实验一纸层析法分离鉴定氨基酸.ppt
《实验一纸层析法分离鉴定氨基酸.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《实验一纸层析法分离鉴定氨基酸.ppt(18页珍藏版)》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、关于实验一纸层析法分离鉴定氨基酸181现在学习的是第1页,共18页182 【二、实验二、实验原理原理】层析技术层析技术 是利用混合物中各组分的物理化学性质的是利用混合物中各组分的物理化学性质的差别,使各组分以不同程度分布在两相中,其中一相差别,使各组分以不同程度分布在两相中,其中一相为为固定相固定相固定相固定相,另一相流过此相称作,另一相流过此相称作流动相流动相流动相流动相,并使各组分以不,并使各组分以不同速度移动,从而达到分离的目的。同速度移动,从而达到分离的目的。可分离物质可分离物质可分离物质可分离物质 糖类、有机酸、氨基酸、核苷等糖类、有机酸、氨基酸、核苷等现在学习的是第2页,共18页1
2、83固定相固定相 在层析中在层析中起分离作用而不随层析过程移动起分离作用而不随层析过程移动的的物质。如纸层析中固定相是滤纸纤维中结合的水。固物质。如纸层析中固定相是滤纸纤维中结合的水。固定相被看成是样品移动的阻力。定相被看成是样品移动的阻力。流动相流动相 在层析过程因其本身流动而在层析过程因其本身流动而推动样品移动推动样品移动推动样品移动推动样品移动的的物质。物质。现在学习的是第3页,共18页184名称名称操作方式操作方式固定相固定相流动相流动相分离依据分离依据 分配层析分配层析 纸层析纸层析 薄层层析薄层层析液体液体液体液体 溶解度溶解度 离子交换层析离子交换层析 离子交换柱层析离子交换柱层
3、析固体固体液体液体 带电性带电性 静电引力静电引力 吸附层析吸附层析 吸附薄层层析吸附薄层层析 气体吸附层析气体吸附层析固体固体液体液体气体气体 吸附力吸附力 亲和层析亲和层析 酶与底物酶与底物 抗原与抗体抗原与抗体固体固体液体液体 配体专一性配体专一性 凝胶层析凝胶层析 凝胶过滤凝胶过滤固体固体液体液体 分子大小分子大小层析的分类层析的分类现在学习的是第4页,共18页185 分配层析分配层析分配层析分配层析:是利用不同物质在两种不相溶的溶剂中的分配:是利用不同物质在两种不相溶的溶剂中的分配系数不同而达到分离的一种技术。系数不同而达到分离的一种技术。分配系数分配系数 =溶质在固定相的溶解度溶质
4、在固定相的溶解度溶质在流动相的溶解度溶质在流动相的溶解度现在学习的是第5页,共18页186 纸层析是以滤纸作为惰性支持物的纸层析是以滤纸作为惰性支持物的分配层析分配层析:纸纤维上的纸纤维上的 OHOH 基具有亲水性,所以能基具有亲水性,所以能吸附吸附一层一层水水作为作为固定相固定相,而通常把而通常把有机溶剂有机溶剂作为作为流流动相动相。流动相流经支持物时与固定相间连续。流动相流经支持物时与固定相间连续抽提,使物质在两相间不断地分配而得到分抽提,使物质在两相间不断地分配而得到分离。离。现在学习的是第6页,共18页187v 溶质在滤纸上的移动速率用溶质在滤纸上的移动速率用f(比移)值来(比移)值来
5、表示:表示:展层层斑点中心与原点间的距离 Rf=-溶剂前沿与原点之间的距离现在学习的是第7页,共18页188现在学习的是第8页,共18页189 影响影响Rf值的因素值的因素(多种)(多种)(多种)(多种)物质结构与极性物质结构与极性 物质的极性大小决定了物质在水物质的极性大小决定了物质在水 和有机溶剂之间的分配情况。和有机溶剂之间的分配情况。pHpHpHpH值值 展层剂的展层剂的pHpH影响被分离物质的极性基团的影响被分离物质的极性基团的解离形式。解离形式。层析滤纸的质量层析滤纸的质量 层析用滤纸要质地均匀,紧密,层析用滤纸要质地均匀,紧密,有一定的机械强度,并含杂质少。国产新华滤纸可有一定的
6、机械强度,并含杂质少。国产新华滤纸可 用于一般的纸层析。用于一般的纸层析。现在学习的是第9页,共18页1810 【三、器材与试剂三、器材与试剂】器材:器材:1 1、层析缸、层析缸、层析缸、层析缸 2 2、毛细管、毛细管、毛细管、毛细管 3 3、喷雾器、喷雾器、喷雾器、喷雾器 4 4、培养皿、培养皿、培养皿、培养皿 5 5、层析滤纸、层析滤纸、层析滤纸、层析滤纸(新华一号新华一号新华一号新华一号)试剂:试剂:试剂:试剂:1 1、扩展剂、扩展剂、扩展剂、扩展剂(正丁醇(正丁醇(正丁醇(正丁醇:水水水水:冰醋酸冰醋酸冰醋酸冰醋酸=4=4:3 3:1 1)2 2、显色剂、显色剂、显色剂、显色剂 0.1
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 实验 层析 分离 鉴定 氨基酸
限制150内