格里斯试剂分光光度法29068.pdf

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1、亚硝酸盐氮测定格里斯试剂分光光度法 1 原理 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸作用，可生成不稳定的化合物，随即与-萘胺作用，生成一种红色偶氮化合物，反应如下：此偶氮化合物在 524nm 处有最大吸收波长，因此可以通过此反应产生红色偶氮化合物的吸光值计算出 NO2-的浓度，从而计算出亚硝态氮浓度。此方法的有效范围最大值为 L。2 实验用品 仪器：100ml 容量瓶、10ml 容量瓶、试管若干、最大量程分别为 1ml、的移液枪一支、分光光度计、水浴锅；药品：对氨基代苯磺酸、冰醋酸、-萘胺、亚硝酸钠；2.3 试剂配制（1）格里斯试剂 A.对氨基代苯磺酸试剂:称取对氨基苯磺酸 g，溶于 30 mL冰醋酸和 10

2、0 mL蒸馏水的混合液中(过滤避光保存一个月内可用);B.-萘胺试剂:称取 g-萘胺试剂，溶解于 100 mL 热蒸馏水中，冷却后加入 30 mL 冰醋酸(过滤避光保存一个星期内可)；临用前将 A 和 B 两溶液等量混合。（2）NaNO2标准溶液（mg/mL）：称取分析纯亚硝酸钠溶于水中，定容至 100 mL；吸取 1 mL 此溶液，再稀释定容至 10 mL，即为标准溶液。3 实验步骤 标准曲线 取 7 支 10 ml 比色管，分别按表加入试剂，在波长 524 nm 处以蒸馏水作参比，依次测定吸光度 A，各值减去空白试验（即 0 号管）绘制标准曲线。编号 0 1 2 3 4 5 6 NaNO2

3、标准溶液（mL）0 加蒸馏水至 5mL 浓度（mg/L）0 格里斯试剂（mL）摇匀，沸水浴加热 1min，冷却至室温 吸光值 A524 A=A524-A524(0)以编号 16 的数据（红色字体的数据）作标准曲线，横坐标为配制成溶液亚硝酸盐氮浓度（mg/L），纵坐标为 A；（此图为 1 月 28 日数据）样品测定 取水样（必要时可以用稀释后水样代替，记下稀释的倍数 D）用蒸馏水稀释至 5ml 后，加入格里斯试剂，。在波长 524 nm 处以蒸馏水作参比，依次测定吸光度 A524，各值减去空白试验（即标准曲线 0 号管的吸光值）即为校正值 A（此全过程应与标准曲线同时操作）；编号 A B C D

4、 E F.水样/ml .加蒸馏水至 5mL 格里斯试剂/ml 摇匀，沸水浴加热 1min，冷却至室温；A524 A=A524-A524(0)浓度/（mg/L）水中亚硝酸盐氮浓度按下式计算：N（NO2-）=5(A-a)/(bV)D 式中：N（NO2-）原水样中亚硝酸盐氮浓度，mg/L，以 N 计；A试样校正后的吸光值；b标准曲线的斜率；a标准曲线的截距；V所取试样的体积，ml；D稀释倍数（水样未经稀释时此值为 1）；4 注意事项 该方法最大有效范围比起原样品中亚硝酸盐氮浓度可能最大值有相当大差距，注意稀释但又不可过量稀释，避免测得的吸光值过小以致不准确；出于对所用蒸馏水可能含有亚硝酸根的缘故，会令标准曲线测试样及水样的测得值大于实际值，因此以 0 号管消去去蒸馏水可能含有亚硝酸根所造成的误差，所以标准曲线不过原点。