮仪开机预热后，要多空蒸几次，等读数稳定后再进行样品测定。三、植株全磷的测定（H2SO4H2O2消煮，钒钼黄比

9、色法）1、方法原理 在酸性条件下，正磷酸能与偏钒酸和钼酸发生反应，形成黄色的三元杂多酸钒钼磷酸。溶液黄色稳定，黄色的深浅与磷的含量成正相关，所以，可用比色法测定溶液中磷的含量。2、主要仪器、试剂（1）主要仪器：万分之一电子天平、电磁炉、移液管（1、5、10ml 2 个）、吸耳球、容量瓶（50ml 8 个、100、1000ml）、量筒 吸管、塑料瓶、棕色瓶、pH 试纸、烘箱 722 或 723 型分光光度比色计（2）试剂 浓硝酸(分析纯)%二硝基酚指示剂（2,6-二硝基酚或 2,4-二硝基酚溶于 100ml 水中，其变色范围是 pH（无色）（黄色），变色点是 pH）6mol/LNaOH 溶液（2

10、4g NaOH(分析纯)溶于水，稀释至 100ml）磷标准液 50ugmL-1（准确称取经 105烘干的 KH2PO4(分析纯)溶于水，移入 1L 容量瓶，加水约 400ml，加入 5ml 浓 H2SO4（或浓硝酸），用水定容，装入塑料瓶中低温保存）。钒钼酸铵试剂：A 液：将的钼酸铵(NH4)6Mo7O244H2O，分析纯溶于 400mL 水中。B 液：将的偏钒酸铵(NH4VO3，分析纯)溶于 300mL 沸水中，冷却后，加入 250mL 浓硝酸(分析纯)，冷却至室温。将 A 液缓缓注入 B 液中，不断搅匀，加水稀释到 1L，贮入棕色瓶中。3、测定步骤 吸取消煮好的待测液 mL（含 P）置于

11、50ml 容量瓶中，加 2,6-二硝基酚（或 2,4-二硝基酚)指示剂 2 滴，用 6molL-1NaOH 调pH 至刚显黄色，准确加入钒钼酸铵试剂，用水定容，摇匀。同时做空白实验。15min 后，用分光光度计在 450nm 处比色，以空白液调节吸光值的零点。标准曲线制作：准确吸取 50ugmL-1的 P 标准溶液 0、5、，于 50mL 容量瓶中，加与吸取的待测液等量的空白消煮液，同上述操作步骤显色和比色。该标准系列 P 的浓度分别为 0、5、ugmL-1 P。4、结果计算 植株全 P(%)=V分取倍数10-4/m 式中：从标准曲线查得显色液 P 的质量浓度(ug/mL)V 显色液体积(mL

12、)分取倍数：定容体积/分取体积，100/10 m 烘干样品质量（g）104将 ug/L 浓度单位换算为百分含量的换算因数 5、注意事项 显色液的酸度要求在-1H+内，酸度过高时，显色不完全或不显色，酸度太低时则可能生成沉淀或其它物质的颜色；比色要在 15min后、24h 内完成。）四、植株全钾的测定（H2SO4H2O2消煮，火焰光度法）1、方法原理 植物体内的钾几乎全部以离子状态存在于植物组织中，样品经消煮或浸提，并经稀释后，待测液中的 K 可用火焰光度法测定。2、主要仪器、试剂（1）主要仪器：容量瓶（50ml 8 个、1000ml）；移液管、10ml)+吸耳球、火焰光度计。（2）试剂：100

13、 ugmL-1K 标准溶液（准确称取在 105干燥 2h 后的，溶于水，于 1L 容量瓶中定容，存于塑料瓶中。3、测定步骤 吸取消煮好的待测液（含 K 10 mg/L50 mg/L），置于 50 mL 容量瓶，用水定容，摇匀，直接在火焰光度计上测定，读取检流计读数。标准曲线制作：准确吸取 100 ugmL-1标准溶液 0，10，20ml，分别放入 50ml 容量瓶中，加入与吸取的待测液等量的空白消煮液，加水定容即得 0，1，2，5，10，20，40mg/L K 的标准系列溶液。以浓度最高的标准溶液定火焰光度计检流计的满度，然后从稀到浓依次进行测定，记录检流计读数，以检流计读数为纵坐标绘制标准曲

14、线。4、结果计算 植株全钾(%)=V分取倍数10-4/m】式中：从标准曲线查得显色液 K 的质量浓度(ugmL-1)V：测定液体积(mL)50ml 分取倍数：定容体积/分取体积，100/10 m：烘干样质量（g)104：将 ug/L 浓度单位换算为百分含量的换算因数 5、注意事项(1)按要求制作标准曲线；(2)标准溶液和待测液的组成要基本相同。因为，溶液组成的改变（包括酸碱、阴、阳离子的浓度）对测定结果有影响；(3)仪器状态（如空气压力、火焰的状态等）对测定结果有影响。:植物全氮、磷、钾的测定 植物中氮、磷、钾的测定包括待测液的制备和氮磷钾的定量两大步骤。植物全氮待测液的制备通常用开氏消煮法(

15、参考有机肥料全氮的测定)。植物全磷、钾可用干灰化或其他湿灰化法制备待测液。本书介绍H2SO4H2O2消煮法，可用同一份消煮液分别测定氮、磷、钾以及其它元素(如钙、镁、铁、锰等)。一、植物样品的消煮(H2SO4H2O2法)方法原理植物中的氮磷大多数以有机态存在，钾以离子态存在。样品经浓 H2SO4和氧化剂H2O2消煮，有机物被氧化分解，有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐，钾也全部释出。消煮液经定容后，可用于氮、磷、钾等元素的定量。本法采用H2O2加速消煮剂，不仅操作手续简单快速，对氮磷钾的定量没有干扰，而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度，但要注意遵照操作规程的要求操作，防止有机氮被氧化成N

16、2或氮的氧化物而损失。试剂：(1)硫酸(化学纯、比重(2)30%H2O2（分析纯)操作步骤：(1)常规消煮法 称取植物样品(准确至装入100ml开氏瓶的底部，加浓硫酸5ml，摇匀(最好放置过夜)，在电炉上先小火加热，待H2SO4 发白烟后再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下，稍冷后加6 滴H2O2，再加热至微沸，消煮约710 分钟，稍冷后重复加H2O2 再消煮，如此重复数次，每次添加的H2O2 应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热约10 分钟，除去剩余的H2O2，取下冷却后，用水将消煮液无损转移入100ml 容量瓶中，冷却至室温后定容(V1)。用无磷钾的干燥滤纸过滤，或放置澄清后吸取

17、清液测定氮、磷、钾。每批消煮的同时，进行空白试验，以校正试剂和方法的误差。(2)快速消煮法 称取植物样品(称准至，放入100ml 开氏瓶中，加1ml水润湿，加入4ml 浓H2SO4摇匀，分两次各加入H2O2 2ml，每次加入后均摇匀，待激烈反应结束后，置于电炉上加热消煮，使固体物消失成为溶液，待H2SO4发白烟，溶液成褐色时，停止加热，此过程约需10 分钟。待冷却至瓶壁不烫手，加入H2O22ml，继续加热消煮约510分钟，冷却，再加入H2O2 消煮，如此反复一直至溶液呈无色或清亮后(一般情况下，加H2O2总量约8-10ml)再继续加热5-10分钟，以除尽剩余的H2O2。取下冷却后用水将消煮液定

18、量地转移入100ml 容量瓶中，定容(V1)。同时做空白试验，校正试剂和方法误差。注释：植物体内的钾以离子态存在于细胞液或与有机成分呈现松散结合态。因此，若只测定钾时，可采用简易的浸提法制备待测液。浸提剂可用LHCl或2mol/LNH4ACLMg(OAC)2 溶液，也可用热水。所用的H2O2 应不含氮和磷。H2O2在保存中可能自动分解，加热和光照能促其分解，故应保存于阴凉处。在H2O2中加少量H2SO4 酸化，可阻止H2O2分解。二、植物全氮的测定(半微量蒸馏法和扩散法)方法原理 植物样品经开氏消煮、定容后，吸取部分消煮液碱化，使铵盐转变成氨，经蒸馏和扩散，用H3BO3 吸收，直接用标准酸滴定

19、，以甲基红溴甲酚绿混合指示剂指示终点。试剂：(1)40%(m/v)NaOH 溶液 称取工业用氢氧化钠(NaOH)400g，加水溶解不断搅拌，再稀释定容至1000ml 贮于塑料瓶中。(2)2%H3BO3指示剂溶液 称取20g 硼酸加入热蒸馏水(60)溶解，冷却后稀释定容至1000ml，最后用稀盐酸(HCl)或稀氢氧化钠(NaOH)调节pH 至(定氮混合指示剂显葡萄酒红色)。(3)取标准溶液C(HCl 或1/2 H2SO4)=L(4)碱性溶液 (5)定氮混合指示剂。称取 甲基红和 溴甲酚绿指示剂放入玛瑙研钵中，加入100ml95%酒精研磨溶解，此液应用稀盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)调节pH

20、 至。(6)L 盐酸标准溶液。取浓盐酸(HCl)(比重，用蒸馏水稀释定容至1000ml，然后用标准碱液或硼砂标定。操作步骤：(1)蒸馏法 吸取定容后的消煮液，(V2，含NH4N 约1ml)，注入半微量蒸馏器的内室，另取150ml 三角瓶，内加入5ml2%H3BO3指示剂溶液，放在冷凝管下端，管口置于H3BO3 液面以下，然后向蒸馏器内室慢慢加入约3ml40%(m/v)NaOH 溶液，通入蒸气蒸馏，(注意开放冷凝水，勿使馏出液的温度超过40)待馏出液体积约达5060ml 时，停止蒸馏，用少量已调节至pH 为 的水冲洗冷凝管末端。用酸标准溶液滴定馏出液至由蓝绿色突变为紫红色(终点的颜色应和空白测定

21、的终点相同)。用酸标准溶液，同时进行空白液的蒸馏测定，以校正试剂和滴定误差。(2)扩散法 吸取定容后的消煮液200500ml(V2，含NH4于10 厘米的扩散皿外室。内室加入2%H3BO3指示剂溶液3ml，参照土壤碱解氮测定的操作步骤进行扩散和滴定，但中和H2SO4 需用40%NaOH 溶液2ml，扩散可在室温下进行，不必恒温，室温在20以上时，放置约24h，低于20时，须放置较长时间。在扩散期间，可将扩散皿内容物小心转动混匀23 次，加速扩散，可缩短扩散时间。在测定样品的同时，须在同一条件下做空白试验。结果计算 全N%=C(V-V0)100/(mV2/V1)式中 C酸标准溶液浓度，mol/L

22、；V滴定试样所用的酸标准液，ml；V0滴定空白所用的酸标准液，ml；N 的毫摩尔质量，g/mmol；m称样量，g；V1消煮液定容体积，ml；V2吸取测定的消煮液体积 ml。三、植物全磷的测定(钒钼黄吸光光度法)方法原理 植物样品经浓H2SO4 消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸，其吸光度与磷浓度成正比，可在波长400490nm处用吸光光度法测定磷。磷浓度较高时选用较长的波长，较低时选用较短的波长。此法的优点是操作简便，可在室温下显色，黄色稳定。在HNO3，HCl,HClO4 和H2SO4 等介质中都适用，对酸度和显色剂浓度的要求也不十分严格，干

23、扰物小。在可见光范围内灵敏度较低，适测范围广(约为120mg/L，P)，故广泛应用于含磷较高而且变幅较大的植物和肥料样品中磷的测定。试剂：(1)钒钼酸铵溶液 钼酸铵(NH4)6Mo7O244H2O 分析纯溶于400ml 水中，另将25g 偏钒酸铵(NH4VO3，分析纯)溶于300ml 沸水中，冷却后加入250ml 浓HNO3(分析纯)。将钼酸铵溶液缓缓注入钒酸铵溶液中，不断搅匀，最后加水稀释到1L，贮入棕色瓶中。(2)6mol/LNaOH 溶液 24gNaOH 溶于水，稀释至100ml；(3)%二硝基酚指示剂 2，6二硝基酚或2，4二硝基酚溶于100ml 水中；(4)磷标准液C(P)50mg/

24、L 干燥的KH2PO4(分析纯)溶于水，加入5ml 浓HNO3，于1L 容量瓶中定容。操作步骤：吸取定容、过滤或澄清后的消煮液(V2 含磷放入50ml容量瓶中，加2 滴二硝基酚指示剂，滴加6mol/LNaOH中和至刚呈黄色，加入 钒钼酸铵试剂，用水定容(V3)。15分钟后用1cm 光径的比色杯在波长440mm 处进行测定，以空白溶液(空白试验消煮液按上述步骤显色)调节仪器零点。标准曲线或直线回归方程 准确吸取50mg/L P 标准液0，1，5，10，15ml 分别放入50ml 容量瓶中，按上述步骤显色，即得0，10，15mg/LP 的标准系列溶液，与待测液一起测定，读取吸光度，然后绘制标准曲线

25、或求直线回归方程。结果计算 全P%C(P)(V1/m)(V3/V2)104 式中 C(P)从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷浓度，mg/L；V3显色液体积，ml；V2吸取测定的消煮液体积，ml；V1消煮液定容体积，ml；m称样量，g；104将mg/L 浓度单位换算为百分含量的换算因数。注释 显色液中(CP)1-5mg/L 时，测定波长用420nm；520mg/L，用490nm。待测液中Fe3+浓度高的选用450nm，以消除Fe3+干扰。校准曲线也应用同样波长测定绘制。一般室温下，温度对显色影响不大，但室温太低(如15时，需显色30分钟，稳定时间可达24小时；如试液为HCl，HClO4 介质，

26、显色剂应用HCl 配制；试液为H2SO4介质，显色剂也用H2SO4配制。显色液酸的适宜浓度范围为L，最好是L，酸度高显色慢且不完全，甚至不显色，低于L，易产生沉淀物，干扰测定。钼酸盐在显色液中的终浓度适宜范围为10-310-2mol/L，钡酸盐为810-510-3mol/L。此法干扰离子少，干扰离子是Fe3+，当显色液中Fe3+浓度超过%时，它的黄色有干扰。可用扣除空白法消除。UV254测定）一、实验仪器：紫外分光光度计、1cm 石英比色皿。真空抽滤机。过滤装置：孔径为m 的滤膜。清洗滤膜和过滤装置时应保证至少 50mL 不含有机物的清洗水通过滤膜。清洗水：DOC 含量低于 L 的双蒸馏水。二

27、、操作过程 水样的制备：将水样通过过滤装置,去除水中悬浮物质和非溶解性有机物。分光光度法测定：以去离子水作为空白对照，在 254nm 波长、室温下测定。色度测定 一、主题内容与适用范围 1、本标准规定了两种测定颜色的方法。本标准测定经 15min 澄清后样品的颜色。pH 值对颜色有较大影响，在测定颜色时应同时测定 pH 值。酸标准溶液(c(HCI 或 12 H2SO4)：L。标定见 HG/T 2843.仪器设备 蒸馏装置或半自动蒸馏仪。蒸馏:检查蒸馏装置是否漏气和管道是否洁净后，打开蒸馏仪开关，空蒸 30 分钟。准确吸取定容后的消煮液(V2，含 NH4-N 约1mg)，注入半微量蒸馏器的消化管

28、内。另取 150mL 三角瓶，内加 5mL 2H3BO3，指示剂溶液，放在冷凝管下端，管口置于 H3BO3液面以上 34cm 处，然后向蒸馏器内慢慢加入约 3mL 400gLNaOH 溶液，通入蒸气蒸馏(注意开放冷凝水，勿使馏出液的温度超过40C)。待馏出液体积约达 5060mL 时，停止蒸馏，用少量已调节至 P的水冲洗冷凝管末端。用酸标准溶液滴定馏出液至由蓝绿色突变为紫红色(终点的颜色应和空白测定的滴定终点相同)。与此同时进行空白测定的蒸馏、滴定，以校正试剂和滴定误差。结果计算 全(N)，=c(HCl)X(VV0)m；式中：c(HCl)酸标准溶液的浓度，molL；V滴定试样所用的酸标准液体积

29、，mL；V0滴定空白所用的酸标准液，mL：N 的摩尔质量，kgmol；m称样量，g：?D分取倍数(即消煮液定容体积 V1吸取测定的体积 V2)。3 植物全磷的测定（钒钼黄吸光光度法）适用范围：适合于含磷量较高的植物样品的测定(如籽粒样品)。方法原理：植物样品经浓 H2SO4消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸，其吸光度与磷浓度成正比，可在波长 400490nm 处用吸光光度法测定。磷浓度较高时选用较长的波长，较低时选用较短波长。此法的优点是操作简便，可在室温下显色，黄色稳定。在 HNO3、HCIO4，和 H2SO4等介质中都适用，对酸度和显色剂浓

30、度的要求也不十分严格，干扰物少。在可见光范围内灵敏度较低，适测范围广(约为 120mgL P)，故广泛应用于含磷较高而且变幅较大的植物和 肥料样品中磷的测定。试剂 钒钼酸铵溶液：钼酸铵(NH4)，分析纯)溶于 400mL 水中，必要时可适当加热，但温度不得超过 60。另将偏钒酸铵(NH4VO3，分析纯)溶于 300mL 沸水中，冷却后加入 250mL 浓 HNO3（分析纯）。将钼酸铵溶液缓缓注入钒酸铵溶液中，不断搅匀，最后加水稀释至1L，贮于棕色瓶中。NaOH 溶液(c=6 molL)：24g NaOH 溶于水，稀释至 100mL。二硝基酚指示剂(p=2 g/L)：g 2,6-二硝基酚或二硝基

31、酚溶于 100 mL 水中。磷标准溶液(P=50mgL)：(干燥的 KH2PO4(分析纯)溶于水，加入 5mL 浓 HNO3，于 1 L 容量瓶中定容。主要仪器设备。分光光度计。分析步骤 准确吸取定容、过滤或澄清后的消煮液 520mL(V2：，含 P 0,75mg)放入 50 mL 容量瓶中，加 2 滴二硝基酚指示剂，滴加6molL NaOH 中和至刚呈黄色，加入 mL 钒钼酸铵试剂，用水定容(V3)。15min 后，用 1cm 光径的比色槽在波长 440nm 处进行测定，以空白溶液(空白试验消煮液按上述步骤显色)，调节仪器零点。校准曲线或直线回归方程：准确吸取 50mgL P 标准液 0，1

32、，10，15mL 分别放入 50mL 容量瓶中，按上述步骤显色，即得 0，10，15mgL P 的标准系列溶液，与待测液一起进行测定，读取吸光度。然后绘制校准曲线或求直线回归方程。.结果计算 全()，=P X V X（V3V2）)X10-4m；式中：P从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度，mgL：V消煮液定容体积，mL；V2吸取测定的消煮液体积，mL；，V3显色液体积，mL：m称样量，：10-4将 mgL 浓度单位换算为百分含量的换算因数。注意事项 显色液中 P15mgL 时，测定波长用 420nm；520mgL，用 490nm。待测液中 Fe+浓度高应选用 450nm，以清除 Fe

33、+干扰。校准曲线也应用同样波长测定绘制。一般室温下，温度对显色影响不大，但室温太低(如15)时，需显色 30min。稳定时间可达 24 h。如试液为 HCI、HClO4介质，显色剂应用 HCl 配制；试液为 H2SO4介质，显色剂也用 H2SO4配制。显色液酸的适宜浓度范围为L，最好是 molL。酸度高显色慢且不完全，甚至不显色：低于L 易产生沉淀物，干扰测定。钼酸盐在显色液中的终浓度适宜范围为10-2molL，钒酸盐为 8X10-5一L。此法干扰离子少。主要干扰离子是铁，当显色液中 Fe3+浓度超过时，它的黄色有干扰，可用扣除空白消除。植物全磷的测定（钼锑抗吸光光度法）适用范围：适合于含磷量

34、较低的植物样品的测定(如茎秆样品等)。方法提要：植物样品经浓 H2SO4消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下，待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸，后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络台物，可用吸光光度法测定。试剂 6 molL NaOH 溶液 二硝基酚指示剂&2 molL(12 H2SO4)硫酸溶液：浓 H2SO4，加水至 100mL。钼锑贮存液：浓 H2SO4(分析纯)126mL 缓慢地注入约 400mL 水中，搅拌，冷却。鉬酸铵(分析纯)溶解于约 60的 300mL 水中，冷却。然后将 H2SO4溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中，再加入 100mL 酒石酸锑钾（KS

35、bOC4O612H2O,分析纯）溶液，最后用水稀释至 1L，避光贮存。此贮存液含钼酸铵为 l，酸浓度为 c(12 H2SO4)=L。钼锑抗显色剂：抗坏血酸(C6H8O6，左旋，旋光度+21 一+22，分析纯)溶于 100mL 钼锑贮存液中。此液须随配随用，有效期一天，冰箱中存放，可用 35 天。磷标准工作液(P)=5mgL：吸取 100rngL P 标准贮存液稀释 20 倍，即为 5mgL P 标准工作溶液，此溶液不宜久存。.主要仪器设备：同上。.分析步骤 吸取定容过滤或澄清后的消煮液(V2，含 P 530ug)于 50 mL 容量瓶中，用水稀释至约 30mL，加 l-2 滴二硝基酚指示剂，滴

36、加 6molL NaOH 溶液中和至刚呈黄色，再加入 1 滴 2molL(12 H2SO4)溶液，使溶液的黄色刚刚褪去，然后加入钼锑抗显色剂，摇匀，用水定容(V3)。在室温高于 15的条件下放置 30min 后，用 lcm 光径比色槽在波长 700nm 处测定吸光度，以空白溶液为参比调节仪器零点。校准曲线或直线回归方程：准确吸取(P)=5 mg/L 标准工作溶液 0，1，2，4，6，8 mL，分别放入 50 mL 容量瓶中，加水至 30 mL，同上步骤显色并定容，即得 0，L P 标准系列溶液，与待测液同时测定，读取吸光度。然后绘制校准曲线或直线回归方程。.结果计算：同上。.注意事项：根据分光

37、光度计性能，可选用 650-890nm 波长处测定，880890nm 处灵敏度高。5 植物全钾的测定一火焰光度法 适用范围：适合于植物样品消煮液中钾含量的测定。方法提要：植物样品经消煮或浸提，并经稀释后，待测液中的 K 可用火焰光度法测定。试剂 K 标准溶液(K)=100mgL)：KCI(分析纯，在 105110C 干燥 2 h)溶于水，于 1 L 容量瓶中定容，存于塑料瓶中。主要仪器设备 5.火焰光度计。6 分析步骤：吸取定容后的消煮液(V2：)放入 50mL 容量瓶中，用水定容(V3)。直接在火焰光度计上测定，读取检流计读数。校准曲线或直线回归方程：准确吸取 100mgL K 标准溶液 0

38、，1，5，10，20mL，分别放入 50mL 容量瓶中，加入定容后的空白消煮液 5 或 10mL(使标准溶液中的离子成分和待测液相近)，加水定容。即得 0，2，5，10，20，40mg/L K 的标准系列溶液。以浓度最高的标准溶液定火焰光度计检流计的满度(一般只定到 90)，然后从稀到浓依次进行测定，记录检流计读数。以检计读数为纵坐标，钾浓度为横坐标绘制校准曲线或求直线回归方程。7 结果计算 全(K)，=K X V X（V3V2）)Xl0-4m 式中：K从校准曲线或回归方程求得的测读液中 K 的浓度，mgL；V消煮液定容体积，mL；V2吸取体积，mL V3测读液定容体积，mL：m干样质量，g 10-4将 mgL 浓度单位换算为百分含量的换算因数。8 注意事项 酸度，一般L,水定容。标准液与待测液组成基本相同，加空白消煮液 5mL 控制。