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1、酶与食品质量安全酶与食品质量安全第1页,此课件共31页哦n n酶酶具具有有改改善善食食品品品品质质和和加加工工性性能能,酶酶在在食食品品工工业业中中的的应应用用日日益益深深入入和和广广泛泛,极极大大地地促促进进了了酶酶制制剂剂工工业业的的发发展展。然然而而酶酶的的来来源源及及其其性性质质也也关关乎乎食食品品质质量量安安全全,特特别别是是随随着着生生物物技技术术的的发发展展,通通过过基基因因工工程程手手段段改改造造部部分分微微生生物物的的基基因因,从从而而改改变变酶酶蛋蛋白白的的基基本本结结构构,达达到到强强化化酶酶在在某某方方面面功功能能特特性性目目的的的的做做法法已已成成为为商商业业上上成成
2、功功的的典典范范,同同时时,这这种种做做法法给给食食品品酶酶的的应应用用带带来来安安全全隐隐患患。对对食食品品工工业业用用酶酶制制剂剂生生产产及及应应用用进进行行安安全全卫卫生生管管理理,从从而而建建立立一一套套科科学学使使用用规范及酶制剂安全性评价体系。规范及酶制剂安全性评价体系。第2页,此课件共31页哦1 酶与食品质量安全n n酶酶存存在在于于所所有有的的新新鲜鲜食食品品当当中中,例例如如坚坚果果、乳乳、奶奶油油、干干酪酪、新新鲜鲜水水果果和和蔬蔬菜菜、未未烧烧煮煮的的肉肉、鱼鱼和和蛋蛋中中都都富富含含各各种种酶酶类类。当当人人们们食食用用这这些些食食品品时时,相相当当数数量量的的酶酶就就
3、摄摄入入人人体体中中。在在摄摄入入的的酶酶中中,不不仅仅有有动动物物和和植植物物来来源源的的,而而且且还还有有微微生生物物来来源源的的。在在发发酵酵和和腌腌制制食食品品中中,例例如如干干酪酪、酸酸奶奶、啤啤酒酒和和腌腌黄黄瓜瓜,就就含含有有微微生生物物来来源源的酶。的酶。n n作作为为微微生生物物来来源源的的食食品品酶酶制制剂剂,通通常常除除了了包包括括酶酶蛋蛋白白本本身身以以外外,还还含含有有微微生生物物的的代代谢谢产产物物,以以及及添添加加的的保保存存剂剂和和稳稳定定剂剂。如如果果将将加加入入食食品品中中的的酶看作为食品添加剂,那么就应该考虑到卫生和安全方面的问题。酶看作为食品添加剂,那么
4、就应该考虑到卫生和安全方面的问题。第3页,此课件共31页哦1.1 酶制剂作为食品添加剂进入食品的潜在危害n n酶酶酶酶不不不不仅仅仅仅来来来来源源源源于于于于动动动动植植植植物物物物,也也也也有有有有来来来来源源源源于于于于微微微微生生生生物物物物的的的的,酶酶酶酶与与与与其其其其他他他他混混混混入入入入酶酶酶酶制制制制剂剂剂剂的的的的蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质,作作作作为为为为外外外外源源源源蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质在在在在随随随随同同同同食食食食品品品品进进进进入入入入人人人人体体体体后后后后,有有有有可可可可能能能能引引引引起起起起过过过过敏敏敏敏反反反反应应应应,虽虽虽虽然然然然目目目目
5、前前前前还还还还极极极极少少少少见见见见这这这这样样样样的的的的例例例例子子子子,但但但但在在在在新新新新的的的的酶酶酶酶制制制制剂剂剂剂出出出出现现现现时时时时必必必必须以予考虑。须以予考虑。须以予考虑。须以予考虑。n n另另另另外外外外,来来来来源源源源于于于于微微微微生生生生物物物物的的的的酶酶酶酶制制制制剂剂剂剂也也也也可可可可能能能能带带带带有有有有毒毒毒毒素素素素,必必必必须须须须选选选选择择择择那那那那些些些些不不不不产产产产生生生生毒毒毒毒素素素素的的的的菌菌菌菌种种种种来来来来生生生生产产产产酶酶酶酶制制制制剂剂剂剂,或或或或检检检检查查查查每每每每一一一一批批批批酶酶酶酶制
6、制制制剂剂剂剂以以以以确确确确定定定定其其其其不不不不含含含含毒毒毒毒素素素素。酶酶酶酶制制制制剂剂剂剂作作作作为为为为食食食食品品品品添添添添加加加加剂剂剂剂使使使使用用用用时时时时应应应应符符符符合合合合国国国国家家家家标标标标准准准准GB GB 27602760食品添加剂使用卫生标准食品添加剂使用卫生标准食品添加剂使用卫生标准食品添加剂使用卫生标准的规定。的规定。的规定。的规定。第4页,此课件共31页哦n n迄今为止,还没有充分的证据表明,用于食品工业中的酶是有害于人体健康的。此外,在大多数情况下,酶在加工中已失活,且在加工中失活的酶经进一步的单元操作是否尚存在于食品中,在很多情况下也是
7、不确定的。因此在标签上注明添加的酶反而会引起误解。第5页,此课件共31页哦 1.2 酶催化有毒物质的产生n n在生物材料中,酶和底物处在细胞的不同部位,仅当生物材料破碎时,酶和底物的相互作用才有可能发生,其次,湿度、pH、温度、辅酶和金属离子等条件也是重要的。有时底物本身是无毒的,在经酶催化降解后变成有害物质。第6页,此课件共31页哦n n例如,木薯含有生氰糖苷,虽然它本身并无毒,但是在内源糖苷酶的作用下,产生氢氰酸。如果将木薯根切成小块后彻底清洗,那么留在组织中的微量HCN在随后的烧煮中就很容易挥发除去。n n十字花科植物的种子以及皮和根含有葡萄糖芥苷,葡萄糖芥苷属于硫糖苷,在芥苷酶作用下会
8、产生对人和动物体有害的甲状腺肿素,可用加热的方法使芥苷酶失活。因此,食品加工的条件必须按照终产物的物理化学性质而变化。第7页,此课件共31页哦1.3 酶作用导致食品中营养组分的损失n n虽然在食品加工中营养组分的损失是由于非酶作用所引起的,但是食品材料中一些酶的作用也是不能忽视的。n n例如:维生素的降解第8页,此课件共31页哦维生素的降解维生素的降解n n(1)脂肪氧合酶催化胡萝卜素降解使面粉漂白,在其他食品如一些蔬菜的加工过程中脂肪氧合酶也参与了胡萝卜素的破坏过程。n n(2)在一些用发酵方法加工的鱼制品中,由于鱼和细菌中的硫胺素酶的作用,使这些食品缺少维生素B。n n(3)抗坏血酸是最不
9、稳定的维生素,虽然抗坏血酸氧化酶能催化抗坏血酸氧化生成脱氢抗坏血酸,当脱氢抗坏血酸内酯进一步水解生成2,3-二酮古罗糖酸后,Vc的活性才完全丧失。第9页,此课件共31页哦1.4 酶作用的解毒反应第10页,此课件共31页哦1.4.1去除食品中的抗营养因子n n植酸以钙、镁、和钾盐的形式存在于豆类和谷类中,易于同膳食中的铁、锌和其他金属离子形成难溶的络合物,因而使人体吸收这些元素变得困难。n n植酸酶能催化植酸水解成磷酸和肌醇,显著降低植酸和寡糖的含量。n n近年植酸酶还用于酿造和饲料工业,以改善原料中磷的利用,以及用于去钾大豆蛋白食物的生产,成为肾脏病人蛋白质的来源。第11页,此课件共31页哦n
10、 n1.4.2 水解牛乳中的乳糖水解牛乳中的乳糖n n牛奶中所含的乳糖是一种双糖,因为分子太大,要在小肠中消化成较小的葡萄糖及半乳糖才能穿过肠壁进入血管中被吸收。但当小肠中的乳糖酶未能发挥作用时,乳糖就在大肠内发酵,大约半小时至2小时内出现胀气、腹痛、呕吐或拉肚子等症状。乳糖不耐症是一种相当普遍的现象,特别是亚洲人的乳糖酶缺乏发生率高达90%以上。第12页,此课件共31页哦酶法低乳糖牛乳的生产工艺酶法低乳糖牛乳的生产工艺n n水解14-16h,水解率达50%以上第13页,此课件共31页哦1.4.3 降低淀粉类食品高温产生丙烯酰胺含量n n自从2002年4月瑞典斯德哥尔摩大学Margareta
11、Tornqvist教授首次发现,在油炸或焙烤的马铃薯和谷物类食品中存在具有神经毒性的潜在致癌物丙烯酰胺,有关丙烯酰胺的问题立即引起了全世界的广泛关注。随后英国、美国、加拿大等发达国家也开展了相关研究。许多国家和国际性机构对丙烯酰胺在食品中形成机理、危害评估和消除方法等方面进行广泛而深入研究。第14页,此课件共31页哦n n目前,淀粉类食品在加工中丙烯酰胺的生成机理的研究已有突破性进展;在食品贮藏和加工方法方面,欧美和日本等国对食物加工前的保存条件、加工温度对食品中丙烯酰胺含量的影响进行了研究,并提出减少丙烯酰胺的方法,如降低加工温度、体系pH值,减少原料中天门冬酰胺的含量等。瑞士科学家Vass
12、等研究发现天天门门冬冬酰酰胺胺酶酶应用可降低薄脆饼干70丙烯酰胺含量,但作用机理还有待于进一步深入分析和研究。第15页,此课件共31页哦n n1.4.4 其他其他n n另有研究发现,-葡萄糖基转移酶用于甜叶菊加工,可以脱苦涩味,黄曲霉毒素B1经黄曲霉毒素脱毒酶处理后毒性、致畸性极大降低。所有这些都证明酶法解毒是一种安全、高效的解毒方法,对食品无污染、有高度的选择性,且不影响食品的营养物质。第16页,此课件共31页哦1.5 酶作为现代食品质量与安全快速、灵敏分析的重要手段n如酶联免疫测定、PCR、生物传感器、酶抑制率法第17页,此课件共31页哦2 酶制剂的安全评价n n对酶制剂产品的安全性要求,
13、联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)食品添加剂专家委员会(JECFA)早在1978年WHO第2届大会就提出了对酶制剂来源安全性的评估标准。第18页,此课件共31页哦酶酶制制剂剂来源安全性的来源安全性的评评估估标标准准n n(1)来自动植物可食部位即传统上作为食品成份,或传统上用于食品的菌种所生产的酶,如符合适当的化学与微生物学要求,即可视为食品,而不必进行毒性试验。n n(2)由非致病的一般食品污染微生物所产的酶要做短期毒性试验。n n(3)由非常见微生物所产生的酶要做广泛的毒性试验,包括实验动物的长期喂养试验。第19页,此课件共31页哦n n 这一标准为各国酶的生产提供了安全性评
14、估的依据,即生产菌种必须是非致病性的,不产生毒素、抗生素和激素等生理活性物质,菌种需经各种安全性试验证明无害才准使用于生产。对于毒素的测定,除化学分析外,还要做生物分析。第20页,此课件共31页哦微微微微 生生生生 物物物物 来来来来 源源源源 的的的的 食食食食 品品品品 酶酶酶酶 制制制制 剂剂剂剂 的的的的 安安安安 全全全全 特特特特 性性性性 评评评评 价价价价对对于于通通过过常常规规方方法法改改造造菌菌种种得得到到的的食食品品酶酶制制剂剂,通通常常要考虑的安全因素包括要考虑的安全因素包括:n n菌种产毒素的可能性和潜在的致病性n n致过敏性和刺激性n n致癌性和诱导突变性n n影响
15、生育和导致胎儿畸形n n酶反应的产物n n酶与其他食品成分之间的反应和酶对消费者的直接作用等。第21页,此课件共31页哦2.1潜在的产毒素性n n作为菌种必须具备基本的安全性,一般来说,菌是否具有潜在的产毒素的特性,尤其是那些通过口服起作用的毒素作为重点考虑的因素。由于在商品酶制剂中不会含有活微生物,因此潜在的致病性不是重点考虑的因素,但是对酶制剂生产工厂的工人来说,这一点要尤为注意。第22页,此课件共31页哦2.2潜在的致病性n n一般来说,明显的人人类类致致病病菌菌不能在食品酶制剂工厂的生产中应用,同时微生物也不可能在成品的酶制剂中存活。即便如此,作为常规的工业化操作规范,还是要通过动物模
16、型来确定未未知知微微生生物物的潜在的致病危害。n n区分致病性和偶然的感染非常重要,许多微生物可以通过寄主的免疫系统到达一定位置就可以产生感染。已有研究证实,无论寄主的健康与否,真正的致病性细菌可以侵入免疫系统,从而产生疾病和感染。第23页,此课件共31页哦n n另外,分清微生物自身作用和寄主对微生物的反应过是非常重要的。研究表明,给动物注射已死的细菌会导致代谢紊乱,最终死于败血病因为注射的是已死的细菌不会产生病变,所以动物的死亡不是微生物的致病性引起的,人体自身的免疫系统释放的类荷尔蒙激素物质才是至死的主要原因。因此,通过简单的注射微生物进人动物体内来评价微生物致病性的方法是不可取的。第24
17、页,此课件共31页哦2.3安全菌株n n国际食品与饮料咨询委员会(IFBC)认为,已确定无致病性、不产毒素的菌种,尤其是那些在安全用于食品酶制造方面具有悠久历史的微生物,即便它们经过传统的或导人DNA的改造,仍然是产生安全菌种系属的最优的选择。建立一个安全的菌种还需彻底搞清楚寄主机体的特征,确保所有导入寄主机体的DNA的安全,保证整个改造寄主机体的过程适合食品生产的应用。第25页,此课件共31页哦n n被筛选出的菌种通过诱变(如化学诱变、紫外线照射诱变)从而获得产酶量高的菌种。n n利用传统的方法和基因技术可以减少和消除一些不想要的内源酶和其他的物质。n n例如,许多微生物会分泌蛋白酶,虽然这
18、一特征在特殊场合下是有用的,但它会造成目的酶水解,还有可能会对食品有不好的影响。因此,一些特殊的菌种被开发出来,它们的产蛋白酶的基因被去除或钝化。第26页,此课件共31页哦2.4 工程化酶n n蛋白质工程是通过改变蛋白质肽链内在的氨基酸的排列顺序从而影响蛋白质功能,可以通过化学诱变、紫外线辐射、菌种突变等诱导和随机诱变技术实现。另外,也可采用定点突变技术,该法是针对确定蛋白质功能的基因片断直接突变,从而获得所需的蛋白质功能。第27页,此课件共31页哦蛋白质分子修饰是否会对酶的安全性造蛋白质分子修饰是否会对酶的安全性造成影响?成影响?n n要说明这个问题,我们首先得搞清酶结构和功能的自然变化。基
19、因核苷酸的排列顺序决定酶蛋白的氨基酸排列顺序,从而决定酶的功能特性,同时还决定了酶蛋白的三维空间结构。这有利于搞清楚酶在改进后相互之间的关系,也更进一步的为搞清楚结构与功能之间的关系提供了帮助。第28页,此课件共31页哦n n同一类或同一大类的微生物来源的酶维持原有的三级结构和酶的特征,但在稳定性、专一性等方面的特定功能有所不同。目前并无直接证据表明,酶的这种变化致使酶产毒素。事实上通过口服起作用的生物毒素相对数以千计的食物蛋白来说非常少,而且生物毒素的结构和作为商品的食品酶在结构上差异很大。第29页,此课件共31页哦n n有进一步的研究表明,同一类和同一大类的酶通过上述所有的技术改造,它们仍然保持原有的特征三维结构和催化功能。因此,工程酶表现出的不同与自然界中观察到的情况非常相似。第30页,此课件共31页哦n n酶的结构和功能实验表明,通过改造酶而获得某种功能不致使酶具有产毒性。正是如此,对于仅在理沦上推测有危险的工程酶进行毒理学的测试要非常慎重,对于那些通过同一系统向同一寄主导入基因的方法获得系列产品的制造商会认为对一些附加产品作进一步的测试是多余的。第31页,此课件共31页哦
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