血清总胆固醇测定.ppt

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1、 实验五实验五 人人血清总胆固醇的测定血清总胆固醇的测定 -化学比色法化学比色法 一、实验目的一、实验目的 1.了解胆固醇 2.学习胆固醇测定的原理和方法 二、实验原理二、实验原理（一）胆固醇cholesterol 是一种环戊烷多氢菲的衍生物。早在18世纪人们已从胆石中发现了胆固醇，它广泛存在于动物体内，尤以脑及神经组织中最为丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高。其溶解性与脂肪类似，不溶于水，易溶于乙醚、氯仿等溶剂。是合成胆汁酸，维生素D以及甾体激素的原料 胆固醇是动物组织细胞所不可缺少的重要物质，它不仅参与形成细胞膜。自然界中的胆固醇主要存在于动物性食物之中，植物中没有胆固醇，但存在结构

2、上与胆固醇十分相似的物质植物固醇。植物固醇无致动脉粥样硬化的作用。正常人体内血液总胆固醇110220毫克/100毫升。血液中胆固醇含量过高，表示胆固醇代谢可能发生障碍。冠状动脉粥样硬化患者的血清胆固醇含量往往偏高。因此临床化验上测定血清胆固醇含量将有助于诊断某些疾病。人体胆固醇来自食物及体内合成两个途径。1.2/3由肝脏制造出2.其余的1/3来自食物，尤以肥肉内脏、蛋黄含量较高。机体的胆固醇以两种形式存在:游离的胆固醇 胆固醇酯 胆固醇必须和脂蛋白结合才能运送到体内各部分；脂蛋白又分低密度脂蛋白LDL和高密度脂蛋白HDL。低密度脂蛋白胆固醇 LDL-C 低密度脂蛋白把胆固醇从肝脏运送到全身组织

3、，过量时，它携带的胆固醇便积存在动脉壁上，久了容易引起动脉硬化。因此低密度脂蛋白被称为“坏的胆固醇”。高密度脂蛋白胆固醇HDL-C 高密度脂蛋白扮演清道夫角色，它将周边组织多余的胆固醇送回肝脏，排出体外，达到抗血管硬化的目的。它还有维护血管内皮细胞功能，及保护血管免于血栓的形成。高密度脂蛋白增加，动脉壁被胆固醇囤积的机会就减少。因此它是“好的胆固醇”。（二）血液（二）血液 组成：血细胞（有形体）血浆（包含血清及纤维蛋白原）血浆是血液的重要组成分，呈淡黄色液体，水分占9092，溶质以血浆蛋白为主。血浆总胆固醇的1/3以游离形式存在，2/3为与脂肪酸结合之胆固醇酯。（三）实验反应原理实验反应原理

4、胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲醛产生紫红色物质，此物质在550nm波长处有最大吸收。因此，可用比色法作总胆固醇的定量测定。胆固醇含量在400mg/100mL以内时，与光吸收值呈良好线性关系。三、实验步骤三、实验步骤1、制作标准曲线2、样品测定,人血清(已经稀释，直接使用)四、注意事项四、注意事项1.强酸注意实验安全2.这次实验选定35水浴锅中显色3.混合酸自己配制：25毫升浓硫酸缓慢缓慢倒入25毫升冰乙酸中，边加边搅4.混合酸粘度大，要用封口膜混匀。比色前也需要混匀5.样品测定中对照不做，用标准曲线中的0号管6.接触血清戴手套一只，实验结束要洗手五、思考题五、思考题 酯类难溶于水，将它们均匀分散在水中则形成乳浊液。为什么正常人血浆和血清中含有酯类虽多，但却清澈透明？