艾滋病实验室检查ppt课件.ppt

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1、关于艾滋病实验室检查PPT现在学习的是第1页，共19页2实实 验验 室室 检检 查查现在学习的是第2页，共19页3免疫学检测免疫学检测AIDSAIDS患者患者正常正常(10109 9/L)/L)CD4CD40.20.21(0.81(0.81.2)1.2)CD4/CD8CD4/CD8111.21.22.12.1淋巴细胞总淋巴细胞总数数112 23 3流式细胞仪测定流式细胞仪测定流式细胞仪测定流式细胞仪测定现在学习的是第3页，共19页4血清学检测血清学检测（）（）HIV抗体的初筛试验抗体的初筛试验ELISA（酶联免疫（酶联免疫试验）试验）现在学习的是第4页，共19页5血清学检测血清学检测（）（）H

2、IVHIV抗体的确证试验抗体的确证试验抗体的确证试验抗体的确证试验Western blot（免疫印迹试验）（免疫印迹试验）现在学习的是第5页，共19页6血清学检测（）血清学检测（）HIV抗原检测抗原检测ELISA夹心法夹心法测定测定p24p24抗原抗原敏感性很高（敏感性很高（7 710 pg/ml10 pg/ml）特异性稍差（可有假阳性特异性稍差（可有假阳性）现在学习的是第6页，共19页7分子生物学检测分子生物学检测（1）HIV RNA检测检测RT-PCR（逆转录（逆转录-聚合酶链反应）聚合酶链反应）PCRPCR：高温变性：高温变性(94)(94)低温退火低温退火(55)(55)适温延伸适温延

3、伸(72)(72)；经；经25302530个循环，成倍数扩增个循环，成倍数扩增荧光定量荧光定量PCRPCR：比常规：比常规PCRPCR多一个寡聚核苷酸多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子）淬灭分子）应用：应用：PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA；RT-PCRRT-PCR查查血浆中的病毒血浆中的病毒RNARNA现在学习的是第7页，共19页8分子生物学检测（分子生物学检测（2 2）淋巴细胞淋巴细胞HIV RNA检测检测Northern印迹杂交印迹杂交(Northern blot)原理：原理：RNA RNA片段经电泳分

4、离，片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸纤维素从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂交滤膜，再用探针杂交现在学习的是第8页，共19页9分子生物学检测（分子生物学检测（3）HIV变异株检测变异株检测Sanger测序法测序法 原理：核酸扩增时，核苷酸在某一原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一特定的碱固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生基处终止，产生A A、T T、C C、G G四组不四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的素变性的PAGEPAGE胶上电泳，获得胶上电泳，获得DNADNA序序列列现在学习的是第9页，共19页10病毒检测病毒检测

5、l血浆、单核细胞、脑脊液可分离出血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIVl操作复杂，主要用于科研操作复杂，主要用于科研现在学习的是第10页，共19页11诊诊 断断现在学习的是第11页，共19页12诊断原则诊断原则流流行行病病学学史史：有有静静脉脉注注射射毒毒品品史史；多多个个性性伴伴和和不不洁洁性性生生活活史史；输输入入未未经经HIV抗抗体体检检测测的的血血液液和和血血制制品品史史；HIV抗抗体体阳阳性性所所生生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。临床表现：临床表现：高高危危对对象象出出现现上上感感样样及及单单核核细细胞胞增增多多症症样样表表现现，颈

6、颈、腋腋及及枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。感染。无症状期、艾滋病期临床表现。无症状期、艾滋病期临床表现。实实验验室室检检查查：HIV抗抗体体阳阳性性，并并经经确确证证试试验验确确认认。CD4+T淋淋巴巴细细胞胞数数明明显显减减少少。HIV RNA和和P24抗抗原原的的检检测测有有助助于于早早期诊断新生儿的期诊断新生儿的HIV感染。感染。现在学习的是第12页，共19页13诊断标准诊断标准l急性期急性期 流行病学史、临床表现、流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性抗体由阴性转为阳性 仅实验室检查仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性抗体由

7、阴性转为阳性l无症状期无症状期 流行病学史、流行病学史、HIV抗体阳性抗体阳性 仅实验室检查仅实验室检查HIV抗体阳性抗体阳性 现在学习的是第13页，共19页14诊断标准诊断标准l艾滋病期艾滋病期 流流行行病病学学史史，HIV抗抗体体阳阳性性，临临床床表表现现有有下下列列一一项项或以上或以上：1.1.1.1.短短期期（6 6个个月月内内）体体重重下下降降1010以以上上；2.2.咳咳嗽嗽或或腹腹泻泻超超过过4 4周周；3.3.持持续续或或间间歇歇发发热热超超过过4 4周周；4.4.全全身身淋淋巴巴结结肿肿大大；5.5.反反复复带带状状疱疱疹疹或或慢慢性性播播散散性性HSVHSV感感染染；6.6

8、.口口咽咽念念珠珠菌菌病病；7.7.全全身身搔搔痒痒性性皮皮炎炎；8.8.反反复复发发生生的的败败血血症症；9.9.深深部部真真菌菌感感染染，马马尔尔尼尼非非青青霉霉菌菌；10.10.肺肺孢孢子子虫虫肺肺炎炎；11.11.活活动动性性巨巨细细胞胞病病毒毒感感染染；12.12.弓弓形形虫虫脑脑病病。13.13.反反复复发发生生、难难治治性性肺肺部部感感染染或或进进展展迅迅速速的的活活动动性性结结核核病病；14.14.中中枢枢神神经经系系统统受受损损、占占位位性性病病变变或或中中、青青年年痴痴呆呆症症；15.15.卡卡波波西西肉肉瘤瘤或淋巴瘤。或淋巴瘤。现在学习的是第14页，共19页15诊断标准诊

9、断标准 HIV抗体阳性抗体阳性 CD4+T淋巴细胞数淋巴细胞数200/mm200/mm3 3 无上述表现或症状无上述表现或症状现在学习的是第15页，共19页16鉴别诊断鉴别诊断l原发性原发性CD4+淋巴细胞减少症淋巴细胞减少症 无HIV感染流行病学资料，HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。l继发性继发性CD4+淋巴细胞减少淋巴细胞减少 肿瘤和自生免疫性疾病（autoimmune disease）化疗或免疫抑制治疗后。现在学习的是第16页，共19页17预预 后后现在学习的是第17页，共19页18影响预后的因素影响预后的因素感染的感染的HIV型别及亚型：型别及亚型：HIV-1较较HIV-2临床进展快临床进展快并发的机会性感染：并发的机会性感染：同同时时合合并并卡卡波波济济肉肉瘤瘤及及肺肺孢孢菌菌肺肺炎炎者者病病死死率率最最高高；合合并丙型肝炎者预后差并丙型肝炎者预后差抗逆转录病毒治疗：抗逆转录病毒治疗：治疗改变了艾滋病进程治疗改变了艾滋病进程 现在学习的是第18页，共19页2023/4/1感谢大家观看现在学习的是第19页，共19页