基因工程的工具公开课ppt课件.ppt

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1、经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用 基因工程基因工程 是指在是指在体外体外通过人工通过人工“剪切剪切”和和“拼接拼接”等方法，对生物的等方法，对生物的基因基因进行改造和重新组进行改造和重新组合，然后合，然后导入导入受体细胞，并使重组基因在受受体细胞，并使重组基因在受体细胞中体细胞中表达表达，产生人类需要的，产生人类需要的基因产物基因产物的的技术。技术。经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用基因工程的产物：多彩

2、小鱼多彩小鱼转基因小鼠转基因小鼠转基因小猪转基因小猪辣椒香蕉辣椒香蕉蓝色玫瑰蓝色玫瑰黑籽番茄黑籽番茄经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用（1 1）能）能识别识别双链双链DNADNA的某种的某种特定核苷酸序列特定核苷酸序列（2 2）使每条链中）使每条链中特定部位特定部位的两个核苷酸之间的的两个核苷酸之间的磷磷 酸二酯键酸二酯键断开。断开。1.1.作用：作用：（一）限制性核酸内切酶（一）限制性核酸内切酶“分子手术刀分子手术刀”经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增

3、加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用具有具有特异性特异性。一种一种限制酶限制酶只能识别一种只能识别一种特定的特定的核苷酸核苷酸序列序列，并且能在，并且能在特定的切点特定的切点上切割上切割DNADNA分子，分子，2.2.作用特点：作用特点：大多数限制酶的识别序列由大多数限制酶的识别序列由6 6个个核苷酸组成，核苷酸组成，少数的识别序列由少数的识别序列由4 4、5 5或或8 8个核苷酸组成。个核苷酸组成。限制酶的识别序列：限制酶的识别序列：（一）限制性核酸内切酶（一）限制性核酸内切酶“分子手术刀分子手术刀”经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，

4、增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用回文序列回文序列经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用中轴线在G与A之间切割EcoRI限制酶的作用大肠杆菌的一种大肠杆菌的一种大肠杆菌的一种大肠杆菌的一种限制酶（限制酶（EcoREcoR），专门识别），专门识别DNADNA分分子中含有子中含有“GAATTCGAATTC”这样的序列，一旦找到就从这样的序列，一旦找到就从G G和和A A之间剪断。之间剪断。经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购

5、买商品的价款或接受服务的费用黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端EcoRIEcoRI限制酶的切割限制酶的切割经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用SmaISmaI只能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切开。中轴线SmaISmaI限制酶的作用限制酶的作用在G与C之间切割经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用平末端平末端平末端平末端平末端平末端平末端平末端SmaISmaI限制酶的切割限制酶的切割当限制酶从识别序列的中心

6、轴线处切开时，切开的当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNADNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端平末端。经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用产生黏性末端或平末端产生黏性末端或平末端3.3.结果：结果：（一）限制性核酸内切酶（一）限制性核酸内切酶“分子手术刀分子手术刀”4.4.切割对象：切割对象：目的基因和运载体目的基因和运载体经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或

7、接受服务的费用质粒质粒目的基因目的基因经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用要想获得某个目的基因必须要用限制酶要想获得某个目的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？一切几个切口？可产生几个黏性末端？一个目的基因有几个黏性末端？个目的基因有几个黏性末端？要切两个切口，产生四个黏性末端，要切两个切口，产生四个黏性末端，两个。两个。如果把两种来源不同的如果把两种来源不同

8、的DNADNA用同一种限用同一种限制酶来切割，会怎样呢？制酶来切割，会怎样呢？会产生相同的末端。会产生相同的末端。思考题：思考题：经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用5.来源 现在已经从约现在已经从约300种微生物中分离出了约种微生物中分离出了约4000 种限制性内切酶种限制性内切酶(限制酶限制酶)。经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用寻根问底寻根问底你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是你能推测限制酶存在于

9、原核生物中的作用是是什么吗？是什么吗？原核生物易受自然界外源原核生物易受自然界外源DNA的入侵的入侵，但生物在长期的进化过程中形成了一套完善但生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。的防御机制，以防止外来病原物的侵害。限限制酶制酶就是细菌的一种就是细菌的一种防御性工具防御性工具，当外源，当外源DNA侵入时，会利用限制酶侵入时，会利用限制酶将外源将外源DNA切割切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效使之失效，从而达到从而达到保护自身保护自身的目的。的目的。经营

10、者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用（二）（二）“分子缝合针分子缝合针”DNADNA连接酶连接酶作用作用:作用原理：作用原理：催化磷酸二酯键形成催化磷酸二酯键形成 把切下来的把切下来的DNADNA片段拼接成新的片段拼接成新的DNADNA，即将，即将脱氧脱氧核糖和磷酸核糖和磷酸连接起来。连接起来。经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用（二）（二）“分子缝合针分子缝合针”DNADNA连接酶连接酶经营者提供商品或者服务有

11、欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用将外源基因送入受体细胞。将外源基因送入受体细胞。(三三)基因进入受体细胞的载体基因进入受体细胞的载体 “分子运输车分子运输车”载体的作用：载体的作用：质粒质粒噬菌体的衍生物噬菌体的衍生物动植物病毒等动植物病毒等载体的种类：载体的种类：经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用大肠杆菌结构模式图DNA质粒载体结构模式图目的基因插入位点氨苄青霉素抗性基因复制原点一个至多个限制酶切割位点有标记基因可以复制对受

12、体细胞无害真正被用作载体的质粒，都是进行过人工改造的。载体需要具备的条件经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用 将含有目的基因的将含有目的基因的DNADNA与经特定的酶切与经特定的酶切后的载体（质粒）进行连接形成重组后的载体（质粒）进行连接形成重组DNADNA，重，重组组DNADNA可能有几种？可能有几种？思思 考考经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加

13、赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用 结果分析：结果分析：单纯用单纯用EcoREcoR限制酶切割，再连接后的产物有：限制酶切割，再连接后的产物有：（1 1）目的基因与质粒连接的产物）目的基因与质粒连接的产物（2 2）目的基因与目的基因连接的产物）目的基因与目的基因连接的产物（3 3）质粒与质粒连接的产物）质粒与质粒连接的产物（4 4）目的基因自身环化的产物）目的基因自身环化的产物（5 5）质粒自身环化的产物）质粒自身环化的产物经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用思考：思考：如何避免质粒和目的基因的自身环化和随如何避免质粒和目的基因的自身环化和随意连接？意连接？用不同限制酶切割目的基因和质粒用不同限制酶切割目的基因和质粒经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用