肝胆胰疾病的实验诊断精华版课件.ppt
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1、肝胆胰疾病的实验诊断浙江大学医学院附属邵逸夫医院消化科 吴加国精品文档概述n肝胆胰疾病临床常见;n腹腔内三个相互毗邻的脏器,有各自生理功能;n其损伤可引起人体一系列病理变化,导致疾病;n肝脏具有独特的生化和免疫功能;n胆囊与胰腺在腹腔内与肝脏相互连通。精品文档肝胆胰相关疾病肝脏疾病n病毒性肝炎病毒性肝炎;n自身免疫性肝炎;n药物性肝病;n酒精性肝病酒精性肝病;n肝硬化肝硬化;n非酒精性脂肪性肝病;n原发性肝癌原发性肝癌;n肝性脑病等。精品文档肝胆胰相关疾病胰腺疾病n胰腺炎胰腺炎;n胰腺癌等。肝胆胰相关疾病胆道疾病n胆囊炎;n胆石症。精品文档肝胆胰疾病相关症状n呕血;n黄疸黄疸;n急性腹痛等。精
2、品文档主要内容n常用生物化学的实验检测常用生物化学的实验检测n蛋白质代谢功能检测;n胆红素和胆汁酸代谢检测n酶学检查;n肝脏纤维化相关标志物检测;n脂质代谢功能检测;n摄取和排泄功能检查。n常见肝胆胰疾病的实验诊断常见肝胆胰疾病的实验诊断n病毒性肝炎;n酒精性肝病;n肝硬化;n原发性肝癌;n胰腺炎;n自身免疫性肝炎;n非酒精性脂肪性肝病;n肝性脑病;n胰腺癌;n胆囊炎与胆石症;n药物性肝病。n常用免疫学的实验诊断精品文档第一部分:常用生物化学的实验检测常用生物化学的实验检测精品文档常用生物化学的实验检测一、蛋白质代谢功能检测;二、胆红素代谢检测;三、酶学检查;四、肝脏纤维化相关标志物检测;五、
3、摄取和排泄功能检查。精品文档一、蛋白质代谢功能检测精品文档蛋白质代谢功能检测概论n肝脏合成蛋白功能:肝脏可合成90以上的血清总蛋白,包括白蛋白(全部)、糖蛋白、脂蛋白、多种凝血因子、抗凝因子、纤溶因子及各种转运蛋白等。n肝功能受损可致血液中蛋白含量变化:低白蛋白血症水肿;凝血因子合成减少皮肤粘膜出血倾向;刺激单核-巨噬细胞系统,球蛋白生成增加。n检测血浆蛋白含量及蛋白质组分的分析(蛋白电泳),可了解肝细胞有无受损及其损害的严重程度。精品文档蛋白质代谢功能检测内容n血清总蛋白测定,白蛋白、球蛋白、白蛋白与球蛋白比值测定;n血清蛋白电泳;n血清前白蛋白测定;n与肝功能有关的特殊蛋白测定;n血浆凝血
4、因子测定;n血氨测定。精品文档血清蛋白测定血清总蛋白(serumtotalprotein,STP):白蛋白(albumin,A);球蛋白(globulin,G);白蛋白/球蛋白比值(albumin/globulin,A/G)。精品文档血清蛋白测定白蛋白n合成部位:肝脏,150250mg/kgd,半寿期1519d.n主要功能:维持血液胶体渗透压;内源性营养源;载体作用(体内代谢物转运)。精品文档血清蛋白测定球蛋白n合成部位:主要由B淋巴细胞-浆细胞(非肝细胞)合成,其次为肝细胞。n组成:免疫球蛋白(非肝细胞合成)和补体;各种糖蛋白、脂蛋白;金属结合蛋白和酶类等(肝细胞合成)。n功能:与机体免疫功
5、能及血浆粘度密切相关。精品文档血清蛋白测定检测方法n双缩脲(biuretmethod)法:血清总蛋白;n溴甲酚绿(dyebromcresolgreen)法:白蛋白。精品文档n与性别无关,与年龄相关。新生儿、婴幼儿和60岁以上的老年人稍低。n白蛋白至少占60%;球蛋白不超过40%。n成人:成人:n血清总蛋白:血清总蛋白:6080g/L;n血清白蛋白血清白蛋白:4050g/L;n血清球蛋白血清球蛋白:2030g/L;n白蛋白白蛋白/球蛋白比值(球蛋白比值(albumin/globumin,A/G):):正常成人:正常成人:1.52.5:1血清蛋白测定参考范围精品文档血清蛋白测定临床意义n反映慢性肝
6、损害,以及肝实质细胞的储备功能。n最常见的情况:STP与ALB增高;STP与ALB减低;STP与GLB增高;GLB减低;A/G倒置。精品文档总蛋白减低:TP80g/L(高蛋白血症)n蛋白合成增多(主要是Ig)(多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症);n血液浓缩(严重脱水、休克、饮水量不足);n肝硬化(球蛋白增高);n慢性感染性疾病(球蛋白明显增高、自身免疫性肝炎、脓毒症、梅毒、麻风、疟疾等)。精品文档总蛋白减低:ALB35g/L称高球蛋白血症)n慢性肝脏疾病;nM蛋白血症(多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症);n自身免疫性疾病(SLE、风湿病等);n肝外的慢性炎症和慢性感染(结核、麻风等。精品文档球蛋白减低:n
7、先天性先天性B淋巴细胞缺陷、先天性无免疫球淋巴细胞缺陷、先天性无免疫球蛋白血症;蛋白血症;n免疫功能抑制(用免疫抑制剂及抗肿治疗);n严重肝、肾疾病晚期;n生理性减少:生理性减少:3岁以下的婴幼儿;精品文档A/G比值减低或倒转n严重肝功能损害nM蛋白血症(如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症)。精品文档影响血清蛋白质检测结果因素n检测方法;n激烈运动;n体位;n标本溶血;n乳糜标本;n静脉采血时止血带压迫时间超过3分钟。n采血状态:静止、空腹、卧位;并避免标本溶血。精品文档血清蛋白电泳(serum protein electrophoresis,SPE)临床常用方法:n醋酸纤维素膜法n琼脂糖凝胶
8、法(电泳结果常用光密度计扫描图表示)精品文档Schematic representation of the electrophoretic pattern of normal human serum in pH 8.6 buffer obtained with four methods.A:Tiselius or free boundary electrophoresis.B:Paper electrophoresis.C:Starch-gel electrophoresis.D:Immunoelectrophoresis.The arrow indicates the starting po
9、int with each method.2-Macroglobulin remains at the origin in starch-gel electrophoresis,but moves in the-to-range with other methods.Ig,immunoglobulin.(From Putnam FW.The proteins,2nd ed.,Vol.1.Orlando:Academic Press,1975:18,with permission.)精品文档血清蛋白电泳参考值醋酸纤维膜法:n白蛋白:0.620.71;n1球蛋白:0.030.04;n2球蛋白:0.
10、060.10;n球蛋白:0.070.11;n球蛋白:0.090.18.精品文档Electrophoresis area distribution fo serum protein elementnPrealbumin area:prealbumin(PAB)nAlbumin area:albumin(A)n1 globulin area:1-lipoprotein(HDL),1-acid-glycoprotein(1-AG),1-antitrypsin(1-AT)n2 globulin area:2macroglobulin(2MG),haptoglobin(Hp),pro-lipoprote
11、in(VLDL),cholinesterase(CHE),ceruloplasmin(CP)n globulin area:transferrin(Tf),-lipoprotein(LDL),C-reactiveprotein(CRP),complementfibrinogen(Fib),hemopexin(Hpx),antithrombin(AT-)nglobulin area:immunoglobulin(IgA,IgD,IgE,IgG,IgM)精品文档血清蛋白电泳临床意义n肝病型:白蛋白减低;1、2和球蛋白有减少倾向,球蛋白增高。nM蛋白血症型:白蛋白轻度减低,单克隆球蛋白明显增高;出现
12、峰型明显的M蛋白区带。n肾病型:白蛋白及球蛋白减低,2和球蛋白增高。n炎症型:1、2和球蛋白均增高。n其他型:风湿病:多克隆球蛋白增高;先天性低球蛋白血症:球蛋白减低;蛋白丢失性肠病:白蛋白及球蛋白减低,2球蛋白增高。精品文档血清前白蛋白测定(prealbumin,PAB)n肝细胞合成,分子量比白蛋白小.n载体蛋白,能与甲状腺素结合,因此又叫甲状腺素结合前白蛋白(thyroxinbindingprealbumin),并能运输维生素.n半衰期短,为1.9天(约2天),因此是反映肝脏蛋白质合成的敏感指标,它比白蛋白更能早期反映肝细胞损害。n血清前白蛋白参考值:280-360mg/L(成人)。精品文
13、档血清前白蛋白临床意义n降低见于:n营养不良、慢性感染、恶性肿瘤晚期、溃疡性结肠炎、甲亢、肾病综合征、烧伤;n肝胆系统疾病:肝炎、肝硬化、肝癌及胆汁淤积性黄疸。对早期肝炎、急性重症肝炎有特殊诊断价值。n增高见于:Hodgkin病。精品文档与肝脏功能有关的特殊蛋白测定n血清血清1-酸性糖蛋白酸性糖蛋白(1-acid-glycoprotein,1-AG或或AAG)是血浆蛋白中含糖量最高的蛋白(含糖量高达40%)。合成于肝脏和白细胞。急性时相反应蛋白。n血清血清1-抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶(1-antitrypsin,1-AT或或AAT),主要合成于肝脏,广泛存在于血清和体液中。血清中主要的糖蛋白酶抑制
14、剂。急性时相反应蛋白。n血清血清2-巨球蛋白巨球蛋白(2 macroglobulin,2-MG,AMG)是血浆中分子量最大的蛋白质,合成于肝脏和网状内皮系统。急性时相反应蛋白。具有蛋白酶抑制功能。n血清铜蓝蛋白血清铜蓝蛋白(ceruloplasmin,CP)由肝脏合成。n血清纤维结合蛋白血清纤维结合蛋白(fibronectin,FN)由肝细胞、内皮细胞和巨噬细胞合成。精品文档血氨测定(ammonia,NH3)n参考范围:1872mol/L。n临床意义:n病理性增高:严重肝病、尿毒症、上消化道大出血、肝外门脉系统分流形成。n生理性增高:过多进食高蛋白饮食和运动后。n减低见于:低蛋白饮食和严重贫血
15、等。精品文档临床举例(一)精品文档二、胆红素代谢功能检测精品文档衰老的衰老的衰老的衰老的RBCRBCRBCRBCHbHbHbHb血红素血红素血红素血红素胆绿素胆绿素胆绿素胆绿素胆红素胆红素胆红素胆红素胆红素胆红素胆红素胆红素(血胆红素)(血胆红素)(血胆红素)(血胆红素)UDPGAUDPGAUDPGAUDPGAUDPUDPUDPUDP葡萄糖醛酸胆红素葡萄糖醛酸胆红素葡萄糖醛酸胆红素葡萄糖醛酸胆红素(肝胆红素(肝胆红素(肝胆红素(肝胆红素/结合胆红素)结合胆红素)结合胆红素)结合胆红素)尿胆原尿胆原尿胆原尿胆原粪胆原粪胆原粪胆原粪胆原粪胆素粪胆素粪胆素粪胆素尿胆原尿胆原尿胆原尿胆原尿胆素尿胆素尿
16、胆素尿胆素胆红素胆红素胆红素胆红素-A A A AA A A A胆红素胆红素胆红素胆红素Z-PrZ-PrZ-PrZ-PrA A A A胆红素胆红素胆红素胆红素正常胆红素代谢途径精品文档血清胆红素检测n血清总胆红素(serumtotalbilirubin,STB):非结合胆红素 (unconjugatedbilirubin,UCB)结合胆红素(conjugatedbilirubin,CB)n正常情况下进入血中的胆红素与被清除的胆红素处于动态平衡,当胆红素代谢发生障碍时,血、尿胆红素和尿胆原会发生变化。精品文档血清胆红素测定原理n血清中胆红素与偶氮染料发生重氮化反应有快相与慢相两期,前者为可溶性结
17、合胆红素,后者为不溶解的非结合胆红素。n应用Jendrassik-Grof方法,使用茶碱和甲醇作为溶剂,以保证血清中结合与非结合胆红素完全溶解,并与重氮盐试剂起快速反应,即为血清中的总胆红素(serum total bilirubin)。n血清中不加溶解剂,当血清与重氮盐试剂混合后快速发生颜色改变,在1分钟时测得的胆红素即为结合胆红素(CB)。总胆红素减去结合胆红素即为非结合胆红素(UCB)。精品文档血清胆红素检测参考值nSTB:新生儿:01天:34103mol/L;出生后12天:103171mol/L;35天:68137mol/L;成人:3.417.1mol/L。nCB:06.8mol/L。
18、nUCB:1.710.2mol/L;nCB/STB:0.20.4。精品文档血清胆红素检测临床意义n判断有无黄疸及黄疸的程度;n根据黄疸程度推断黄疸原因;n根据CB及UCB增高情况及CB/STB比值判断黄疸的类型:nCB/STB50%:cholestaticjaundice。精品文档尿胆红素(bilirubinuria)检查n非结合胆红素不能透过肾小球屏障,尿中不出现;结合胆红素为水溶性,能透过肾小球基底膜,尿中能出现。n正常成年人尿中含有微量胆红素,大约为3.4mol/L,通常检测方法不能发现,当血中结合胆红素浓度超过肾阈(34mol/L)时,结合胆红素可自尿中排出。精品文档尿胆红素检查方法n
19、加氧法加氧法检查,胆红素被氧化为胆氯素而使尿呈绿色;n重氮反应法重氮反应法检查,胆红素成为重氮胆红素,尿呈紫色。尿内胆红素检查参考范围n定性试验阴性;定量2mg/L。精品文档尿内胆红素检查临床意义n尿中胆红素试验阳性提示血中结合胆红素增加,见于:n 胆汁排泄受阻;n 肝细胞损害;n 碱中毒时胆红素分泌增加,亦可阳性。n可用于黄疸的鉴别诊断。精品文档尿液尿胆原(urobilinogen,URO)测定原理n在胆红素肠肝循环中,仅有极少数尿胆原逸入血液循环,从肾脏排出。n尿中尿胆原为无色不稳定物质,可与苯甲醛(Ehrlich试剂)发生醛化反应,生成紫红色化合物,从而可进行定性和定量检查。精品文档尿液
20、尿胆原测定参考范围n定量:0.844.2mol/L/24h;n定性:阴性或弱阳性。精品文档尿中尿胆原检查临床意义n尿中尿胆原在生理情况下仅有微量,但受食物和尿液酸碱度的影响,在餐后或碱性尿中,由于肾小管对尿胆原重吸收减少和肠道尿胆原生成增加,尿中尿胆原稍增加;相反在酸性尿中则减少。n若晨尿稀释4倍以上仍成阳性,则为尿胆原增多。精品文档尿中尿胆原检查临床意义病理性尿胆原增多见于:n肝细胞受损肝细胞受损;n循环中红细胞破坏增加及红细胞前体细胞在骨髓内破坏增加,如溶血性贫血及巨幼细胞贫血溶血性贫血及巨幼细胞贫血;n内出血内出血时胆红素生成增加;n充血性心力衰竭伴肝淤血肝淤血时,影响胆汁中尿胆原转运及
21、再分泌,进入血中的尿胆原增加;n其他:如肠梗阻肠梗阻、顽固性便秘,使肠道对尿胆原回吸收增加,使尿中尿胆原排出增加。精品文档尿中尿胆原检查临床意义病理性尿胆原减少或缺如见于:n胆道梗阻胆道梗阻(同时伴尿胆红素增加);n新生儿及长期服用广谱抗生素时,由于肠道细菌缺乏或受到药物抑制肠道细菌缺乏或受到药物抑制,使尿胆原生成减少;n其他:小肠排泄过快、胆红素产生减少(严重再生障碍性贫血)、肾功能不全。精品文档正常人及常见黄疸的胆色素代谢检查结果精品文档正常人胆色素代谢检查结果血清胆红素(mol/L):nCB:06.8mol/L;nUCB:1.710.2mol/L;nCB/STB:0.20.4。尿内胆色素
22、:n尿胆红素:阴性或弱阳性;n尿胆原(mol/L):0.844.2。精品文档梗阻性黄疸(obstructivejaundice)胆色素代谢检查结果血清胆红素(mol/L):nCB:明显增加;nUCB:轻度增加;nCB/STB:0.5。尿内胆色素:n尿胆红素:强阳性;n尿胆原(mol/L):减少或缺如。精品文档溶血性黄疸(hemolyticjaundice)胆色素代谢检查结果血清胆红素(mol/L):nCB:轻度增加;nUCB:明显增加;nCB/STB:0.2,2。精品文档血清转氨酶增高主要疾病:n急性病毒性肝炎n慢性病毒性肝炎n非病毒性肝炎:药物性、脂肪肝、肝癌、酒精性肝病等疾病n肝硬化n胆汁
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