凝集反应课件.ppt

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1、关于凝集反应现在学习的是第1页，共30页概述概述一、定义一、定义凝集反应是指凝集反应是指颗粒性抗原颗粒性抗原（细菌、红细胞）（细菌、红细胞）或附着或附着在载体上的可溶性抗原在载体上的可溶性抗原(或抗体或抗体)与相与相应的应的抗体（或抗原）抗体（或抗原）在适量的电解质存在的在适量的电解质存在的条件下，经一定时间后凝聚成条件下，经一定时间后凝聚成肉眼可见的凝肉眼可见的凝集物集物。参加反应的抗原称为凝集原参加反应的抗原称为凝集原,抗体称为凝集素。抗体称为凝集素。现在学习的是第2页，共30页二、分类凝凝集集反反应应玻片凝集试验直接凝集反直接凝集反应应抗人球蛋白凝集试验抗人球蛋白凝集试验间接凝集反间接凝

2、集反应应试管凝集试验正向间接凝集试验反向间接凝集试验间接凝集抑制试验直接法间接法（coombs试验）试验）现在学习的是第3页，共30页直接凝集反应 定义：直接用颗粒性抗原与抗体结合，出现肉眼可见的凝集现象。特点：*抗原呈颗粒状，制成的液体为悬液*抗原颗粒相对比抗体大,形成的凝集物主要成分为抗原*抗原的比表面积比抗体小，试验时为使抗体不过剩，通常稀释抗体*以出现凝集现象的抗体最高稀释度判断效价现在学习的是第4页，共30页一、玻片凝集试验已知抗体已知抗体 未知抗原未知抗原（待检标本）（待检标本）?+凝集团块凝集团块混浊混浊YESNOO抗原（菌体抗原）抗原（菌体抗原）致密的致密的颗粒状凝集物颗粒状凝

3、集物 O凝集凝集H抗原抗原（鞭毛抗原）（鞭毛抗原）疏松的疏松的絮状凝集物絮状凝集物 H凝集凝集Vi抗原抗原（表面抗原）致密的（表面抗原）致密的颗粒状凝集物颗粒状凝集物 Vi凝集凝集现在学习的是第5页，共30页ABO血型鉴定血血 型型 系系 统统 现在学习的是第6页，共30页实验原理标准抗标准抗A血清血清含含抗抗凝集素凝集素使型、使型、AB型红细胞的凝集原凝集型红细胞的凝集原凝集含含抗抗凝集素凝集素使型、使型、AB型红细胞的凝集原凝集型红细胞的凝集原凝集标准抗标准抗B血清血清现在学习的是第7页，共30页实验步骤1、标记玻片：取洁净玻片一张，用笔在玻片两端分别标明 A BBA2、滴加血请：在玻片A

4、 B两端分别滴加标准抗A 和抗B血清各一滴。抗A抗体抗B抗体现在学习的是第8页，共30页3、消毒取血 用无菌棉签蘸取消毒液消毒液，消毒左手无名指指左手无名指指腹腹皮肤，用消毒采血针垂直刺入消毒皮肤处取血各一滴分别涂于玻片的标准抗A血清和标准抗B血清中，分别分别用用牙签牙签将其将其混匀混匀4、观察结果静置静置1015分钟后用肉眼观察有无凝集现象。现在学习的是第9页，共30页结果判断A型标准抗A血清标准抗血清根据有无凝集现象判定血型根据有无凝集现象判定血型B型AB型O型现在学习的是第10页，共30页方法评价方法评价:定性试验定性试验简便和快速简便和快速敏感度低敏感度低临床应用临床应用:菌种鉴定菌种

5、鉴定血清学分型血清学分型血型鉴定血型鉴定现在学习的是第11页，共30页试管凝集试验定量抗原（已知）定量抗原（已知）+系列稀释抗体（待检系列稀释抗体（待检血清）血清）不同程度的凝集反应（阳性）不同程度的凝集反应（阳性）确定抗体的滴度确定抗体的滴度(凝集效价凝集效价)现在学习的是第12页，共30页1.实验材料：实验材料：伤寒杆菌伤寒杆菌O菌液、菌液、待测血清、生理盐水待测血清、生理盐水2.方法：方法：0.50.50.50.50.50.50.50.50.51:201:401:801:1601:3200.5弃掉弃掉123450.160.9生理盐水生理盐水(ml)待测血清待测血清对照管对照管0.5ml0

6、.5ml0.5ml0.5ml0.5ml伤寒杆菌伤寒杆菌O菌液菌液0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml抗体稀释度抗体稀释度彻底混匀彻底混匀56,1h现在学习的是第13页，共30页4.预期结果预期结果+很小的凝集颗粒很小的凝集颗粒混浊混浊-无凝集现象无凝集现象与对照相同与对照相同+小、部分凝集块小、部分凝集块中等混浊中等混浊+大多凝集管底大多凝集管底轻度混浊轻度混浊+大的凝集块大的凝集块清亮清亮凝集程度凝集程度沉淀沉淀上清上清现在学习的是第14页，共30页管底沉淀管底沉淀凝集程度凝集程度 最高稀释比例最高稀释比例 待测血清的滴度待测血清的滴度现在学习的是第15页，共30页方

7、法评价：方法评价：半定量试验半定量试验简便、快速简便、快速敏感度低敏感度低临床应用：临床应用：肥达试验肥达试验外斐试验外斐试验布鲁菌病布鲁菌病交叉配血试验交叉配血试验现在学习的是第16页，共30页间接凝集试验间接凝集试验 将可溶性抗原或抗体吸附于将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体颗粒性载体表表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象现在学习的是第17页，共30页间接凝集反应载体不同反应方式不同正向间接凝集试验反向间接凝集试验间接凝集抑制试验协同凝集试验红细胞凝集试验胶乳凝集试验分类分类现在学

8、习的是第18页，共30页正向间接凝集用抗原致敏载体用抗原致敏载体-检测抗体检测抗体间接乳凝试验检测类风湿因子间接乳凝试验检测类风湿因子间接炭凝试验检测梅毒反应素间接炭凝试验检测梅毒反应素间接血凝试验检测猪瘟抗体间接血凝试验检测猪瘟抗体现在学习的是第19页，共30页反向间接凝集试验用抗体致敏载体用抗体致敏载体-检测抗原检测抗原反向间接血凝试验检测甲胎蛋白、乙肝表面抗原现在学习的是第20页，共30页间接凝集抑制试验用抗原致敏载体用抗原致敏载体-检测抗原检测抗原现在学习的是第21页，共30页妊娠免疫诊断试验妊娠免疫诊断试验孕妇尿中，绒毛膜促性腺激素（孕妇尿中，绒毛膜促性腺激素（HCGHCG）含量明显

9、增高。（）含量明显增高。（HCGHCG是可是可溶性抗原溶性抗原 ）反之，非孕妇尿中反之，非孕妇尿中HCGHCG含量甚微，不足以消耗掉抗含量甚微，不足以消耗掉抗HCGHCG抗体抗体。现在学习的是第22页，共30页实验材料 1、标本：、标本：孕妇尿（孕妇尿（HCG阳性）、待检尿、阳性）、待检尿、正常尿正常尿 、试剂：、试剂：兔抗人兔抗人HCG血清、血清、HCG致敏的乳胶颗粒致敏的乳胶颗粒 、器材：、器材：载玻片、滴管、玻棒载玻片、滴管、玻棒现在学习的是第23页，共30页四、实验方法四、实验方法 加尿液标本加尿液标本加兔抗人加兔抗人HCG免疫血清免疫血清加加HCG致敏的乳胶颗粒致敏的乳胶颗粒 观察结

10、果观察结果混匀静止混匀静止2 2分钟分钟混匀静止混匀静止2 2分钟分钟孕妇尿孕妇尿待检尿待检尿正常尿正常尿123现在学习的是第24页，共30页五、实验结果五、实验结果待检尿待检尿 若出现白色细小凝集为若出现白色细小凝集为妊娠诊断试验阴性妊娠诊断试验阴性 若呈均匀浑浊乳状液为若呈均匀浑浊乳状液为妊娠诊断试验阳性妊娠诊断试验阳性。孕妇尿孕妇尿 呈现白色均匀浑浊乳状液。呈现白色均匀浑浊乳状液。正常尿正常尿 出现均匀一致的白色细小凝集物。出现均匀一致的白色细小凝集物。现在学习的是第25页，共30页间接凝集试验反应类型反应环节反应结果应用正向间接 凝集可溶性抗原-载体+抗体 凝集测定抗体测定抗体反向间接

11、凝集抗体-载体+可溶性抗原凝集测定抗原测定抗原间接凝集抑制可溶性抗原+抗体+可溶性抗原-载体不凝集测定抗原测定抗原现在学习的是第26页，共30页小结凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原的颗粒性载体与相应抗体结合后，可出现肉眼可见的原的颗粒性载体与相应抗体结合后，可出现肉眼可见的凝集现象。凝集现象。可以分为直接凝集反应、间接凝集反应和抗人球蛋白可以分为直接凝集反应、间接凝集反应和抗人球蛋白试验试验现在学习的是第27页，共30页小结类型反应环节结果应用直接凝集试验颗粒性抗原+抗体凝集测定抗原或抗体正向间接凝集可溶性抗原-载体+抗体 凝集测定抗体反向间接凝集抗体-载体+可溶性抗原凝集测定抗原间接凝集抑制可溶性抗原+抗体+可溶性抗原-载体不凝集测定抗原现在学习的是第28页，共30页作业1、何为凝集反应？凝集反应有哪些类型？2、请解释直接凝集试验、正向间接凝集试验、反向间接凝集试验和间接凝集抑制试验的原理？现在学习的是第29页，共30页感感谢谢大大家家观观看看现在学习的是第30页，共30页