最全的~高三生物实验总结.docx
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1、最全的高三生物实验总结石嘴山市第一中学高三生物实验总结一、生物实验中试剂的作用及实验方法总结 (一)化学物质的检测方法 淀粉碘液 (蓝色) 还原性糖斐林试剂班氏试剂(砖红色) CO2Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊) 乳酸pH试纸 O2余烬复然 蛋白质被蛋白酶水解、双缩脲试剂(紫色) 脂肪苏丹染液 (橘黄色)、苏丹染液 (红色) DNA二苯胺(蓝色) 染色体龙胆紫溶液,醋酸洋红溶液 (二)实验条件的控制方法 1、加水中氧气泵入空气或氧气或放入绿色植物 2、减少水中氧气容器密封或油膜覆盖或用凉开水 3、除去容器中CO2NaOH溶液 4、除去叶中原有淀粉置于黑暗环境 5、除去叶中叶绿素酒精水浴
2、加热 6、除去光合对呼吸干扰给植株遮光 7、如何得到单色光棱镜色散或透明薄膜滤光 8、血液抗疑加入柠檬酸钠 9、线粒体提取细胞匀浆离心 (三)实验结果的显示方法 光合速度O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量 水生植物可依气泡的产生量或产生速率; 离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目; 植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。 呼吸速度O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量原子或分子转移途径放射性同位素示踪细胞液浓度大小、植物细胞是否死亡质壁分离甲状腺激素动物耗氧量,发育速度等生长激素生长速度(体重、体长变化)胰岛素作用动物活动状态四、实验中控制温度的方法 1、还原
3、糖,DNA鉴定沸水浴加热 2、酶促反应水浴保温 3、用酒精溶解叶中的叶绿素酒精要隔水加热、 4、细胞和组织培养恒温箱培养五、实验中常用器材和药品的使用 1、NaOH:用于吸收CO2或改变溶液的pH 2、Ca(OH)2:鉴定CO2 3、CaCl2:提高细菌细胞壁的通透性 4、HCl:解离或改变溶液的pH 5、NaHCO3:提供CO2 6、NaCl:配制生理盐水或用于提取DNA 7、琼脂:激素或其他物质的载体或培养基的凝固剂 8、酒精:用于消毒、提纯DNA、叶片脱色及配制解离液 9、蔗糖:测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原10、滤纸:过滤或纸层析 11、纱布、尼龙布:过滤,遮光12、龙胆紫溶液
4、或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色六、一些常见的实验方法根据颜色来确定某种物质的存在: 淀粉+I2(蓝色);还原性糖+斐林试剂(砖红色);脂肪+苏丹(橘黄)或+苏丹(红色);蛋白质+双缩脲试剂(紫色);(2)用荧光标记法来证明细胞膜具有一定的流动性(3)同位素示踪法:光合作用产生氧气的来源; 光合作用中二氧化碳的去向;噬菌体侵染细菌实验证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质; DNA的复制是半保留复制。(4)获得无籽果实的方法:用适宜浓度的生长素处理花蕾期已去雄的子房,如无籽蕃茄;诱导染色体变异,如无籽西瓜。(5)确定某种激素功能的方法:饲喂法,切除注射法,阉割移植法,切除口服法。(6)确
5、定传入、传出神经的功能:刺激+观察效应器的反应或测定神经上的电位变化。(7)植物杂交的方法雌雄同花:花蕾期去雄+套袋 +开花期人工授粉+套袋雌雄异花:花蕾期雌花套袋+开花期人工授粉+套袋(8)确定某一显性个体基因型的方法:测交; 该显性个体自交。(9)确定某一性状为显性性状或隐性性状的方法:具有一对相对性状的纯合体的杂交 自交,观察后代是否有性状分离(10)确定某一个体是否具有抗性基因的方法:确定小麦是否具有抗锈病基因,用锈病菌去侵染,一段时间后,观察有无锈斑出现。(11)育种的方法:杂交育种;人工诱变育种;单倍体育种;基因工程育种;细胞工程育种;多倍体育种等。(12)测定种群密度的方法:样方
6、法; 标志重捕法(13)生态瓶的制作方法;瓶必须透明,且封闭(14)测定细菌的数目-显微计数七、实验技术1、光学显微镜的使用:适用于观察生物的微观结构,如细胞的结构,包括光镜下可看到的各种细胞器。2、临时装片、切片和涂片的制作技术:适用于显微观察,凡需在显微镜下观察的生物材料,必须先制成临时装片、切片或涂片。如“观察植物细胞的质壁分离和复原的实验”中要制作洋葱表皮的临时装片,在生物组织中脂肪的鉴定中要制作花生种子的切片等。3、研磨和过滤技术:适用于从生物组织中提取物质,如酶、色素等。研磨时要先将生物材料切碎,然后加入研磨剂常用SiO2、提取液及其他必要物质,充分研磨后,往往要进行过滤,以除去滤
7、渣,所用过滤器具则根据需要或或根据试题中提供的器材加以选用,如可用滤纸、纱布、脱脂棉、尼龙布等。4、解离技术:用于破坏细胞壁,分散植物细胞,制作临时装片。5、恒温技术:适用于有酶参加的生化反应,一般用水浴或恒温箱。根据题目要求选用。6、纸层析技术:适用于溶液中物质分离。重要步骤包括制备滤纸条、画滤液细线、层析分离。7、根尖培养技术: 观察植物根尖有丝分裂的实验二、设计实验步骤常用“四步法”。 第一步:共性处理实验材料,均等分组并编号。选择实验材料时要注意应用一些表示等量的描述性语言,如:“生长一致的”,“年龄相同的,体重一致的”等等。分成多少组要视题目中所给的信息而定,(一般情况分两组)。编号
8、最好用A、B、C或甲、乙、丙,而不用1、2、3 避免与实验步骤相混淆。 第二步:遵循单因子变量原则,对照处理各组材料。方法为一组为对照组(往往为处于正常生理状态的),其余为实验组,对照组与实验组只能有一个实验条件不同(单因子变量),其他条件要注意强调出相同来,这是重要的得分点或失分点。至于变量是什么要根据具体题目来确定。 第三步:相同条件培养(饲养、保温)相同时间。 第四步:观察记录实验结果。 实验结果的预测(预期);首先要根据题目判断该题是验证性实验还是探究性实验,如果是验证性实验,则结果只有一个,即题目中要证明的内容。如果是探究性实验,则结果一般有三种:实验组等于对照组,说明研究的条件对实
9、验无影响。实验组大于对照组,说明研究的条件对实验有影响,且影响是正相关。实验组小于对照组,说明研究的条件对实验有影响,且影响是负相关。 三、教材中实验总结(一)用显微镜观察多种多样的细胞实验目的:1)使用高倍显微镜观察几种细胞,比较不同细胞的异同点2)运用制作临时装片的方法实验原理:利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构,例如:可以看到叶绿体、线粒体等细胞器,从而能够区别不同的细胞。方法步骤:第一步:转动反光镜使视野明亮 第二步:在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野中央 第三步:用转换器转过高倍物镜问(1)是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野明亮?为什么?(提示:低倍镜的视
10、野大,通过的光多,放大的倍数小;高倍镜视野小,通过的光少,但放大的倍数高。)问(2)为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察?(提示:如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。)问(3)用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?(提示:不行。用高倍镜观察,只需微调即可。转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。) 第四步:观察并用细准焦螺旋调焦。(二)观察DNA和RNA在细胞中的分布原理:甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色
11、,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA和染色剂结合。实验材料用具:人的口腔上皮细胞或蚕豆叶表皮,洋葱表皮,大烧杯,小烧杯,温度计,滴管,消毒牙签,载玻片,盖玻片,铁架台,石棉网,火柴,酒精灯,吸水纸,显微镜、质量分数为0.9%的NaCl溶液,质量分数为0.8%的盐酸,吡罗红甲基绿染色剂实验方法步骤:取口腔上皮细胞制片载玻片要洁净,滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞将载玻片在酒精灯下烘
12、干防止污迹干扰观察效果保持细胞原有形态消毒为防止感染,漱口避免取材失败固定装片水解1在小烧杯中加入30 mL质量分数为8%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中;230 水浴保温5 min。改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色冲冼用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S洗去残留在外的盐酸染色1用吸水纸吸去载玻片上多余的水分;2用吡罗红甲基绿染色剂2滴染色5 min;3吸去多余的染色4盖上盖玻片。观察先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,调节清晰后才换用高倍物镜观察使观察效果最佳实验结果细胞核区域染成绿色,细胞质区域染成红色。实验结论DNA主要分布
13、在细胞核中(线粒体和叶绿体中也含有少量的DNA),RNA主要分布在细胞质中。注意事项: 1.材料的选择 选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察; 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰,不可使用紫色表皮细胞)2.取材要点 取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质; 取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。 3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗。 4.安全要点 用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂; 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自
14、然冷却1分钟。 5.换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调焦,切不可动粗准焦螺旋。(三)检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质实验原理:可溶性还原糖+ 斐林试剂砖红色沉淀。(水浴加热)脂肪小颗粒 + 苏丹染液橘黄色小颗粒。(要显微镜观察)蛋白质 + 双缩脲试剂紫色反应。实验材料:1.可溶性还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织,以苹果、梨为最好。2.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h4h)。3.蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d2d的黄豆种子(或用豆浆、或用鸡蛋蛋白)。实验步骤:1、还原性糖的鉴定:(1)还原性糖:有还原性基团游离醛基或酮
15、基的糖;如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖。(2)试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。 (3)步骤:取样液2mL于试管中加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)水浴加热2min左右观察颜色变化(浅蓝色棕色砖红色)(4)结论:还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀2、脂肪的鉴定(1)步骤:取材:花生种子(浸泡3-4h),将子叶削成薄片制作切片:(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央染色:(滴苏丹染液23滴切片上23min后吸去染液滴体积分数50%的酒精洗去浮色吸去多余的酒精)制作装片
16、:(滴12滴清水于材料切片上盖上盖玻片)镜检鉴定:(显微镜对光低倍镜观察高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)(2)结论:细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色。(3)实验成功的要点:.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h4h)。该试验成功的关键是获得只含有单层细胞理想薄片。滴苏丹染液染液染色2-3min,时间不宜过长,以防细胞的其他部分被染色。3、蛋白质的检测(1)试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)(2)步骤:试管中加样液2mL加双缩脲试剂A液1mL,摇匀加双缩尿试剂B液4滴,摇匀 观察颜色变化(紫色) (
17、3)结论:蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。(4)实验成功的要点:蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d2d的黄豆种子(或用豆浆、或用鸡蛋蛋白稀释液)。双缩脲试剂的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入双缩脲试剂B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液)。(四)用高倍镜观察线粒体和叶绿体实验目的:使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。实验原理:叶绿体的辨认依据:叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据:线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色,细胞质接近无色实验材料:观
18、察叶绿体时选用:藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是:叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片,所以作为实验的首选材料。(若用菠菜叶作实验材料,要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。)方法步骤:步 骤注 意 问 题分 析1制片。用镊子取一片黑藻的小叶,放入载玻片的水滴中,盖上盖玻片。制片和镜检时,临时装片中的叶片不能放干了,要随时保持有水状态否则细胞或叶绿体失水收缩,将影响对叶绿体形态和分布的观察。2低倍镜下找到叶片细胞3高倍镜下观察叶绿体的形态和分布4制作人的口腔上皮细胞临时装片在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液用牙签取碎屑盖盖玻片5观察线粒体蓝绿色的是线粒体,细胞质接
19、近无色。讨论:1、细胞质基质中的叶绿体,是不是静止不动的?为什么?答:不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动,这种运动能随时改变椭球体的方向,使叶绿体既能接受较多光照,又不至于被强光灼伤。2、叶绿体的形态和分布,与叶绿体的功能有什么关系?答:叶绿体的形态和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多,这可以接受更多的光照。(五)通过模拟实验探究膜的透性实验目的:1说明生物膜具有选择透过性 2尝试模拟实验的方法实验原理:某些半透膜(如动物的膀胱膜、肠衣等),可以让某些物质透过,而另一些物质不能透过。或者(玻璃纸)水分子
20、可以透过,而蔗糖分子因为比较大,不能透过。可以用半透膜将不同浓度的溶液分隔开,然后通过观察溶液液面高低的变化,来观察半透膜的选择透过特性,进而类比分析得出生物膜的透性。方法步骤:1取两个长颈漏斗,分别在漏斗口处封上一层玻璃纸。2在A漏斗中注入硫酸铜溶液,B漏斗中注入蔗糖溶液,并加入少许红墨水,使其略呈红色。3将两个漏斗分别浸入盛有蒸馏水的烧杯中,在两漏斗的液面处做标记4静置一段时间后,观察烧杯中蒸馏水颜色的变化及长颈漏斗的液面变化,并将观察到的结果设计表格进行记录。讨论:1漏斗管内的液面为什么会升高?答:由于单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量多于从长颈漏斗渗出的水分子数量,使得管内液
21、面升高。2如果用一层纱布代替玻璃纸,漏斗管内的液面还会升高吗?答:用纱布替代玻璃纸时,因纱布的孔隙很大,蔗糖分子也可以自由通透,因而液面不会升高。3如果烧杯中不是清水,而是同样浓度的蔗糖溶液,结果会怎样?答:半透膜两侧溶液的浓度相等时,单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量等于渗出的水分子数量,液面也不会升高(六)观察植物细胞的质壁分离与复原 实验原理:成熟的植物细胞有一大液泡。当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞液中的水分就透过原生质层进入到外界溶液中,由于原生质层比细胞壁的伸缩性大,当细胞不断失水时,液泡逐渐缩小,原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来,既发生了质壁分离。当细胞液的浓度
22、大于外界溶液的浓度时,外界溶液中的水分就透过原生质层进入到细胞液中,液泡逐渐变大,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,既发生了质壁分离复原。材料用具:紫色的洋葱鳞片叶;刀片,镊子,滴管,载玻片,盖玻片,吸水纸,显微镜;蔗糖的质量浓度为0.3g/mL的溶液,清水 方法步骤:1、制作洋葱鳞片叶表皮的临时装片:选取洋葱鳞片叶外表皮紫色较深的部位,用刀片划一个0.7cm见方的小块,用镊子尖插入平行于根侧的一个边,紧紧捏住这侧整个边缘部分,然后稍用力慢慢撕取,将捏住的较厚的部分表皮用刀片切去,剩余部分展平于载玻片中央的水滴中盖上盖玻片,即制成临时装片。2、观察植物细胞的质壁分离与复原现象(1)观察洋
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