边做边学酵母菌细胞的固定化技术.ppt

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1、汕头一中生物组许明酶的定义：活细胞产生的 具有催化作用的 有机物（大部分是蛋白质，少部分是RNA）酶作用的特点：高效性（与无机催化剂相比）专一性 需要适宜的温度和pH对反应条件比较敏感，易失活难回收，利用率低影响产品质量酶应用过程中的存在问题：解决策略（设想）：将酶固定在不溶于水的载体上，使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，实现酶的重复利用定义（p50）：利用物理或化学方法将酶固定在一定空间的技术常用载体(不溶于水)：明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等将酶包埋在将酶包埋在细微网格里细微网格里将酶相互将酶相互连接起来连接起来将酶吸附在将酶吸附在载体表面上载体表面上包埋法包埋法化学

2、结合法化学结合法物理吸附法物理吸附法利用固定化葡萄糖异构酶生产高果糖浆 原理：葡萄糖异构酶葡萄糖果糖固定化酶的优点：酶既能与反应物接触，又容易与反应物分离，实现酶的重复利用 节约生产成本，提高产品质量一种酶只能催化一种酶只能催化一种或一类化学反应一种或一类化学反应单独催化某一化学反应，可以利用载体固定一单独催化某一化学反应，可以利用载体固定一种酶进行反应；种酶进行反应；在实际生产过程中，很多产物的形成是通过在实际生产过程中，很多产物的形成是通过一一系列的酶促反应系列的酶促反应完成的完成的若需要要收集若需要要收集连续反应连续反应的产物，显然需要多种的产物，显然需要多种酶酶应该将多种应该将多种酶固

3、定在载体酶固定在载体上还是将上还是将细胞固定在细胞固定在载体载体上上?定义（p50）：利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间的技术，包埋法包埋法化学结合法化学结合法物理吸附法物理吸附法多用于固定酶常用常用载体：海藻酸钠对象：酵母细胞原理：海藻酸钠在钙离子溶液中会由液态转变为凝胶 从而将酵母细胞包埋制备流程 制备流程 酵母细胞活化（1g+10ml水）活化酵母细胞与冷却海藻酸钠混匀将混合物置于针筒中，缓慢滴入乳酸钙溶液中收集凝胶珠，检验固定效果小提示：小提示：缺水状态下，微生缺水状态下，微生物处于休眠状态。活化就是物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的

4、生活状态新恢复正常的生活状态准备阶段：配置海藻酸钠溶液（3.5g溶于120ml水）实验结果分析与评价1.如何检验凝胶珠质量是否合格？检验方法：挤压，使其破裂不容易破裂，无液体流出视为合格提示：为保证凝胶形成效果，刚形成的凝胶珠应置于钙离子（乳酸钙/氯化钙）溶液中稳定一段时间实验结果分析与评价2、不同小组凝胶珠颜色有深有浅说明什么？凝胶珠不是圆形或椭圆形说明什么？颜色过钱，呈白色，可能是海藻酸钠过多或酵母菌细胞数目过少凝胶珠不是圆形或椭圆形，因为海藻酸钠浓度偏高实验结果分析与评价4、观察发酵的葡萄糖溶液，可说明什么？利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以闻到酒味由于呼吸，产生CO2，还能产生较多气泡多谢指导！多谢指导！分组分组酵母菌溶液酵母菌溶液（ml）海藻酸钠溶液海藻酸钠溶液（ml）总体积总体积（ml）11030402202040330104041010分两次，共20