课题菊花的组织培养绝好课件.ppt

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1、关于课题菊花的组织培养绝好现在学习的是第1页，共33页大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那有大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那有没有没有不用种子来培育植物不用种子来培育植物的方法呢？的方法呢？植物组织培养植物组织培养营养繁殖营养繁殖扦插扦插嫁接嫁接压条压条 现在学习的是第2页，共33页一、基础知识一、基础知识1 1、植物的组织培养、植物的组织培养（1 1）细胞的分化）细胞的分化概念：概念：在在个体发育个体发育中，中，相同细胞相同细胞的后代在形态、的后代在形态、结构、生理功能上发生结构、生理功能上发生稳定性差异稳定性差异的过程的过程 .过程：过程：如：受精卵增殖、生长、分化形成组织、如：受

2、精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统器官、系统.现在学习的是第3页，共33页特点：特点：B.B.稳定性：稳定性：C.C.全能性：全能性：A.A.持久性：持久性：是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中生命过程中,在胚胎期达到最大限度在胚胎期达到最大限度.细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的.已分化的细胞，仍具有发育的潜能已分化的细胞，仍具有发育的潜能.现在学习的是第4页，共33页原因：原因：基因在特定的时间和空间条件下的选择基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果性表达的结果.结果：结果：形成不同的细胞

3、和组织形成不同的细胞和组织（2 2）细胞的全能性）细胞的全能性定义：定义：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性体的潜能的特性.原理：原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因体所必需的全部基因.现在学习的是第5页，共33页高度特化的高度特化的动物动物细胞，从整个细胞来说，全能性受细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细胞核内含有该物种遗传性

4、所需要的遗传物质为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质.已分化的已分化的植物植物细胞，仍具有全能性细胞，仍具有全能性.实例实例受精卵受精卵 生殖细胞生殖细胞 体细胞体细胞全能性的比较全能性的比较:现在学习的是第6页，共33页（3 3）植物组织培养）植物组织培养细胞离体细胞离体必要条件：必要条件：一定的营养物质、激素和其他外一定的营养物质、激素和其他外界条件界条件原理原理:细胞的全能性细胞的全能性A.A.外植体：外植体：从从活植物体活植物体上切下进行培养的那部分上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官细胞、组织或器官.相关概念相关概念:现在学习的是第7页，共33页v什么叫脱（去）分化、再分化？

5、v愈伤组织的细胞有什么特点？v如何控制细胞的脱分化与去分化？（阅读（阅读32-33页第一段解决下列问题页第一段解决下列问题）二、植物组织培养的基本过程二、植物组织培养的基本过程现在学习的是第8页，共33页植物组织培养的基本过程现在学习的是第9页，共33页细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。现在学习的是第10页，共33页人参的愈伤组织人参的愈伤组织人参的愈伤组织人参的愈伤组织现在学习的是第11页，共33页菠萝的愈伤组织菠萝的愈伤组织菠萝的愈伤组织菠萝的愈伤组织现在学习的是第12页，共33页 愈伤组织愈伤组织（脱分化）（脱分化）根或芽等器官根或芽等器官现在学习的是第13

6、页，共33页（三）影响植物组织培养的因素1、材料（外植体）的选取、材料（外植体）的选取（1）不同植物的组织培养难度不同）不同植物的组织培养难度不同 什么样的植物容易进行组织培养？什么样的植物容易进行组织培养？（2）同一种植物的不同组织培养难度不同）同一种植物的不同组织培养难度不同 什么样的组织容易进行组织培养？什么样的组织容易进行组织培养？容易进行无性生殖的植物，如烟草、胡萝卜容易进行无性生殖的植物，如烟草、胡萝卜幼龄、保存时间短的组织幼龄、保存时间短的组织菊花的组织培养一般选用何种材料？菊花的组织培养一般选用何种材料？未开花植物的茎上部新萌生的侧枝未开花植物的茎上部新萌生的侧枝现在学习的是第

7、14页，共33页（三）影响植物组织培养的因素2、培养基的配制、培养基的配制常用的一种培养基为常用的一种培养基为_其主要成分包括：其主要成分包括：_ _元素：元素：C C、H H、O O、N N、P P、K K、CaCa、MgMg、S S_元素：元素：B B、MnMn、CuCu、ZnZn、FeFe、MoMo、I I、CoCo_：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等_：生长素、细胞分裂素、赤霉素等：生长素、细胞分裂素、赤霉素等MS培养基培养基大量大量微量微量有机物有机物植物激素植物激素现在学习的是第15页，共33页旁栏思考旁栏思考：你能说出各种营养物质的作用吗？同

8、专题你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2 2中微生物培中微生物培养基的配方相比，养基的配方相比，MSMS培养基的配方有哪些明显的不同培养基的配方有哪些明显的不同？答：答：微量元素和大量元素提供微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的植物细胞生活所必需的无机盐；无机盐；蔗糖蔗糖提供碳源，同时能够维持培养基的渗提供碳源，同时能够维持培养基的渗透压；透压；甘氨酸、维生素甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。营养需求。2、培养基的配制、培养基的配制(MS培养基培养基)微

9、生物培养基微生物培养基以以有机营养有机营养为主。与微生物的培养不同，为主。与微生物的培养不同，MSMS培养基培养基则需提供则需提供大量无机营养大量无机营养，无机盐混合物包括，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。现在学习的是第16页，共33页植物激素中植物激素中_和和_是启动细胞分裂、脱分是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。化和再分化的关键性因素。_、_以及以及_等，都会影响实验结果。等，都会影响实验结果。（三）影响植物组织培养的因素3、不同植物激素使用顺序和使用量、不同植物激素使用顺序和使用量生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素植

10、物激素的浓度植物激素的浓度使用的先后顺序使用的先后顺序用量的比例用量的比例不同植物激素使用顺序不同植物激素使用顺序细胞分裂细胞分裂细胞不分化细胞不分化分化频率分化频率现在学习的是第17页，共33页（三）影响植物组织培养的因素不同植物激素使用量不同植物激素使用量生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于有利于_抑制抑制_；比值低时，；比值低时，有利于有利于_抑制抑制_；比值适中时，；比值适中时，促进促进_。根的分化根的分化芽的形成芽的形成芽的分化芽的分化根的形成根的形成愈伤组织的形成愈伤组织的形成现在学习的是第18页，共33页（三）影响植物组织培养的因素4

11、、环境因素：、环境因素：不同的植物对各种条件的要求往往不同的植物对各种条件的要求往往_。如进行菊花的组织培养，一般将如进行菊花的组织培养，一般将pHpH控制在控制在_左右；左右；温度控制在温度控制在_；并且每天用日光灯照射并且每天用日光灯照射_。不同不同5.8181822 22 12h12h现在学习的是第19页，共33页（二）影响植物组织培养的因素5、消毒、消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境。在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境。植物组织培养用的培养基，含有植物生长发育所需要的各种营养物植物组织培养用的培养基，含有植物生长发育所需要的各种营养物质，这些营养物质同样为细菌等微小的生

12、物提供了适合的营养。在质，这些营养物质同样为细菌等微小的生物提供了适合的营养。在这种培养基上，细菌等微小的生物比植物细胞具有更强的新陈代谢这种培养基上，细菌等微小的生物比植物细胞具有更强的新陈代谢能力，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，能力，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此，植物组织培养要想取得成使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此，植物组织培养要想取得成功，必须有效地防止细菌等的污染，保证培养材料、培养基、培养功，必须有效地防止细菌等的污染，保证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。为了达到这一要求，就要在植物组织培养过程中

13、进用具完全无菌。为了达到这一要求，就要在植物组织培养过程中进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。现在学习的是第20页，共33页3 3、植物组织培养过程、植物组织培养过程:离离离离体体体体组组组组织织织织或或或或细细细细胞胞胞胞植植植植物物物物体体体体脱分化脱分化细胞分裂素细胞分裂素生长素生长素愈愈愈愈伤伤伤伤组组组组织织织织芽芽芽芽根根细胞分裂素细胞分裂素细胞分裂素细胞分裂素 生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素 生长素生长素生长素生长素再分化再分化植物细胞培养植物细胞培养植物细胞培养植物细胞培养不需要光不需要光不需要光不需要光?需要光需要光现在学习的是

14、第21页，共33页在培养过程中，是脱分化、再分化的过在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过的能力，是由细胞到一个个体的演变过程程培养过程中为什么需要进行光照？培养过程中为什么需要进行光照？思思 考考现在学习的是第22页，共33页制备制备MS固体固体培养基培养基外植体消毒外植体消毒 接种接种 培培 养养栽栽 培培四、实验操作四、实验操作 移移 栽栽流水流水冲洗冲洗无菌纸吸干无菌纸吸干70%酒精酒精无菌无菌水水冲洗冲洗无菌纸吸干无菌纸吸干0.1%氯化汞氯化汞无菌无菌水水冲洗至少三次之上冲洗至少三次之上

15、（哪（哪6步？）步？）1、配制各种母液、配制各种母液（大量元素、微量元素各浓（大量元素、微量元素各浓缩多少倍？用量较小的有机物呢？）缩多少倍？用量较小的有机物呢？）2、配制培养基、配制培养基（菊花组培是否添加植物激素？）（菊花组培是否添加植物激素？）3、灭菌、灭菌（哪种灭菌方法？）（哪种灭菌方法？）注注意意接接种种时时的的各各种种无无菌菌操操作作。将将菊菊花花茎茎段段插插入入培培养养基基时时特特别别应应注注意意什什么么？最最好好在在哪哪儿儿培培养养？温温度度？光光照照？定定期期消消毒毒？直直接接移移栽栽到到土土壤壤中中吗吗？现在学习的是第23页，共33页 不是。对外植体进行表面消毒时，既不是。

16、对外植体进行表面消毒时，既要考虑到消毒效果，又要考虑到植物的要考虑到消毒效果，又要考虑到植物的耐受能力。耐受能力。在外植体消毒过程中，是不是强度越在外植体消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？大越好，为什么？思思 考考现在学习的是第24页，共33页1 1 你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格

17、，没有被杂菌污染。瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？1 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）灼烧）4 4、无菌箱中的培养；、无菌箱中的培养；5 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。现在学习的是第25页，共33页现在学习的是第26页，共33页现在学习的是第27页，共33页练习1.答：植物组织培养所

18、利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。现在学习的是第28页，共33页(1)(1)、培育无病毒植株、培育无病毒植株(2)(2)、培养紫草愈伤组织培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫伤提取紫草素（治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）(4)(4)、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法

19、、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法植物组织培养的应用：植物组织培养的应用：(3)(3)、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，可以解决可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题发芽率低等问题.现在学习的是第29页，共33页同常规的无性繁殖方法相比，组织培养快速繁殖法主要具有以下优点：（1 1）快速。）快速。采用常规的方法如分株法，一棵花卉一年一般只能生产几株或几十株，但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的小植株

20、。（2 2）周年生产。）周年生产。花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行，因条件可控，所以不受季节限制，可以全年进行连续生产。而常规的无性繁殖则受季节限制，只能在花卉生长季节进行繁殖。（3 3）经济效益高。）经济效益高。花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小，在一个200平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。如按每株1元计算，每年产值上百万元。（4 4）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因。）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因。所以使用这项技术可让优良的品种不断地延续。组织培养与常规繁殖相比优点众多组织培养与常规繁殖相比优点众多现在学习的是第30页，共33页1.下列那组符合菊花

21、组织培养的基本步骤（下列那组符合菊花组织培养的基本步骤（）A制备制备MS培养基培养基 外植体消毒外植体消毒 接种接种 培养培养 移栽移栽 栽培栽培B制备制备MS培养基培养基 外植体消毒外植体消毒 接种接种 培养培养 栽培栽培 移栽移栽C制备制备MS培养基培养基 外植体消毒外植体消毒 接种接种 栽培栽培 培养培养 移栽移栽D制备制备MS培养基培养基 外植体消毒外植体消毒 接种接种 移栽移栽 培养培养 栽培栽培练练 习习2.在外植体脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪个条件是不在外植体脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪个条件是不需要的（需要的（）A消毒灭菌消毒灭菌 B适宜的温度适宜的温度 C充足的光

22、照充足的光照 D适宜的养料和激素适宜的养料和激素 AC现在学习的是第31页，共33页3某同学在做菊花组织培养时，操作完成了某同学在做菊花组织培养时，操作完成了 3-4天后，观天后，观察同一温室中的外植体，发现有的瓶内外植体正常生长，察同一温室中的外植体，发现有的瓶内外植体正常生长，有的瓶内外植体已经死亡，你认为死亡的原因不可能的是有的瓶内外植体已经死亡，你认为死亡的原因不可能的是（）A培养条件，比如培养条件，比如pH、温度等不适宜、温度等不适宜 B接种时外植体未灭菌接种时外植体未灭菌 C接种工具消毒后未冷却就接种外植体接种工具消毒后未冷却就接种外植体D将菊花茎段倒插入培养基中将菊花茎段倒插入培养基中 4 MS培养基与微生物培养基相比不同的是（培养基与微生物培养基相比不同的是（）A MS培养基不含有机物培养基不含有机物 B微生物培养基以有机物为主微生物培养基以有机物为主 CMS培养基不含微量元素培养基不含微量元素 DMS培养基需提供大量无机营养培养基需提供大量无机营养AD现在学习的是第32页，共33页4/1/2023感谢大家观看现在学习的是第33页，共33页