【课件】微生物的选择培养与计数+课件+2022—2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

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1、项目类型适用范围操作方法消毒灭菌较为较为温和温和理理化方法，杀化方法，杀死死部分微生部分微生（不不包括芽包括芽孢、孢子）孢、孢子）强烈强烈的理化的理化方法，杀死方法，杀死所有微生物所有微生物（包括（包括芽孢、芽孢、孢子孢子）煮沸消毒法煮沸消毒法日常生活日常生活100 100 煮沸煮沸5 56 min6 min巴氏消毒法巴氏消毒法不耐高温的液体不耐高温的液体626265 65 煮煮30 min30 min或或80-80-90 90 煮煮30s-1 min30s-1 min化学药剂化学药剂生物活体、水源等生物活体、水源等擦拭等擦拭等,如用酒精擦拭双手、如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源用氯气消毒水源

2、紫外线紫外线紫外线照射紫外线照射30 min30 min灼烧灭菌灼烧灭菌接种的接种的金属工具金属工具、接种时用的、接种时用的试管口试管口或或瓶口瓶口等等直接在酒精灯火焰的充分直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧燃烧层灼烧干热灭菌干热灭菌耐高温、需要保持干燥的物品耐高温、需要保持干燥的物品,如如玻璃器皿和金属用具玻璃器皿和金属用具等等物品放入干热灭菌箱物品放入干热灭菌箱,160160170 170 加热加热2 23h3h湿热灭菌湿热灭菌培养基、培养皿培养基、培养皿等等,生产和实验生产和实验室常用室常用高压蒸汽灭菌锅内高压蒸汽灭菌锅内,100 kPa,100 kPa,温温度度121,15121,153

3、0 min30 min接种室、接种箱，超净工作台接种室、接种箱，超净工作台消毒和灭菌的比较消毒和灭菌的比较微生物的基本培养技术及应用第2节 第一章 发酵工程 第2课时微生物的选择培养和计数一、选择培养基PCR是一种在体外DNA复制的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。1973年，科学家科学家在美国黄石国家公园的热泉中筛选出耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。1.1.科学科学实例：实例：水生栖热菌能在70-80高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。耐高温耐高温的酶的酶耐高温耐高温生物体生物体耐高温耐高温环境（热泉、火山口）环境（热泉、火山口）寻找寻找寻

4、找寻找寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。(1 1)筛选原因：筛选原因：(2)(2)启示：启示：一、选择培养基耐寒微生物耐热微生物石油分解菌2.实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。温泉温泉冰川冰川油田油田一、选择培养基3.选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。分离酵母菌、霉菌等真菌分离固氮微生物分离自养型微生物加高浓度食盐金黄色葡萄球菌石油是唯一碳源能消除石油污染的微生物不加含碳有机物不加氮源加入青霉素选择培养基的作用：分离并计数某

5、种微生物的数量（例如，能分解尿素的细菌）。思考思考 讨论讨论选择培养基配方的设计 尿素尿素CO(NHCO(NH2 2)2 2含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的产中一种重要的氮肥。氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成尿素被土壤中某些细菌分解成NHNH3 3,再被再被转化为转化为NONO3 3-、NHNH4 4+等被植物吸收。等被植物吸收。这些这些细菌之所以能分解尿素，细菌之所以能分解尿素，是因为能合成是因为能合成脲酶脲酶，来催化尿素分解。，来催化尿素分解。讨论1：如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计

6、？设计一种选择培养基设计一种选择培养基,用用尿素作为唯一氮源尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。可以将分解尿素的细菌分离出来。思考思考 讨论讨论选择培养基配方的设计讨论2：该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？该培养基与普通培养基该培养基与普通培养基相比较，共同点相比较，共同点是是都以有机碳都以有机碳作为碳作为碳源，都源，都有水和无机盐；有水和无机盐；不同点是该培养基以尿素作为唯一氮不同点是该培养基以尿素作为唯一氮源，使源，使只有能以尿素作为氮源的微生物只有能以尿素作为氮源的微生物生长。生长。牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g琼脂20.0g蒸馏水定容到1000mlK

7、H2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO47H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000ml培养基一培养基二培养基一的碳源为_，氮源为_；培养基二的碳源为_，氮源为_牛肉膏蛋白胨葡萄糖尿素固体培养基选择培养基异养微生物二、微生物的选择培养对土样进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的培养基上，即可得到能分解尿素的细菌的纯培养物。1.方法：2.稀释涂布平板法的操作过程：二、微生物的选择培养(1)(1)铲取土壤，将样品装入纸袋铲取土壤，将样品装入纸袋中。中。(2)(2)将将10g10g土壤加入盛有土壤加入盛有90mL90mL无菌水无菌水的锥形

8、瓶中，充分摇匀。的锥形瓶中，充分摇匀。取取1mL1mL上清液加入盛有上清液加入盛有9mL9mL无菌水的是试管中，依次等比稀释。无菌水的是试管中，依次等比稀释。1mL1107110511061103110211041mL1mL1mL1mL9mL无菌水1mL1mL90mL无菌水(3)(3)取取0.1mL0.1mL菌液，菌液，滴滴加到培加到培养基表面。养基表面。(4)(4)将涂布器将涂布器浸浸在盛有在盛有酒精的烧杯中。酒精的烧杯中。(5)(5)将涂布器放在火焰将涂布器放在火焰上上灼灼烧，待酒精燃尽、烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进涂布器冷却后，再进行涂布。行涂布。待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板

9、倒置，培养(6)(6)用涂布器将菌液均匀地用涂布器将菌液均匀地涂涂布在培养基表面。涂布时可布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。转动培养皿，使涂布均匀。3.培养：二、微生物的选择培养待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置倒置，放入，放入30-3730-37的温度下培的温度下培养养1-2d1-2d。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。培养时要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养，为什么？未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键，如果无菌落生长，说明了什么？培养未接种的

10、培养基的作用是对照。未接种的培养基在恒温箱中保温一段培养未接种的培养基的作用是对照。未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后，如果无菌落生长，说明培养基制备成功、合格，未受到污染。时间后，如果无菌落生长，说明培养基制备成功、合格，未受到污染。用平板划线法接种培养结果的图片如下。请结合图片分析，平板划线法能否达到对细菌进行计数的目的？为什么？不能。平板划线法最开始的划线很可能菌类会长成一片，导致无法计数，此外灼烧接种环的时候也会杀死一部分菌类。与平板划线法相比，为什么稀释涂布平板法可以用于细菌的计数？稀释涂布平板法会进行等比稀释，在合适的稀释倍数下，均匀涂布得到的菌落互不接触，可以确定菌类的密度，

11、再通过计算可以得知原液的菌落数。比较比较平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法主要步骤主要步骤工具工具能否用于能否用于计数计数菌体获取结果结果共同点共同点平板划线法和稀释涂布平板法的比较涂布器涂布器接种环接种环都能将微生物分散到固体培养基表面，以获得单细胞菌落，达到分离纯化微生物的目的，也可以于观察菌落特征不能计数不能计数可以计数，但操作复杂可以计数，但操作复杂，需涂布，需涂布多个平板多个平板接种环在固体平板培养基表面连接种环在固体平板培养基表面连续划线续划线一系列的梯度一系列的梯度稀释；稀释；涂布平板法操作涂布平板法操作在具有显著的菌落特征的区域菌在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑

12、取菌体落中挑取菌体从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体菌体1.稀释涂布平板法当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。三、微生物的数量测定除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目(1)统计依据(2)操作过程一般选择菌落数为30300的平板进行培养，以保证获得计数。通常选用一定稀释范围的样品进行培养，在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。(3)注意事项：统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观

13、察到的只是 菌落。因此，统计结果一般用 而不是用活菌数来表示。少少一个一个菌落数菌落数下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中样品稀释示意图。据图分析，每克土壤中的菌株数约为多少？约为1.7109个。M代表稀释倍数；C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数；V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)每g样品中的菌落数(CV)M统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。三、微生物的数量测定2.显微镜直接计数法：是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。该方法利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定容积里样品中微生物的数量。统计结果一般活菌数和死菌的总和，故

14、统计的结果比实际值偏大。微生物的计数方法比较内容显微镜直接计数法稀释涂布平板法主要用具显微镜、细菌计数板或血细胞计数板涂布器计数依据细菌个数培养基上菌落数优点计数方便、操作简单计数的是活菌缺点不能区分死菌与活菌操作较复杂且有一定误差计算公式每毫升原液含菌株数4001 000每小格平均菌株数稀释倍数每毫升原液含菌株数平均菌落数/所用涂布液体积稀释倍数原理：绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。1.培养基的制备配方：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数常见的分解尿素的微生物：芽孢杆菌、小球菌、棒状杆菌等

15、细菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。探究探究探究探究 实践实践实践实践葡萄糖10.0g尿素1.0gKH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO47H2O0.2g琼脂15.0g蒸馏水1000mlu制备选择培养基（尿素为唯一氮源）u制备牛肉膏蛋白胨培养基用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照组，用以尿素为唯一氮源的培养基做实验组，用来判断选择培养基是否具有选择作用。提供无机盐；调节pH。（1 1）土壤取样）土壤取样2.实验设计细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表38cm 的土壤层。因此，取样时一般要铲去表层土。取土样时用的铁铲和取样袋在使用前都需要灭菌。操作完成后，一定要洗手

16、。测细菌数：一般用测细菌数：一般用10104 4、10105 5、10106 6稀释液稀释液测放线菌：一般用测放线菌：一般用10103 3、10104 4、10105 5稀释液稀释液测真菌数：一般用测真菌数：一般用10102 2、10103 3、10104 4稀释液稀释液（2 2）样品的稀释）样品的稀释选选择择一一个个比比较较宽宽的的范范围围，将将1101103 31101107 7倍倍稀稀释释的的稀稀释释液液分分别别涂涂布布到到平板上培养，以保证能从中选择出菌落数在平板上培养，以保证能从中选择出菌落数在3030300300的平板进行计数的平板进行计数在初次实验中，对于稀释的范围没有把握，怎样

17、做才能保证从中选择出菌落数在30300的平板进行计数？思考测定土壤中细菌的数量，一般选用 倍稀释的稀释液进行平板培养，当第一次做这个实验时可以将稀释的范围放 一点。1104、1105和1106宽选择培养基牛肉膏蛋白胨培养基图中的1、2、3平板是选择培养基，4平板为牛肉膏蛋白胨培养基，以判断选择培养基是否具有筛选作用；另外，还要有两个对照，即不涂布稀释液的选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基，以验证培养基中是否含有杂菌实验组：1 1、2 2、3 3组接种的选择培养基组接种的选择培养基用以分离并计数能分解尿素的细菌第第4 4组接种的牛肉膏蛋白胨培养基组接种的牛肉膏蛋白胨培养基用以判断选择培养基是否具有选

18、择作用对照组：第第5 5组不涂布稀释液的选择培养基组不涂布稀释液的选择培养基用以验证培养基中是否含有杂菌第第6 6组牛肉膏蛋白胨培养基组牛肉膏蛋白胨培养基用以验证培养基中是否含有杂菌实验结果：前3组实验组分离得到单菌落；第4组得到多种菌落；第5,6组正常情况下无菌落。不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌一般在30-37的温度下培养1-2d。一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征，如形状、大小和颜色等。每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。（4 4）微生物的培养与观察）微生物的培养与观察(1

19、)无菌操作:(2)做好标记:(3)规划时间:本实验耗时较长，需要事先规划时间，以便提高实验效率，在操作时有条不紊。本实验耗时较长，需要事先规划时间，以便提高实验效率，在操作时有条不紊。取土样的用具在使用前都取土样的用具在使用前都需要需要 。实验操作均应实验操作均应在在 进行进行。4.操作提示灭菌酒精灯火焰旁本本实实验验使使用用的的平平板板和和试试管管较较多多，为为避避免免混混淆淆，最最好好在在使使用用前前做做好好标标记记。例例如如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的的 等等。稀释度如果是用同一土样进行的操作，数据应该比较接

20、近。如果差异很大，就需要从如果是用同一土样进行的操作，数据应该比较接近。如果差异很大，就需要从操作是否规范、培养基配制是否合理等方面查找原因。操作是否规范、培养基配制是否合理等方面查找原因。5.5.结果分析与评价结果分析与评价如果没有接种的培养基上没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。如果接种后如果没有接种的培养基上没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。如果接种后的完全培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，说明选择培养基筛选出的完全培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，说明选择培养基筛选出了一些尿素分解菌。了一些尿素分解菌。1.1.结合对照组，分析培养物中是否有杂菌污染以及

21、选择培养基是否筛选出一些菌落。结合对照组，分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落。如果得到了两个或多个菌落数为如果得到了两个或多个菌落数为3030-300300的平板，说明稀释度合适，操作比较成的平板，说明稀释度合适，操作比较成功，能够进行菌落的计数。功，能够进行菌落的计数。2.2.你是否获得了某一稀释度下菌落数你是否获得了某一稀释度下菌落数 为为3030300300的平板？在这一稀释度下，是否至的平板？在这一稀释度下，是否至少有少有2 2个平板的菌落数接近？个平板的菌落数接近？3.3.你统计的每克土样中能分解尿素的细菌的菌落数是多少？与其他同学统计的结果你统计的每克土样中

22、能分解尿素的细菌的菌落数是多少？与其他同学统计的结果接近吗？如果差异很大，可能是什么原因引起的？接近吗？如果差异很大，可能是什么原因引起的？甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。1.甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。该同学的统计结果 (填“可靠”或“不可靠”)。若不可靠，应如何改进？2.乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学将21舍去，然后取平均值。该同学对实验结果的处理 (填“合理”或“不合理”)。微生物计数时，如果实验中出现重复实验的结果差别很大的情况，应

23、 ，找出差异的原因，而不能简单地将结果舍弃后进行计数。为为增增加加实实验验的的说说服服力力与与准准确确性性，应应设设置置重重复复实实验验，在在同同一一稀稀释释度度下下至至少少涂涂布布3 3个个平平板板，统计结果后计算平均值。统计结果后计算平均值。不可靠不合理分析实验过程中可能的影响因素3.某同学在三种稀释度下取0.1 mL的菌液涂布平板，统计菌落数，得到了以下的数据，试计算1 g样品的活菌数。平板稀释度平板1平板2平板3104320360356105212234287106212318105的稀释度下取0.1 mL菌液涂布的三个平板上的菌落数在30300范围内，计算其平均值为(21223428

24、7)/3244。进一步可以换算出1 g样品中活菌数为(2440.1)1052.44108(个)。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。CO（NH2）2+H2OCO2+2NH3 脲酶原理：脲酶催化尿素分解成氨培养基碱性增强 酚红变红脲酶阳性6.6.进一步探究进一步探究本本活动只是初步筛选了能分解尿素的活动只是初步筛选了能分解尿素的细菌，对细菌，对分离的菌种进行鉴定还需要借助生物分离的菌种进行鉴定还需要借助生物化学的方法。你可以查阅相关化学的方法。你可以查阅相关资料，进一步资料，进一步设计实验来鉴定自己分离的菌种。设计实验来

25、鉴定自己分离的菌种。液体培养基可以直接看液体的变色情况；固体培养基上可以观察菌落周围是否出现红色环带，红色环带直径与菌落直径比值越大，说明分解能力越强。脲酶阴性脲酶阳性是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记算得出水样中大肠杆菌的数量。到生活中去到生活中去到生活中去到生活中去测定饮水中大肠杆菌数量的方法选择培养基与鉴别培养基的比较选择培养基与鉴别培养基的比较项目选择培养基鉴别培养基原理用途举例图示加入不影响甚至促进目标微生物生长，而抑加入不影响甚至促进目标微生物生长，而抑制或阻止其他种类微生物生长的化学物质制或阻止其他种类微生物生长的化学

26、物质加入某种指示剂或化学药品加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正不影响微生物正常生长常生长)，使，使微生物的某种代谢产物与培养基微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应中的特定指示剂或化学药品发生反应培养、分离出目标微生物培养、分离出目标微生物鉴别目标微生物鉴别目标微生物培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素，抑制细菌的生长；利用以尿素为唯一氮源素，抑制细菌的生长；利用以尿素为唯一氮源的培养基来培养可分解尿素的细菌的培养基来培养可分解尿素的细菌可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否含有大

27、肠杆菌中是否含有大肠杆菌(若有，则菌落呈黑色若有，则菌落呈黑色)练习与应用练习与应用练习与应用练习与应用1.1.研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌。判断下列相关表述是否正确。石油降解菌。判断下列相关表述是否正确。（1 1）这种培养基是一种选择培养基。）这种培养基是一种选择培养基。()（2 2）利用这种石油降解菌可以降解石油，修）利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤。复土壤。()（3 3）相对于未被污染的土壤，从被石油污染）相对于未被污染的土壤，从被石油污染的土壤中更容易分

28、离到石油降解菌。的土壤中更容易分离到石油降解菌。()2.2.用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是样品中的活菌数，原因是()A.A.菌落中的细菌数目是固定的菌落中的细菌数目是固定的B.B.平板上的一个菌落就是一个细菌平板上的一个菌落就是一个细菌C.C.通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同D.D.平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌一、概念检测D练习与应用练习与应

29、用练习与应用练习与应用二、拓展应用1.1.反刍动物，如牛和羊，具有特殊的器官反刍动物，如牛和羊，具有特殊的器官瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。请你设计一个实验，从瘤胃中分离出能够分解尿素其中许多微生物能分解尿素。请你设计一个实验，从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物。的微生物。反刍动物的瘤胃中有反刍动物的瘤胃中有大量的微生物大量的微生物，其中就，其中就有分解尿素的微生物有分解尿素的微生物。由于瘤胃中的。由于瘤胃中的微生物多为微生物多为厌氧菌厌氧菌，接触空气后会死亡，因此从中分离能分解尿素的微生物除了，接触空气后会死亡，因此从中分离能分解尿

30、素的微生物除了需要准备选择培养基，还应该参照需要准备选择培养基，还应该参照厌氧菌的培养方法厌氧菌的培养方法进行实验设计。进行实验设计。2.2.地地球球上上的的植植物物每每年年产产生生的的纤纤维维素素超超过过7070亿亿吨吨，其其中中4040%6060%能能被被土土壤壤中中某某些些微微生生物物分分解解利利用用，这这是是因因为为它它们们能能够够产产生生纤纤维维素素酶酶。对对这这些些微微生生物物的的研研究究与与应应用用，使使人人们们能能够够利利用用精精杆杆等等生生产产酒酒精精，用用纤纤维维素素酶酶处处理理服服装装面面料料等等。已已知知刚刚果果红红是是一一种种染染料料，它它可可以以与与像像纤纤维维素素

31、这这样样的的多多糖糖物物质质形形成成红红色色复复合合物物，但但并并不不与与水水解解后后的的纤纤维维二二糖糖、葡葡萄萄糖糖等等发发生生这这种种反反应应。当当我我们们在在含含有有纤纤维维素素的的培培养养基基中中加加入入刚刚果果红红时时，刚刚果果红红与与纤纤维维素素形形成成红红色色复复合合物物；而而当当纤纤维维素素被被纤纤维维素素分分解解菌菌分分解解后后，复复合合物物就就无无法法形形成成，培培养养基基中中会出现以这些菌为中心的透明圈会出现以这些菌为中心的透明圈(如下图所示如下图所示)。请回答下列问题。请回答下列问题。（1）现在要从土壤中分离纤维素分解菌，请你给出详细的实验方案。可以可以参考本节参考本

32、节“探究探究实践实践”中的设计思路进行设计。中的设计思路进行设计。练习与应用练习与应用练习与应用练习与应用（2）你打算到什么环境中去寻找纤维素分解菌？为什么？纤维素纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中，采集土样时，可分解菌大多分布在富含纤维素的环境中，采集土样时，可以选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土等。以选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土等。2.2.地地球球上上的的植植物物每每年年产产生生的的纤纤维维素素超超过过7070亿亿吨吨，其其中中4040%6060%能能被被土土壤壤中中某某些些微微生生物物分分解解利利用用，这这是是因因为为它它们们能能够够产产生生纤

33、纤维维素素酶酶。对对这这些些微微生生物物的的研研究究与与应应用用，使使人人们们能能够够利利用用精精杆杆等等生生产产酒酒精精，用用纤纤维维素素酶酶处处理理服服装装面面料料等等。已已知知刚刚果果红红是是一一种种染染料料，它它可可以以与与像像纤纤维维素素这这样样的的多多糖糖物物质质形形成成红红色色复复合合物物，但但并并不不与与水水解解后后的的纤纤维维二二糖糖、葡葡萄萄糖糖等等发发生生这这种种反反应应。当当我我们们在在含含有有纤纤维维素素的的培培养养基基中中加加入入刚刚果果红红时时，刚刚果果红红与与纤纤维维素素形形成成红红色色复复合合物物；而而当当纤纤维维素素被被纤纤维维素素分分解解菌菌分分解解后后，

34、复复合合物物就就无无法法形形成成，培培养养基基中中会出现以这些菌为中心的透明圈会出现以这些菌为中心的透明圈(如下图所示如下图所示)。请回答下列问题。请回答下列问题。练习与应用练习与应用练习与应用练习与应用（3）有同学说可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌。请你评价这一做法。人工设置适合纤维素分解菌人工设置适合纤维素分解菌生存的环境，腐烂生存的环境，腐烂的滤纸上很可能的滤纸上很可能有纤维素分解菌。有纤维素分解菌。课堂小结微生物的数量测定选择培养基的作用微生物选择培养获取纯培养物的方法-稀释涂布平板法微生物的选择培养和计数选择培养基微生物的选择培养科学实例筛选原则选择培养基的概念及举例稀释涂布平板法的操作过程间接计数法 稀释涂布平板法直接计数 计数板计数法土壤中分解尿素的细菌的分离与计数培养基的制备（1）土壤取样（2）样品的稀释（3）稀释涂布平板法接种（4）微生物的培养与观察实验设计感 谢 观 看