酶工程固定化酶的性质精选课件.ppt

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1、关于酶工程固定化酶的性质第一页，本课件共有12页CH5-2 固定化酶的性质固定化酶的性质2.固定化的酶性质固定化的酶性质 分配效应对分配效应对KmKm的影响的影响 这种影响通常用分配系数这种影响通常用分配系数()()来描述：来描述：SiSiS (1)S (1)式式中中SiSi和和SS分分别别表表示示底底物物或或其其它它效效应应物物在在微微环环境境中中的的局局部部浓浓度度和和宏宏观观体体系系中中的总体的总体(或平均或平均)浓度。浓度。对对最最简简单单的的固固定定化化酶酶系系统统而而言言，其其动动力力学学性性态态，一一般般仍仍服服从从米米氏氏方方程程。当当反反应应系系统统进进行行充充分分搅搅拌拌，

2、消消除除外外扩扩散散限限制制影影响响时时，只只考考虑虑分分配配效效应应的的影影响响，则则反反应应速速度度可可表表示如下：示如下：VmaxSiVmaxSi v=(2)v=(2)Km+Si Km+Si VmaxS VmaxS =(3)=(3)Km+S Km+S VmaxS VmaxS VmaxS VmaxS =(4)=(4)Km/+S K Km/+S Km+Sm+S K Km=Km/(5)m=Km/(5)这这表表明明分分配配系系数数的的影影响响，是是改改变变了了KmKm。K Km m是是分分配配效效应应影影响响下下的的表表观观米米氏氏常常数数。由由式式(1)(1)和和(5)(5)，可可以以看看出出

3、SiSiSS，则则1 1，K Km mKmKm，表明固定化作用降低酶对底物的亲和力。，表明固定化作用降低酶对底物的亲和力。通通过过载载体体和和底底物物电电荷荷性性质质、离离子子强强度度和和pHpH值值对对分分配配效效应的影响讨论，可以得出一般性规律如下：应的影响讨论，可以得出一般性规律如下：载载体体与与底底物物带带相相同同电电荷荷时时，相相斥斥，SiSiSS，K Km mKmKm。当当载载体体带带正正电电荷荷时时，局局部部H H+浓浓度度低低于于总总体体浓浓度度，SiSi变变大大，K K变变小小，即即酶酶活活力力一一pHpH曲曲线线向向酸酸性性方方向向偏偏移移，亦亦即即最最适适pHpH向向酸酸

4、性性方方向向偏偏移移；反反之之，离离子子载载体体将将向向碱碱性性方向偏移，如图所示。方向偏移，如图所示。1.载体带正电荷，载体带正电荷，最适最适pH向偏酸性偏移；向偏酸性偏移；2.游离酶的最适游离酶的最适pH3.3.载体带负电荷，载体带负电荷，最适最适pH向偏碱方向偏移；向偏碱方向偏移；V 上上述述效效应应，通通过过提提高高反反应应系系统统的的离离子子强强度度，可可以以减减弱弱或或消消除除。当当离离子子强强度度等等于于载载体体电电荷荷基基团团浓浓度度一一半半时时，K Km mKmKm2 2，当当离离子子强强度度远远大大于于载载体体电电荷基团浓度时，荷基团浓度时，K Km mKmKm。采用疏水性

5、载体时，如底物为极性物质或电采用疏水性载体时，如底物为极性物质或电荷性物质，则荷性物质，则Si小，小，KmKm；如底物为疏水性；如底物为疏水性物物 第二页，本课件共有12页CH5-2 固定化酶的性质固定化酶的性质2.固定化的酶性质固定化的酶性质 扩扩散限制效散限制效应应 酶酶固固定定化化之之后后，由由于于扩扩散散限限制制，使使得得酶酶往往往往不不能能得得到到宏宏观观体体系系相相同同水水平平的的底底物物，因因而而观观测测到到的的实实效效反反应应速速度度，常常低低于于理理论论预预测测的的水水平平。对对于于这这种种影影响响，通通常常引引用用实实效效系系数数O O进进行定量行定量讨论讨论。v=v=O

6、Ov vp p O O=v/v=v/vp p （1 1）式式中中v v为为实实效效反反应应速速度度，v vp p为为理理论论预预期期反反应应速速度度，即即由由溶溶液液酶酶的的米米孟氏方程确定的速度。孟氏方程确定的速度。VmaxSVmaxS VmaxS 由由 v=v=O （2 2）Km+S Km+S Km+S 如前所述，扩散包括外扩散和内扩散两方面。如前所述，扩散包括外扩散和内扩散两方面。外外扩扩散散实实际际上上包包括括分分子子扩扩散散和和对对流流扩扩散散两两部部分分。在在固固定定化化酶酶反反应应操操作作中中，可可以以通通过过搅搅拌拌混混和和而而消消除除或或削削弱弱其其限限制制作作用用。动动力力

7、学学分分析析指指出出，外外扩扩散散限限制制效效应应影影响响下下，酶酶反反应应实实效效速速度度一一般般低低于于酶酶促促转转化化动动力力学学规规定定的的速速度度。因因此此，这这种种扩扩散散限限制制可可以以看看作作是是一种抑制效应，可称为扩散抑制。一种抑制效应，可称为扩散抑制。内内扩扩散散限限制制对对酶酶反反应应动动力力学学的的影影响响，在在某某种种程程度度上上比比外外扩扩散散限限制制更更突突出出，更更重重要要。动力学理论分析所得出的一些主要结论有以下三点，可以用定性的语言来描述。动力学理论分析所得出的一些主要结论有以下三点，可以用定性的语言来描述。底底物物和和其其它它效效应应物物分分子子量量对对扩

8、扩散散速速率率的的影影响响分分析析表表明明，一一般般情情况况下下，固固定定化化酶酶作作用用于于高高分分子子量量底底物物比比低低分分子子量量底底物物的的实实效效反反应应速速度度下下降降程程度度比比溶液酶更大。许多实验结果与此理论分析是一致的。溶液酶更大。许多实验结果与此理论分析是一致的。载载体体结结构构的的影影响响分分析析表表明明，内内扩扩散散限限制制取取决决于于载载体体的的孔孔隙隙率率、孔孔隙隙半半径径、孔孔隙隙曲曲折折程程度度。即即：底底物物的的内内扩扩散散系系数数与与载载体体孔孔隙隙率率成成正正比比，与与底底物物在在宏宏观观体体系系中中固固有有的的扩扩散散系系数数成成正正比比，与与载载体体

9、孔孔隙隙的的曲曲折折系系数数成成反反比比，与与载载体体膜膜厚厚度度或或载载体体颗颗粒粒半径的平方成反比。实验支持了这一理论分析。半径的平方成反比。实验支持了这一理论分析。内内扩扩散散限限制制与与酶酶反反应应固固有有速速度度有有关关。即即是是说说固固有有反反应应速速度度v vp p 大大，酶酶反反应应的的底底物物转转移移系系数数也也大大，当当SS小小于于0.1 0.1 KmKm时时，O O大大，则则固固定定化化酶酶反反应应速速度度也也相对大。相对大。第三页，本课件共有12页CH5-2 固定化酶的性质固定化酶的性质3.固定化的酶催化条件固定化的酶催化条件 酶活力回收率酶活力回收率 游游离离酶酶经经

10、过过固固定定化化以以后后，酶酶活活力力往往往往下下降降。固固定定化化酶酶所所保保留留下下来来的的酶酶活活力力与与游游离离酶酶在在固固定定化化之之前前的的酶酶活活力力之之比比，称称为为该该酶酶活活力力回回收收率率，也也叫叫固固定定化化效效率率、残残存存活活力力等等。在在不不考考虑虑扩扩散散限限制制影影响响的的情情况况下下，固固定定化化酶酶的的酶酶活力回收率可以通过实验测得活力回收率可以通过实验测得由下式求得：由下式求得：V Vm m.B.Bimim F Fim im 100%100%V Vm m.B.B式式中中F Fimim为为活活力力回回收收率率()，B B为为固固定定化化前前所所用用的的游游

11、离离酶酶溶溶液液体体积积；B Bimim为为制制得得的的固固定定化化酶酶湿湿体体积积；V Vm m 为为固固定定化化前前的的酶酶的的最最大大反反应应速速度度；V Vm m 固固定化酶测得的表观最大反应速度。定化酶测得的表观最大反应速度。关关于于固固定定化化酶酶收收率率问问题题，有有不不同同得得报报道道，上上述述方方法法考考虑虑了了在在固固定定化化处处理理过过程程中中，有有未未被被固固定定化化的的酶酶蛋蛋白白、在在固固定定化化过过程程中中失失活活的的酶酶蛋蛋白白以以及及在在固固定定化化后后KcatKcat的变化（降低或升高）；的变化（降低或升高）；而另一种方法是：而另一种方法是：V Vm m.B

12、.Bimim F Fim im 100%100%V Vm m.（B BB B）式式中中符符号号与与上上式式相相同同，B B为为固固定定化化处处理理后后，回回收收的的未未固固定定的的酶酶蛋蛋白白的的量量。实实际际上上这这种种方方法法，只只考考虑虑了了在在固固定定化化处处理理过过程程中中，固固定定化化方方法法对对酶酶蛋蛋白白构构型、活性中心等的影响，把未被固定化的酶蛋白作为回收考虑。型、活性中心等的影响，把未被固定化的酶蛋白作为回收考虑。固固定定化化酶酶的的话话力力回回收收率率因因所所采采用用的的固固定定化化方方法法而而异异。一一般般来来说，说，F Fimim 值按下列固定化方法顺序递减：值按下列

13、固定化方法顺序递减：吸附法凝胶包埋法微型胶囊包埋法交联法吸附法凝胶包埋法微型胶囊包埋法交联法 例例如如，李李增增吉吉等等(1993(1993年年)报报道道，用用DEAEDEAE纤纤维维素素直直接接吸吸附附天天冬冬氨氨酸酸酶酶，酶酶活活力力回回收收达达9090；以以聚聚乙乙烯烯基基吡吡啶啶与与聚聚甲甲基基丙丙烯烯酸酸复复合合物物包包埋埋同同一一酶酶，当当加加酶酶量量为为每每1 1克克复复合合物物8.40mg8.40mg和和16.8mg16.8mg时时，酶酶活活力力回回收收分分别别可可达达8787和和9494。姜姜涌涌明明等等(1993(1993年年)用用壳壳聚聚糖糖作作载载体体，戊戊二二醛醛作作

14、交交联联剂剂，分分别别对对木木瓜瓜蛋蛋白白酶酶、AS1.398AS1.398中中性性蛋蛋白白酶酶、胰胰蛋蛋白白酶酶和和胃胃蛋蛋白白酶酶进进行行固固定定化化，在在最最佳佳条条件件下下，固固定定化化酶酶的的活活力力回回收收率率分分别别为为4747、7474、5050和和5555。底物专一性变化底物专一性变化 对对于于作作用用于于大大分分子子底底物物的的酶酶，当当其其固固定定于于水水不不溶溶性性载载体体之之后后，往往往往由由于于空空间间障障碍碍，而而使使酶酶对对分分子子量量大大的的底底物物的的催催化化活活性性大大大大下下降降。例例如如，糖糖化化酶酶用用CM一一纤纤维维素素经经化化学学法法共共价价固固

15、定定化化后后，对对分分子子量量为为8000的的直直链链淀淀粉粉的的催催化化活活性性下下降降23，而而对对分分子子量量为为500000的直链淀粉的催化活性下降的直链淀粉的催化活性下降85一一87。反应的最适反应的最适pH值变化值变化许许多多实实验验证证明明，酶酶固固定定化化后后的的反反应应最最适适pH值值会会发发生生不不同同程程度度的的变变化化。例例如如，天天冬冬氨氨酸酸酶酶固固定定于于疏疏水水载载体体N烷烷基基琼琼脂脂糖糖珠珠之之后后，酶酶的的最最适适反反应应pH与与液液酶酶相相比比，向向碱碱性性区区移移动动了了04个个pH单单位位，（为为pH89马马林林等等，1991)。胰胰蛋蛋白白酶酶用用

16、戊戊二二醛醛固固定定于于脱脱乙乙酰酰壳壳聚聚糖糖载载体体后后，最最适适pH范范围围加加宽宽，由由液液相相酶酶的的pH8.0变变为为pH7.09.0(隋隋德德新新等等，1991)。另另外外也也有有实实验验证证明明固固定化酶最适定化酶最适pH移向酸侧的。移向酸侧的。反应最适温度的变化反应最适温度的变化固固定定化化酶酶的的最最适适反反应应温温度度，在在很很多多情情况况下下是是高高于于游游离离酶酶的的。同同上上实实验验的的固固定定化化天天冬冬氨氨酸酸酶酶最最适适反反应应温温度度提提高高了了5，为为50；胰胰蛋蛋白白酶酶也也提提高高了了5，为为60，而而且且即即使使在在70仍仍有有较较高高的的活活性性。

17、用用CM纤纤维维素素叠叠氮氮衍衍生生物物固固定定化化的的胰胰蛋蛋白白酶酶和和糜糜蛋蛋白白酶酶的的最最适适温温度度则则比比游游离离酶酶高高515。也也有有固固定定化化酶的最适温度不变的，例如壳聚糖固定化胃蛋白酶。酶的最适温度不变的，例如壳聚糖固定化胃蛋白酶。第四页，本课件共有12页CH5-2 固定化酶的性质固定化酶的性质3.固定化的酶催化条件固定化的酶催化条件 米氏常数变化米氏常数变化 酶被固定化后，米氏常数的变化前已推导，下表所列固定酶被固定化后，米氏常数的变化前已推导，下表所列固定化酶的化酶的Km值与游离酶的值与游离酶的Km值之比值：值之比值：酶载 体固定化方法底 物Km/Km无花果酶肌酸激

18、酶天冬酰胺酶木瓜蛋白酶 CM-纤维素CM-纤维素尼龙火棉胶 肽键结合法 肽键结合法微囊吸附 苯甲酰精氨酸乙酯ATP、肌酸Asn苯甲酰精氨 0.9 101021.8 一般来说，酶在固定化以后，一般都表现为一般来说，酶在固定化以后，一般都表现为Km值增大，值增大，即即Km/Km大于大于l。第五页，本课件共有12页CH5-2 固定化酶的性质固定化酶的性质3.固定化的酶催化条件固定化的酶催化条件 最大反应速度的变化最大反应速度的变化固固定定化化酶酶的的最最大大反反应应速速度度(V(Vm)m)与与游游离离酶酶的的VmVm值值大大多多基基本相同，本相同，事事实实上上，对对于于最最大大反反应应速速度度的的比

19、比较较是是很很难难进进行行的的，因因为为VmVm与与反反应应体体系系中中的的加加酶酶量量有有关关，单单纯纯VmVm的的比比较较，也也难以说明什么问题，最客观的比较参数应该是难以说明什么问题，最客观的比较参数应该是KcatKcat但到目前笔者尚未收到有关研究资料报道。但到目前笔者尚未收到有关研究资料报道。第六页，本课件共有12页CH5-2 固定化酶的性质固定化酶的性质4.固定化酶的稳定性固定化酶的稳定性 固定化酶的热稳定性固定化酶的热稳定性大多数酶经固定化以后，热稳定性提高。大多数酶经固定化以后，热稳定性提高。例例如如，乳乳酸酸脱脱氢氢酶酶、脲脲酶酶、氨氨基基酰酰化化酶酶、胰胰蛋蛋白白酶酶等等，

20、固定化后，热稳定性都比游离酶高；固定化后，热稳定性都比游离酶高；也有固定化之后耐热性反而下降的例子。也有固定化之后耐热性反而下降的例子。DEAEDEAE纤纤维维素素离离子子交交换换吸吸附附的的转转化化酶酶，4040加加热热3030分分钟钟，其其剩剩余余活活力力为为4 4，而而游游离离酶酶，在在相相同同条条件件下下其其活活力力为为100100。固定化酶对化学试剂的稳定性固定化酶对化学试剂的稳定性大大多多数数情情况况下下，酶酶固固定定化化之之后后，增增强强了了对对化化学学试试剂剂的的耐耐受受力力。例例如如氨氨基基酰酰化化酶酶，用用DEAEDEAE葡葡聚聚糖糖交交换换吸吸附附法法制制成成固固定定化化

21、酶酶后后，在在6mol6molL Lll尿尿素素、2mol2molL Lll中中，保保存存活活力力分分别别为为146146和和117117；而而游游离离酶酶在在相相应应条条件件下下，保保存存活活力力仅仅9 9和和4949。CMCCMC偶偶联联的的胰胰蛋蛋白白酶酶，在在3mol3molL Lll 脲脲中中的的保保存存活活力力为为120120，游游离离酶酶只只6060。尿尿素素、盐盐酸酸脲脲这这样样的的蛋蛋白白质质变变性性剂剂，不不仅仅没没有有损损失失固固定定化化酶酶的的活活性性，反反而而提提高高酶酶活活性性的的现现象象，据据认认为为可可能能与与酶酶的的柔柔顺顺性性增增加加有有关关。个个别别酶酶如

22、如葡葡萄萄糖糖淀淀粉粉酶酶，固固定定化化以以后后，对某些抑制剂更为敏感。对某些抑制剂更为敏感。固定化酶对蛋白酶的稳定性固定化酶对蛋白酶的稳定性一一般般来来说说，酶酶固固定定化化以以后后，增增强强了了对对蛋蛋白白酶酶的的抵抵抗抗力力。例例如如用用尼尼龙龙或或聚聚服服膜膜包包埋埋，或或用用聚聚丙丙烯烯酰酰胺胺包包埋埋的的天天冬冬酰酰胺胺酶酶，对对蛋蛋白白酶酶极极为为稳稳定定，而而游游离离酶酶在在同同样样条条件件下下，几几乎乎全全部部失失活活。据据认认为为，这这可可能能与与固固定定化化酶的载体不允许大分子酶蛋白透过有关。酶的载体不允许大分子酶蛋白透过有关。固定化酶的操作稳定性和贮藏稳定性固定化酶的操

23、作稳定性和贮藏稳定性大大多多数数酶酶固固定定化化以以后后，操操作作稳稳定定性性和和贮贮藏藏稳稳定定性性都都明明显显提提高高。这这对对工工业业生生产产是是很很重重要要的的有有利利性性质质。例例如如三三酯酯酸酸纤纤维维素素包包埋埋的的转转化化酶酶，在在2525操操作作530530日日，活活力力仅仅丧丧失失一一半半。重重氮氮化化结结合合于于多多孔孔玻玻璃璃的的葡葡萄萄糖糖异异构构酶酶，6060下下的的半半寿寿期期为为1414天天。一一般般说说来来，操作稳定性要有一个月以上的半寿期，才有工业应用价值。操作稳定性要有一个月以上的半寿期，才有工业应用价值。贮贮藏藏稳稳定定性性下下降降的的例例子子也也存存在

24、在。游游离离核核酸酸酶酶44下下保保存存一一周周，活活力力不不减减；而而共共价价固固定定化化酶酶(载载体体苯苯乙乙烯烯马马来来酐酐)则则丧丧失失5050的的活活力。力。第七页，本课件共有12页CH5-2 固定化酶的性质固定化酶的性质5.固定化酶稳定性的途径固定化酶稳定性的途径探探讨讨固固定定化化过过程程增增强强酶酶稳稳定定性性的的机机制制，从从中中寻寻求求提提高高固固定定化化酶酶稳稳定定性性途途径径，是是值值得得重重视视的的课课题题，不不少少研研究究者者已已在在这这方方面面作作了了有益探索。初步归纳有以下几点有益探索。初步归纳有以下几点。用化学修饰增加与载体相反的电荷用化学修饰增加与载体相反的

25、电荷 例如用乙酰酐和例如用乙酰酐和琥珀酰酐作为酶的酰化剂，酶经酰化后与阴离子交换剂琥珀酰酐作为酶的酰化剂，酶经酰化后与阴离子交换剂DEAE纤维素结合。如此制备的固定化葡萄糖淀粉酶，纤维素结合。如此制备的固定化葡萄糖淀粉酶，55糖化可溶性淀粉，经糖化可溶性淀粉，经7.5小时，酶活力保留小时，酶活力保留71，而未，而未经酰化的固定化酶，只保留经酰化的固定化酶，只保留17的活力。的活力。固定化酶与底物形成复合物固定化酶与底物形成复合物 研究固定化多核苷酸磷酸研究固定化多核苷酸磷酸化酶微环境对酶稳定性的作用时，证明固定化酶与其反应化酶微环境对酶稳定性的作用时，证明固定化酶与其反应产物大分子核酸形成的复

26、合物，对酶的稳定性起很大的作产物大分子核酸形成的复合物，对酶的稳定性起很大的作用。用。在实际工作中，经常在固定化处理时，先将酶和底物结在实际工作中，经常在固定化处理时，先将酶和底物结合，以酶底物复合物的形式进行，获得的固定化酶的收率合，以酶底物复合物的形式进行，获得的固定化酶的收率和稳定性都有明显改善。和稳定性都有明显改善。添添加加隋隋性性蛋蛋白白质质 研研究究固固定定化化葡葡萄萄糖糖氧氧化化酶酶的的稳稳定定性性指指出出，在在固固定定化化过过程程中中，以以1 1：10(10(酶酶：Hb)Hb)的的比比例例添添加加血血红红蛋蛋白白，提提高高酶酶活活性性效效果果最最为为明明显显，这这可可能能是是惰

27、惰性性蛋蛋白白质质提提供供了了对对酶酶更为有利的微环境之故。更为有利的微环境之故。增强载体凝胶多孔性和结构有序性增强载体凝胶多孔性和结构有序性 研究卡拉胶的结研究卡拉胶的结构与其包埋的异构酶热稳定性的关系时，发现含硫酸根构与其包埋的异构酶热稳定性的关系时，发现含硫酸根多的卡拉胶，具有较好的孔隙性和结构上的有序性。而多的卡拉胶，具有较好的孔隙性和结构上的有序性。而这种有序性与酶对底物的亲和力呈正相关。在制备固定这种有序性与酶对底物的亲和力呈正相关。在制备固定化酶时，添加氨基葡萄糖，可提高胶的结构有序性，同化酶时，添加氨基葡萄糖，可提高胶的结构有序性，同时得到了理想的酶稳定性。时得到了理想的酶稳定

28、性。同时固定化能消除产物抑制的酶同时固定化能消除产物抑制的酶 葡萄糖氧化酶氧化葡葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖的产物之一为萄糖的产物之一为H202，易使该酶钝化，若同时固定化葡萄糖，易使该酶钝化，若同时固定化葡萄糖氧化酶氧化酶(GOD)和过氧化氢酶和过氧化氢酶(Cat)，当，当CatGOD为为27时，时，固定化双酶，使葡萄糖氧化酶半寿期延长了固定化双酶，使葡萄糖氧化酶半寿期延长了12倍。倍。25连连续使用续使用36小时活力不变，半寿期达小时活力不变，半寿期达1155小时小时(约：，约：，48天天)。第八页，本课件共有12页CH5-3固定化酶反应器固定化酶反应器1 1.固定化酶反应器类型固定化酶反应器类

29、型 酶反应器是以酶作为催化剂进行反应所需的设备。性酶反应器是以酶作为催化剂进行反应所需的设备。性能优良的反应器，可大大提高生产效率。能优良的反应器，可大大提高生产效率。酶反应器的形式很多，根据进料和出料方式，可概括酶反应器的形式很多，根据进料和出料方式，可概括为两种类型：为两种类型：分批搅拌式反应器分批搅拌式反应器(BR)(BR)与连续流式反应器与连续流式反应器(CFR)(CFR)。后者又有两种基本形式：连续流搅拌桶后者又有两种基本形式：连续流搅拌桶(罐罐)反应器反应器(CST)(CST)、复合搅拌反应器（复合搅拌反应器（CSRCSR）、填充床反应器）、填充床反应器(PR)(PR)和流化床和流

30、化床反应器（反应器（FBRFBR）。）。第九页，本课件共有12页CH5-3固定化酶反应器固定化酶反应器 1 1.固定化酶反应器类型固定化酶反应器类型 第十页，本课件共有12页CH5-3固定化酶反应器固定化酶反应器 1 1.固定化酶反应器类型固定化酶反应器类型 分批搅拌反应器分批搅拌反应器 这这类类反反应应器器结结构构简简单单，不不需需特特殊殊装装置置，适适于于小小规规模模试试验验。目目前前我我国国酶酶反反应应器器主主要要用用这这种种形形式式的的反反应应器器。用用溶溶液液酶酶或或粗粗酶酶制制剂剂催催化化时时，酶酶一一般般不不回回收收，待待反反应应转转化化为为一一定定程程度度后后，直直接接加加热热

31、或或用用其其它它方方法法使使酶酶失失效效除除去去。这这种种反反应应器器在在工工业业生生产产中中，很很少少采采用用固固定定化化酶酶，因因为为在在反反复复过过滤滤或或离心回收过程中，容易造成酶失效损失。离心回收过程中，容易造成酶失效损失。填填充充床床反反应应器器 这这是是当当前前采采用用最最多多的的一一种种反反应应器器形形式式。床床内内通通常常用用颗颗粒粒状状或或片片状状固固定定化化酶酶填填充充，也也可可平平行行地地填填充充各各向向异异性性的的半半透透性性中中空空纤纤维维；或或者者作作成成管管状状，内内部部填填充充酶酶膜膜、酶酶片片等等。运运转转时时，底底物物按按照照一一定定方方向向以以恒恒定定流

32、流速速通通过过反反应应床床。根根据据底底物物流流动动方方式式，又又有有下下向向流流动动，上上向向流流动动和和循循环环法法之之分分。工工业业生生产产中中，液液流流方方向向常常用用上上向向方方式式，避避免免下下向向流流动动的的液液压压对对柱柱床床的的影影响。对反应产生气体者尤应注意。响。对反应产生气体者尤应注意。流流化化床床反反应应器器 和和连连续续流流搅搅拌拌桶桶反反应应器器一一样样，是是让让适适量量的的颗颗粒粒状状酶酶悬悬浮浮于于反反应应床床中中，但但不不搅搅拌拌，而而是是通通过过向向上上的的底底物物流流，达达到到混混合合的的目目的的。因因此此，流流速速应应以以能能使使酶酶颗颗粒粒不不下下沉沉，而而又又不不致使颗粒溢出反应床为度。致使颗粒溢出反应床为度。第十一页，本课件共有12页感谢大家观看第十二页，本课件共有12页