生化实验基本操作要求资料优秀PPT.ppt

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1、生物化学试验基本操作生物化学试验基本操作一一.生物化学试验基本操作生物化学试验基本操作玻璃仪器的洗涤玻璃仪器的洗涤洗涤干净的标准：在生化试验中，玻璃仪器干净与否，洗涤干净的标准：在生化试验中，玻璃仪器干净与否，是获得精确结果的重要环节。干净的玻璃仪器内壁是获得精确结果的重要环节。干净的玻璃仪器内壁应特别光明光滑，无水珠附着在玻壁上。应特别光明光滑，无水珠附着在玻壁上。常用的洗涤方法：常用的洗涤方法：1.一般仪器（如烧杯、试管等）：一般仪器（如烧杯、试管等）：可用毛刷蘸肥皂液、合成洗涤剂细致刷洗。然可用毛刷蘸肥皂液、合成洗涤剂细致刷洗。然后用自来水反复冲洗，最终用少量蒸馏水冲洗后用自来水反复冲洗

2、，最终用少量蒸馏水冲洗23次，倒置在器皿架上晾干或置于烘箱烤干备次，倒置在器皿架上晾干或置于烘箱烤干备用。用。2.容量分析仪器（如吸量管、容量瓶、滴定管等）：容量分析仪器（如吸量管、容量瓶、滴定管等）：不能用毛刷刷洗。用后应刚好用自来水多次冲洗，细不能用毛刷刷洗。用后应刚好用自来水多次冲洗，细心检查干净程度，依据挂不挂水珠实行不同处理方法。心检查干净程度，依据挂不挂水珠实行不同处理方法。（1）如不挂水珠，用蒸馏水冲洗、干燥，方法同上；）如不挂水珠，用蒸馏水冲洗、干燥，方法同上；（2）如挂水珠，则应沥干后用重铬酸钾洗液浸泡）如挂水珠，则应沥干后用重铬酸钾洗液浸泡46小时，然后按上法依次操作，即先

3、用自来水冲洗，小时，然后按上法依次操作，即先用自来水冲洗，再用蒸馏水冲洗，最终干燥。再用蒸馏水冲洗，最终干燥。3.粘附有血浆的刻度吸量管等，有三种洗涤方法：粘附有血浆的刻度吸量管等，有三种洗涤方法：（1）先用）先用45%尿素溶液浸泡，使血浆蛋白溶解，然后尿素溶液浸泡，使血浆蛋白溶解，然后用自来水冲洗；用自来水冲洗；（2）也可用）也可用1%氨水浸泡，使血浆溶解，然后再依次用氨水浸泡，使血浆溶解，然后再依次用1%稀盐酸溶液、自来水冲洗；稀盐酸溶液、自来水冲洗；（3）以上二法如达不到清洁要求，可浸泡于重铬酸钾）以上二法如达不到清洁要求，可浸泡于重铬酸钾洗液洗液46小时，再用大量自来水冲洗，最终用蒸馏

4、水小时，再用大量自来水冲洗，最终用蒸馏水冲洗冲洗23次。次。4.新购置的玻璃仪器新购置的玻璃仪器:应先置于应先置于12%稀盐酸溶液中浸泡稀盐酸溶液中浸泡26小时，除去附小时，除去附着的游离碱，再用自来水冲洗干净，最终用蒸馏水冲着的游离碱，再用自来水冲洗干净，最终用蒸馏水冲洗洗23次。次。凡用过的玻璃仪器，均应马上洗涤，久置凡用过的玻璃仪器，均应马上洗涤，久置 干枯后洗涤特别困干枯后洗涤特别困难。如不能刚好洗涤，先用流水初步冲洗后浸泡在清水中，难。如不能刚好洗涤，先用流水初步冲洗后浸泡在清水中，待后按常规处理。待后按常规处理。二二.生物化学试验基本操作生物化学试验基本操作吸量管的运用吸量管的运用

5、 吸量管和定量吸吸量管和定量吸(移移)液器液器(微量加样器微量加样器)均为均为用来转移确定体积溶液的量器。用来转移确定体积溶液的量器。吸量管：生化试验中常用的有三种，最常用吸量管：生化试验中常用的有三种，最常用的是刻度吸量管。的是刻度吸量管。1.刻度吸量管：刻度吸量管：刻度吸量管的种类：刻度吸量管的种类：按容量规格来分，有按容量规格来分，有0.1、0.2、0.25、0.5、1、2、5、10ml等数种。其精密度按不同的容积可达移取量的等数种。其精密度按不同的容积可达移取量的0.11%。通常。通常将管身标明的总容量分刻为将管身标明的总容量分刻为100等分。因此，等分。因此，10ml的吸量管的吸量管

6、一格代表一格代表0.1ml；1ml的吸量管一格代表的吸量管一格代表0.01ml,其余类推。其余类推。按按“零零”点位置来分，有点位置来分，有“0”点在吸量管上端的（即读数从点在吸量管上端的（即读数从上而下渐渐增大），也有上而下渐渐增大），也有“0”点在吸量管下端的（读数从下点在吸量管下端的（读数从下而上渐渐增大而上渐渐增大)。两种标示方法，在运用时各有便利之处。两种标示方法，在运用时各有便利之处。按刻度方法来分，刻度吸量管也有两种，一种是刻度刻到尖端按刻度方法来分，刻度吸量管也有两种，一种是刻度刻到尖端的，将液体放出时，应吹出残留在吸量管尖端的少量液体，的，将液体放出时，应吹出残留在吸量管尖端

7、的少量液体，另一种是刻度不刻到尖端的。另一种是刻度不刻到尖端的。刻度吸量管的正确运用方法：刻度吸量管的正确运用方法：用右手拇指和中指夹住管身，将吸量管的尖端伸用右手拇指和中指夹住管身，将吸量管的尖端伸入试液深处，左手持洗耳球把试液吸入管内至高过刻入试液深处，左手持洗耳球把试液吸入管内至高过刻度以上时，快速用右手食指按住吸量管的上口，以限度以上时，快速用右手食指按住吸量管的上口，以限制试液的泄放。吸液后应尽量使吸量管保持垂直，使制试液的泄放。吸液后应尽量使吸量管保持垂直，使右眼与刻度等高，略微轻抬食指或轻轻转动吸量管，右眼与刻度等高，略微轻抬食指或轻轻转动吸量管，使试液面缓慢着陆，至管内试液弯月

8、面的最低点与吸使试液面缓慢着陆，至管内试液弯月面的最低点与吸量管的刻度线相齐为止。量管的刻度线相齐为止。然后将吸量管插到需加试剂的容器中，让尖端与容器内壁然后将吸量管插到需加试剂的容器中，让尖端与容器内壁靠紧，松开食指让液体流出。液体流完后再等靠紧，松开食指让液体流出。液体流完后再等1515秒钟，捻秒钟，捻动一下吸量管后移去（如需吹的吸量管，则吹出尖端的液动一下吸量管后移去（如需吹的吸量管，则吹出尖端的液体后再捻转一下吸量管移去）。体后再捻转一下吸量管移去）。运用刻度吸量管的留意事项：运用刻度吸量管的留意事项：选择适当规格的吸量管：吸量管的最大容积应等于或略大于选择适当规格的吸量管：吸量管的最

9、大容积应等于或略大于所需容积（所需容积（ml数）。数）。细致看清吸量管的刻度状况：刻度是否包括吸量管尖端的液细致看清吸量管的刻度状况：刻度是否包括吸量管尖端的液体？读数方向是从上而下，还是从下而上？体？读数方向是从上而下，还是从下而上？拿吸量管时，刻度确定要面对自己，以便读数。拿吸量管时，刻度确定要面对自己，以便读数。吸取试剂时应留意三点：一是先吹去吸量管内可能存在的残吸取试剂时应留意三点：一是先吹去吸量管内可能存在的残留液体，二是将吸量管插入试剂液面深部留液体，二是将吸量管插入试剂液面深部(以免吸液过程中因以免吸液过程中因液面降低而吸入空气产生气泡或管内试剂进入洗耳球液面降低而吸入空气产生气

10、泡或管内试剂进入洗耳球)，三是，三是运用洗耳球运用洗耳球(不行干脆用口吸不行干脆用口吸)。按吸量管上口时应当用食指，不能用拇指。按吸量管上口时应当用食指，不能用拇指。吸取粘滞性大的液体吸取粘滞性大的液体(如血液、血浆、血清等如血液、血浆、血清等)时，除选用合时，除选用合适的吸管适的吸管(奥氏管奥氏管)外，应留意拭净管尖附着的液体，尽量减慢外，应留意拭净管尖附着的液体，尽量减慢放液速度放液速度(用食指压力限制用食指压力限制)，待液体流尽后吹出管尖残留的最，待液体流尽后吹出管尖残留的最终一滴液体。终一滴液体。运用的吸量管应干净、干燥无水。如急用而又有水时，可运用的吸量管应干净、干燥无水。如急用而又

11、有水时，可用少量欲取试剂冲洗用少量欲取试剂冲洗3 3次，以免试剂被稀释。次，以免试剂被稀释。定量吸定量吸(移移)液器液器(微量加样器微量加样器)：定量吸液器是吸量管的革新产品。由塑料制成。定量吸液器是吸量管的革新产品。由塑料制成。目前，因产地厂家不同其质量、价格差异特别目前，因产地厂家不同其质量、价格差异特别悬殊。悬殊。1.定量吸液器的优点：运用便利，取、加样快速，定量吸液器的优点：运用便利，取、加样快速，计量精确，不易破损，能吸取多种样品（只换计量精确，不易破损，能吸取多种样品（只换吸嘴即可）。吸嘴即可）。2.定量吸液器的类型：有两种类型。定量吸液器的类型：有两种类型。固定式：只能取加确定容

12、量的试剂，不能随意固定式：只能取加确定容量的试剂，不能随意调整取加样量。其规格有调整取加样量。其规格有10l、20l、25l、30l、50l、100l、200l、250l、300l、400l、500l、1000l等。等。可调式：在确定容量范围内可依据须要进行调整取加样量。可调式：在确定容量范围内可依据须要进行调整取加样量。例如规格为例如规格为50200l的可调式定量吸液器，可以在的可调式定量吸液器，可以在50到到200l的范围内依据须要调整成设计容许的各种取加样容量的范围内依据须要调整成设计容许的各种取加样容量（60l、85l、110l、170l、200l等）。等）。一般来讲，固定式吸液器比较

13、精确，可调式吸液器运用较为一般来讲，固定式吸液器比较精确，可调式吸液器运用较为便利。便利。3.定量吸液器的运用方法：定量吸液器的运用方法：选择适当的吸液器。吸液前先把吸嘴套在吸引管上，选择适当的吸液器。吸液前先把吸嘴套在吸引管上，套上后要轻轻旋紧一下，以保证结合严密。套上后要轻轻旋紧一下，以保证结合严密。持法：右手四指（除大拇指外）并拢握住吸液器外壳持法：右手四指（除大拇指外）并拢握住吸液器外壳（使外壳突起部分搭在食指近端），大拇指轻轻放在（使外壳突起部分搭在食指近端），大拇指轻轻放在吸液器的按钮上。吸液器的按钮上。取样取样(吸液吸液)：用大拇指按下按钮到第一停止点，以排：用大拇指按下按钮到第

14、一停止点，以排出确定容量的空气，随后把吸嘴尖浸入取样液内，缓出确定容量的空气，随后把吸嘴尖浸入取样液内，缓缓松开大拇指，让按钮渐渐自行复原，取样即告完成。缓松开大拇指，让按钮渐渐自行复原，取样即告完成。排液：将吸液器的吸嘴尖置于加样容器壁上，排液：将吸液器的吸嘴尖置于加样容器壁上，用大拇指渐渐地将按钮按下到第一停止点，停用大拇指渐渐地将按钮按下到第一停止点，停留留1秒钟（粘性较高的溶液停留时间应适当延秒钟（粘性较高的溶液停留时间应适当延长）。然后再把按钮按到其次停止点上，让吸长）。然后再把按钮按到其次停止点上，让吸嘴沿管壁向上滑动。当吸嘴尖与容器壁或溶液嘴沿管壁向上滑动。当吸嘴尖与容器壁或溶液

15、离开时，方可释放按钮，使其复原到初始位置。离开时，方可释放按钮，使其复原到初始位置。吸液器用后应刚好取下吸嘴。将吸嘴用自来水吸液器用后应刚好取下吸嘴。将吸嘴用自来水冲洗后浸入盛水的容器内（以防干枯），待试冲洗后浸入盛水的容器内（以防干枯），待试验结束后集中细致清洗。验结束后集中细致清洗。三三.生物化学试验基本操作生物化学试验基本操作溶液的混匀溶液的混匀 混匀的目的：混匀的目的：使反应体系内的各种物质分子很好地相互接触，使反应体系内的各种物质分子很好地相互接触，充分进行反应；充分进行反应；使欲稀释的溶液成为浓度均一的溶液。使欲稀释的溶液成为浓度均一的溶液。混匀的方法通常有以下几种：混匀的方法通常

16、有以下几种：使盛器作离心运动。使盛器作离心运动。左手持试管上端，用右手指轻击试管下半部，使管内溶液左手持试管上端，用右手指轻击试管下半部，使管内溶液作旋转运动。作旋转运动。利用旋涡混合（振荡）器混匀。利用旋涡混合（振荡）器混匀。不得已时可用干燥清洁的玻璃棒搅匀。不得已时可用干燥清洁的玻璃棒搅匀。混匀的留意事项：混匀的留意事项：防止盛器内的液体溅出或被污染。防止盛器内的液体溅出或被污染。严禁用手指堵塞管口或瓶口震荡混匀。严禁用手指堵塞管口或瓶口震荡混匀。四四.生物化学试验基本操作生物化学试验基本操作离心机的运用离心机的运用 离心法是分别沉淀的一种方法。它是利用离心机离心法是分别沉淀的一种方法。它

17、是利用离心机转动产生的离心力，使比重较大的物质沉积在转动产生的离心力，使比重较大的物质沉积在管底，以达到与液体分别的目的。因液体在沉管底，以达到与液体分别的目的。因液体在沉淀的上部，故称清亮的液体部分为上清液。淀的上部，故称清亮的液体部分为上清液。电动离心机的运用方法：电动离心机的运用方法：1.将欲离心的液体，置于离心管或小试管内。并检查离将欲离心的液体，置于离心管或小试管内。并检查离心管或小试管的大小是否与离心机的套管相匹配。心管或小试管的大小是否与离心机的套管相匹配。2.取出离心机的全部套管，并检查套管底部是否铺有软取出离心机的全部套管，并检查套管底部是否铺有软垫，有无玻璃碎片或漏孔（有玻

18、璃碎片必需取出，漏垫，有无玻璃碎片或漏孔（有玻璃碎片必需取出，漏孔应当用蜡封住）。检查合格后，将盛有离心液的两孔应当用蜡封住）。检查合格后，将盛有离心液的两个试管分别放入套管中，然后连套管一起分置于粗天个试管分别放入套管中，然后连套管一起分置于粗天平的两侧，通过往离心管与套管之间滴加水来调整两平的两侧，通过往离心管与套管之间滴加水来调整两边的重量使之达到平衡。边的重量使之达到平衡。3.将已平衡的两只装有离心管的套管，分别放入将已平衡的两只装有离心管的套管，分别放入离心机相互对应的两插孔内。盖上离心机盖。离心机相互对应的两插孔内。盖上离心机盖。打开电源开关。逐档扭动旋钮，缓慢增加离心打开电源开关。逐档扭动旋钮，缓慢增加离心机转速，直至所需数值。达到离心所需时间后，机转速，直至所需数值。达到离心所需时间后，将转速旋钮逐步回零，关闭电源，让离心机自将转速旋钮逐步回零，关闭电源，让离心机自然停止转动后（不行人为制动），取出离心管。然停止转动后（不行人为制动），取出离心管。THANK YOU.