多肽的固相合成-(经典版)ppt课件.ppt

《多肽的固相合成-(经典版)ppt课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《多肽的固相合成-(经典版)ppt课件.ppt（32页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确学员旅五队学员旅五队学员旅五队学员旅五队 徐磊徐磊徐磊徐磊 许金翔许金翔许金翔许金翔 钟家伟钟家伟钟家伟钟家伟王康王康王康王康 尚立群尚立群尚立群尚立群 王修楠王修楠王修楠王修楠 在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确定义：以氨基酸为原料，用化学方法合成多肽或蛋白质。目的：确证天然多肽或蛋白质的结构；生产天然的、在生物体内含量极微但有医疗或其他生物效用的多肽；改变部分结构，研究其结构与功能的关系，并设计更有效的药物。基

2、本原理：将两个氨基酸合成一个二肽,基本点是将一个氨基酸的羧基与另一个氨基酸的氨基连结成肽键在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确方法方法：将将这些不希望参加反些不希望参加反应的基的基团用一些特殊的化学用一些特殊的化学试剂与之反与之反应,使生成的基使生成的基团对缩合反合反应不敏感不敏感,还能在能在肽合成后，在不破坏合成后，在不破坏肽键及氨基酸及氨基酸结构的条件下将它构的条件下将它们恢恢复成原先的基复成原先的基团。这一一类试剂称保称保护试剂，形成的基，形成的基团称保称保护基。基。关键：需要有措施使第1个氨基酸的氨基与第2个氨基酸

3、的羧基不参与反应在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确多肽的液相合成多肽的液相合成Click to add TitleClick to add TitleClick to add TitleThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.Click to add Title氨基保氨基保护羧基保基保护Click to add Title缩合合羧基脱除保基脱除保护缩合向合向C端延端延长氨基脱除保氨基脱除保护缩

4、合从合从N端延伸端延伸氨基及氨基及羧基保基保护脱除脱除形成无保形成无保护的四的四肽在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确1963年，年，R.B.梅里菲梅里菲尔德提出固相合成的方法，避免了溶解德提出固相合成的方法，避免了溶解问题。它的原理是将第它的原理是将第 1个氨基酸接到不溶的固体个氨基酸接到不溶的固体颗粒上粒上,然后将保然后将保护的第的第2个氨基酸与之个氨基酸与之缩合。合。产物因在固体物因在固体颗粒上，因此很容易将反粒上，因此很容易将反应中剩中剩余的余的试剂清洗干清洗干净。然后脱去保。然后脱去保护基基,再将第再将第3个氨基

5、酸与之个氨基酸与之缩合而成合而成三三肽。如此反复，只要反。如此反复，只要反应产率非常高，就能合成很大的率非常高，就能合成很大的肽。最后。最后将合成的将合成的肽从固体的支持物上切下，再从固体的支持物上切下，再经纯化，即可得相化，即可得相应的的肽。弊端：弊端：上述反上述反应都在溶都在溶剂中中进行，称行，称为溶液方法。因所溶液方法。因所用保用保护基都是疏水的基都是疏水的,而而肽键是是亲水的水的,因此合成到一、二因此合成到一、二十十肽时，使保，使保护了的了的肽溶解便成了困溶解便成了困难的的问题。寻找合找合适的溶适的溶剂是液相法的一个是液相法的一个难题。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，

6、而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确Diagram固相合成法的诞生固相合成法的诞生多肽合成仪介绍多肽合成仪介绍 多肽的不稳定多肽的不稳定 活化基团活化基团Fmoc与与tBoc 在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确固相合成法的诞生固相合成法的诞生 20世纪50年代1932190219721963Emil Fischer 有机化学家们有机化学家们 Max Bergmann Lou Carpino Merrifield 1902年，年，Emil Fischer首先开始关注多肽合成，由于当时在多首先开始关注多

7、肽合成，由于当时在多肽合成方面的知识太少，进展也相当缓慢肽合成方面的知识太少，进展也相当缓慢 到到1932年，年，Max Bergmann等人开始使用苄氧羰基等人开始使用苄氧羰基(Z)来保护来保护-氨基，氨基，多肽合成才开始有了一定的发展。多肽合成才开始有了一定的发展。到了到了20世纪世纪50年代，有机化学家们合成了大量的生物活性多肽，包年代，有机化学家们合成了大量的生物活性多肽，包括催产素，胰岛素等，同时在多肽合成方法以及氨基酸保护基上面也括催产素，胰岛素等，同时在多肽合成方法以及氨基酸保护基上面也取得了不少成绩，这为后来的固相合成方法的出现提供了实验和理论取得了不少成绩，这为后来的固相合成

8、方法的出现提供了实验和理论基础。基础。1963年，年，Merrifield首次提出了固相多肽合成方法首次提出了固相多肽合成方法(SPPS)，这个在多，这个在多肽化学上具有里程碑意义的合成方法，一出现就由于其合成方便，迅速，肽化学上具有里程碑意义的合成方法，一出现就由于其合成方便，迅速，成为多肽合成的首选方法，而且带来了多肽有机合成上的一次革命，并成为多肽合成的首选方法，而且带来了多肽有机合成上的一次革命，并成为了一支独立的学科成为了一支独立的学科固相有机合成固相有机合成(SPOS)。1972年，年，Lou Carpino首先将首先将9-芴甲氧羰基芴甲氧羰基(FMOC)用于保护用于保护-氨基，氨

9、基，其在碱性条件下可以迅速脱除，其在碱性条件下可以迅速脱除，10min就可以反应完全，而且由于其就可以反应完全，而且由于其反应条件温和，迅速得到广泛使用，以反应条件温和，迅速得到广泛使用，以BOC和和FMOC这两种方法为基这两种方法为基础的各种肽自动合成仪也相继出现和发展，并仍在不断得到改造和完础的各种肽自动合成仪也相继出现和发展，并仍在不断得到改造和完善。同时，固相合成树脂，多肽缩合试剂以及氨基酸保护基，包括合善。同时，固相合成树脂，多肽缩合试剂以及氨基酸保护基，包括合成环肽的氨基酸正交保护上也取得了丰硕的成果。成环肽的氨基酸正交保护上也取得了丰硕的成果。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带

10、着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确Diagram固相合成法的诞生固相合成法的诞生多肽合成仪介绍多肽合成仪介绍 多肽的不稳定多肽的不稳定 活化基团活化基团Fmoc与与tBoc 在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确多肽合成仪多肽合成仪第一代多肽合第一代多肽合成仪成仪 第二代多肽合第二代多肽合成仪成仪 第三代多肽合第三代多肽合成仪成仪 多肽合成仪的发展多肽合成仪的发展在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确第一代多肽合成仪第

11、一代多肽合成仪第一代多肽合成仪是以第一代多肽合成仪是以Beckman公司推出的公司推出的Beckman 990 Peptide Synthesizer以及以及Vegas Biotechnologies公司推公司推出的出的Vegas 296 Peptide Synthesizer为代表的，诞为代表的，诞生在上世纪七十年代。生在上世纪七十年代。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确第一代多肽合成仪第一代多肽合成仪back在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确第

12、二代多肽合成仪第二代多肽合成仪第二代多肽合成仪是以第二代多肽合成仪是以Protein Technologies公公司推出的司推出的PS3 Peptide Synthesizer以及以及Advanced ChemTech公公司推出的司推出的ACT peptide synthesizer Model 90为为代表的，诞生在上世纪八代表的，诞生在上世纪八十年代十年代。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确第二代多肽合成仪第二代多肽合成仪此两款设备也是此两款设备也是目前市场上仍在目前市场上仍在销售的最早的多销售的最早的多肽合成仪。肽

13、合成仪。back在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确第三代多肽合成仪第三代多肽合成仪第三代多肽合成仪是以第三代多肽合成仪是以Applied BiosystemsApplied Biosystems公公司的司的ABI 433 peptide ABI 433 peptide synthesizer synthesizer 与与C S BioC S Bio公司的公司的CS336CS336为代表的无为代表的无死角多肽合成仪为代表死角多肽合成仪为代表的，诞生在上世纪九十的，诞生在上世纪九十年代。年代。在整堂课的教学中，刘教师总是让学

14、生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确Diagram固相合成法的诞生固相合成法的诞生多肽合成仪介绍多肽合成仪介绍 多肽的不稳定多肽的不稳定 活化基团活化基团Fmoc与与tBoc 在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确活化基团活化基团Fmoc与与tBoc 多肽固相合成法多肽固相合成法 多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，固相合成顺序一般从多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，固相合成顺序一般从C端端（羧基端）向（羧基端）向N端（氨基端）合成。固相合成法，大大的减轻了每步端（氨基端）合成。固相

15、合成法，大大的减轻了每步产品提纯的难度。为了防止副反应的发生，参加反应的氨基酸的侧链产品提纯的难度。为了防止副反应的发生，参加反应的氨基酸的侧链都是保护的。羧基端是游离的，并且在反应之前必须活化。固相合成都是保护的。羧基端是游离的，并且在反应之前必须活化。固相合成方法有两种，即方法有两种，即Fmoc和和tBoc。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确Fmoc的循环的循环 3.洗脱和脱保护：洗脱和脱保护：多肽从多肽从柱上洗脱下来，其保护基柱上洗脱下来，其保护基团被一种脱保护剂团被一种脱保护剂（TFA）洗脱和脱保护。洗脱和脱保护

16、。.2.激活和交联：激活和交联：下一个氨基酸的羧基被一种下一个氨基酸的羧基被一种活化剂所活化。活化的单体与游离的氨基反活化剂所活化。活化的单体与游离的氨基反应交联，形成肽键。在此步骤使用大量的超应交联，形成肽键。在此步骤使用大量的超浓度试剂驱使反应完成。浓度试剂驱使反应完成。1.去保护：去保护：Fmoc保护的柱子和单体保护的柱子和单体必须用一种碱性溶必须用一种碱性溶剂（剂（piperidine）去去 除氨基的保护基除氨基的保护基团。团。由于Fmoc比tBoc存在很多优势，现在大多采用Fmoc法合成具体合成由下列几个循环组成：在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定

17、的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确Diagram固相合成法的诞生固相合成法的诞生多肽合成仪介绍多肽合成仪介绍 多肽的不稳定多肽的不稳定 活化基团活化基团Fmoc与与tBoc 在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确不稳定性不稳定性问题问题多肽的不稳定多肽的不稳定性是其制剂研性是其制剂研究中存在的主究中存在的主要问题之一，要问题之一，其原因较多。其原因较多。脱酰胺脱酰胺 氧化氧化消旋消旋水解水解变性变性-消除消除.在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确不稳

18、定性不稳定性添加剂冻干提高稳定性的主要途径提高稳定性的主要途径定向突变化学修饰在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确演讲人：许金翔演讲人：许金翔PPT制作：徐磊制作：徐磊 钟家伟钟家伟材料收集：尚立群材料收集：尚立群 王修楠王修楠 王康王康在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确DiagramTitleAdd your title in here-Yo

19、ur text in here-Your text in hereAdd your title in here-Your text in here-Your text in hereAdd your title in here-Your text in here-Your text in hereAdd your title in here-Your text in here-Your text in here在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确DiagramText in here 01.Title01.TitleAdd

20、 your text in hereAdd your text in hereAdd your text in here 02.Title02.TitleAdd your text in hereAdd your text in hereAdd your text in here 03.Title03.TitleAdd your text in here Add your text in hereAdd your text in hereThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Desig

21、n Inc.ThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.ThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确DiagramAdd Your TextAdd Your TextClick to add TextClick to add TextCli

22、ck to add TextClick to add TextClick to add TextClick to add TextTitleAdd your text在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确3-D Pie ChartA.ProductsA.ProductsAdd your text in hereAdd your text in hereAdd your text in hereAdd your text in hereAdd your text in hereAdd your text in hereAdd

23、your text in hereB.ProductsB.Products Add your text in here Add your text in here Add your text in here Add your text in here Add your text in here在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确Diagram10%5%60%25%ThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design

24、Inc.Text in hereText in hereText in hereText in here Your text in here Your text in here Your text in here Your text in here Your text in here Your text in here Your text in here Your text in here Your text in hereClick to add Text Your text in here Your text in here Your text in here在整堂课的教学中，刘教师总是让

25、学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确DiagramThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.ThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.TitleTitleTitleTitleTitleTitle在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确

26、DiagramTitleTitleTitleTitleTitleTitleThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.Add your text in hereAdd your text in hereAdd your text in here在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确DiagramTitleTitleTitleTitleText in hereText in hereTitleTitle

27、Text in hereTitleTitleThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确DiagramClick to add TextAdd your text in here-Your text in here-Your text in hereThemeGallery is a Design Digital Content&Contents mall dev

28、eloped by Guild Design Inc.Click to add TextClick to add TextAdd your text in here-Your text in here-Your text in hereAdd your text in here-Your text in here-Your text in here在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确DiagramAdd your text in hereAdd your text in hereTitleABAdd your text in hereDAdd your text in hereCAdd your text in hereAdd your text in hereAdd your text in hereAdd your text in here