糖类的测定8(精品).ppt
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1、食品中糖类的测定v学习目标v1、了解糖类的种类及性质v2、掌握还原糖的测定方法及原理v3、了解淀粉的测定过程v4、了解纤维及果胶的性质及测定方法食品中糖类的测定内容v一、还原糖的测定v二、蔗糖的测定v三、总糖的测定v四、淀粉的测定v五、粗纤维及果胶的测定概述v1、糖类的概念、分类及性质 糖类概念:是指多羟基醛、酮及其缩合物。糖类概念:是指多羟基醛、酮及其缩合物。糖类旧称碳水化合物,是由碳、氢、氧三种元素糖类旧称碳水化合物,是由碳、氢、氧三种元素组成的一大类化合物。组成的一大类化合物。糖糖+蛋白质蛋白质糖蛋白糖蛋白 糖糖+脂肪脂肪糖脂糖脂 概述v糖类:分为单糖、低聚糖、多糖。糖类:分为单糖、低聚
2、糖、多糖。v有效糖类有效糖类人体能消化利用的单糖、双糖、多糖人体能消化利用的单糖、双糖、多糖中的淀粉。中的淀粉。v无效糖类无效糖类多糖中的纤维素、半纤维素、果胶等多糖中的纤维素、半纤维素、果胶等不能被人体消化利用的。不能被人体消化利用的。v这些无效糖类能促进肠道蠕动。这些无效糖类能促进肠道蠕动。概述v2、糖类在食品中的含量v3、糖类的测定方法 相对密度法相对密度法折光法折光法 旋光法旋光法物理法物理法 物理法物理法 化学法化学法 色谱法色谱法 发酵法发酵法 酶酶 法法 重量法重量法 直接滴定法直接滴定法 (改良的兰改良的兰爱农法)爱农法)高锰酸钾法高锰酸钾法 萨氏法萨氏法 3,5二硝基水杨酸二
3、硝基水杨酸 酚酚硫酸法硫酸法 蒽酮法蒽酮法 半胱氨酸半胱氨酸咔唑法咔唑法化学法化学法还原糖法还原糖法碘量法碘量法比色法比色法 纸色谱纸色谱 薄层色谱薄层色谱 GC(气相色谱法)(气相色谱法)HPLC 半乳糖脱氢酶测半乳糖、乳糖半乳糖脱氢酶测半乳糖、乳糖 葡萄糖氧化酶测葡萄糖葡萄糖氧化酶测葡萄糖 发酵法发酵法 测不可发酵糖测不可发酵糖 重量法重量法测果胶、纤维素、膳食纤维素测果胶、纤维素、膳食纤维素 色谱法色谱法 酶法酶法概述v4、测定糖类的意义(略)二、还原糖的测定 v还原糖概念:具有还原性的糖。还原糖概念:具有还原性的糖。v 所有的单糖都是还原糖;所有的单糖都是还原糖;v 低聚糖中的乳糖、麦
4、芽糖是还原糖。低聚糖中的乳糖、麦芽糖是还原糖。v v 低聚糖中的蔗糖是非还原糖,多糖也是非还原低聚糖中的蔗糖是非还原糖,多糖也是非还原糖。但蔗糖、多糖都可以水解成还原糖。通过测定糖。但蔗糖、多糖都可以水解成还原糖。通过测定水解后的还原糖来测定蔗糖或多糖。水解后的还原糖来测定蔗糖或多糖。v v 所以说:还原糖的测定是糖类定量的基础。所以说:还原糖的测定是糖类定量的基础。v 还原糖的测定方法:有直接滴定法还原糖的测定方法:有直接滴定法和高锰酸钾滴定法。和高锰酸钾滴定法。(一)高锰酸钾法(费林试液法)v1、测定原理、测定原理v 还原糖还原糖+Cu2+Cu2Ov 浅蓝色浅蓝色砖红色砖红色(沉淀沉淀)。
5、Cu2O+Fe3+H+Cu2+Fe2+Fe2+KMnO4 Fe3+Mn2+操作程序:提取液的制备操作程序:提取液的制备氧化氧化过滤过滤 溶解溶解滴定滴定空白试验空白试验计算。计算。(计算得(计算得 Cu2O量查表量查表 还原糖量)还原糖量)含有含有Cu2+的试剂是:菲林试剂的试剂是:菲林试剂:v斐林试剂:由斐林试剂:由碱性酒石酸铜甲、乙两液配制而成。碱性酒石酸铜甲、乙两液配制而成。v斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂,反应的终斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂,反应的终点可用次甲基蓝作指示剂,在碱性、点可用次甲基蓝作指示剂,在碱性、沸腾沸腾环境下还环境下还原呈无色。根据斐林试剂完全还原所需的还
6、原糖量,原呈无色。根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量,计算出样品还原糖量。计算出样品还原糖量。斐林试剂v 斐林试剂是德国化学家斐林(斐林试剂是德国化学家斐林(Hermann von Fehling,1812年年-1885年)在年)在1849年发明的。它是由氢氧化钠的质年发明的。它是由氢氧化钠的质量分数为量分数为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液,还有酒石酸钾钠配制而成的。的溶液,还有酒石酸钾钠配制而成的。v 它与可溶性的还原性糖它与可溶性的还原性糖(葡萄糖)、果糖和麦芽糖葡萄糖)、果糖和麦芽糖)在加热在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化
7、亚铜沉淀。因此,斐林试的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。因此,斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。2、试剂v(1)碱性酒石酸铜甲液:)碱性酒石酸铜甲液:v 配制:称取配制:称取34.639g硫酸铜(硫酸铜(CuSO45H2O),),加适量水溶解,加入加适量水溶解,加入0.5mL盐酸,加水稀释至盐酸,加水稀释至500 mL,用精制石棉过滤。,用精制石棉过滤。v(2)碱性酒石酸铜乙液:)碱性酒石酸铜乙液:v 配制:称取配制:称取173g酒石酸钾钠与酒石酸钾钠与50g氢氧化钠,加氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至适量水溶解,并稀释至500mL,用
8、精制石棉过滤,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。贮存于橡胶塞玻璃瓶内。v 作用:产生作用:产生Cu2+。v(3)精制石棉:)精制石棉:v取石棉先用取石棉先用3mol/L盐酸浸泡盐酸浸泡23h,用水洗净;,用水洗净;v再用再用100g/L氢氧化钠浸泡氢氧化钠浸泡23h,倾去溶液;,倾去溶液;v再用碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时,用水洗净;再用碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时,用水洗净;v再用再用3mol/L盐酸浸泡数小时,用水洗至不呈酸性;盐酸浸泡数小时,用水洗至不呈酸性;v加水振荡,使之成为微细的浆状软纤维,用水浸加水振荡,使之成为微细的浆状软纤维,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中;泡并贮存于玻璃瓶中;v
9、作用:用于填充作用:用于填充古氏坩埚古氏坩埚。古氏坩埚v古氏坩埚:英文名称是古氏坩埚:英文名称是Goochcrucible。v 它是化学分析中兼作过滤及称量沉淀用的一种坩埚。它是化学分析中兼作过滤及称量沉淀用的一种坩埚。v 因美国化学家古奇所创制而得名。由瓷土制成。因美国化学家古奇所创制而得名。由瓷土制成。v 使用时先将石棉绒均覆盖在坩埚的多孔底上(约使用时先将石棉绒均覆盖在坩埚的多孔底上(约1-2毫米毫米厚),盖以多孔瓷板,再地瓷板上均匀覆盖一层石棉绒,烘厚),盖以多孔瓷板,再地瓷板上均匀覆盖一层石棉绒,烘干至恒重,即可供沉淀过滤和称量之用。干至恒重,即可供沉淀过滤和称量之用。v 自玻璃过滤
10、坩埚出现后,这种坩埚则很少应用。自玻璃过滤坩埚出现后,这种坩埚则很少应用。v(4)1/5高锰酸钾标准溶液:0.1mol/L。v 高锰酸钾溶液需标定高锰酸钾溶液需标定 称取草酸钠(称取草酸钠(GB1289基准物,基准物,105干燥干燥2h,存于干燥,存于干燥器中)器中)0.1g,准确至,准确至0.0002g,溶于,溶于 50mL水中,再加硫酸水中,再加硫酸溶液(溶液(3.2)10mL,将此溶液加热至,将此溶液加热至7585,用配制好的,用配制好的高锰酸钾(高锰酸钾(3.5)滴定)滴定,溶液呈现粉红色且溶液呈现粉红色且1min不褪色为终不褪色为终 点点,滴定结束时滴定结束时,溶液温度在溶液温度在6
11、0以上以上,同时作空白试验。同时作空白试验。作用:滴定生成的亚铁盐,据消耗高锰酸钾的量计算氧作用:滴定生成的亚铁盐,据消耗高锰酸钾的量计算氧化亚铜的量。化亚铜的量。v(5)氢氧化钠溶液:1 mol/L。v作用:加入到碱性酒石酸铜甲液中,提供碱性条件。或者在处理样品时用。v(6)酸性硫酸铁溶液:称取50g硫酸铁,加入200mL水溶解后,慢慢加入100mL硫酸,冷却后加水稀释至1000mL。v作用:溶解氧化亚铜沉淀。v(7)盐酸:3 mol/L。v 作用:精制石棉用。3、仪器v(1)25mL古氏坩埚或垂融坩埚垂融坩埚仪器v真空泵或水泵。v本院循环水式本院循环水式真空泵真空泵 产品型号:SHZD()
12、型型v产品展商:巩巩义予华仪器有义予华仪器有限责任公司限责任公司循环水式多用真空泵 砂芯过滤活动装置4、操作方法v(1)样品处理v乳类、乳制品及蛋白质的冷食类v称样入容量瓶加水摇匀加斐甲及碱加水定容混匀静置过滤备用。v酒精性饮料v含大量淀粉的食品v汽水等含二氧化碳的饮料操作方法v样品处理v(2)测定 v吸取50mL处理后的样品溶液,于400mL烧杯内;v加入碱性酒石酸铜甲液、乙液各25mL;v于烧杯上盖一表面皿,加热,控制在4min内沸腾,再准确加热2min;v趁热用铺好石棉的古氏坩埚或G4垂融坩埚抽滤,并用60热水洗涤烧杯及沉淀,至洗液不呈碱性为止。v将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400mL烧杯
13、中;v加25mL酸性硫酸铁溶液及25mL水,用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解;v用0.1000mol/L(1/5KmnO4)溶液滴定至微红色为终点。v吸取50mL水代替样品溶液,在同样条件下做空白试验。v5、计算1v计算2v根据氧化亚铜的质量查表,得到还原糖的量(附表4)。v计算3v计算样品中还原糖的含量说明(二)直接滴定法v1、原理 还原糖还原糖+Cu2+Cu2Ov 浅蓝色浅蓝色砖红色砖红色(沉淀沉淀)。v (1)用标准的葡萄糖溶液标定菲林试剂。v 获得10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)。v(2)用样液滴定菲林试剂。v 根据样液消耗量可计算出还原糖含量。(1)用标准的葡萄糖溶液标
14、定菲林试剂。一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快与酒石酸钠反应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下,以次甲基蓝作为指示剂,用葡萄糖标液滴定。v 目的:获得10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)。v(2)用样液滴定菲林试剂。v 样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应,生成红色的氧化亚铜沉淀,待二价铜全部被还原后,稍过量的还原糖把次甲基蓝还原,溶液由蓝色变为无色,即为滴定终点。根据样液消耗量可计算出还原糖含量。适用范围及特点适用范围及特点 本法又称快速法,它是在蓝一爱农容量法基础上本法又称快速法,它是在蓝一爱农容量法基础上发展起来的
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