附录4.常用的消灭菌操作方法.pptx

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1、附录附录4常用的消毒灭菌操作方法大连理工大学附属高级中学 潘怡辰微生物无处不在微生物无处不在无菌技术无菌技术无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。无菌操作要求1.实验操作的空间，操作者衣着，手进行消毒。2.用于实验的，微生物培养皿，接种用具，培养基进行灭菌3.为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精火焰附近进行4实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触消毒消毒灭菌灭菌消毒：是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢，孢子）灭菌：则是指用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物。常用灭菌操作方法-干热灭菌法利用干热空气

2、或火焰使细菌的原生质凝固，并使细菌的酶系统破坏，从而杀死细菌的方法。适用于耐高温的玻璃，金属等用具。常用灭菌操作方法-干热灭菌法灼烧灭菌干热灭菌箱常用灭菌操作方法-干热灭菌法1.将待灭菌的物品，如塞上面塞的试管，锥形瓶，等玻璃仪器，用干净的报纸包裹严密后，放入干热灭菌箱。2.灭菌，关好干热灭菌箱的箱门，旋动恒温调节器，设定温度为160-170。当温度升到150左右时，保持此温度34h。3降温，关掉电源，自然降温4.开箱取物 等温度降到70以下后，打开箱门，取出灭菌物品。注意温度末降到70以前，切勿打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。干热灭菌操作方法使用高压蒸气灭菌，是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭

3、菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾产生蒸汽，待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高,高于100,导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。常用灭菌操作方法-高压灭菌操作法1.首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架）平齐。2.放入储物桶，并装入灭菌物品，注意不要装的太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。锥形瓶与试管口不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而透入棉塞。3.加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内（内侧半圆槽）。拧紧固定盖子的螺栓，注意要同时旋紧相对的

4、两个螺栓，使螺栓松紧一致，不漏气。高压灭菌操作法4.加热灭菌锅，打开排气阀，桶内空气随加热时排出，待较急的蒸汽喷出时，再将扳手置回原位。让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐步上升。当锅内压力达到安全阀控制范围时，灭菌器会间歇性放汽，开始保温并计时（100kPa,121，15-30min）5.到灭菌时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。如果提前打开排气阀，锅内压力突然下降，灭菌容器内的液体会冲出容器，造成污染。高压灭菌操作法紫外线只适用于表面灭菌和空气灭菌。以面积为10的普通小型接种室为例，在工作台上方距地面2米处悬挂12只30

5、W紫外灯，每次开灯照射30min，就能达到室内空气灭菌的目的。照射前，适量喷洒石碳酸等化学抑菌剂，可以加强灭菌效果。常用灭菌操作方法-紫外线灭菌的操作方法2018全国二卷选修137.在生产，生活和科研中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染回答下列问题在实验室中，玻璃和金属材料的实验器具_(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是_可以在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能_,在照射前，适量喷洒_,可强化消毒效果。水厂供应的自来水通常是经过_(填“氯气”，“乙醇”，“高锰酸钾”)消毒的某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是_2018全国二卷选修1破坏DNA结构消毒液氯气未将锅内冷空气排尽