07.药品无菌检测技术.ppt

《07.药品无菌检测技术.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《07.药品无菌检测技术.ppt（28页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、第七章 药品无菌检测技术 2022/12/202022/12/201 1第一节 药品无菌检测概述 中药和生物系中药和生物系中药和生物系中药和生物系2022/12/202022/12/202 2一、药品无菌检测概念及意义相相关关概概念念无菌检查无菌检查：用于确定要求无菌的药品、医：用于确定要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料及要求无菌的其他用疗器具、原料、辅料及要求无菌的其他用品是否染有活菌的一种方法。品是否染有活菌的一种方法。无菌制剂无菌制剂：即规定用无菌法制备或制备：即规定用无菌法制备或制备后经无菌处理的不含活的微生物的药物。后经无菌处理的不含活的微生物的药物。需氧菌需氧菌厌氧菌厌氧菌真菌真

2、菌2022/12/202022/12/203 3一、药品无菌检测概念及意义意意义义n确定药物是否污染。确定药物是否污染。n控制药品的质量，保证用药的有效性控制药品的质量，保证用药的有效性和安全性都具有重要意义。和安全性都具有重要意义。n同时也可作为衡量药品生产全过程卫同时也可作为衡量药品生产全过程卫生水平的重要根据之一。生水平的重要根据之一。2022/12/202022/12/204 4一、基础知识需做需做无菌无菌检查检查的制的制剂剂 注射剂：注射剂：注射液、注射用无菌粉末、注射用浓溶注射液、注射用无菌粉末、注射用浓溶液液眼用制剂眼用制剂：眼用液体制剂、眼用半固体制剂、眼：眼用液体制剂、眼用半

3、固体制剂、眼用固体制剂等用固体制剂等用于烧伤、溃疡或严重创伤等外用药物制剂用于烧伤、溃疡或严重创伤等外用药物制剂：软：软膏剂、乳膏剂、气雾剂、喷雾剂、散剂、耳用制剂膏剂、乳膏剂、气雾剂、喷雾剂、散剂、耳用制剂（用于手术、耳部伤口或耳膜穿孔的滴耳剂与洗耳（用于手术、耳部伤口或耳膜穿孔的滴耳剂与洗耳剂）、鼻用制剂、冲洗剂、涂剂、洗剂、涂膜剂、剂）、鼻用制剂、冲洗剂、涂剂、洗剂、涂膜剂、凝胶剂。凝胶剂。植入剂植入剂:植入性硅橡胶、植入性生物降解材料植入性硅橡胶、植入性生物降解材料其他：透析液，可吸收止血剂等其他：透析液，可吸收止血剂等2022/12/202022/12/205 5一、药品无菌检测概念

4、及意义无菌无菌检查检查环境环境和人和人员要员要求求环境要求环境要求:无菌室内进行。背景洁净度无菌室内进行。背景洁净度10,00010,000级下的局部级下的局部100100级，单向流空气。级，单向流空气。操作人员：卫生、着装符合要求。操作人员：卫生、着装符合要求。操作要求：严格遵守无菌操作，严防污染。操作要求：严格遵守无菌操作，严防污染。2022/12/202022/12/206 6二、药品无菌检测概况 利用无菌操作，将药品分别加入适合利用无菌操作，将药品分别加入适合需氧菌、厌氧菌和真菌生长的液体培养基需氧菌、厌氧菌和真菌生长的液体培养基中，置于适宜温度下培养一段时间，观察中，置于适宜温度下培

5、养一段时间，观察有无微生物生长，由此判断药品是否合格。有无微生物生长，由此判断药品是否合格。无菌无菌检查检查原理原理 2022/12/202022/12/207 7二、药品无菌检测概况1.1.检查项目检查项目（1 1）阴性对照试验阴性对照试验：稀释液：稀释液+培养基，培养基，应无菌生长。应无菌生长。（2 2）阳性对照试验阳性对照试验：供试品：供试品+阳性对照阳性对照菌菌+培养基，应有菌生长。培养基，应有菌生长。（3 3）供试品检查供试品检查：供试品：供试品+培养基，有培养基，有菌生长，判不符合规定；无菌生长，判符菌生长，判不符合规定；无菌生长，判符合规定合规定 无菌无菌检查检查方法方法 202

6、2/12/202022/12/208 8二、药品无菌检测概况2.2.检查数量和检查量（检查数量和检查量（p130）检查数量与批产量、检查数量与批产量、检品来源有关检品来源有关检查量与装量有关检查量与装量有关 无菌无菌检查检查方法方法 2022/12/202022/12/209 9二、药品无菌检测概况3.3.培养基、培养温度、培养时间培养基、培养温度、培养时间 无菌无菌检查检查方法方法 检查检查菌菌培养基名称培养基名称装量装量培养温度培养温度培养培养时间时间细细菌菌硫乙醇酸硫乙醇酸盐盐流体培养基流体培养基15ml15ml303035351414天天真菌真菌改良改良马马丁培养基丁培养基10ml10

7、ml232328281414天天2022/12/202022/12/201010二、药品无菌检测概况4.4.检查方法检查方法 无菌无菌检查检查方法方法 薄膜薄膜过滤过滤法法 直接直接接种接种法法 2022/12/202022/12/201111第二节 药品无菌检测方法 中药和生物系中药和生物系中药和生物系中药和生物系2022/12/202022/12/201212一、直接接种法 接接 培培 种种 养养项项 目目 量量 基基好氧、好氧、厌厌氧菌培养氧菌培养真菌培养真菌培养硫乙醇酸硫乙醇酸盐盐流体培养基流体培养基改良改良马马丁培养基丁培养基供供试试品：品：每种培养基各若干支每种培养基各若干支（与检

8、查数量有关）（与检查数量有关）若干若干mlml（与装量有关）（与装量有关）若干若干mlml（与装量有关）（与装量有关）阳性阳性对对照：照：供供试试品阳性品阳性对对照菌菌照菌菌液液若干若干mlml（供（供试试品）品）+1.0ml1.0ml（菌液）（菌液）或：若干或：若干ml(ml(供供试试品品)+1.0ml+1.0ml（菌液）（菌液）阴性阴性对对照照若干若干mlml稀稀释释液液若干若干mlml稀稀释释液液培养温度培养温度3030353523232828培养培养时间时间1414天（阳性天（阳性对对照照48487272小小时时）2022/12/202022/12/201313二、薄膜过滤法封闭式薄膜

9、过滤器封闭式薄膜过滤器传统开放式薄膜过滤器传统开放式薄膜过滤器2022/12/202022/12/201414二、薄膜过滤法改良马丁培养基改良马丁培养基硫乙醇酸盐流体培养基硫乙醇酸盐流体培养基阳性对照阳性对照培养培养观察结果，观察结果，写检验记录写检验记录取规定量取规定量供试品供试品预处理预处理滤膜滤膜过滤过滤冲洗冲洗滤膜滤膜2022/12/202022/12/201515三、结果判断供试品管均澄清，或虽显浑浊但供试品管均澄清，或虽显浑浊但经确证经确证无菌无菌生长，判供试品符合规定。生长，判供试品符合规定。供试品管中任何一管显浑浊并确证有菌生长，供试品管中任何一管显浑浊并确证有菌生长，判供试品

10、不符合规定。判供试品不符合规定。当符合（当符合（p134）至少一个条件时，可判试验）至少一个条件时，可判试验结果无效。并取同量供试品重试。结果无效。并取同量供试品重试。？2022/12/202022/12/201616第三节 药品无菌检测方法实例中药和生物系中药和生物系中药和生物系中药和生物系2022/12/202022/12/201717注射剂的无菌检查实训目的掌握常用注射剂的无菌检查的方法及其结果分掌握常用注射剂的无菌检查的方法及其结果分析与判断；析与判断；熟悉无菌检查使用的培养基；熟悉无菌检查使用的培养基；能够规范书写检验报告书。能够规范书写检验报告书。2022/12/202022/12

11、/201818注射剂的无菌检查实训原理方法是按规定取一定量的检品，严格按照无菌方法是按规定取一定量的检品，严格按照无菌操作技术，接种至需、厌氧培养基、真菌培养操作技术，接种至需、厌氧培养基、真菌培养基中，在适宜的温度下培养一定时间，观察有基中，在适宜的温度下培养一定时间，观察有无细菌、真菌生长，以判断检品是否无菌、是无细菌、真菌生长，以判断检品是否无菌、是否合格。否合格。主要程序如下主要程序如下2022/12/202022/12/201919注射剂的无菌检查实训材料1仪器：恒温培养箱、仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、烧高压蒸汽灭菌锅、烧杯、量筒、试管、吸杯、量筒、试管、吸量管、电热套、量管、

12、电热套、pHpH精精密试纸、酒精灯、火密试纸、酒精灯、火柴等。柴等。2试剂：酪胨、氯化钠、葡试剂：酪胨、氯化钠、葡萄糖、刃天青、萄糖、刃天青、L-L-胱氨酸、胱氨酸、硫乙醇酸钠（或硫乙醇酸）硫乙醇酸钠（或硫乙醇酸）、酵母浸出粉、牛肉浸出、酵母浸出粉、牛肉浸出粉、蛋白胨、硫酸镁、磷粉、蛋白胨、硫酸镁、磷酸氢二钾、琼脂等。酸氢二钾、琼脂等。4供试品：供试品：规格规格10ml10ml葡葡萄糖酸萄糖酸钙注射钙注射液液 3阳性试阳性试验菌：验菌：金黄色金黄色葡萄球葡萄球菌菌2022/12/202022/12/202020注射剂的无菌检查实训过程1 1实训用液、培养基的配制实训用液、培养基的配制和仪器的包

13、扎和仪器的包扎 配制配制0.90.9无菌氯化钠溶液无菌氯化钠溶液（稀释液）（稀释液）配制试液和指示液：碘酒溶液、配制试液和指示液：碘酒溶液、7575乙醇溶液乙醇溶液 制备金黄色葡萄球菌菌悬液，用作阳性对照菌制备金黄色葡萄球菌菌悬液，用作阳性对照菌 制备营养肉汤培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、改制备营养肉汤培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基良马丁培养基 包扎包扎1.0ml1.0ml吸量管若干支。吸量管若干支。包扎好的物品、稀释液和培养基，贴标签，统一灭包扎好的物品、稀释液和培养基，贴标签，统一灭菌，备用。菌，备用。2022/12/202022/12/202121注射剂的无菌检查实训过程2

14、 2直接接种法直接接种法 取若干支供试品取若干支供试品1111支，消毒后，用砂支，消毒后，用砂轮在安瓿颈部划一环行线，再用轮在安瓿颈部划一环行线，再用7575酒精酒精棉球将碘酒擦净，待干，打开颈部后，按棉球将碘酒擦净，待干，打开颈部后，按下表中的要求接种供试品管、阳性对照管下表中的要求接种供试品管、阳性对照管和阴性对照管。和阴性对照管。2022/12/202022/12/202222表表 无菌检查接种及其培养无菌检查接种及其培养培养基培养基好氧、厌氧菌培养好氧、厌氧菌培养真菌培养真菌培养硫乙醇酸盐流体培养基硫乙醇酸盐流体培养基改良马丁培养基改良马丁培养基供试品：供试品：每种培养基每种培养基10

15、10支支2.0ml2.0ml2.0ml2.0ml阳性对照阳性对照2.0ml2.0ml（供试品）（供试品）1.0ml1.0ml（阳性对照菌液）（阳性对照菌液）阴性对照阴性对照培养温度培养温度3035303523282328培养时间培养时间1414天天（阳性对照（阳性对照48724872小时）小时）1414天天2022/12/2023注射剂的无菌检查实训过程3 3结果判断结果判断 阴性对照管应澄清无阴性对照管应澄清无菌生长菌生长 阳性对照管细菌应生阳性对照管细菌应生长良好长良好 供试品管均澄清，供试品管均澄清，或虽显浑浊但经或虽显浑浊但经确证无菌生长，确证无菌生长，判供试品符合规判供试品符合规定。

16、定。供试品管中任何供试品管中任何一管显浑浊并确一管显浑浊并确证有菌生长，判证有菌生长，判供试品不符合规供试品不符合规定。定。2022/12/202022/12/202424注射剂的无菌检查实训过程3 3结果判断结果判断 除非能充分证明试验结果无效，即生长的微除非能充分证明试验结果无效，即生长的微生物非供试品所含。生物非供试品所含。试验若经确认无效，应重试。重试时，重新试验若经确认无效，应重试。重试时，重新取同量供试品，按上述方法复试重试，若无菌生取同量供试品，按上述方法复试重试，若无菌生长，判供试品符合规定；若有菌生长，判供试品长，判供试品符合规定；若有菌生长，判供试品不符合规定。不符合规定。

17、判判断断说说明明2022/12/202022/12/202525注射剂的无菌检查实训过程填填写写记记录录单单3 3结果判断结果判断 2022/12/202022/12/202626注射剂的无菌检查实训过程的注意事项无菌检查时，除无菌室应符合洁净级要求，应无菌检查时，除无菌室应符合洁净级要求，应严格掌握无菌操作技术，使用的器材、培养基严格掌握无菌操作技术，使用的器材、培养基需灭菌彻底。需灭菌彻底。按药典要求的接种量接种。按药典要求的接种量接种。阳性对照菌未生长时，供试品的检验结果应判阳性对照菌未生长时，供试品的检验结果应判为无效。为无效。在培养期内必须逐日观察，了解培养过程的变在培养期内必须逐日观察，了解培养过程的变化，不可在培养期结束时才观察结果。化，不可在培养期结束时才观察结果。2022/12/202022/12/202727注射剂的无菌检查思考u哪些药品制剂需做无菌检查，怎样正哪些药品制剂需做无菌检查，怎样正确判断结果？确判断结果？u在实验中为何要设阳性对照？若阳性在实验中为何要设阳性对照？若阳性对照出现阴性结果是何原因？应如何处对照出现阴性结果是何原因？应如何处理？理？2022/12/202022/12/202828