分光光度法课件.ppt

《分光光度法课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《分光光度法课件.ppt（27页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、关于分光光度法课件现在学习的是第1页，共27页一、定性分析一、定性分析（一）定性鉴别 定性鉴别的依据吸收光谱的特征吸收光谱的形状吸收峰的数目吸收峰的位置（波长）吸收峰的强度相应的吸光系数现在学习的是第2页，共27页续前1对比吸收光谱的一致性对比吸收光谱的一致性同一测定条件下，与标准对照物谱图或标准谱图进行对照比较现在学习的是第3页，共27页续前2对比吸收光谱的特征值对比吸收光谱的特征值现在学习的是第4页，共27页续前3对比吸光度或吸光系数的比值：例：例：例：例：现在学习的是第5页，共27页续前（二）纯度检查和杂质限量测定1纯度检查（杂质检查）1）峰位不重叠：找找使主成分无吸收，杂质有吸收使主成

2、分无吸收，杂质有吸收直接考察杂质含量直接考察杂质含量2 2）峰位重叠：）峰位重叠：主成分强吸收，杂质无吸收主成分强吸收，杂质无吸收/弱吸收弱吸收与纯品比较，与纯品比较，EE 杂质强吸收杂质强吸收 主成分吸收主成分吸收与纯品比较，与纯品比较，EE，光谱变形，光谱变形现在学习的是第6页，共27页续前2杂质限量的测定：例：肾上腺素中微量杂质例：肾上腺素中微量杂质肾上腺酮含量计算肾上腺酮含量计算 2mg/mL-0.05mol/L 2mg/mL-0.05mol/L的的HCLHCL溶液，溶液，310nm 310nm下测定下测定 规定规定 A A3103100.05 0.05 即符合要求的杂质限量即符合要求

3、的杂质限量0.06%0.06%现在学习的是第7页，共27页二、定量分析二、定量分析（一）单组分的定量方法1吸光系数法 2标准曲线法 3对照法：外标一点法现在学习的是第8页，共27页续前1吸光系数法（绝对法）吸光系数法（绝对法）现在学习的是第9页，共27页练习例：维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度（见书P201例1）解：现在学习的是第10页，共27页练习例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，

4、于361nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量？（见书P61例2）解：现在学习的是第11页，共27页练习例：解：现在学习的是第12页，共27页续前续前2标准曲线法标准曲线法现在学习的是第13页，共27页示例 芦丁含量测定0.710mg/25mL0.710mg/25mL现在学习的是第14页，共27页续前3对照法：外标一点法对照法：外标一点法注：当样品溶液与标准品溶液的注：当样品溶液与标准品溶液的注：当样品溶液与标准品溶液的注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时稀释倍数相同时稀释倍数相同时稀释倍数相同时现在学习的是第15页，共27页练习例：维生素B12的含量测定 精密吸取B12注射

5、液2.50mL，加水稀释至10.00mL；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标示量为100g/mL）见书P203例题解：1）对照法 现在学习的是第16页，共27页练习2）吸光系数法 现在学习的是第17页，共27页续前（二）多组分的定量方法（二）多组分的定量方法三种情况：1两组分吸收光谱不重叠两组分吸收光谱不重叠（互不干扰）两组分在各自两组分在各自max下不重叠下不重叠分别按单组分定量分别按单组分定量现在学习的是第18页，共27

6、页续前2两组分吸收光谱部分重叠两组分吸收光谱部分重叠 1测测A1b组分不干扰组分不干扰可按单组分定量测可按单组分定量测Ca 2测测A2a组分干扰组分干扰不能按单组分定量测不能按单组分定量测Ca 现在学习的是第19页，共27页续前3 3两组分吸收光谱完全重叠两组分吸收光谱完全重叠混合样品测定混合样品测定（1）解线性方程组法）解线性方程组法（2）等吸收双波长消去法）等吸收双波长消去法（3）系数倍率法）系数倍率法现在学习的是第20页，共27页1解线性方程组法解线性方程组法n n步骤：步骤：现在学习的是第21页，共27页2等吸收双波长法等吸收双波长法n n步骤：步骤：消除消除a的影响测的影响测b现在学

7、习的是第22页，共27页续前消去消去b的影响测的影响测a 注：须满足两个基本条件注：须满足两个基本条件 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大现在学习的是第23页，共27页3系数倍率法系数倍率法前提：干扰组分前提：干扰组分b不成峰形不成峰形 无等吸收点无等吸收点现在学习的是第24页，共27页续前步骤：b曲线上任找一点1 另一点2优点：同时将待测组分和干扰组分放大信号优点：同时将待测组分和干扰组分放大信号K K倍，倍，提高了待测组分测定灵敏度提高了待测组分测定灵敏度ab 1 1

8、 2 2现在学习的是第25页，共27页练习解：1 1取咖啡酸，在取咖啡酸，在165165干燥至恒重，精密称取干燥至恒重，精密称取10.00mg10.00mg，加少量，加少量 乙醇溶解，转移至乙醇溶解，转移至200mL200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶容量瓶中，加水至刻度线，取此溶 液液5.00mL5.00mL，置于，置于50mL50mL容量瓶中，加容量瓶中，加6mol/L6mol/L的的HCL 4mLHCL 4mL，加，加 水至刻度线。取此溶液于水至刻度线。取此溶液于1cm1cm比色池中，在比色池中，在323nm323nm处测定吸处测定吸 光度为光度为0.4630.463，已知该波长处的，已知该波长处的 ，求咖啡酸百分，求咖啡酸百分 含量含量（见书后（见书后P215 P215 题题1616）现在学习的是第26页，共27页感感谢谢大大家家观观看看31.03.2023现在学习的是第27页，共27页